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全预混冻干非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR试剂的研究和初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：马静钟斐刘琳张军汪葆玥胡冬梅毕一鸣徐琦顾小雪刘玉良倪建强周智任永强李琦中国动物疫病预防控制中心华润科学技术研究院有限公司

非洲猪瘟的防控有赖于及时准确的诊断，荧光PCR是检测非洲猪瘟病毒的主要技术。本研究通过优化冻干工艺研制出非洲猪瘟病毒全预混荧光PCR试剂，检测过程中只需要加入去离子水和待检核酸就可以完成检测，降低了操作误差，检测灵敏度可达... 详细信息

非洲猪瘟的防控有赖于及时准确的诊断，荧光PCR是检测非洲猪瘟病毒的主要技术。本研究通过优化冻干工艺研制出非洲猪瘟病毒全预混荧光PCR试剂，检测过程中只需要加入去离子水和待检核酸就可以完成检测，降低了操作误差，检测灵敏度可达1拷贝/微升。稳定期和加速稳定性试验表明，37和50℃30天检测性能不受影响。同时，配套使用便携式Q3-Plus荧光PCR仪，在50min内可完成核酸检测，且可直接连接手机读取信号，无需电脑等设施。对218份临床样品的检测表明，冻干试剂和现配试剂的阳性率均为38.99% （85/218），相符性为100% 。本试验研制的全预混非洲猪瘟病毒荧光PCR试剂具有便于运输、准确性高、仪器拓展性好的特点，对在养殖场的现地检测有重要意义。

关键词：非洲猪瘟病毒荧光PCR 冻干试剂全预混

2016—2023年上海市浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌耐药性比较

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 38-47页

作者：方雅红张妤孙冰清姜芹龚志亮李闽商军张亦菲上海市动物疫病预防控制中心上海长宁201103 上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海浦东201299 上海市松江区动物疫病预防控制中心上海松江201699

为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(***)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量肉汤... 详细信息

为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(***)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量肉汤稀释法测定分离的大肠埃希菌对10大类14种抗菌药物的敏感性。结果显示,两区不同养殖场的抗菌药物使用情况存在差异。两区分别分离到333和350株大肠埃希菌,分离率为83.04%和71.43%。两区分离菌株对四环素(87.09%,82.00%)、磺胺异噁唑(77.78%,82.00%)、氨苄西林(82.58%,70.30%)和复方新诺明(70.87%,76.90%)的耐药率较高,对头孢他啶(6.61%,6.90%)和黏菌素(0.90%,0.90%)较为敏感,未检测到美罗培南耐药菌株;多重耐药菌株占比分别为87.99%和81.71%。8年间,两区分离菌株对多数抗菌药物的耐药率、多重耐药菌株占比和耐药谱数量整体呈下降趋势,松江区下降趋势更明显。结果表明,浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌对部分抗菌药物的耐药率高且多重耐药情况严重,在减抗背景下,两区耐药水平均有缓解,松江区缓解程度更大。

关键词：大肠埃希菌耐药性兽用抗菌药减量化行动浦东新区松江区

血能铁制剂对哺乳母猪生产性能及生理生化指标的影响

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 116-123页

作者：胡国明黄昌巧周淑棉韦玉衡谢小东胡庭俊胡永浩甘肃农业大学动物医学院广西大学动物科学技术学院贵港市动物疫病预防控制中心

铁作为一种关键的微量元素，对动物的生长具有重大的意义，铁缺乏将会导致发育障碍、繁殖性能不佳、贫血和腹泻等多种不良影响。本研究以产前7 d至产后21 d的哺乳母猪(Sus scrofa domestica)为对象，探讨饲料中添加血能铁制剂对哺乳母... 详细信息

铁作为一种关键的微量元素，对动物的生长具有重大的意义，铁缺乏将会导致发育障碍、繁殖性能不佳、贫血和腹泻等多种不良影响。本研究以产前7 d至产后21 d的哺乳母猪(Sus scrofa domestica)为对象，探讨饲料中添加血能铁制剂对哺乳母猪生产性能、生理生化指标及仔猪相关指标的影响。结果显示，与空白对照组相比，以1 kg/t饲料添加剂量添加血能铁制剂后，连续饲喂28 d能够显著降低母猪助产率、提高断配率，改善母猪产程，增加仔猪初生窝重、仔猪平均体重、断奶窝重，降低仔猪腹泻率、畸形率、死胎率，从而提高母猪生产性能和仔猪生长性能；同时血能铁制剂可以提高第7天哺乳仔猪血清铁和总铁结合力，起到预防仔猪贫血的作用。本研究为兽医临床应用血能铁制剂提高母猪生产性能提供参考和依据。

关键词：血能铁制剂生产性能血液指标

刺梨的生物学功能及其在畜禽生产中应用的研究进展

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饲料研究 2025年 169-173页

作者：梁燕张勇伍昌华罗杰安顺市动物疫病预防控制中心安顺市陆生动物疫病病原学监测区域中心铜仁职业技术学院

刺梨作为药食两用植物资源，含有维生素C、多糖、有机酸、黄酮、多酚等活性成分，具有抗氧化、降血脂、降血糖、抗菌、抗炎及稳定肠胃稳态等生物学功能。刺梨作为饲料添加剂可以促进畜禽生长，提高动物免疫功能。此外，刺梨果渣发酵可... 详细信息

刺梨作为药食两用植物资源，含有维生素C、多糖、有机酸、黄酮、多酚等活性成分，具有抗氧化、降血脂、降血糖、抗菌、抗炎及稳定肠胃稳态等生物学功能。刺梨作为饲料添加剂可以促进畜禽生长，提高动物免疫功能。此外，刺梨果渣发酵可降低反刍动物机体血脂含量，降低饲养成本。文章综述了刺梨的主要活性成分、生物学功能及其在畜禽生产中的应用，为进一步推广刺梨在畜禽养殖生产、疫病防控、饲料研发中的应用提供参考。

关键词：刺梨生物学功能畜禽生产

2020—2023年上海地区犬钩端螺旋体血清流行病学调查与分析

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 48-54页

作者：张玉杰何随彬徐锋庄源王晓旭沈莉萍向蒙杨显超王建上海市动物疫病预防控制中心上海长宁201103 上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海浦东201299 上海市疾病预防控制中心上海长宁200336

为了解上海地区犬钩端螺旋体的免疫和临床感染情况,同时明确犬携带钩端螺旋体的优势血清群,为上海地区犬钩端螺旋体病的防控提供重要的数据支撑。本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2020—2023年收集的3920份犬血清样本(3557份流浪犬... 详细信息

为了解上海地区犬钩端螺旋体的免疫和临床感染情况,同时明确犬携带钩端螺旋体的优势血清群,为上海地区犬钩端螺旋体病的防控提供重要的数据支撑。本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2020—2023年收集的3920份犬血清样本(3557份流浪犬血清样本、176份免疫家养犬血清样本和187份未免疫家养犬血清样本)进行血清学检测,采用显微凝集试验(MAT)对ELISA检测阳性的80份血清样本进行钩端螺旋体血清群检测,同时对血清阳性率和血清群数据进行统计分析。结果显示,流浪犬的钩端螺旋体血清阳性率为52.38%(95%CI:51.22%~53.54%),家养犬的钩端螺旋体血清阳性率为19.28%(95%CI:15.22%~23.34%)。血清分群结果显示,流浪犬血清样本所含血清群的占比为犬群>澳洲群>黄疸出血群>拜伦群>40%,未发现流感伤寒群;家养犬血清样本中15种血清群均有发现,其中未免疫家养犬血清样本所含血清群的占比为黄疸出血群>秋季群=回归热群>犬群>50%,免疫家养犬血清样本所含血清群的占比为拜伦群>波摩那群>致热群>50%(与疫苗有关的黄疸出血群和犬群不用于优势血清群的比较);统计分析结果显示,未免疫家养犬的感染血清群数量存在地区差异(P<0.05),流浪犬和家养犬的血清阳性率和感染血清群类型(澳洲群、波摩那群、流感伤寒群和塔拉索夫群)存在显著差异(P<0.05),免疫家养犬和未免疫家养犬感染的血清群类型(拜伦群、致热群和秋季群)存在显著差异(P<0.05)。结果表明,上海地区不同犬种群的钩端螺旋体优势血清群不同,且流浪犬血清阳性率较高,应当注意防范流浪犬带来的潜在公共卫生安全问题。

关键词：犬钩端螺旋体血清群流浪犬家养犬

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2023年华南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传变异分析

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中国畜牧兽医 2025年 331-340页

作者：李松倍谢永生龙晓琴张晓晓陈永杰张春红焦茂兴郭春和华南农业大学兽医学院动物疫病防控全国重点实验室宜春学院生命科学与资源环境学院肇庆市动物疫病预防控制中心

【目的】了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。【方法】采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的... 详细信息

【目的】了解2023年华南地区猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的遗传变异情况,为华南地区PRRSV的防控提供理论依据。【方法】采用实时荧光定量PCR方法对华南地区不同猪场采集的328份样品进行PRRSV检测,对来自不同猪场具有代表性的29个PRRSV阳性样品ORF5基因进行测序和遗传进化分析。【结果】所有样本中PRRSV的阳性率为54.27%(178/328),获得29株PRRSV。ORF5基因序列分析结果显示,所获得的PRRSV毒株均属于基因Ⅱ型毒株,29株PRRSV ORF5基因之间的核苷酸序列相似性为83.7%～100%,氨基酸序列相似性为83.0%～100%。其中6株属于以重组毒株NADC30-like为代表的谱系1,2株属于以经典毒株VR2332为代表的谱系5,21株属于以高致病性毒株JXA1为代表的谱系8。ORF5基因氨基酸突变主要集中在2个高变区、1个诱饵表位和3个跨膜区。谱系1的5株毒株的诱饵表位区域发生了V27A突变,谱系5的2株毒株的诱饵表位区域发生了V29A突变。在中和表位区域,谱系1的8株毒株发生了I39L突变,谱系8的5株毒株发生了I39F突变。在毒力相关位点中,部分毒株发生了R13Q、R151K、R151I、R151G突变。此外,谱系1的N-糖基化位点变异较多,主要集中在第30-32、32-34、33-35、34-36、35-37、57-59位氨基酸处,而谱系5和谱系8的N-糖基化位点相对保守。【结论】目前华南地区猪场的PRRSV阳性率仍较高,PRRSV流行以多谱基因Ⅱ型为特征,谱系8和谱系1毒株占比较高,并且变异复杂多样,需加强对PRRSV的监测,以掌握PRRSV毒株之间的遗传变异情况,及时做好防控。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 遗传变异 ORF5基因谱系

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云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况调查分析

动物医学进展 2025年第1期46卷 123-128页

作者：董路段博芳杨建发杨红梅李坤马洲董星和李永华邹丰才云南省动物疫病预防控制中心云南昆明650201 云南农业大学动物医学院云南昆明650201 景洪市勐龙镇农业农村发展服务中心云南景洪666112 保山市动物卫生监督所云南保山678000 武定县动物疫病预防控制中心云南武定651600

为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫... 详细信息

为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫;PCR扩增显示:5份样品为广州管圆线虫阳性,总阳性率为0.111%(5/4502);不同地区间,昆明市阳性率最高(0.231%,4/1734),德宏州(0.221%,1/453)次之;不同淡水螺种类中,福寿螺阳性率为0.192%(4/2081),环棱螺阳性率为0.160%(1/624),其余3种螺未检出;不同采样环境下,农贸市场阳性率为0.192%(4/2083),野外环境阳性率为0.041%(1/2419)。不同螺种类和采样环境感染率有统计学意义(P广州管圆线虫的感染情况,为云南省广州管圆线虫病的防控提供了重要基础数据。

关键词：淡水螺广州管圆线虫 ITS基因感染

基于荧光定量PCR检测和原位杂交技术分析湖北省蛋鸡滑液支原体的感染情况

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畜牧兽医学报 2025年

作者：王纯王晴吴晓倩胡婷崔卫涛裴洁宋铁平胡思顺张万坡李自力周祖涛华中农业大学动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室湖北省动物疫病预防控制中心宜昌天佑华牧科技有限公司

近年来，滑液支原体（Mycoplasma synoviae， MS）在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大，各蛋鸡品种均有饲养，目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此，本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS... 详细信息

近年来，滑液支原体（Mycoplasma synoviae， MS）在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大，各蛋鸡品种均有饲养，目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此，本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳顶端异常（eggshell apex abnormality，EAA）蛋鸡输卵管中的分布。采集湖北省36个规模蛋鸡养殖场82个鸡群血清和气管棉拭子各1637份，利用建立的荧光定量PCR（real-time qPCR）方法检测MS载量，ELISA试剂盒检测免疫鸡群和非免疫鸡群血清抗体，并对产EAA蛋的蛋鸡输卵管进行MS载量、病理切片和MS定位分析。结果显示，临床样本中，喉气管拭子MS阳性率9.41%；血清抗体阳性率92.24%，其中非免疫鸡群抗体阳性率89.04%且6月龄抗体达100%阳性，免疫鸡群抗体阳性率95%；36个规模场中有26个（72.22%）MS感染阳性场，82个鸡群中有61个（74.39%）感染阳性群；10个蛋鸡品种均有MS感染。产EAA蛋的鸡输卵管部位检出MS且膨大部的载量极显著高于子宫部、峡部和漏斗部（P＜0.01），子宫部显著高于峡部和漏斗部（P＜0.05）；在产EAA蛋的蛋鸡输卵管中，峡部和子宫部出现黏膜上皮细胞变性和腺体肿大以及膨大部出现腺体上皮细胞脱落和坏死，子宫部和峡部的黏膜上皮以及膨大部的黏膜上皮和管状腺周围都有MS阳性信号检出，其中膨大部和子宫部阳性信号最强。综上，湖北省蛋鸡场MS感染严重，不同品种均有感染，MS主要定植在蛋鸡输卵管子宫部和膨大部中并造成病理损伤。本研究为湖北省蛋鸡MS感染情况的认识和MS引起EAA蛋的研究提供了数据支撑。

关键词：滑液支原体蛋壳顶端异常荧光定量PCR 原位杂交组织分布

检测A群PoRV抗体间接ELISA方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：钟培玉王奕斐黄夏玲樊柳忻罗鼎科张政黄觉覃一峰陈樱韦祖樟黄伟坚欧阳康广西大学动物科学技术学院贺州市动物疫病预防控制中心广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室

猪轮状病毒（PoRV）是当前引起哺乳仔猪腹泻的重要原因之一，其VP4基因编码的纤突蛋白是病毒抗原的主要组成成分。本研究中，利用表达并纯化的VP4蛋白作为包被抗原，构建了一种间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，用于检测PoRV抗体，... 详细信息

猪轮状病毒（PoRV）是当前引起哺乳仔猪腹泻的重要原因之一，其VP4基因编码的纤突蛋白是病毒抗原的主要组成成分。本研究中，利用表达并纯化的VP4蛋白作为包被抗原，构建了一种间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，用于检测PoRV抗体，为了确保该ELISA方法的准确性和可靠性，对其反应条件进行了详细优化，同时对该方法的进行了特异性、敏感性以及重复性实验评估。实验结果显示，在使用本实验所构建的间接ELISA方法检测PoRV抗体时，其与PEDV等临床常见病毒的阳性血清未表现出交叉反应，特异性方面表现可靠。所建立的间接ELISA检测方法具有较高的敏感性能够准确检出稀释至1:800的PoRV阳性血清样本；此外，该检测方法在重复性评估中的表现也非常稳定，通过批内和批间的多次重复实验，计算得出的变异系数均小于6%。运用本方法构建的间接ELISA方法，对2019-2021年广西地区的1041份样本血清样品进行PoRV检测，结果显示样品阳性率为53.72%。该间接ELISA方法不仅具备实验室检测的良好性能，还具有在临床上用于快速诊断PoRV感染及开展流行病学调查的应用前景。

关键词：轮状病毒 ELISA 抗体