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分泌物来源的蟾酥基原物种的分子鉴定

中国中药杂志 2024年第1期49卷 80-87页

作者：李宏宇刘静梁肖彩王乙淋蒙泳成陈伟才黄勇广西中医药大学广西南宁530200 广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室广西南宁530200 南宁师范大学广西南宁530001

物种基原是影响蟾酥药材质量的重要因素之一,来源于中华大蟾蜍的蟾酥质量显著高于来源于黑眶蟾蜍的蟾酥。蟾酥属于分泌物,缺乏基原动物的外观形态,传统鉴别法难以鉴别,而分子鉴定技术的快速发展为蟾酥鉴定提供了新的方法。然而,分泌物... 详细信息

物种基原是影响蟾酥药材质量的重要因素之一,来源于中华大蟾蜍的蟾酥质量显著高于来源于黑眶蟾蜍的蟾酥。蟾酥属于分泌物,缺乏基原动物的外观形态,传统鉴别法难以鉴别,而分子鉴定技术的快速发展为蟾酥鉴定提供了新的方法。然而,分泌物中残留的DNA含量很少,降解严重,目前对分泌物来源的药材进行分子鉴定研究仍缺乏。为了解蟾酥药材的基原物种,该研究首先收集了83份蟾酥样品,其中71份原动物样品,按照2020年版《中国药典》的方法制备蟾酥,市售蟾酥药材7份,对照药材5份。然后比较了不同DNA提取方法,扩增其线粒体16S rRNA基因片段和构建系统发育树,最后对蟾酥的基原物种进行分子鉴定。结果表明,试剂盒法提取蟾酥DNA质量比较好,83份蟾酥样品中有80份成功扩增出16S rRNA序列。从GenBank上下载了71条蟾酥基原物种的16S rRNA序列。系统发育树结果表明蟾酥基原物种中华大蟾蜍与黑眶蟾蜍各自聚成单系,节点支持率为100%(NJ)和1.00(BI)。市售蟾酥和对照药材的基原物种均为中华大蟾蜍。可见,从分泌物来源的蟾酥能提取DNA,扩增出16S rRNA基因序列,能够对蟾酥基原物种进行分子鉴定,这为蟾酥药材的质量标准、其他分泌物来源的药材基原物种鉴定提供参考。

关键词：蟾酥中华大蟾蜍 16S rRNA 分子鉴定

基于斑马鱼模型和网络药理学研究四方木皮的抗炎作用及其机制

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3070-3080页

作者：陈柳燕吴传梅梁潘韦金凤蓝婷婷郭敏李永华汝梅广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室广西南宁530200 梧州市人民医院广西梧州543000

通过网络药理学-分子对接的方法,探讨四方木皮抗炎的作用机制,并用斑马鱼炎症模型进行验证。利用网络药理学预测四方木皮抗炎的有效成分、潜在核心靶点和信号通路。用脂多糖(LPS)诱导斑马鱼炎症模型,以细胞凋亡率和活性氧(ROS)生成率等... 详细信息

通过网络药理学-分子对接的方法,探讨四方木皮抗炎的作用机制,并用斑马鱼炎症模型进行验证。利用网络药理学预测四方木皮抗炎的有效成分、潜在核心靶点和信号通路。用脂多糖(LPS)诱导斑马鱼炎症模型,以细胞凋亡率和活性氧(ROS)生成率等指标来评价四方木皮水提物和70%乙醇提取物的抗炎活性,用q PCR验证预测的主要靶点。预测发现,四方木皮的潜在抗炎靶点有121个,PPI分析显示,四方木皮抗炎主要作用于信号传导和转录激活因子3 (signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、血管内皮生长因子A (vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9,MMP9)、c-fos原癌蛋白(c-fos proto-oncogene protein,FOS)、环状素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、趋化因子8(c-x-c motif chemokine ligand 8,CXCL8)、白细胞分化抗原8(cluster of differentiation 8,CD8)等靶点;基因本体(Gene Ontology,GO)分析显示,生物过程主要作用于抑制细胞凋亡过程、基因表达的正调控、细胞增殖的正向调节;京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析表明,MAPK信号通路、PI3K-Akt信号途径、HIF-1信号通路等可能在四方木皮抗炎中起关键作用;分子对接显示,5种关键成分与核心靶点均具有较强的结合力。斑马鱼动物实验表明,四方木皮可显著抑制炎症导致的ROS形成,降低幼鱼体内细胞死亡,抑制了组织中炎症反应的增强。此外,与空白组相比,模型组中核因子(nuclear factor,NF)-κB、TP53、FOS、衔接蛋白复合物-1(adaptor protein complex-1,AP-1)、丝裂原活化蛋白激酶P38(mitogen-activated protein kinases P38,P38)的转录水平显著上调;与模型组相比,四方木皮水提物和70%乙醇提取物组的斑马鱼组织中NF-κB、TP53、FOS、AP-1、P38的m RNA表达明显下调。四方木皮通过多成分、多靶点发挥抗炎作用,且其抗炎作用可能与抑制MAPK信号通路有关。

关键词：四方木皮抗炎斑马鱼网络药理学分子对接

基于谱效关系筛选广西甜茶调节脂代谢活性质量标志物

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食品工业科技 2024年第13期45卷 17-29页

作者：樊兰兰巫秋连黄万方姜蔓菁潘东进凌洁广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西高校中药提取纯化与质量分析重点实验室广西南宁530200 广西中医药大学海洋药物研究院广西南宁530200

目的:基于谱效关系筛选广西甜茶调节脂代谢活性部位中的质量标志物。方法:采用95%乙醇提取广西甜茶,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到不同萃取部位,将不同萃取部位溶液作用于诱导分化后的3T3-L1前脂肪细胞,以油红O染... 详细信息

目的:基于谱效关系筛选广西甜茶调节脂代谢活性部位中的质量标志物。方法:采用95%乙醇提取广西甜茶,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到不同萃取部位,将不同萃取部位溶液作用于诱导分化后的3T3-L1前脂肪细胞,以油红O染色法和细胞甘油三酯释放量为指标,筛选活性部位。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对活性部位进行成分分析和解析,基于灰色关联度法和偏最小二乘回归法分析活性部位共有峰与其调节脂代谢药效之间的谱效关系,筛选质量标志物。结果:乙酸乙酯及正丁醇萃取部位为调节脂代谢的活性部位,鞣花酸、矢车菊素-3-O-芸香糖苷、甜茶素和对映-贝壳杉-16-烯-19-羧酸-13-O-β-D-葡萄糖苷4个成分与调节脂代谢活性作用高度相关,可作为甜茶调节脂代谢活性的质量标志物。结论:基于谱效关系的广西甜茶质量标志物的研究,对阐明药效物质基础、筛选与药效相关的核心质量标志物、保证药材质量的可控性和合理应用有重要意义。

关键词：广西甜茶 3T3-L1细胞脂代谢谱效关系质量标志物

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基于药性理论的中药抗辐射预测模型的构建

中草药 2024年第8期55卷 2684-2693页

作者：杨淇郝二伟侯小涛邓家刚杜正彩范丽丽夏中尚广西中医药大学药学院广西南宁530000 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室广西南宁530000 广西中医药大学广西农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西南宁530000 广西中医药大学广西中医湿病方药理论与转化重点实验室广西南宁530000 广西中医药大学广西中医药科学实验中心广西南宁530000

目的以中药药性作为特征描述符构建机器学习抗辐射作用预测模型,并解释抗辐射中药药性的重要药性特征以指导临床和日常辐射防治。方法通过药智网、中国知网、PubMed等数据库获取报道具有抗辐射作用的中药研究文献,通过SymMap数据库获得... 详细信息

目的以中药药性作为特征描述符构建机器学习抗辐射作用预测模型,并解释抗辐射中药药性的重要药性特征以指导临床和日常辐射防治。方法通过药智网、中国知网、PubMed等数据库获取报道具有抗辐射作用的中药研究文献,通过SymMap数据库获得《中国药典》等权威著作记载的中药性味归经等药性作为特征描述符构建数据库,并将数据处理为适合机器学习的格式。使用随机森林、支持向量机、梯度提升、逻辑回归、全连接神经网络5种机器学习模型对数据集进行五折交叉训练并进行性能评估,再使用10个未参与训练的报道具抗辐射作用的中药和10个报道无抗辐射作用的中药作为外部验证集测试模型,最后利用SHapley加性解释(SHapley additive ex planations,SHAP)解释器对决定抗辐射作用有无的重要药性特征进行可视化。结果收集到涉及单味药研究、保健食品注册和复方研究共136味报道具抗辐射作用的中药,总频次为447次,其中中药使用频次及频率排名前3的为灵芝、红景天、枸杞子,频次≥10的中药共10味。在5个机器学习的性能评估中,随机森林性能最佳,其准确率、平衡F分数(F1)和曲线下面积(area under urve,AUC)分别为0.8044、0.7732和0.8798。在外部中药抗辐射的验证中,随机森林模型能较好地预测已报道具有抗辐射作用的中药。性能最佳的随机森林SHAP解释器认为“补虚、清热”功效,“心、肝、脾、肺”归经,“酸、甘、苦”味,“寒”药性特征对抗辐射作用贡献最大。结论首次将中药药性作为特征描述应用到机器学习当中并取得了较好的预测模型性能,并指导了放射病的中医药防治,即当以扶正祛邪,滋阴降火,主治心、肝、脾、肺为治疗原则。此外,机器学习模型较好的预测结果反映了中医药理论对疾病的防治具有良好的可解释性与可重现性。

关键词：机器学习中药药性四气五味抗辐射灵芝红景天枸杞子

不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 112-120页

作者：韦迪张维琦莫琼韦少宣覃文慧广西中医药大学药学院南宁530200 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室南宁530001 广西中医药大学第一附属医院南宁530200 桂林市人民医院广西桂林541002

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂... 详细信息

目的:比较不同归经寄主桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠骨微观结构、骨代谢的影响,并探析其作用机制。方法:选取88只SPF级雌性SD大鼠,随机分为11组:假手术组,模型组,桑树寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),肉桂寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1)),阴香寄生低、中、高剂量组(2.5、5、10 g·kg^(-1))。药物干预12周后进行取材,使用双能X射线骨密度仪(DXA)和微计算机断层扫描(Micro-CT)检测大鼠股骨近端骨密度及骨微结构情况;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠股骨组织病理学变化;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中雌二醇(E_(2))、骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肱骨中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、Smad1、Smad9、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肱骨中BMP-2、p-Smad1/5/9、Runx2蛋白表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨微结构明显破坏,骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)显著下降(P药效最佳,其治疗骨质疏松症可能是通过调控BMP/Smad信号通路,调节骨转换的平衡。

关键词：桑寄生不同归经寄主骨质疏松骨密度骨形态发生蛋白(BMP)/Smad通路

基于氨基酸成分的淡水珍珠及海水珍珠对比分析及近红外快速检测

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中草药 2024年第10期55卷 3477-3486页

作者：张紫涵王香颖李思维李启龙甘柳霜郝二伟杜正彩侯媛媛白钢邓家刚侯小涛广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学广西中药药效研究重点实验室广西南宁530200 农作物废弃物功能成分研究协同创新中心广西南宁530200 广西中医湿病方药理论与转化重点实验室广西南宁530200 南开大学药学院天津市分子药物研究重点实验室天津300071

目的基于关键氨基酸的含量差异,通过近红外技术实现淡水与海水珍珠的快速检测。方法采用氨基酸分析仪考察108批次海水珍珠与淡水珍珠氨基酸种类与含量差异,依据氨基酸比较分析筛选关键氨基酸。针对关键氨基酸优化近红外定量模型,确立近... 详细信息

目的基于关键氨基酸的含量差异,通过近红外技术实现淡水与海水珍珠的快速检测。方法采用氨基酸分析仪考察108批次海水珍珠与淡水珍珠氨基酸种类与含量差异,依据氨基酸比较分析筛选关键氨基酸。针对关键氨基酸优化近红外定量模型,确立近红外光谱技术珍珠快速检测模型。结果研究发现天冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)含量在淡水珍珠与海水珍珠有显著差异,且两者含量范围无交集。通过珍珠近红外光谱与Asp、Gly含量化学计量学拟合对珍珠样品进行检测,所得结果与传统的氨基酸分析技术测定结果一致。结论基于化学计量学手段对珍珠的定量分析,结果准确可靠,结合近红外光谱技术对不同基原珍珠进行快速检测,为珍珠的质量控制提供方法依据。

关键词：珍珠氨基酸定量测定近红外光谱技术快速检测

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壮药多裂黄檀中2个新的黄檀酚类化合物

药学学报 2024年第2期59卷 418-423页

作者：卢澄生王维玉朱敏覃思思黎肇辉梁臣艳冯旭韦建华广西中医药大学教学实验实训中心广西南宁53020 广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011 广西中医药大学中药学国家级实验教学示范中心广西南宁530200

运用硅胶、MCI、Sephadex LH-20等柱色谱,结合半制备液相分离技术对多裂黄檀80%乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离纯化得到12个化合物。通过UV、IR、MS、1D/2D NMR等波谱数据与结合文献确定化合物的结构,分别鉴定为多裂黄檀酚A(1)、多裂黄檀... 详细信息

运用硅胶、MCI、Sephadex LH-20等柱色谱,结合半制备液相分离技术对多裂黄檀80%乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离纯化得到12个化合物。通过UV、IR、MS、1D/2D NMR等波谱数据与结合文献确定化合物的结构,分别鉴定为多裂黄檀酚A(1)、多裂黄檀酚B(2)、R-(-)-3′-hydroxy-2,4,5-trimethoxydalbergiquinol(3)、neokhriol A(4)、mucronulatol(5)、(3R)-7,2′,3′-三羟基-4′-甲氧基异黄烷(6)、异短尖剑豆酚(7)、(3S)-violanone(8)、3′-Omethylviolanone(9)、eryvarin M(10)、(±)-α,3,4,2′,4′-pentahydroxydihydrochalcone(11)和(-)-butin(12)。其中,化合物1和2为新化合物,化合物3~12为首次从该植物中分离得到。化合物1、2、4、6、8、11、12对DPPH自由基有良好清除作用。

关键词：多裂黄檀化学成分黄檀酚抗氧化

治疗阿尔茨海默病中药化学成分及机制的研究概况

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 236-245页

作者：杜正彩胡润华李瑞林郝二伟侯小涛邓家刚广西中医药大学广西中医药科学实验中心南宁530200 广西中药药效研究重点实验室南宁530200 广西农作物废弃物功能成分研究协同创新中心南宁530200 广西中医湿病方药理论与转化实验室实验室南宁530200 广西中医药大学药学院南宁530200

阿尔茨海默病(AD)是目前老年人群中高发疾病之一,其病因涉及β淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积、Tau蛋白过度磷酸化、胆碱能系统异常、氧化应激与炎症反应等多个致病因素与病理环节,但至今仍未阐明其具体的发病机制,也未找到特效治疗药物。近年... 详细信息

阿尔茨海默病(AD)是目前老年人群中高发疾病之一,其病因涉及β淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积、Tau蛋白过度磷酸化、胆碱能系统异常、氧化应激与炎症反应等多个致病因素与病理环节,但至今仍未阐明其具体的发病机制,也未找到特效治疗药物。近年来,越来越多的研究关注中药化学成分在AD治疗中的潜力,因其多样性和复杂性,可能对AD的多个病理环节产生积极影响。研究者们从中药中分离得到众多有效成分,并经过现代药理学研究证实了治疗AD的效果。该文通过文献分析发现具有抗AD的中药化学成分主要有皂苷类(占31%)、黄酮类(占24%)、多糖类(占20%)、内酯类(占8%)、生物碱(7%)、酚类化合物(3%)及其他类化合物(7%)。其中人参皂苷、三七皂苷、淫羊藿黄酮、葛根素、黄芩素、五味子多糖、当归多糖、灵芝多糖、茯苓多糖、石杉碱甲、黄连素、穿心莲内酯、姜黄素、大黄素、天麻素等在抗AD方面研究较多,而其作用机制则涉及到AD发病机制的多个方面。该文综述中药化学成分抗AD的活性及其可能作用机制,为研发防治AD新药提供参考。

关键词：中药化学成分阿尔茨海默病发病机制研究概况

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一株肉桂炭疽病病原菌分离鉴定及生防菌筛选

北方园艺 2024年第8期 102-108页

作者：王洁梁丽婷谢欣怡黄荣韶姚绍嫦谭小明广西中医药大学药学院广西南宁530200 广西中医药大学壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西中医药大学广西高校中药民族药资源保护与利用重点实验室广西南宁530200

以广西防城港人工栽培的肉桂病叶为试材,采用内生真菌分离纯化法、形态学观察、ITS测序和平板对峙等方法,研究了肉桂炭疽病病原菌的分类地位及其拮抗菌株的筛选,以期为肉桂炭疽病生防菌开发提供参考依据。结果表明:从广西防城港肉桂病... 详细信息

以广西防城港人工栽培的肉桂病叶为试材,采用内生真菌分离纯化法、形态学观察、ITS测序和平板对峙等方法,研究了肉桂炭疽病病原菌的分类地位及其拮抗菌株的筛选,以期为肉桂炭疽病生防菌开发提供参考依据。结果表明:从广西防城港肉桂病叶中分离出6株真菌(B1~B6),B6明显致病。通过形态和分子生物学鉴定该菌株为炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides。平板对峙结果表明,RG256拮抗效果最佳,抑制率为77.05%±5.06%,鉴定为Gliocladiopsis sp.。综上所述,明确广西防城港肉桂炭疽病的病原真菌为炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides),并筛选到对肉桂炭疽病病原真菌有拮抗作用的生防菌株,为肉桂炭疽病的绿色防治提供参考依据。

关键词：肉桂炭疽病菌内生真菌拮抗菌株