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人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程

中医药治疗胃食管反流病的血清学因子及机制通路探析

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辽宁中医药大学学报 2025年第1期27卷 202-206页

作者：彭洪姣时昭红湖北中医药大学湖北武汉430000 湖北中医药大学附属武汉市中西医结合医院湖北武汉430000

胃食管反流病是消化系统常见病,中医药治疗胃食管反流病获得良好疗效。该研究从血清学指标及相关通路角度总结中医药治疗胃食管反流病的疗效机制,常见的血清学因子可分为神经递质、胃肠激素、炎症介质三大类,通过恢复食管下括约肌功能... 详细信息

胃食管反流病是消化系统常见病,中医药治疗胃食管反流病获得良好疗效。该研究从血清学指标及相关通路角度总结中医药治疗胃食管反流病的疗效机制,常见的血清学因子可分为神经递质、胃肠激素、炎症介质三大类,通过恢复食管下括约肌功能、调控内脏高敏感、改善食管黏膜炎症三大途径来干预胃食管反流病进展。其中恢复食管下括约肌功能的血清学物质主要有胃泌素、胃动素、血管活性肠肽、胆囊收缩素等,通过SCF/c-kit信号通路、PLC-DAG-PKC信号通路等发挥作用。调控内脏高敏感的血清学物质主要有P物质、CGRP、5-羟色胺等,通过基于TRPV1蛋白相关因子、MC-PAR2-TRPV1信号通路等发挥作用。改善食管黏膜炎症的血清学物质主要有白细胞介素-18、白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白等,通过TLR4/NF-κB、NF-κB、NLRP3/Caspase-1等通路发挥作用。部分血清学因子对GERD机制呈现互相协同,或多途径作用的效果。该研究为胃食管反流病的研究提供了参考。

关键词：中医药胃食管反流病血清学因子通路机制

强骨壮筋汤联合康复训练在股骨颈骨折术后的应用效果观察

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中国中医药科技 2025年第1期 108-110页

作者：南金梅叶倩倩陈玲玲谢海风温州市中西医结合医院关节外科

股骨颈骨折是中老年人群中常见的一类骨折,随着我国人均寿命的延长、骨质疏松发病率的增高、交通运输业的发展,股骨颈骨折发病率也呈升高趋势[1],尤其是高能量损伤引起的青壮年股骨颈骨折更为多见[2]。

关键词：

泰癌注射液联合化疗对Ⅳ期胃癌的疗效及免疫功能的影响

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广东医学 2017年第7期38卷 1104-1105,1109页

作者：陈元岩钟俊新陈显国王业增广州市中西医结合医院胃肠外科广东广州510800

目的观察泰癌注射液联合化疗对Ⅳ期胃癌的疗效及免疫功能的影响。方法 68例Ⅳ期胃癌患者随机分成观察组和对照组。所有病例均接受FOLFOX化疗方案:奥沙利铂100 mg/m^2静脉滴注2 h,第1天;亚叶酸钙400 mg/m^2,5-氟尿嘧啶500 mg/m^2,第1~5... 详细信息

目的观察泰癌注射液联合化疗对Ⅳ期胃癌的疗效及免疫功能的影响。方法 68例Ⅳ期胃癌患者随机分成观察组和对照组。所有病例均接受FOLFOX化疗方案:奥沙利铂100 mg/m^2静脉滴注2 h,第1天;亚叶酸钙400 mg/m^2,5-氟尿嘧啶500 mg/m^2,第1~5天。观察组在此基础上加用泰癌注射液2 m L肌注,2次/d,第1~5天。每3周为1个疗程,3个疗程后评价疗效。结果观察组治疗有效率较对照组高,化疗不良反应较对照组低,免疫功能较对照组明显提高(P<0.05)。结论化疗联合泰癌注射液具有增效减毒作用,能明显提高晚期胃癌化疗患者的免疫功能。

关键词：泰癌注射液化疗胃癌免疫功能

小瞳孔白内障手术中虹膜拉钩与放射状瞳孔缘虹膜切开扩瞳的并发症及视力预后对比

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眼科 2017年第2期26卷 85-89页

作者：王水纯吴富钞金婷广州市中西医结合医院眼科 510800

目的观察并对比小瞳孔白内障手术中虹膜拉钩与放射状瞳孔缘虹膜切开扩瞳的并发症及视力预后。设计回顾性比较性病例系列。研究对象2012年4月至2015年6月在广州市中西医结合医院接受超声乳化白内障吸出联合人工晶状体植入术的83例(90眼)... 详细信息

目的观察并对比小瞳孔白内障手术中虹膜拉钩与放射状瞳孔缘虹膜切开扩瞳的并发症及视力预后。设计回顾性比较性病例系列。研究对象2012年4月至2015年6月在广州市中西医结合医院接受超声乳化白内障吸出联合人工晶状体植入术的83例(90眼)小瞳孔白内障患者。方法 50眼行虹膜拉钩扩瞳(研究组),40眼行放射状瞳孔缘虹膜切开扩瞳(对照组),记录两组的围手术期指标、术后并发症及视力恢复情况。主要指标超声乳化时间、手术时间、术中术后并发症及术后视力。结果对照组平均超声乳化时间显著高于研究组(104.8±17.9 s和57.8±11.9 s)(t=12.835,P<0.001);对照组平均手术总时间明显低于研究组(20.1±3.8 min和29.2±5.8 min)(t=-6.468,P<0.001);对照组术中虹膜损伤及出血显著高于研究组(P<0.001);对照组术后1天矫正视力≥0.3者(40%),低于研究组(72%)(χ~2=9.328,P=0.002),对照组术后3个月矫正视力≥0.3者(80%),低于研究组(90%)(χ~2=1.798,P=0.180);研究组术后1天瞳孔变形率显著低于对照组(68%和95%)(χ~2=10.125,P=0.001);研究组术后1周瞳孔变形率显著低于对照组(20%和90%)(χ~2=46.557,P<0.001)。研究组和对照组的角膜水肿率分别为86%和90%(χ~2=0.331,P=0.565),但两组的角膜水肿程度比较,差异有统计学意义(Z=11.318,P=0.003);研究组前房反应率68%,显著低于对照组的95%(χ~2=10.125,P=0.001)。结论小瞳孔白内障手术中虹膜拉钩扩瞳,具有安全系数高、不易出血和引起炎症的优点,对术后瞳孔恢复形态和功能有积极意义。

关键词：白内障/外科学小瞳孔虹膜拉钩虹膜切开

进展期胃癌淋巴结转移规律与清扫范围对临床结局的影响

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广东医学 2016年第24期37卷 3693-3695页

作者：陈元岩陈显国李天翔郭雄图广东省广州市中西医结合医院胃肠外科 510800

目的探讨分析进展期胃癌淋巴结转移规律,并分析不同清扫范围对临床结局的影响。方法回顾性分析223例接受胃癌根治术治疗的进展期胃癌患者为研究对象,分析比较性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分型及其他临床资料对淋巴结转移的影响;分... 详细信息

目的探讨分析进展期胃癌淋巴结转移规律,并分析不同清扫范围对临床结局的影响。方法回顾性分析223例接受胃癌根治术治疗的进展期胃癌患者为研究对象,分析比较性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分型及其他临床资料对淋巴结转移的影响;分析不同清扫范围对临床预后的影响。结果淋巴结转移率与患者性别、年龄、肿瘤部位无关(P>0.05);肿瘤直径越大、Borrmann分型、TNM分期越高及分化程度越低,淋巴结转移率越高(P<0.05);D2淋巴结清扫术在淋巴结转移率及3年、5年存活率方面均优于D1、D3清扫术(P<0.05)。结论进展期胃癌淋巴结转移率与肿瘤的大小、Borrmann分型、TNM分期、分化程度密切相关。由于D2根治术较D1、D3根治术在预后有明显优势,且D3根治术损伤较大,术后并发症较多,因此,胃癌D2根治术清扫范围较为合理,D3根治术仍需进一步研究。

关键词：进展期胃癌淋巴结转移淋巴结清扫胃癌根治术

基于生物信息学探讨泄浊解毒方调控细胞自噬治疗溃疡性结肠炎的机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 166-173页

作者：康欣孙超迪刘建平任杰杜明民赵源郎晓猛河北省中医院河北省中西医结合胃肠病研究重点实验室河北省浊毒证重点实验室邯郸市中医院

目的：利用生物信息学与动物实验方法探讨泄浊解毒方调节细胞自噬治疗溃疡性结肠炎（UC）潜在机制。方法：从基因表达综合数据库（GEO）中获取UC患者结肠黏膜组织差异表达基因，与细胞自噬基因取交集，获取细胞自噬差异基因（DEARG），... 详细信息

目的：利用生物信息学与动物实验方法探讨泄浊解毒方调节细胞自噬治疗溃疡性结肠炎（UC）潜在机制。方法：从基因表达综合数据库（GEO）中获取UC患者结肠黏膜组织差异表达基因，与细胞自噬基因取交集，获取细胞自噬差异基因（DEARG），将DEARG分别导入Metascape和STRING数据库，进行基因本体/京都基因与基因组百科全书（GO/KEGG）富集分析、蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）分析，最终得到15个关键DEARG，通过最小绝对收缩和选取算子（LASSO）回归和接收者操作特征曲线（ROC）曲线分析获取核心DEARG；运用CIBERSORT去卷积法对UC患者样本做免疫浸润分析，以及核心DEARG与免疫细胞的相关性分析。将C57BL/6J小鼠分为正常组和模型制备组，采用2.5%的葡聚糖硫酸钠自由饮方式，建立UC小鼠模型，按照随机数字表法分为泄浊解毒低、中、高剂量组及美沙拉嗪组，灌胃7 d，苏木素-伊红染色观察结肠黏膜形态，蛋白免疫印迹法检测结肠组织中胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、组织蛋白酶B(CTSB)、C-C基序趋化因子2(CCL2)、趋化因子（CXC基序）受体4(CXCR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达量，实时荧光定量聚合酶链式反应法检测结肠组织中Caspase-1、CCL2、CTSB、CXCR4、HIF-1α mRNA表达。结果：从GEO数据库筛选出数据集GSE87466，与细胞自噬基因取交集，运用PPI分析、LASSO回归和ROC曲线分析后得到核心DEARG(Caspase-1、CCL2、CTSB、CXCR4)，免疫浸润分析结果显示NK细胞、M0型巨噬细胞、M1型巨噬细胞、树突细胞在UC患者结肠黏膜组织中表达具有显著差异，核心DEARG与此类免疫细胞同样存在显著相关性。与泄浊解毒方网络药理学结果取交集后发现HIF-1α信号通路可能是泄浊解毒方调控UC的关键信号通路。动物实验观察到泄浊解毒方可明显缓解UC小鼠结肠黏膜炎症性反应，与正常组比较，模型组Caspase-1、CCL2、CTSB、CXCR4、HIF-1α蛋白和mRNA的表达量显著升高，经泄浊解毒方及美沙拉嗪治疗后，各组小鼠结肠黏膜中Caspase-1、CCL2、CTSB、CXCR4、HIF-1α蛋白和mRNA的表达量均显著下调。结论：Caspase-1、CCL2、CTSB、CXCR4是与UC发病密切相关的细胞自噬基因，泄浊解毒方可下调细胞自噬核心基因缓解小鼠结肠黏膜炎症反应。

关键词：溃疡性结肠炎泄浊解毒方生物信息学细胞自噬

大鼠糖尿病足溃疡模型皮肤组织中miRNA对PI3K/AKT通路的调控作用

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中国老年学杂志 2024年第17期 4247-4252页

作者：冯波王聪卢增辉李武龙郭艳江西省中西医结合医院血管外科江西省中西医结合医院胃肠外科江西省中西医结合医院超声科

目的研究大鼠糖尿病足溃疡(DFU)模型皮肤组织中miRNA对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)的调控作用。方法通过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方式建立糖尿病大鼠模型，在第15天后再次测量大鼠血糖，以空腹血糖>15 mmol/L为大鼠造... 详细信息

目的研究大鼠糖尿病足溃疡(DFU)模型皮肤组织中miRNA对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)的调控作用。方法通过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方式建立糖尿病大鼠模型，在第15天后再次测量大鼠血糖，以空腹血糖>15 mmol/L为大鼠造模成功的标准。糖尿病大鼠模型构建成功后，在大鼠双侧后肢足背部消毒后切除5 mm×5 mm的全层皮肤，制备DFU模型；对照组则不进行创面造模，正常饲养。4 d后取溃疡组织和对照组相同部位的组织进行miRNA高通量测序并针对PI3K/AKT通路进行数据分析；苏木素-伊红(HE)染色观察溃疡组织和对照组织的状态；TUNEL法检测细胞凋亡；Western印迹检测胰岛素样生长因子(IGF)-1、PI3K、磷酸化(p)-AKT、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)等蛋白表达。结果 HE染色显示，模型组造模处组织相对于对照组足背皮肤组织表现出溃疡状态。TUNEL染色结果显示，对照组组织中细胞凋亡很少，模型组组织中则有显著的细胞凋亡现象。Western检测结果显示，对照组组织中IGF-1、PI3K、p-AKT、p-mTOR等蛋白表达都显著低于模型组组织(P<0.05)。miRNA高通量测序检测得到在对照组和模型组之间显著差异表达的miRNA共224个。在差异表达miRNA中筛选rno-miR-339-5p, rno-miR-34a-5p, rno-miR-503-5p, rno-miR-146b-5p, rno-miR-322-5p, rno-miR-149-5p, rno-novel-53-mature, rno-miR-125a-5p, rno-miR-339-3p, rno-miR-3473,rno-novel-30-mature, rno-miR-326-3p, rno-miR-134-5p等与PI3K-AKT信号通路相关的miRNA,并根据这些miRNA的靶基因将这些miRNA标示在京都基因和基因组百科全书(KEGG)中的PI3K/AKT通路上。结论糖尿病大鼠足背溃疡皮肤组织中，PI3K/AKT通路表达上调，对PI3K/AKT起调控作用的miRNA表达也显著变化，从免疫反应、细胞外基质(ECM)-整合素(Integrin)、生长因子和间质上皮转化等多个角度起到促进创口愈合的效果。

关键词：磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路糖尿病足溃疡细胞外基质(ECM) 京都基因和基因组百科全书(KEGG) miRNA

人类表皮生长因子受体2蛋白在胰腺癌中的表达及意义

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广东医学 2013年第1期34卷 99-100页

作者：陈元岩李天翔张继红石汉平广东省广州市中西医结合医院胃肠外科 510800 中山大学附属第一医院胃肠外科广州510080

目的研究人类表皮生长因子受体2(HER-2/neu)蛋白在胰腺癌组织中的表达情况,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测20例正常胰腺组织、20例癌旁胰腺组织和60例胰腺癌组织中的HER-2/neu蛋白的表达。结果胰腺癌组... 详细信息

目的研究人类表皮生长因子受体2(HER-2/neu)蛋白在胰腺癌组织中的表达情况,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测20例正常胰腺组织、20例癌旁胰腺组织和60例胰腺癌组织中的HER-2/neu蛋白的表达。结果胰腺癌组织的HER-2/neu蛋白阳性表达率为31.7%,而在正常胰腺组织无表达,HER-2/neu蛋白表达在胰腺癌组织中的表达显著高于癌旁胰腺组织及正常胰腺组织(P0.05)。结论 HER-2/neu蛋白的表达在胰腺癌的发生、发展中起重要作用,使用HER-2/neu靶向抗体Herceptin(郝赛汀)作为胰腺癌的靶向治疗药物,有望为胰腺癌的生物治疗开辟一条新的途径。

关键词：胰腺癌 HER-2 neu 免疫组化