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脑出血老龄鼠脑组织中差异表达的miRNA测序、验证及功能

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中国老年学杂志 2024年第9期44卷 2202-2206页

作者：高玉广廖煜雄钟洁刘琦琦黄德庆广西中医药大学第一附属医院广西南宁530023

目的利用转录组测序技术筛选脑出血脑组织中差异表达的微小RNA(miRNA),通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行验证,并分析差异表达的miRNA与脑出血后脑组织含水量的关系。方法采用胶原酶构建脑出血老龄鼠(ICH组),另外设立空白组(NC组),... 详细信息

目的利用转录组测序技术筛选脑出血脑组织中差异表达的微小RNA(miRNA),通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行验证,并分析差异表达的miRNA与脑出血后脑组织含水量的关系。方法采用胶原酶构建脑出血老龄鼠(ICH组),另外设立空白组(NC组),将两组脑组织运用Trizol法提取组织RNA,同时构建链特异性转录组文库和sRNA文库,筛选脑出血的miRNA,通过RT-PCR进行验证,并分析差异表达的miRNA与脑出血后脑组织含水量的关系,并运用生物信息学技术对差异基因进行基因本体论(GO)功能富集分析。结果脑出血大鼠中差异表达的miRNA共有6个,其中高表达的miRNA是miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298,低表达的miRNA是miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p;miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298与脑出血后脑组织含水量呈明显正相关(r=0.885、0.820、0.935,P<0.05),miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p与脑出血后脑组织含水量呈明显负相关(r=-0.495、-0.773、-0.838,P<0.05);这些miRNA主要富集在细胞组分、结合功能、细胞突起等相关的生物学功能上。结论miR-204-5p、miR-1912-3p、miR-137-3p、miR-448-3p、miR-770-3p、miR-1298与脑出血后脑组织含水量相关,这些miRNA主要富集在细胞组分、结合功能、细胞突起等相关的生物学功能上。

关键词：脑出血 miRNA 差异性表达反转录聚合酶链反应(RT-PCR)

基于JAK2/STAT3信号通路探讨补坎益离汤改善GERD大鼠食管线粒体氧化损伤的机制研究

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时珍国医国药 2024年第8期35卷 1818-1823页

作者：杨成宁陈南王宇青黎丽群刘礼剑陈广文广西中医药大学第一附属医院广西南宁530023 广西中医药大学研究生学院广西南宁530001

目的基于JAK2/STAT3信号通路探讨补坎益离汤改善胃食管反流病(Gastroesophageal Reflux Disease, GERD)大鼠食管组织线粒体氧化损伤的作用机制。方法 28只SD大鼠随机选取5只作为假手术组,其余大鼠采用十二指肠吻合术构建GERD大鼠模型,... 详细信息

目的基于JAK2/STAT3信号通路探讨补坎益离汤改善胃食管反流病(Gastroesophageal Reflux Disease, GERD)大鼠食管组织线粒体氧化损伤的作用机制。方法 28只SD大鼠随机选取5只作为假手术组,其余大鼠采用十二指肠吻合术构建GERD大鼠模型,第6周随机选取3只验证模型成功后将造模大鼠按照随机数字表法分为模型组、补坎益离汤低、中、高剂量(8.85、17.7、35.4g·kg^(-1))组,期间观察并记录大鼠一般情况,每组各5只,疗程共5周。光镜下观察大鼠食管病理组织学结构,并进行食管黏膜损伤指数评分;化学发光法检测食管组织ATP水平,免疫荧光检测食管组织ROS水平、Ca^(2+)浓度,免疫组化(IHC)检测食管下段组织中JAK2、STAT3蛋白量,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白水平。结果 GERD模型大鼠毛发无光泽,略有结节,精神不振,可见食物残渣反流至口角,光镜下观察食管黏膜组织结构紊乱,黏膜上皮增生,固有层乳头延长,可见炎症细胞浸润,黏膜下层可见出血,食管黏膜损伤指数评分增加。经补坎益离汤低、中、高剂量干预后,大鼠毛发及精神改善,食管黏膜结构基本恢复正常,黏膜上皮未见明显增生,黏膜下层少量出血,食管黏膜损伤指数评分降低。与假手术组相比,模型组大鼠食管组织ATP含量显著降低,ROS、Ca^(2+)含量显著上升(P病密切相关;补坎益离汤可以有效修复GERD大鼠食管黏膜组织损伤,其机制可能与补坎益离汤抑制JAK2/STAT3信号通路改善线粒体氧化损伤有关。

关键词：胃食管反流病补坎益离汤线粒体氧化损伤 JAK2/STAT3信号通路

基于人工神经网络骨关节炎诊断模型的建立与分析

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2550-2554页

作者：范以东秦刚苏国威肖世富刘俊良李威材吴广涛广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530000 广西中医药大学第一附属医院骨病创伤骨科广西壮族自治区南宁市530022

背景:生物信息学领域的快速发展为骨关节炎的诊断提供了新的方法。人工神经网络具有强大的数据计算能力和分类能力,研究表明其在诊断疾病方面表现出了较好的性能。目的:旨在使用人工神经网络建立一种新的骨关节炎诊断预测模型,并通过外... 详细信息

背景:生物信息学领域的快速发展为骨关节炎的诊断提供了新的方法。人工神经网络具有强大的数据计算能力和分类能力,研究表明其在诊断疾病方面表现出了较好的性能。目的:旨在使用人工神经网络建立一种新的骨关节炎诊断预测模型,并通过外部数据集验证其在骨关节炎中的诊断价值。方法:通过GEO数据库搜索下载符合要求的骨关节炎相关数据集,将其分为Train组与Test组。对Train组的基因表达矩阵进行差异分析,筛选差异表达基因。对差异基因进行GO、KEGG富集分析;通过Lasso回归模型、支持向量机模型、随机森林树模型从差异基因中进一步鉴定骨关节炎关键基因。随后使用R软件“neuralnet”包构建基于人工神经网络的骨关节炎诊断模型,5折交叉验证评估模型表现;使用Test组中2个独立的数据集来验证其诊断效果。结果与结论:通过差异分析共得到90个与骨关节炎相关的差异基因,其中33个下调,57个上调。GO富集分析显示其生物过程主要参与白细胞介导的免疫、骨髓白细胞迁移、趋化因子产生等过程;KEGG富集显示差异基因主要富集在类风湿关节炎、白细胞介素17信号通路、破骨细胞分化等通路。通过3种机器学习方法筛选并取交集后共得到5个诊断骨关节炎的关键基因,分别为HMGB2、GADD45A、SLC19A2、TPPP3、FOLR2。Train组中5个关键基因建立的人工神经网络模型显示其准确率为96.36%,曲线下面积(AUC)为0.997,对神经网络模型的5折交叉验证表明其平均AUC>0.9,具有一定的稳健性;Test组中2个独立的数据集结果显示其AUC分别为0.814和0.788。提示:建立的人工神经网络骨关节炎诊断模型具有一定的诊断价值。

关键词：骨关节炎诊断模型人工神经网络机器学习

加减薯蓣丸上调MyRF减轻血管性痴呆小鼠mPFC-BLA环路髓鞘损伤及焦虑抑郁行为

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：陈欣怡冯小霞陈晨邱静谭子虎阳光湖北省中医院老年病科/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院湖北中医药大学第一临床学院

目的探讨加减薯蓣丸(MSP)改善血管性痴呆(VaD)小鼠焦虑、抑郁行为的机制。方法在药效研究中,选择60只C57BL/6小鼠,以颈总动脉缩窄/束缚应激(BCAS/CRS)构建VaD行为异常模型,假手术处理作为对照。按干预条件分为对照组(生理盐水)、模型... 详细信息

目的探讨加减薯蓣丸(MSP)改善血管性痴呆(VaD)小鼠焦虑、抑郁行为的机制。方法在药效研究中,选择60只C57BL/6小鼠,以颈总动脉缩窄/束缚应激(BCAS/CRS)构建VaD行为异常模型,假手术处理作为对照。按干预条件分为对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、MSP组(7、14、28 g/kg)、氟西汀(10 mg/kg)组。在机制研究中,40只BCAS/CRS模型小鼠,分别接受空载病毒、髓鞘基因调节因子(MyRF)过表达病毒、MSP(14 g/kg)、MSP+MyRF敲低病毒处理。旷场实验、高架十字迷宫实验、悬尾实验评估行为学变化;Western Blot检测髓鞘相关糖蛋白(MAG)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、髓鞘碱性蛋白(MBP)及髓鞘基因调节因子(MyRF)表达;免疫荧光染色检测MBP表达;胼胝体复合动作电位记录评估有髓轴突动作电位传导。结果与对照组比较,模型组小鼠开放臂次数/时间、中央区时间/距离减少,不动时间延长(P区MAG、MOG、MBP和MyRF表达降低(P区时间/距离,缩短不动时间(P<0.01,P<0.05),上调髓鞘相关蛋白及MyRF表达(P<0.01,P<0.05),增加MBP荧光强度和动作电位N1振幅(P<0.01)。MyRF敲低减弱了MSP对模型小鼠行为学、髓鞘相关蛋白表达和动作电位N1振幅的改善效应(P<0.01,P<0.05)。结论加减薯蓣丸通过上调mPFCBLA环路MyRF表达,促进髓鞘修复和信号传导,改善VaD小鼠焦虑和抑郁行为。

关键词：加减薯蓣丸髓鞘血管性痴呆情绪环路焦虑抑郁行为异常中药复方氟西汀

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维持性血液透析患者基于助推策略的饮食管理

护理学杂志 2024年第10期39卷 107-112页

作者：钟静静梁志金吴国凤吴林梅刘瑞杰卢秋芳广西中医药大学护理学院广西南宁530001 广西中医药大学附属瑞康医院急诊科广西中医药大学附属瑞康医院血液净化中心

目的构建基于证据及助推策略的维持性血液透析患者透析期间饮食管理方案,并评价其应用效果。方法以证据为基础,通过制定审查指标并进行基线调查、分析障碍因素,构建基于助推策略的透析期间饮食管理方案,并应用于50例维持性血液透析患者... 详细信息

目的构建基于证据及助推策略的维持性血液透析患者透析期间饮食管理方案,并评价其应用效果。方法以证据为基础,通过制定审查指标并进行基线调查、分析障碍因素,构建基于助推策略的透析期间饮食管理方案,并应用于50例维持性血液透析患者,采用中断时间序列设计,比较方案实施前后审查指标执行率,患者低血压、低血糖及胃肠道反应发生率,患者透析饮食知信行得分。结果基线调查显示12条审查指标执行率未达标,方案实施后,指标2、3、4的执行率为100%,除指标11外,涉及医护人员及患者的审查指标执行率显著高于实施前(均P科学构建并实施维持性血液透析患者透析期间饮食管理方案,可以有效促进证据在临床中的转化应用,降低透析过程中低血压和低血糖发生率,提高患者透析饮食的知识、信念和行为水平。

关键词：维持性血液透析饮食管理助推策略证据转化低血压低血糖知信行循证护理

清解化攻方对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 975-983页

作者：冯敏超罗芳唐曦平李凯朱晓东张冰玉陈国忠广西中医药大学第一临床医学院广西南宁530001 广西中医药防治医学分子生物重点实验室广西南宁530001 广西医科大学附属肿瘤医院广西南宁5300013 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530001

目的使用网络药理学探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的可能作用机制,并通过动物实验验证。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、ETCM、SwissTargetPrediction数据库获取清解化攻方中各药物入血有效成分的作用靶点,在GeneCard数据库中检索获得SAP-ALI疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集获得共同靶点,随后通过STRING数据库及Cytoscape3.7.1软件对共同靶点进行蛋白互作网络分析,借助DAVID数据库行GO、KEGG富集分析,最后动物实验对关键信号通路予以验证。结果共筛选出清解化攻方治疗SAP-ALI有效活性成分28种,作用于42个共同靶点。PPI网络分析显示,STAT3、IL-6、TGFB1可能是核心靶点;GO、KEGG富集分析主要涉及细胞增殖、PI3K/AKT信号通路等。动物实验证实,清解化攻方能够改善SAP-ALI大鼠模型的胰腺、肺组织的病理情况,下调血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,下调肺组织中PI3K/AKT1信号通路相关蛋白及mRNA表达水平。结论清解化攻方可能通过多成分、多靶点,多通路协同治疗SAP-ALI,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化有关。

关键词：清解化攻方 PI3K/AKT1信号通路重症急性胰腺炎相关急性肺损伤网络药理学实验验证炎症反应

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加味逍遥散通过外泌体miRNA途径发挥抗肝癌作用

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4052-4062页

作者：刘晓明程金来黎如霜李妞妞秦秋云夏猛姚春广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530200 广西中医药大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530200

背景:在课题组先前研究中发现加味逍遥散具有明显的抗肝癌作用,但具体作用机制不明。目的:基于高通量测序结合生物信息学,探讨加味逍遥散对二乙基亚硝胺慢性诱导的原发性肝癌模型大鼠血浆外泌体miRNA水平的调节作用。方法:将SD大鼠随机... 详细信息

背景:在课题组先前研究中发现加味逍遥散具有明显的抗肝癌作用,但具体作用机制不明。目的:基于高通量测序结合生物信息学,探讨加味逍遥散对二乙基亚硝胺慢性诱导的原发性肝癌模型大鼠血浆外泌体miRNA水平的调节作用。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、肝癌模型组、加味逍遥散组。以二乙基亚硝胺持续给药12周诱导肝癌模型,从第17周开始,加味逍遥散组大鼠给予加味逍遥散灌服,每日1次,直至第20周末停药,空白对照组和肝癌模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,通过检测大鼠肝组织的形态结构、肝癌标志物Glypican-3蛋白和血清甲胎蛋白表达验证抗肝癌效应。使用超速离心法分离提取各组大鼠血浆外泌体,利用高通量测序技术筛选出大鼠血浆外泌体中差异表达的miRNA,生物信息学预测加味逍遥散通过肝癌血浆来源外泌体miRNA发挥抗肝癌作用的潜在生物标志物,并进行功能分析。结果与结论:①加味逍遥散对肝癌模型大鼠肝组织的形态结构有显著改善作用,与肝癌模型组相比,加味逍遥散组肝癌标志物Glypican-3蛋白和血清甲胎蛋白的表达均显著降低;②生物信息学分析显示,加味逍遥散组对肝癌模型组上调的miR-223-3p与基因E2F1、NCOA1存在靶向结合位点,并且与肝癌生存率及预后密切相关。由此可见,加味逍遥散对肝癌有治疗作用,可能是通过肝癌血浆来源外泌体miR-223-3p靶向负调控NCOA1/E2F1进而发挥抗肝癌效应。

关键词：肝癌加味逍遥散外泌体 miRNA 生物信息学 miR-223-3p

免疫细胞与膝骨关节炎之间因果作用:一项两样本双向孟德尔随机化分析

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 1081-1090页

作者：吴广涛秦刚何凯毅范以东李威材朱宝刚曹英广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530222 广西中医药大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530022

背景:膝骨关节炎是一种常见的关节软骨及周围组织损伤的慢性炎症性疾病,而免疫细胞在膝骨关节炎免疫炎症反应中起到重要作用,但其中的具体机制仍有待深入研究。目的:采用孟德尔随机化方法来评估731种免疫细胞表型与膝骨关节炎风险之间... 详细信息

背景:膝骨关节炎是一种常见的关节软骨及周围组织损伤的慢性炎症性疾病,而免疫细胞在膝骨关节炎免疫炎症反应中起到重要作用,但其中的具体机制仍有待深入研究。目的:采用孟德尔随机化方法来评估731种免疫细胞表型与膝骨关节炎风险之间的潜在因果关系。方法:使用全基因组关联分析(GWAS)目录中公开获取731种免疫细胞表型的全基因组关联分析统计数据(从GCST0001391到GCST0002121)和IEUGWAS数据库中膝骨关节炎的全基因组关联分析数据(ebi-a-GCST007090)。采用逆方差加权法、MR-Egger回归法、加权中位数法、加权模型法和简单模型法来研究免疫细胞与膝骨关节炎之间的因果关系。敏感性分析用于检验孟德尔随机化分析结果是否可靠,然后以同样方法进行反向孟德尔随机化分析。结果与结论:①正向分析结果表明,共有4种免疫细胞表型与膝骨关节炎有显著的因果关系(FDR<0.20),其中B细胞中的CD27 on CD24+CD27+(OR=1.026,P=0.00026,Pfdr=0.18)、髓系细胞中的CD33 on CD33dim HLA DR-(OR=1.014,P=0.00050,Pfdr=0.18)以及Treg细胞中的CD45RA+CD28-CD8br%CD8br(OR=1.001,P=0.00078,Pfdr=0.18)与膝骨关节炎风险呈直接的正向因果关联;单核细胞中PDL-1 on monocyte(OR=0.952,P=0.00098,Pfdr=0.18)与膝骨关节炎风险呈直接的负向因果关联。②反向分析结果表明,当膝骨关节炎作为暴露数据时,与731种免疫细胞表型均不具有显著因果关系(FDR<0.20)。③敏感性分析结果显示:双向孟德尔随机化的Cochran’s Q检验和MR-Egger回归法结果P值均大于0.05,表明免疫细胞表型与膝骨关节炎之间的因果效应分析不存在显著的异质性和多效性。④上述结果证实,CD27 on CD24+CD27+,CD33 on CD33dim HLA DR-,CD45RA+CD28-CD8br%CD8br以及PDL-1 on monocyte免疫细胞表型与膝骨关节炎之间可能具有较为显著的潜在因果关系,这为研究膝骨关节炎的生物学机制及探索膝骨关节炎的早期防治提供有价值的线索,也为干预性药物的开发提供了新的方向。

关键词：骨关节炎膝骨关节炎免疫机制免疫细胞孟德尔随机化因果关系全基因组关联分析逆方差加权法敏感性分析

中药改善心肌损伤:线粒体钙稳态介导巨噬细胞自噬与焦亡的作用途径

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中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1276-1284页

作者：刘凌云何贵新秦伟彬宋惠张利文唐伟智杨斐斐朱子一欧阳彬广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530299 广西中医药大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530230

背景:心肌损伤修复过程涉及复杂的细胞和分子机制,尤其是线粒体钙稳态、巨噬细胞的自噬与焦亡途径。中药在改善心肌损伤方面有显著的临床疗效,但其作用机制尚需深入研究。目的:探讨线粒体钙稳态介导的巨噬细胞自噬与焦亡途径在心肌损伤... 详细信息

背景:心肌损伤修复过程涉及复杂的细胞和分子机制,尤其是线粒体钙稳态、巨噬细胞的自噬与焦亡途径。中药在改善心肌损伤方面有显著的临床疗效,但其作用机制尚需深入研究。目的:探讨线粒体钙稳态介导的巨噬细胞自噬与焦亡途径在心肌损伤中的作用,并总结中药在这一领域的研究进展。方法:计算机检索Web of Science、PubMed及中国知网等数据库,从建库至2024年3月的相关文献。中文检索词为“线粒体钙稳态,巨噬细胞自噬,巨噬细胞焦亡,中药,心肌损伤,心肌损伤再灌注”等;英文检索词为“Mitochondrial calcium homeostasis,Macrophage autophagy,Macrophage pyroptosis,Traditional Chinese medicine,Myocardial injury”等。通过文献回顾分析线粒体钙稳态与巨噬细胞自噬、焦亡之间的关系,探究其在心肌损伤中的作用机制,总结中药多靶点、多通路影响的途径。结果与结论:①研究发现,线粒体钙稳态的维持与心肌细胞功能的正常运转密切相关。巨噬细胞可通过自噬与焦亡途径参与心肌损伤的修复过程,自噬有助于细胞的清除和炎症反应的调节,而焦亡则可通过释放炎症因子影响心肌修复。②中医药通过多种机制调节线粒体钙稳态和巨噬细胞功能,如黄芪甲苷通过降低线粒体膜电位和抑制细胞色素C来调节钙稳态,淫羊藿苷通过减少β-淀粉样蛋白沉积来发挥作用;中药复方和单味药物通过激活或抑制特定的信号通路,如PI3K/AKT、核因子κB等通路来促进心肌损伤的修复。③未来的研究应关注线粒体钙稳态、自噬与焦亡途径的相互作用,以及中药如何通过这些途径发挥治疗作用,为心肌损伤的治疗提供新的策略和药物。

关键词：线粒体钙稳态巨噬细胞自噬巨噬细胞焦亡中医药心肌损伤