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基于CKB/p53信号通路探讨白花丹醌对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2345-2354页

作者：周凤玲袁彬叶一娴邓舒烨马静刘红马远征韦燕飞广西中医药大学基础医学院广西南宁530200 广西高校中药神经-代谢及免疫药理重点实验室广西南宁530200 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530024

基于CKB/p53信号通路研究白花丹醌对人肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将白花丹醌1~12μmol·L^(-1)处理Huh-7细胞,进行细胞增殖和活性cell counting kit-8(CCK-8)实验,确定1、3、6μmol·L^(-1)为低、中、高浓度用于后续... 详细信息

基于CKB/p53信号通路研究白花丹醌对人肝癌Huh-7细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将白花丹醌1~12μmol·L^(-1)处理Huh-7细胞,进行细胞增殖和活性cell counting kit-8(CCK-8)实验,确定1、3、6μmol·L^(-1)为低、中、高浓度用于后续实验。采用规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins,Cas)-9基因编辑技术敲除Huh-7细胞中的脑型肌酸激酶(creatine kinase,brain type,CKB)基因;CKB过表达慢病毒转染Huh-7细胞上调CKB的表达。通过平板克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测CKB的mRNA表达情况;蛋白免疫印迹(Western blot,WB)实验检测CKB、p53、双微体同源基因2(mouse double minute 2 homolog,MDM2)、B淋巴瘤细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和半胱天冬酶(caspase)-3蛋白表达水平。结果显示白花丹醌显著抑制Huh-7细胞增殖,诱导细胞凋亡。与对照组比较,白花丹醌组凋亡水平显著升高,而白花丹醌联合凋亡抑制剂组凋亡水平显著降低。白花丹醌可显著下调CKB、Bcl-2和MDM2蛋白表达水平,上调p53、Bax和caspase-3蛋白表达水平。敲除CKB基因后,Huh-7细胞增殖能力降低,凋亡率升高,Bcl-2和MDM2蛋白表达水平降低,p53、Bax和caspase-3蛋白表达水平升高。上调CKB表达后,Huh-7细胞增殖能力增强,Bcl-2和MDM2蛋白表达水平升高,p53、Bax和caspase-3蛋白表达水平降低。而白花丹醌可逆转过表达CKB对Huh-7细胞增殖和凋亡的作用。该实验表明,白花丹醌可显著抑制Huh-7细胞的增殖能力,其机制可能是通过抑制CKB表达,激活p53信号通路,调控线粒体相关凋亡蛋白的表达,最终诱导细胞凋亡。

关键词：肝癌白花丹醌 CKB p53信号通路增殖凋亡

壮医经筋疗法联合桂枝加黄芪汤加减对肩周炎风寒湿痹证患者表面肌电信号及预后的影响研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：袁经阳黄永唐爱珍许潇杰朱庆磊李名福广西国际壮医医院康复医学科广西中医药大学赛恩斯新医药学院

目的分析壮医经筋疗法联合桂枝加黄芪汤加减对肩周炎风寒湿痹证患者表面肌电信号及预后的影响。方法纳入我院2022年1月～2022年12月收治的114例肩周炎风寒湿痹症患者，使用简单随机法分别纳入联合组（n=57）、对照组（n=57）。2组均... 详细信息

目的分析壮医经筋疗法联合桂枝加黄芪汤加减对肩周炎风寒湿痹证患者表面肌电信号及预后的影响。方法纳入我院2022年1月～2022年12月收治的114例肩周炎风寒湿痹症患者，使用简单随机法分别纳入联合组（n=57）、对照组（n=57）。2组均接受壮医经筋疗法治疗，联合组加用桂枝加黄芪汤加减治疗，2组治疗均持续1个月。检测2组患者治疗前后肩关节功能评分、三角肌表面肌电信号等指标变化，评估2组预后。结果 2组治疗后CMS量表疼痛、肌力、肩关节活动、功能活动评分均较治疗前升高；联合组治疗后Constant-Murley肩关节功能评分（Constant-Murleyshoulderfunctionscore，CMS）量表疼痛、肌力、肩关节活动、功能活动评分均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。2组治疗后患侧三角肌表面积分肌电值（Integratedelectromyography，iEMG）均较治疗前升高，疼痛视觉模拟评分（Visualanalogscore，VAS）评分均较治疗前下降；联合组治疗后患侧三角肌表面iEMG均高于对照组，其VAS评分低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。联合组治疗后临床总有效率为97.40%，较对照组的86.67%显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在壮医经筋疗法的基础上联合桂枝加黄芪汤加减治疗，能够进一步改善肩周炎风寒湿痹证患者表面肌电信号、促进肩关节功能恢复及疼痛减轻，从而提高预后质量。

关键词：壮医经筋疗法黄芪汤肩周炎肌电信号

中医药调控相关炎症信号通路防治肝性脑病的研究进展

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辽宁中医杂志 2024年

作者：赖小群黄国初王萌付蕾谢家诚黄良江柯炫蔡颖莹姚春广西中医药大学研究生院广西中医药大学第一附属医院肝病科广西中医药大学第一附属医院脾胃科

肝性脑病(hepatic encephalopathy， HE)是肝病晚期常见的严重并发症，主要影响大脑神经认知功能，表现为性格改变、行为异常、认知学习记忆障碍，可以从轻微的精神状态改变至严重的意识障碍，甚至昏迷或者死亡。HE发病机制复杂，防治... 详细信息

肝性脑病(hepatic encephalopathy， HE)是肝病晚期常见的严重并发症，主要影响大脑神经认知功能，表现为性格改变、行为异常、认知学习记忆障碍，可以从轻微的精神状态改变至严重的意识障碍，甚至昏迷或者死亡。HE发病机制复杂，防治困难，预后差。相关研究表明HE的发病与丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase， MAPK)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、酪氨酸激酶2/转录激活因子3(Janus Kinase2/Signal Transducer and Activator of Transcription 3， JAK2/STAT3)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Phosphoinositide 3-kinases/Protein Kinase B， PI3K/AKT)等多条炎症信号通路相关，通过调控这些信号通路，可降低促炎细胞因子水平，发挥抗外周炎症和神经炎症的作用，从而降低HE患者病情严重程度，改善其认知和运动功能。近年来探索中医药防治HE机制的相关研究取得了可喜进展。深入研究HE的发病机制并探索更多的中医药治疗HE的靶点是目前的重点研究方向。笔者对HE发病的相关炎症信号通路以及中医药防治HE的作用机制等进行了综述，旨在为中医药的有效性和合理性使用提供坚实的科学基础，并为临床防治HE提供新思路及参考。

关键词：肝性脑病中医药炎症信号通路

益肺宣肺降浊方调控小胶质细胞极化改善血管性痴呆神经炎症的机制研究

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时珍国医国药 2024年第5期35卷 1132-1137页

作者：朱健敏陈炜匡龙娇卓桂峰吴林广西中医药大学研究生院广西南宁530001 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530023 江西中医药大学研究生院江西南昌330004 广西中医药大学科学实验中心广西南宁530001

目的观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马组织小胶质细胞极化以及调控TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法75只老鼠随机分为假手术组(SHAM组)、模型组(MOD组)、益肺宣肺降浊方低剂量组(LDY组),益肺宣肺降浊方中剂量组(MDY组),益肺宣肺... 详细信息

目的观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马组织小胶质细胞极化以及调控TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法75只老鼠随机分为假手术组(SHAM组)、模型组(MOD组)、益肺宣肺降浊方低剂量组(LDY组),益肺宣肺降浊方中剂量组(MDY组),益肺宣肺降浊方高剂量组(HDY组),吡拉西坦组(PIR组)。运用2-VO法(双侧颈总动脉永久性结扎法)造模,造模后经药物干预后行水迷宫检验大鼠学习记忆行为;HE染色、透视电镜分析海马病理形态学;TUNEL法检验海马CA1区细胞凋亡,免疫荧光双标染色检测小胶质细胞极化表型蛋白CD16/32+/Iba-1^(+)、CD206^(+)/Iba-1^(+)共标情况,RT-PCR检测小胶质细胞M1/M2分泌促/抗炎因子TNF-α、IL-1β以及IL-4、TGF-B的基因表达,western blot分析小胶质细胞极化iNOS和Arginase-1以及TLR4/NFKB信号通路相关蛋白表达。结果与模型组对比,益肺宣肺降浊方组对海马组织神经细胞凋亡以及神经元损害的比值降低(P<0.05),其中以高剂量效果最佳(P<0.01),小胶质细胞M1型CD16/32阳性细胞数下降(P<0.05),上述可被益肺宣肺降浊汤逆转。结论益肺宣肺降浊汤神经保护作用通过抑制炎症相关TLR4/NF-κB信号通路,促进小胶质细胞向M2型转化保护神经元改善血管性痴呆。

关键词：益肺宣肺降浊方血管性痴呆小胶质细胞神经炎症

中药化学成分抗糠秕马拉色菌活性筛选及协同抗菌作用

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中国皮肤性病学杂志 2024年第7期38卷 731-739页

作者：黄燕韦志英张怡婕李耀华农清栋黄冬梅潘小姣广西中医药大学广西南宁530200 广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011

目的从30种常见非挥发性中药化学成分中筛选出对糠秕马拉色菌(Malassezia furfur,MF)抑制活性最强的两种化学成分,并对两者的协同抗菌作用及作用机制进行探究。方法采用管碟琼脂扩散法对30种中药单体化合物的MF抑制活性进行初筛;采用96... 详细信息

目的从30种常见非挥发性中药化学成分中筛选出对糠秕马拉色菌(Malassezia furfur,MF)抑制活性最强的两种化学成分,并对两者的协同抗菌作用及作用机制进行探究。方法采用管碟琼脂扩散法对30种中药单体化合物的MF抑制活性进行初筛;采用96孔板培养联合固体培养基接种法,测定活性最强两种单体化合物、酮康唑(KTz)及吡啶硫酮锌(zPT)的最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)及其联合应用之后的联合最低杀菌浓度(combined minimum bactericidal concentration,CMBC),并计算联合杀菌指数(fractional bactericidal concentration index,FBCI);采用结晶紫法测定活性成分对MF生物膜的影响;扫描电镜观察活性成分对MF外观形态的影响;CCK-8法检测活性成分对人永生角质形成细胞(HaCaT)的细胞毒性。结果对MF抑制活性最强的两种化学成分分别为肉桂酸(CIN)和盐酸小檗碱(BER),在作用浓度为5.00 mg/mL时,两者抑菌圈直径分别为(15.17±2.37)mm和(11.21±1.03)mm。各样品的MBC大小顺序为:BER(2500.00μg/mL)>CIN(156.25μg/mL)>zPT(62.50μg/mL)>KTz(7.81μg/mL)。FBCI试验结果表明:CIN和BER配伍,或者两者分别与KTz或zPT配伍,均具有协同杀菌的作用;CIN、BER、KTz及zPT相互配伍的CMBC分别为39.06、625.00、1.95、15.62μg/mL,FBCI均为0.5。各样品对MF生物膜抑制率的大小顺序为:CIN(93.08±1.15)%>KTz(65.10±4.23)%>zPT(43.00±2.81)%>BER(10.55±1.21)%。扫描电镜结果显示,CIN组MF细胞结构完整,但是大部分菌体细胞壁出现不同程度的凹陷;BER、KTz及zPT组MF细胞结构完整,但是大部分菌体整体皱缩,细胞壁表面凹凸不平、粗糙。各样品对HaCaT细胞毒性的大小顺序为:zPT(IC 50BER[IC 50=(27.83±0.66)μg/mL]>KTz[IC 50=(28.22±0.14)μg/mL]>CIN(IC 50>200.00μg/mL)。结论CIN和BER具有协同抗MF的作用,它们分别与zPT或KTz联合应用也有协同抗MF作用;CIN的抗菌作用机制可能与抑制生物膜相关;两者均具有应用于祛头皮屑外用药品或日化产品中的潜质。

关键词：糠秕马拉色菌肉桂酸盐酸小檗碱协同抗菌作用真菌生物膜

济川煎化学成分、药理作用研究进展及质量标志物（Q-Marker）预测

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中华中医药学刊 2024年

作者：韦红杏丘琴覃芳芳李鹏飞覃春萍莫惠晴秦祖杰甄丹丹甄汉深广西中医药大学广西国际壮医医院

济川煎始载于张介宾所著《景岳全书》，是治疗便秘的经典名方，具有促进平滑肌兴奋、调节水液代谢、调节神经递质、维持肠道内环境稳态等药理作用治疗便秘，在临床上常用于治疗功能性、老年性便秘等。本文在总结济川煎的化学成分、药理... 详细信息

济川煎始载于张介宾所著《景岳全书》，是治疗便秘的经典名方，具有促进平滑肌兴奋、调节水液代谢、调节神经递质、维持肠道内环境稳态等药理作用治疗便秘，在临床上常用于治疗功能性、老年性便秘等。本文在总结济川煎的化学成分、药理作用研究的基础上，结合中药质量标志物“五原则”进行综述，预测阿魏酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异阿魏酸、柚皮苷、新橙皮苷、藁本内酯、咖啡酸、丁烯基肽内酯可作为济川煎的质量标志物，为济川煎建立相关的制剂质量标准。

关键词：济川煎质量标志物化学成分临床应用药理作用

基于“毒浊致病”学说解析肝功能衰竭免疫失衡的重建思路

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：舒发明黄英陈月桥龙富立毛德文广西中医药大学附属国际壮医医院妇科广西中医药大学第一临床医学院广西中医药大学第一附属医院肝病科

肝功能衰竭（简称肝衰竭）作为肝病领域的急危重症之一，是目前国际公认亟需解决的医学难题。名中医毛德文教授历经20余载重症肝病临床、基础研究攻关，凝练形成肝衰竭“毒浊致病”新学说，认识到以肝衰竭“毒浊致病”为病机核心所表现... 详细信息

肝功能衰竭（简称肝衰竭）作为肝病领域的急危重症之一，是目前国际公认亟需解决的医学难题。名中医毛德文教授历经20余载重症肝病临床、基础研究攻关，凝练形成肝衰竭“毒浊致病”新学说，认识到以肝衰竭“毒浊致病”为病机核心所表现出来的中医学“证”的演变与肝衰竭免疫功能变化趋势存在着一致性，率先以中医学“证”来宏观评估肝衰竭免疫功能变化，致力于突破肝衰竭治疗中存在的免疫失衡所带来的疗效和技术上的困境，以期为肝衰竭“高发病率及高病死率”的降低做出有益的探索。

关键词：肝功能衰竭毒浊致病免疫平衡

中药调控TLR4信号通路干预脓毒症的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第19期30卷 282-291页

作者：严静谢胜葛来安王光耀刘柱韩冰洁曾耀萱彭金婵钱锦程黎丽群广西中医药大学研究生学院南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530001 江西中医药大学附属医院南昌330006

脓毒症是宿主对感染反应失调所致的常见重症疾病之一,严重威胁全球人类的生命健康。该病发病率和死亡率极高,一直是急危重症领域亟需解决的问题。目前,临床上大多采用抗感染、液体复苏、机械辅助通气等方案治疗脓毒症,但预后疗效差和费... 详细信息

脓毒症是宿主对感染反应失调所致的常见重症疾病之一,严重威胁全球人类的生命健康。该病发病率和死亡率极高,一直是急危重症领域亟需解决的问题。目前,临床上大多采用抗感染、液体复苏、机械辅助通气等方案治疗脓毒症,但预后疗效差和费用高昂等问题仍有待解决。因此,现阶段有必要探寻一种新型、高效、安全、廉价的药物和治疗模式。中医药治病以辨证论治和整体观念为本,能够有效调控脓毒症的进展,维持机体稳态,且不良反应少,临床取得了较好的疗效。近年来大量研究表明,中药可通过调控Toll样受体4(TLR4)信号通路,减轻炎症反应,从而降低脓毒症患者病情严重程度及致死率。然而,目前仍缺乏对中药调控TLR4信号通路治疗脓毒症的系统阐述。故该文通过检索查阅近年来的相关文献,对TLR4信号通路与脓毒症的关系及中药在该病的作用机制进行归纳整理。总结发现,一些中药单体及有效成分、中药复方和中药制剂通过抑制TLR4信号通路的激活,有效减轻全身炎症反应,修复各脏器损伤,改善脓毒症预后。但囿于各种条件的限制,部分研究直接聚焦TLR4这一分子的差异表达和功能,忽视了TLR4的下游分子表达及表型作用,对通路间的交替机制、关系及具体分子作用机制尚不明确,存在药物代谢动力学不明、促炎-抗炎平衡机制模糊等问题,有待进一步研究与探索,以期为脓毒症的潜在治疗及药物开发提供新的思路。

关键词：脓毒症 Toll样受体4(TLR4)信号通路中药综述

清解化攻方调节PINK1/Parkin介导的线粒体自噬对重症急性胰腺炎大鼠肠道炎症反应的影响

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中药材 2024年 2584-2590页

作者：李慧李德文姚春安晓霞张冰玉唐曦平陈国忠广西中医药大学广西中医药防治医学分子生物重点实验室防城港市中医医院广西中医药大学第一附属医院广西医科大学附属肿瘤医院

目的:考察清解化攻方调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬调节重症急性胰腺炎肠损伤的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、清解化攻方组、清解化攻方+CCCP(线粒体自噬激活剂)组、Mdivi-1(线粒体自噬抑制剂)组,采用5%... 详细信息

目的:考察清解化攻方调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬调节重症急性胰腺炎肠损伤的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、清解化攻方组、清解化攻方+CCCP(线粒体自噬激活剂)组、Mdivi-1(线粒体自噬抑制剂)组,采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管建立重症急性胰腺炎肠损伤模型,造模成功后各给药组分别给予相应药物,正常对照组和模型组灌胃相应体积生理盐水,给药24 h后ELISA检测大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、回肠组织匀浆中TNF-α、IL-6含量;HE染色观察大鼠胰腺、回肠组织病理改变;比色法检测回肠组织匀浆液ATP含量;透射电镜观察大鼠回肠组织线粒体超微结构;免疫荧光染色观察回肠组织LC3B、TOMM20免疫共定位;Real-time PCR和Western Blot法检测大鼠回肠组织PINK1、Parkin、LC3、TNF-α、IL-6 m RNA及蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠胰腺和回肠组织结构紊乱、伴大量炎性细胞浸润,病理损伤严重;血清淀粉酶、脂肪酶及回肠组织匀浆TNF-α、IL-6含量显著升高,回肠组织匀浆ATP含量显著降低(P20的双重标记显著升高;PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、TNF-α、IL-6 m RNA及蛋白表达显著升高(P病理损伤改善;血清淀粉酶、脂肪酶及回肠组织匀浆TNF-α、IL-6水平显著降低,回肠组织ATP水平显著升高(P20的双重标记显著减少,回肠组织PINK1、Parkin、LC3、TNF-α、IL-6 m RNA及蛋白表达显著降低(P0.05)。清解化攻方+CCCP组各指标与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清解化攻方可能通过抑制线粒体自噬过度激活减轻重症急性胰腺炎肠道炎症损伤。

关键词：重症急性胰腺炎肠损伤清解化攻方线粒体自噬 PINK1/Parkin通路肠道炎症反应