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基于网络药理学和实验验证探讨益肺宣肺降浊方治疗血管性痴呆的机制研究

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世界科学技术-中医药现代化 2024年 1080-1091页

作者：朱健敏陈炜蒋凌飞吴林广西中医药大学研究生院广西中医药大学第一附属医院广西中医药大学科学实验中心

关键词：血管性痴呆网络药理学益肺宣肺降浊方 AKT/Nrf2/HO-1信号通路

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密花美登木化学成分及抗肿瘤活性研究

中药材 2024年第1期47卷 96-101页

作者：贾学恭黄园园张雯艳梁旭邓富声邓巧玉袁经权广西中医药大学科学实验中心广西南宁530200

目的:研究卫矛科美登木属植物密花美登木Maytenus confertiflora J.Y.Luo et X.X.Chen茎叶的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法:采用正相硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、MCI以及Semi-Prep HPLC对密花美登木醇提物进行分离纯化,并采用... 详细信息

目的:研究卫矛科美登木属植物密花美登木Maytenus confertiflora J.Y.Luo et X.X.Chen茎叶的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法:采用正相硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、MCI以及Semi-Prep HPLC对密花美登木醇提物进行分离纯化,并采用MTT法对三萜化合物进行体外抗肿瘤活性评价。结果:从密花美登木中分离得到17个化合物,分别鉴定为:tridec-1-ene(1)、bis(2-ethylhexyl)phthalate(2)、二十五烷(3)、β-amyrenone(4)、3-hydroxyfriedel-3-en-2-one(5)、β-谷甾醇(6)、28,29-dihydroxyfriedelan-3-one(7)、friedelin(8)、3α-hydroxyfriedel-2-one(9)、3-oxofriedelan-28-oic acid(10)、canophyllol(11)、3-oxo-29-hydroxyfiedelane(12)、pentadecanoic acid(13)、华中冬青素(14)、lingueresinol(15)、飞龙掌血内酯(16)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(17)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物7对Eca-109、EJ细胞具有较强抑制作用,其IC_(50)分别为27.67、30.09μmol/L;化合物12对HepG_(2)、PANC-1细胞均具有较好的抑制作用,其IC_(50)分别为49.42、51.87μmol/L。

关键词：密花美登木化学成分三萜抗肿瘤活性

余甘子叶总黄酮对H22荷瘤小鼠免疫功能调节的影响

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中国医院药学杂志 2024年

作者：陈文雅李璐郭尔楚容少玲陈奔广西中医药大学药学院广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西中医药大学教学实训中心

目的：探讨余甘子叶总黄酮对H22荷瘤小鼠免疫调节的影响与肿瘤微环境的变化及其相互关系。方法：昆明小鼠50只腋下H22细胞荷瘤造模后，随机分为对照(Control)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、余甘子叶总黄酮低(YGZY-L：0.496g·kg-1)、中(YGZY-... 详细信息

目的：探讨余甘子叶总黄酮对H22荷瘤小鼠免疫调节的影响与肿瘤微环境的变化及其相互关系。方法：昆明小鼠50只腋下H22细胞荷瘤造模后，随机分为对照(Control)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、余甘子叶总黄酮低(YGZY-L：0.496g·kg-1)、中(YGZY-M：0.991g·kg-1)、高(YGZY-H：1.982g·kg-1)剂量组，连续给药14 d。观察瘤重抑瘤率，ELISA法检测肿瘤组织中IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量水平，HE染色观察瘤组织形态，免疫组化法检测瘤组织CD4+T、CD8+T细胞比例，制备瘤组织单细胞悬浮液并分离淋巴细胞并用流式细胞术观察肿瘤组织中浸润的淋巴细胞比例，Western Blot观察NF-κB1、FLT3、 PD-1、BTLA、CTLA-4表达情况。结果：各组抑瘤率分别是 5-FU组62.2%，YGZY-L组13.3%，YGZY-M组40.7%，YGZY-H组53.5%；HE染色显示余甘子叶总黄酮使实体瘤细胞坏死、核固缩；免疫组化显示余甘子叶总黄酮和5-FU可以激活肿瘤微环境CD4+T细胞和CD8+T细胞数量(P＜0.01)；ELISA检测显示余甘子叶总黄酮显著上调肿瘤微环境中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α，下调IL-10(P＜0.01)；瘤组织浸润淋巴细胞流式分析发现，与Control组相比，余甘子叶总黄酮降低CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+PD-1+TIL、CD8+PD-1+TIL比例，升高CD8+CD28+CTL比例(P＜0.05或P＜0.01)；Western Blot分析显示，与Control组相比余甘子叶总黄酮显著降低肿瘤微环境中NF-κB1、FLT3表达量(P＜0.01)，降低PD-1、CTLA-4、BTLA表达量(P＜0.05或P＜0.01)。结论：余甘子叶总黄酮可以通过改善肿瘤免疫微环境，调节荷瘤小鼠免疫功能来抵抗肝癌肿瘤。

关键词：余甘子叶总黄酮抗肿瘤免疫功能调节肿瘤微环境

益肺宣肺降浊方调控小胶质细胞极化改善血管性痴呆神经炎症的机制研究

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时珍国医国药 2024年第5期 1132-1137页

作者：朱健敏陈炜匡龙娇卓桂峰吴林广西中医药大学研究生院广西中医药大学第一附属医院江西中医药大学研究生院广西中医药大学科学实验中心

目的观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马组织小胶质细胞极化以及调控TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 75只老鼠随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（MOD组）、益肺宣肺降浊方低剂量组（LDY组）,益肺宣肺降浊方中剂量组（MDY组）... 详细信息

目的观察益肺宣肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马组织小胶质细胞极化以及调控TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法 75只老鼠随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（MOD组）、益肺宣肺降浊方低剂量组（LDY组）,益肺宣肺降浊方中剂量组（MDY组）,益肺宣肺降浊方高剂量组（HDY组）,吡拉西坦组（PIR组）。运用2-VO法（双侧颈总动脉永久性结扎法）造模，造模后经药物干预后行水迷宫检验大鼠学习记忆行为；HE染色、透视电镜分析海马病理形态学；TUNEL法检验海马CA1区细胞凋亡，免疫荧光双标染色检测小胶质细胞极化表型蛋白CD16/32+/Iba-1+、CD206+/Iba-1+共标情况，RT-PCR检测小胶质细胞M1/M2分泌促/抗炎因子TNF-α、IL-1β以及IL-4、TGF-B的基因表达，western blot分析小胶质细胞极化iNOS和Arginase-1以及TLR4/NFKB信号通路相关蛋白表达。结果与模型组对比，益肺宣肺降浊方组对海马组织神经细胞凋亡以及神经元损害的比值降低（P<0.05）,其中以高剂量效果最佳（P<0.01）,小胶质细胞M1型CD16/32阳性细胞数下降（P<0.05）,上述可被益肺宣肺降浊汤逆转。结论益肺宣肺降浊汤神经保护作用通过抑制炎症相关TLR4/NF-κB信号通路，促进小胶质细胞向M2型转化保护神经元改善血管性痴呆。

关键词：益肺宣肺降浊方血管性痴呆小胶质细胞神经炎症

基于线粒体功能探讨温脾通络开窍方治疗阿尔茨海默病的分子机制

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中国中医基础医学杂志 2024年

作者：张金枝陈炜卓桂锋朱健敏陈远亮吴林广西中医药大学第一附属医院广西中医药大学研究生院广西中医药大学科学实验中心

目的基于生物信息学、网络药理学、免疫浸润分析和机器学习等方法并结合实验验证探讨温脾通络开窍方调节线粒体功能治疗阿尔茨海默病( Alzheimer’s disease，AD)的分子机制。方法获取差异表达基因(differentially expressed genes，DE... 详细信息

目的基于生物信息学、网络药理学、免疫浸润分析和机器学习等方法并结合实验验证探讨温脾通络开窍方调节线粒体功能治疗阿尔茨海默病( Alzheimer’s disease，AD)的分子机制。方法获取差异表达基因(differentially expressed genes，DEGs)进行相关性分析、KEGG分析以及免疫浸润分析。对公用数据集样品聚类分类后分析免疫细胞差异，构建机器学习模型、筛选特征基因并构建风险预测列线图模型。建立AD大鼠模型，进行水迷宫实验、HE染色及RT-qPCR检测，对数据挖掘的结果进行动物实验验证。结果DEGs相互联系、调节免疫系统并调控P53(tumor protein 53，p53)信号通路。结果显示有13个差异表达基因，并和免疫细胞在亚型分布上有差异。最佳机器学习模型是支持向量机模型（support vector machine，SVM），评分前5的特征基因是MAOB、MAOA、CASP9、Bcl-2、ABAT。风险预测列线图模型的准确性高，预测误差的风险小。动物实验结果显示：中药组大鼠学习认知功能障碍和神经损伤比模型组明显减轻；特征基因的mRNA相对表达量与数据挖掘的结果具有一致性。结论温脾通络开窍方通过调节线粒体功能缓解AD症状可能是根据13个差异性分子靶点相互间网络调控、P53信号通路和免疫调控作用来实现的。

关键词：阿尔茨海默病线粒体功能温脾通络开窍方分子机制

鳖蛋黄血管紧张素转化酶抑制肽分离纯化及活性分析

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食品科学 2024年

作者：刘华宇廖彭莹张天丰张新锐邓纭宁李耀华韦金锐陈俊广西中医药大学科学实验中心广西中医药大学药学院广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西中医药大学教学实验实训中心中药学国家级实验教学示范中心(广西中医药大学)

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme，ACE)抑制活性的肽段，以ACE抑制活性为评价指标，采用超滤和葡聚糖凝胶色谱技术进行分离纯化。采用液质联用(Lquid chromatography-mass spectrometry/mass... 详细信息

为从鳖蛋黄酶解物中筛选具有血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme，ACE)抑制活性的肽段，以ACE抑制活性为评价指标，采用超滤和葡聚糖凝胶色谱技术进行分离纯化。采用液质联用(Lquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry，LC-MS/MS)技术对活性组分进行肽段鉴定，借助生物信息学工具进行活性评估。优选预测活性较高的肽段进行合成和活性验证，并用分子对接工具分析活性肽与ACE的相互作用。结果表明，鳖蛋黄菠萝蛋白酶酶解物的水解度为17.70%± 0.34%，抑制ACE的IC50值为0.21 ± 0.019 mg/mL。对酶解产物进行分离纯化，从活性组分F3中鉴定出36条肽段，选择6条活性评分较高的肽段进行合成，其中肽段YNGIWPRD和ASDILPKK的IC50为0.019 ± 0.00036 mg/mL(19.01 ± 0.35 μmol/L)和0.17 ± 0.0013 mg/mL(199.42 ± 1.47 μmol/L)。分子对接结果表明，二者均通过多条氢键与ACE紧密结合。综上，从鳖蛋黄中筛选了两条新的ACE抑制活性肽。

关键词：鳖蛋黄血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽分离纯化生物信息学分子对接

解毒化瘀升散方抑制NLRP3信号通路缓解慢加急性肝衰竭大鼠炎症损伤的实验研究

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中华肝脏病杂志 2024年第4期32卷 354-362页

作者：刘潇蒙健林王明刚毛德文戴铭湖南中医药大学长沙410208 广西中医药大学南宁530200 广西中医药大学第一附属医院南宁530023

目的观察解毒化瘀升散方缓解慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠肝脏炎症损伤的疗效及其对NLRP3信号通路活化强度的影响。方法取SD大鼠63只,随机分为空白组、模型组和解毒化瘀升散方低、中、高剂量组(分别为7.29、14.58及29.16 g·kg^(-1)·d^(-... 详细信息

目的观察解毒化瘀升散方缓解慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠肝脏炎症损伤的疗效及其对NLRP3信号通路活化强度的影响。方法取SD大鼠63只,随机分为空白组、模型组和解毒化瘀升散方低、中、高剂量组(分别为7.29、14.58及29.16 g·kg^(-1)·d^(-1))。采用四氯化碳联合D-氨基半乳糖和脂多糖复制ACLF大鼠模型,解毒化瘀升散方不同剂量梯度干预处理5 d,收集大鼠血清及组织样本。采用生物化学分析仪检测大鼠血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平;酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-18、白细胞介素-1β含量;苏木精-伊红染色观察肝组织形态学改变;免疫组织化学法检测肝组织中消皮素D(GSDMD)表达;蛋白质免疫印迹法及PCR检测NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白、Toll样受体4、白细胞介素-1β、白细胞介素-18mRNA和蛋白表达水平。计量资料采用方差分析,组间比较采用秩和检验。结果与空白组相比,模型组大鼠肝组织损伤严重,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平,炎症因子白细胞介素-1β、白细胞介素-18水平,GSDMD蛋白表达水平,均较空白组显著升高(P值均<0.01),NLRP3、TLR4、Caspase 1、凋亡相关斑点样蛋白、白细胞介素-1β、白细胞介素-18蛋白与mRNA表达水平也显著升高(P值均<0.01);与模型组相比,解毒化瘀升散方低、中、高剂量组能改善ACLF大鼠肝组织损伤,血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平,血清白细胞介素-1β、白细胞介素-18水平,肝组织GSDMD蛋白水平,NLRP3、TLR4、Caspase 1、凋亡相关斑点样蛋白表达均较模型组降低,其中以高剂量组降低程度最明显(P值均<0.01)。结论解毒化瘀升散方能减弱ACLF大鼠肝脏NLRP3信号通路活化强度,减轻肝组织病理损伤,减少炎症因子释放,缓解ACLF大鼠肝脏炎症损伤。

关键词：慢加急性肝衰竭炎症 NLRP3信号通路解毒化瘀升散方

血必净注射液对心脏骤停/心肺复苏后大鼠神经功能及生存情况的影响机制

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中国药房 2024年第6期35卷 653-658页

作者：黄德庆高玉广张元侃王政林邓海霞黄夏冰庞延吴林广西中医药大学第一附属医院急诊科南宁530023 广西中医药大学科学实验中心南宁530200

目的基于S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)/S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)途径探讨血必净注射液对大鼠心脏骤停(CA)/心肺复苏(CPR)后神经功能及生存情况影响的潜在机制。方法以室颤法建立CA/CPR大鼠模型,以假手术组大鼠为参照,采用高通量测序分... 详细信息

目的基于S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)/S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)途径探讨血必净注射液对大鼠心脏骤停(CA)/心肺复苏(CPR)后神经功能及生存情况影响的潜在机制。方法以室颤法建立CA/CPR大鼠模型,以假手术组大鼠为参照,采用高通量测序分析挖掘两者差异表达基因,并结合酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测其海马组织中GSNOR、GSNO含量;筛选血必净注射液活性成分,并与GSNOR进行分子对接。将同法造模成功的大鼠分为模型组(30只)、抑制剂(GSNOR抑制剂)组(30只)、血必净组(30只)、血必净+抑制剂组(30只),并设置假手术组(30只),分别于药物首次干预后3h、24h、3d时进行神经功能评价及生存情况记录,并检测上述时间点各组大鼠海马组织中GSNOR、GSNO含量,分析GSNOR、GSNO含量与大鼠改良的神经系统损害严重程度评分表(mNSS)评分的相关性。结果GSNOR编码基因是模型组与假手术组间的差异表达基因之一;与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中GSNOR含量显著升高,而GSNO含量显著降低(P实验结果显示,模型组大鼠各时间点的mNSS评分和海马组织中GSNOR含量均显著高于假手术组(P<0.05),生存率和GSNO含量均显著低于假手术组(P<0.05);各给药组大鼠上述指标均显著改善,且血必净组mNSS评分显著低于抑制剂组,抑制剂组GSNOR、GSNO含量的变化较血必净组更明显,血必净+抑制剂组各指标均显著优于血必净组和抑制剂组(P<0.05)。GSNOR含量与mNSS评分呈正相关,GSNO含量与mNSS评分呈负相关(P<0.05)。结论血必净注射液可以改善CA/CPR后大鼠的神经功能,提高其生存率,该作用可能与下调GSNOR并上调GSNO有关。

关键词：血必净注射液心脏骤停心肺复苏 S-亚硝基谷胱甘肽 S-亚硝基谷胱甘肽还原酶

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基于药性理论的中药抗辐射预测模型的构建

中草药 2024年第8期55卷 2684-2693页

作者：杨淇郝二伟侯小涛邓家刚杜正彩范丽丽夏中尚广西中医药大学药学院广西南宁530000 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室广西南宁530000 广西中医药大学广西农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西南宁530000 广西中医药大学广西中医湿病方药理论与转化重点实验室广西南宁530000 广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西南宁530000

目的以中药药性作为特征描述符构建机器学习抗辐射作用预测模型,并解释抗辐射中药药性的重要药性特征以指导临床和日常辐射防治。方法通过药智网、中国知网、PubMed等数据库获取报道具有抗辐射作用的中药研究文献,通过SymMap数据库获得... 详细信息

目的以中药药性作为特征描述符构建机器学习抗辐射作用预测模型,并解释抗辐射中药药性的重要药性特征以指导临床和日常辐射防治。方法通过药智网、中国知网、PubMed等数据库获取报道具有抗辐射作用的中药研究文献,通过SymMap数据库获得《中国药典》等权威著作记载的中药性味归经等药性作为特征描述符构建数据库,并将数据处理为适合机器学习的格式。使用随机森林、支持向量机、梯度提升、逻辑回归、全连接神经网络5种机器学习模型对数据集进行五折交叉训练并进行性能评估,再使用10个未参与训练的报道具抗辐射作用的中药和10个报道无抗辐射作用的中药作为外部验证集测试模型,最后利用SHapley加性解释(SHapley additive ex planations,SHAP)解释器对决定抗辐射作用有无的重要药性特征进行可视化。结果收集到涉及单味药研究、保健食品注册和复方研究共136味报道具抗辐射作用的中药,总频次为447次,其中中药使用频次及频率排名前3的为灵芝、红景天、枸杞子,频次≥10的中药共10味。在5个机器学习的性能评估中,随机森林性能最佳,其准确率、平衡F分数(F1)和曲线下面积(area under urve,AUC)分别为0.8044、0.7732和0.8798。在外部中药抗辐射的验证中,随机森林模型能较好地预测已报道具有抗辐射作用的中药。性能最佳的随机森林SHAP解释器认为“补虚、清热”功效,“心、肝、脾、肺”归经,“酸、甘、苦”味,“寒”药性特征对抗辐射作用贡献最大。结论首次将中药药性作为特征描述应用到机器学习当中并取得了较好的预测模型性能,并指导了放射病的中医药防治,即当以扶正祛邪,滋阴降火,主治心、肝、脾、肺为治疗原则。此外,机器学习模型较好的预测结果反映了中医药理论对疾病的防治具有良好的可解释性与可重现性。

关键词：机器学习中药药性四气五味抗辐射灵芝红景天枸杞子