检索结果-南通市图书馆

应用全自动角膜内皮细胞分析仪对保存兔角膜内皮细胞定量研究

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中国实用眼科杂志 2001年第1期19卷 20-22页

作者：吴洁朱秀萍刘先宁银勇西安市第一医院眼科

目的 :研究保存的兔角膜内皮细胞活性四项定量指标的变化。方法 :应用非接触式眼库镜及计算机角膜内皮细胞形态定量分析系统对 42只 (84片 )实验兔角膜内皮细胞进行四项指标 (平均细胞面积、细胞密度、六棱细胞比率、变异系数 )定量分... 详细信息

目的 :研究保存的兔角膜内皮细胞活性四项定量指标的变化。方法 :应用非接触式眼库镜及计算机角膜内皮细胞形态定量分析系统对 42只 (84片 )实验兔角膜内皮细胞进行四项指标 (平均细胞面积、细胞密度、六棱细胞比率、变异系数 )定量分析 ,并同时检测内皮细胞活性率 ,其结果进行对比研究。结果 :改良 K3液组与 K液对照组 :保存 5天时 ,四项指标两组无显著性差异(P>0 .0 5 ) ,保存 7、 10天时 ,四项指标两组有显著性差异 (P<0 .0 5 )。改良 K3液组及 K液组分别与正常兔组进行比较 :改良 K液组在保存 10天时 ,四项指标与正常兔组差异有显著性 (P<0 .0 5 )。K液对照组在保存 7、 10天时 ,四项指标与正常兔组差异有显著性 (P<0 .0 5 )。改良 K3液组在保存 10天时 ,内皮细胞活性率在 93.36± 1.96 % ,而四项指标与正常兔组差异已有显著性。K液对照组在保存 7、 10天时 ,内皮细胞活性率分别为 90 .84± 1.9% ,79.8± 4.48% ,四项指标均与正常兔组差异有显著性。结论 :完整的评价角膜植片的活性 ,单纯依靠既往的内皮细胞活性率测定是不全面的 ,在有条件的情况下应同时结合四项定量指标进行综合评价 ,才能确保供体角膜片的质量。

关键词：角膜内皮细胞活性角膜内皮细胞分析仪保存液定量指标

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盖玻片辅助人晶状体上皮细胞原代培养法

眼科学报 2008年第1期24卷 23-26,43页

作者：彭瑞萍吴明星叶少碧中山大学中山眼科中心中山大学眼科学国家重点实验室广州510060

目的:建立人晶状体上皮细胞原代培养的简便方法并比较不同来源人晶状体上皮细胞的生物学特性。方法:取胎龄20周合法引产胚胎眼晶状体囊膜、中山眼科中心眼库眼晶状体囊膜和白内障患者术中撕取的前囊膜,分别在培养皿中铺平,加10μL10%DME... 详细信息

目的:建立人晶状体上皮细胞原代培养的简便方法并比较不同来源人晶状体上皮细胞的生物学特性。方法:取胎龄20周合法引产胚胎眼晶状体囊膜、中山眼科中心眼库眼晶状体囊膜和白内障患者术中撕取的前囊膜,分别在培养皿中铺平,加10μL10%DMEM培养液润湿后加盖盖玻片防止卷曲并促进粘贴,添加培养液浸没盖玻片,37℃培养。同时取相同来源的囊膜按照组织块法培养。观察细胞增殖情况并比较原代人晶状体上皮细胞与人晶状体上皮细胞系SRA01/04β晶体蛋白的表达差异。结果:在盖玻片辅助下,胚胎眼晶状体囊膜第2天即可见明显的增殖细胞由囊膜缘长出,眼库眼囊膜和白内障患者术中撕取的囊膜在3～4d的潜伏期后亦可见增殖细胞长出;组织块法培养出现部分组织块漂浮,且胚胎眼囊膜潜伏期延长至3～4d,眼库眼囊膜和白内障患者晶状体囊膜潜伏期延长至4～5d。结论:盖玻片辅助的改良组织块培养法能尽快获得体外培养的原代晶状体上皮细胞,且操作简便,值得推广应用于晶状体病的研究。

关键词：人晶状体上皮细胞原代培养白内障

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改良组织块培养法体外培养人角膜上皮干细胞

中国组织工程研究 2020年第25期24卷 4012-4017页

作者：许中中余晓菲王丽娅郑州人民医院眼科河南省郑州市450003 河南省人民医院眼科河南省郑州市450003

背景:角膜上皮干细胞定位于角膜缘,又称之为角膜缘干细胞,临床上由于眼表严重热烧伤、化学性烧伤、慢性炎症等原因引起的角膜缘干细胞缺乏或功能障碍治疗较为棘手。目前利用组织工程技术体外培养角膜上皮干细胞并进行临床移植成为新型... 详细信息

背景:角膜上皮干细胞定位于角膜缘,又称之为角膜缘干细胞,临床上由于眼表严重热烧伤、化学性烧伤、慢性炎症等原因引起的角膜缘干细胞缺乏或功能障碍治疗较为棘手。目前利用组织工程技术体外培养角膜上皮干细胞并进行临床移植成为新型有效的治疗方向。目的:探讨在无血清培养条件下采用改良组织块培养法培养人角膜上皮干细胞的可行性。方法:人角膜缘组织来自河南省眼库,植片直径小于8 mm角膜移植术后的供者剩余眼球材料,手术显微镜下剖取角膜缘上皮层外2/3区域,采用2种方法培养人角膜上皮干细胞,常规组织块培养组是将组织块上皮面向上贴壁,加入K-SFM培养液后置于37℃、体积分数为5%CO 2细胞培养箱中培养;改良组织块培养组是先将组织块浸泡于K-SFM培养液中,置于细胞培养箱中孵育12 h,然后组织块上皮面向下贴壁培养。组织块周边有细胞游离出贴壁生长记作“培养第1天”,每日相差显微镜下观察细胞生长变化。利用免疫荧光染色技术检测改良组织块培养第5,10,14天时原代细胞中p63及K3的表达。结果与结论:①改良组织块培养组出膜时间明显短于常规组织块培养组(P<0.05),出膜率明显高于常规组织块培养组(P<0.05);②改良组织块培养组细胞生长状态良好,培养第10天可见小体积细胞较多,聚集成灶状分布;培养第14天可见细胞克隆灶,克隆灶内细胞体积较小,形态均一;③培养第5天,K3表达量较多,p63表达量较少;培养第10天,K3和p63表达量均增多;培养第14天,K3表达量未见明显增多,p63表达量明显增多;④在无血清培养条件下,改良组织块培养法能显著促进角膜上皮干细胞的游离,提高体外培养细胞数量,为人角膜缘上皮组织片的构建提供种子细胞。

关键词：角膜上皮干细胞无血清培养组织块培养改良 K3 p63 标记物

重视角膜病诊治的规范化并加强眼库的基本建设

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中华眼科杂志 2003年第10期39卷 577-577页

作者：陈家祺周世有中山大学中山眼科中心广州510060

角膜病是我国眼科领域的一种常见和严重致盲眼病，在我国南方地区该病患者约占眼科初诊患者的1/5。普及和提高基层眼科医师的角膜病和眼库专业知识，制定常见、多发角膜病的诊治规范，同时注重实施个体化治疗方案，对保护我国人民的视... 详细信息

角膜病是我国眼科领域的一种常见和严重致盲眼病，在我国南方地区该病患者约占眼科初诊患者的1/5。普及和提高基层眼科医师的角膜病和眼库专业知识，制定常见、多发角膜病的诊治规范，同时注重实施个体化治疗方案，对保护我国人民的视功能、提高生活质量尤为重要。

关键词：重视角膜病眼库治疗诊断眼表重建术

重组AAV2-NTF2对人视网膜微血管内皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响

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眼科研究 2010年第7期28卷 577-581页

作者：史煜陈春生曹亮陈凌燕谢琳唐仕波南京医科大学附属南京第一医院眼科 210006 中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州510060

目的观察核运输因子2(NTF2)在体外培养的人视网膜微血管内皮细胞(RCECs)中的表达,并探讨其高表达对RCECs中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法取中山眼科中心眼库的人眼球,分离视网膜组织用以培养人RCECs,并用Ⅷ因子抗体免疫组织... 详细信息

目的观察核运输因子2(NTF2)在体外培养的人视网膜微血管内皮细胞(RCECs)中的表达,并探讨其高表达对RCECs中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法取中山眼科中心眼库的人眼球,分离视网膜组织用以培养人RCECs,并用Ⅷ因子抗体免疫组织化学法鉴定。免疫组织化学法观察细胞中NTF2的表达。通过重组腺相关病毒(rAAV2)将外源性NTF2导入培养的RCECs内,rAAV2-NTF2和rAAV2-EGFP转染RCECs,未转染组为对照组。激光共焦显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)阳性细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组NTF2、VEGFmRNA的表达变化,并进行定量分析。结果培养的RCECs呈典型铺路石样排列,荧光显微镜下可见Ⅷ因子阳性表达为绿色荧光,95%以上的活体细胞可摄取DiI标记的Ac-LDL,并在荧光显微镜下呈现红色荧光。RCECs可表达NTF2,主要位于细胞质内,富集于核周。rAAV2-EGFP转染后,激光共焦显微镜观察可见大量EGFP阳性细胞,实验组NTF2在mRNA水平表达明显强于GFP组和对照组(t=15.06,t=7.02,P<0.01),VEGF表达明显下降(t=7.40,t=14.08,P<0.01)。结论 rAAV2-NTF2转染视网膜内皮细胞后,NTF2可稳定高表达,VEGF表达下降,NTF2可能通过调节VEGF的表达参与新生血管的发生。

关键词：核运输因子2 人视网膜微血管内皮细胞血管内皮生长因子

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活体及体外条件下对角膜上皮干细胞的定位

中国组织工程研究 2014年第1期18卷 94-99页

作者：许中中余晓菲杜连心李晶王丽娅郑州大学第一附属医院眼科河南省郑州市450052 河南省眼科研究所河南省郑州市450003

背景:眼表存在两种形式的上皮干细胞即角膜上皮干细胞和结膜上皮干细胞,角膜上皮干细胞在角膜上皮细胞更新和角膜透明的维持方面起着重要作用。目的:采用活体激光扫描角膜共焦显微镜和免疫荧光染色技术相结合的方法,从活体和体外层面上... 详细信息

背景:眼表存在两种形式的上皮干细胞即角膜上皮干细胞和结膜上皮干细胞,角膜上皮干细胞在角膜上皮细胞更新和角膜透明的维持方面起着重要作用。目的:采用活体激光扫描角膜共焦显微镜和免疫荧光染色技术相结合的方法,从活体和体外层面上对角膜上皮干细胞进行定位研究。方法:收集2009年9月至2012年9月来河南省眼科研究所就诊的单侧角膜缘干细胞缺乏患者,使用活体激光扫描角膜共焦显微镜检查患者双眼,健侧眼为对照。扫描方位依次为中央角膜及上、下、左、右方的角膜缘,记录扫描图像并分析。眼球材料来自于河南省眼库,切取角膜中央和角膜缘组织,组织包埋剂包被、冰冻切片,切片厚度5-7μm;免疫荧光染色技术检测p63、ABCG2、K3和Connexin 43在角膜中央及角膜缘上皮层的表达。结果与结论:共有24例患者确诊为单侧角膜缘干细胞缺乏,活体激光扫描角膜共焦显微镜下患侧眼角膜病变区可见结膜细胞及杯状细胞;角膜缘区域Vogt栅栏状结构消失,色素细胞消失,取而代之的是大量纤维瘢痕化组织。免疫荧光染色示表达ABCG2和p63的细胞主要在角膜缘上皮基底层,尤其在近结膜侧的角膜缘及角膜缘中间部表达相对较高,而中央角膜上皮层细胞不表达;K3及Connexin43在角膜缘上皮基底细胞层不表达,中央角膜上皮全层表达。通过活体激光扫描角膜共焦显微镜观察及干细胞标记物检测显示角膜上皮干细胞主要存在于角膜缘外2/3区域的Vogt栅栏基底部及钉突结构中。

关键词：干细胞培养角膜上皮干细胞活体激光扫描角膜共焦显微镜免疫荧光染色定位国家自然科学基金

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重视角膜移植手术的供体材料问题

中华眼科杂志 2016年第9期52卷 641-643页

作者：潘志强梁庆丰首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科研究所北京市眼科学与视觉科学重点实验室 100730

角膜移植是角膜盲治疗的重要手段。角膜移植手术方式的进步、眼库的建设和发展以及供体材料的合理使用，是提高角膜病治疗效果、减少角膜盲的必要条件。本文从成分角膜移植手术技术的推广、眼库专业化建设以及角膜移植手术供体植片准备... 详细信息

角膜移植是角膜盲治疗的重要手段。角膜移植手术方式的进步、眼库的建设和发展以及供体材料的合理使用，是提高角膜病治疗效果、减少角膜盲的必要条件。本文从成分角膜移植手术技术的推广、眼库专业化建设以及角膜移植手术供体植片准备3个方面，对角膜移植手术的供体材料问题，提出建设性意见供同行参考。（中华眼科杂志，2016，52：641-643）

关键词：角膜移植眼库组织供者组织工程

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自体巩膜帽羟基磷灰石义眼座植入术

眼外伤职业眼病杂志 2007年第1期29卷 63-64页

作者：沈兰珂马雯宋建斌唐浩安康市中医医院眼科陕西安康725000

目的探讨预防羟基磷灰石义眼座植入术后眼座暴露的手术方法。方法常规眼球摘除后,制作一直径约10mm自体巩膜帽固定于义眼座前极,巩膜帽前十字交叉结扎4条直肌,缝合眼球筋膜及球结膜。结果本组16例术后反应轻,无眼座暴露、脱出等并发症发... 详细信息

目的探讨预防羟基磷灰石义眼座植入术后眼座暴露的手术方法。方法常规眼球摘除后,制作一直径约10mm自体巩膜帽固定于义眼座前极,巩膜帽前十字交叉结扎4条直肌,缝合眼球筋膜及球结膜。结果本组16例术后反应轻,无眼座暴露、脱出等并发症发生,活动度良好,外观满意。结论该手术简便易操作,能有效地预防术后眼座暴露,美容效果好,尤其适应于无眼库的基层医院眼球摘除后Ⅰ期HA义眼座植入术。

关键词：眼座暴露自体巩膜帽羟基磷灰石义眼座

新鲜角膜植片移植眼前节重建治疗真菌性角膜炎160例

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第34期11卷 6874-6875页

作者：马利肖河北省邢台眼科医院眼科河北省邢台市054001

选择2001-06/2006-06邢台眼科医院收治的应用新鲜角膜植片行眼前节重建术的真菌性角膜炎患者160例,均知情同意。全部采用眼库保存的48h以内新鲜角膜。植片直径依植床而定,一般大于植孔0.5～1.0mm。术后待角膜移植片上皮愈合后去包扎,定... 详细信息

选择2001-06/2006-06邢台眼科医院收治的应用新鲜角膜植片行眼前节重建术的真菌性角膜炎患者160例,均知情同意。全部采用眼库保存的48h以内新鲜角膜。植片直径依植床而定,一般大于植孔0.5～1.0mm。术后待角膜移植片上皮愈合后去包扎,定期随访。一次手术获临床治愈者132例,占82.5%。一次手术失败改为其他手术方式二次获得成功者20例,占12.5%。手术失败最终行眼球摘除者8例,占5%。共152例治愈,保住眼球,其中14例视力达4.0以上。应用新鲜角膜植片行眼前节重建术是治疗重症真菌性角膜炎较为有效的方法。

关键词：角膜移植角膜炎跟感染真菌性组织移植