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作者：李洁亮广州医科大学

学位级别：硕士

人胚胎干细胞（Human embryonic stem cell,hESC）来源于早期人类胚胎的内细胞团，它可以分化为内、中、外三个胚层的各种细胞及组织。胚胎干细胞的这些特点使得其在再生医学领域有巨大的应用潜能，但是在此之前，它仍然面临巨大的挑战... 详细信息

人胚胎干细胞（Human embryonic stem cell,hESC）来源于早期人类胚胎的内细胞团，它可以分化为内、中、外三个胚层的各种细胞及组织。胚胎干细胞的这些特点使得其在再生医学领域有巨大的应用潜能，但是在此之前，它仍然面临巨大的挑战，即安全性问题，主要包括遗传学及表观遗传学两方面的内容。有研究证实，人胚胎干细胞（hESC）具有极度倾斜性X染色体失活（X chromosomeinactivation,XCI）现象，而某些基因组失衡且表观异常疾病（如X染色体连锁智力发育迟缓类疾病）也表现极度倾斜的XCI。本课题组前期课题也发现，倾斜性XCI的hESC存在DNMT、Nanog等基因区域微小基因组失衡。于是我们推测，除了DNA甲基化及组蛋白修饰外，基因组水平的微小失衡与hESC倾斜性XCI可能也有相关性。本研究利用微阵列单核苷酸多态性技术对9株hESCs基因组稳定性检测，发现了一些胚胎干细胞基因组存在拷贝数变异（copy numbervariation,CNV）及杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH）。结合对9株hESCs中X染色体失活状态分析发现，hESC中X染色体倾斜性失活可能与基因组CNV/LOH区域涉及的某些基因功能改变有一定的相关性，并通过生物信息学分析预测可能的调控通路。研究目的本课题以hESC为研究对象，结合微阵列单核苷酸多态性技术等方法，对hESC基因组稳定性进行检测，并在全基因组内寻找与X染色体倾斜性失活高度关联的拷贝数变异（CNV）、杂合性缺失（LOH），筛选出候选基因，明确基因组失衡影响X染色体倾斜性失活的可能机制，丰富干细胞遗传安全性及表观遗传调控机制的理论。研究方法1．利用本实验室前期建立的10株hESCs系，复苏并体外培养传代。进行hESC表面抗原SSEA-3，SSEA-4，TRA-1-60，TRA-1-81等染色鉴定。2．10株hES培养至10代左右，收集细胞，提取基因组DNA。3．对各细胞DNA进行人雄激素受体基因（HUMARA）多态性片段分析，判断其杂合性，选择HUMARA基因杂合子进行X染色体失活分析。4．使用EpiTect Bisulfite Kit试剂盒(QIAGEN)，将基因组DNA进行用重亚硫酸盐处理,随后行引物特异性PCR反应，并对产物进行多态性片段分析。5．利用微阵列单核苷酸多态性技术，分别检测随机失活组及倾斜性失活组hESCs细胞提取的基因组DNA，寻找与X染色体倾斜性失活可能相关的CNV/LOH。6．利用UCSC、NCBI及DECIPHER等数据库，分析相关CNV/LOH关键区域可能与X染色体倾斜性失活相关的基因，进一步探索可能的基因调控通路。7．分别选取2株X染色体倾斜性失活及随机失活的hESCs，细胞提取RNA，利用荧光定量PCR对倾斜组胚胎干细胞基因组LOH区域涉及的4个lncRNA即XIST,TSIX, JPX, FTX表达情况进行检测分析。实验结果1.10株hESC系均具有典型的hESC克隆形态，表达hESC细胞表面抗原SSEA-4,SSEA-3,TRA-1-60,TRA-1-81。2.核型分析，9株为正常核型的女性hESCs,1株为正常核型的男性hESC。3.9株女性hESC细胞HUMARA位点均为杂合子。4.对9株HUMARA位点杂合子的hESC进行XCI倾斜性失活分析，4株为倾斜性失活，5株为随机失活。5.通过对9株hESCs全基因组行基因芯片检测，发现hESC基因组存在CNV及LOH。通过软件分析发现，本研究的9株hESC在1,4,9,10,12,13,15,17,18,20,21,22这12个染色体上未发现大于400kb的CNV存在。6. X染色体倾斜性失活组hESC与随机失活组CNV数量及大小合计无统计学差异。7. X染色体倾斜性失活组hESC基因组的CNV涉及的基因有：KDM6A，FUNDC1, DUSP21, GAMT。8. X染色体倾斜性失活组hESC基因组的LOH涉及的基因有:HDAC8,XIST,TSIX, JPX, FTX。9. X染色体倾斜性失活的2株hESCs XIST表达比随机失活组高，JPX表达比随机失活组更少，其他2个lncRNA即TSIX,FTX表达在两组之间未见明显差异。10. hESC基因组的LOH区域涉及很多miRNA。研究结论1.微阵列单核苷酸多态性技术是研究hESC全基因组稳定性的一个高敏感技术,hESC基因组并不稳定，存在CNVs和LOH。2.利用HUMARA的甲基化特异性PCR是研究hESC X染色体失

关键词：人胚胎干细胞 X染色体失活拷贝数变异杂合性缺失微阵列单核苷酸多态性技术

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雌激素替代治疗对卵巢切除大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响

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重庆医科大学学报 2014年第4期39卷 425-432页

作者：吕福林肖倩罗艳敏何琦晁凤蕾陈林仇玄张蕾张琪娟肖晓秋唐勇重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室、干细胞与组织工程学研究室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院临床营养科重庆400016 重庆医科大学附属第一医院脂糖代谢实验室重庆400016

目的：探讨雌激素替代治疗（estrogen replacement treatment，ERT）对卵巢切除（ovariectomy，ovx）大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法：对10～11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术，术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机... 详细信息

目的：探讨雌激素替代治疗（estrogen replacement treatment，ERT）对卵巢切除（ovariectomy，ovx）大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法：对10～11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术，术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机分为安慰剂对照组（OVX＋O组）和雌激素替代治疗组（OVX＋E组），前者给予连续4周安慰剂（芝麻油）处理，后者给予连续4周17β-雌二醇替代治疗，4周后采用Morris水迷宫对2组大鼠的空间学习能力进行测试，用化学发光法测定2组大鼠体内循环雌激素浓度．用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘进行定量研究。结果：OVX＋E组大鼠体内循环雌激素浓度明显高于OVX＋O组（t=5．688，P=-0．000）；OVX＋E组大鼠空间学习能力明显提高（F=9．645，P=-0．006）。2组大鼠CA1区体积（t=1．451，P=0．181）、有髓神经纤维体积（t=-1．158，P=0．294）、有髓神经纤维髓鞘体积（u=-0．642，P=0．521）、有髓神经纤维平均直径（t=0．630，P=0．545）和有髓神经纤维髓鞘厚度（u=-1．746，P=-0．081）均不存在统计学差异，但是OVX＋E组直径在0．6．0．7μm的有髓神经纤维髓鞘厚度比OVX＋O组大鼠增加14．1％（t=2．428，P=0．038），OVX＋E组直径在0．8-0．9μm的有髓神经纤维直径与轴突直径差比OVX＋O组大鼠增加18．2％（t=2．432，P=-0．038）。结论：短期雌激素替代治疗可以改善大鼠空间学习能力并对海马CA1区有髓神经纤维髓鞘具有保护作用。

关键词：有髓神经纤维髓鞘海马卵巢切除雌激素替代治疗体视学

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儿童沙门氏菌感染的临床及耐药情况分析

儿童沙门氏菌感染的临床及耐药情况分析

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作者：付宽慈广州医科大学

学位级别：硕士

目的:了解儿童沙门氏菌感染的临床特点及对抗菌药物的耐药情况。方法:对2011年1月至2019年12月在广州医科大学附属市八医院普通儿内科住院治疗的71例沙门氏菌感染患儿的临床资料及药敏实验结果进行回顾性分析。收集患儿一般人口学及流... 详细信息

目的:了解儿童沙门氏菌感染的临床特点及对抗菌药物的耐药情况。方法:对2011年1月至2019年12月在广州医科大学附属市八医院普通儿内科住院治疗的71例沙门氏菌感染患儿的临床资料及药敏实验结果进行回顾性分析。收集患儿一般人口学及流行病学资料,患儿住院及出院随访时的临床情况和药敏实验结果。统计分析患儿的临床特点及耐药情况,采用卡方检验对不同菌型的耐药情况以及沙门氏菌在不同年份对不同种类抗菌药物的耐药情况进行比较分析。结果:在71例沙门氏菌感染患儿中,男性32例,女性39例,男:女=4:5,发病年龄的中位数为11个月。感染的季节主要集中在夏秋季(5-10月)。感染菌型的检测年份主要集中在2016-2019年间,共涵盖了7种血清型,鼠伤寒沙门氏菌是最常见的血清型,其次为肠炎沙门氏菌,其中97.2%的血清型属于非伤寒沙门氏菌(NTS),只有2.8%的血清型属于伤寒沙门氏菌。感染后最常见的症状为腹泻(100%),其次为发热(90.1%);最常见的合并症为呼吸道感染(36.6%)。71名患儿住院天数的中位数为10天,治愈率为67.6%,好转带菌率为16.9%。沙门氏菌对氨苄西林的耐药率最高(83.1%),其次为头孢呋辛(67.6%),耐药率较低的抗生素为亚胺培南(0%),其次为左氧氟沙星(9.9%)。对三代头孢的耐药率均0.05)。71株沙门氏菌中有多重耐药菌(MDR)42例(59.1%),其中耐6种及6种以上的菌株有3例(4.2%)。各年份间多重耐药菌比率无差异(χ=5.669,P>0.05)。结论:婴幼儿是沙门氏菌的易感人群,尤其是1岁以内的婴儿。夏秋季是感染的高发季,最常见的感染血清型为鼠伤寒沙门氏菌,其次为肠炎沙门氏菌。发热和腹泻是最常见的临床症状,呼吸道感染是最常见的合并症。抗生素的不合理使用,使沙门氏菌耐药率增高,多重耐药菌增多,耐药谱变广。其中氨苄西林的耐药率最高,头孢呋辛与阿米卡星近10年的耐药率呈逐渐上升的趋势,对三、四代头孢相对敏感,对亚胺培南基本不耐药。因此三、四代头孢菌素是治疗沙门氏菌感染的推荐用药,亚胺培南可用来治疗多重耐药菌。

关键词：儿童沙门氏菌临床特征耐药性

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Ursane-type乌索烷型天然产物通过阻断线粒体膜间隙转运通路诱导替莫唑胺耐受性胶质瘤细胞凋亡的构效关系和机制研究

Ursane-type乌索烷型天然产物通过阻断线粒体膜间隙转运通路诱导...

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作者：康剑广州医科大学

学位级别：硕士

由于肿瘤细胞对现有化疗药物的抗药性,严重制约了化疗效果。因此,寻找对胶质瘤有效治疗作用的化合物成为了胶质瘤治疗的一个重要的方向。乌索烷型五环三萜类衍生物已被证明对各种肿瘤具有良好的抗癌活性。然而,此类衍生物对多形性胶质... 详细信息

由于肿瘤细胞对现有化疗药物的抗药性,严重制约了化疗效果。因此,寻找对胶质瘤有效治疗作用的化合物成为了胶质瘤治疗的一个重要的方向。乌索烷型五环三萜类衍生物已被证明对各种肿瘤具有良好的抗癌活性。然而,此类衍生物对多形性胶质母细胞瘤(GBM)的抗癌作用,以及潜在的作用机制尚不完全清楚。在本研究中,我们从Rosa cymosa Tratt根中分离出14种ursane型三萜类衍生物,并检测了其在已建立的四种替莫唑胺耐药的GBM细胞系中的抗肿瘤活性。基于细胞活力分析,我们评估了这14种化合物的结构-活性构效关系关系(SAR),发现12号化合物(C-12)表现出最强的抗胶质瘤活性,并证实了C-12的促凋亡作应,随后的机制实验证明C-12促发了Drp1依赖的线粒体溶解和凋亡通路的活化,其深入的作用机制可能与Mia40的减弱,以及线粒体膜间隙转运通路的阻断相关。材料与方法14个乌索烷型化合物取自深圳市神经外科学重点实验活性天然产物化合物库,由北京协和医学院药用植物研究所分离提取,纯度>98%。四种胶质瘤细胞系耐药株由本实验室构建,细胞经由96板培养,不同浓度的化合物共孵育处理,采用CCK-8法检测细胞活力,Annexin V/PI染色的流式细胞检测、TUNEL染色和Caspase-3凋亡检测法检测细胞凋亡状态。采用蛋白质印记实验、免疫共沉淀实验、细胞转染实验和计算机分子模拟实验,检测和发现了线粒体氧化还原酶Mia40相关细胞信号通路的基因表达情况及相应分子之间作用。实验数据均采用SPSS19统计软件进行数据分析处理,所有定量实验至少重复检测3次,图中数据为平均值±标准差(mean±SEM)。当方差系数与假设相同时,将多组实验汇集起来,采用单因素方差分析和t检验来评估多组之间的显著性差异,随后进行Bonferroni校正检验。P实验,证明了C-12通过特异性阻断Mia40蛋白,干扰线粒体膜间隙的蛋白转运,引发Drp1依赖性线粒体溶解,以及诱导细胞凋亡的作用机制。尽管对体外和体内分子机制的深入理解还有待进一步探索,但是pomonic酸衍生物可能被认为是恶性胶质瘤化疗的主要化合物,同时也鼓励结构修饰研究获得额外的有价值的类似物。

关键词： Mia40 乌索烷型化合物线粒体膜间隙转运凋亡

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胎儿骨骼发育异常疾病的基因型与表现型

胎儿骨骼发育异常疾病的基因型与表现型

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作者：黄炜然广州医科大学

学位级别：硕士

【目的】通过对比骨骼发育异常的胎儿超声表现及基因诊断结果,探讨中国人群中骨骼发育异常胎儿的基因型与表现型,初步建立产前诊断方法。【方法】1.收集2015年1月-2017年10月来自广州医科大学附属第三医院产前诊断与胎儿医学中心就诊的... 详细信息

【目的】通过对比骨骼发育异常的胎儿超声表现及基因诊断结果,探讨中国人群中骨骼发育异常胎儿的基因型与表现型,初步建立产前诊断方法。【方法】1.收集2015年1月-2017年10月来自广州医科大学附属第三医院产前诊断与胎儿医学中心就诊的超声提示胎儿骨骼发育异常可能的妊娠孕妇病例共32例,且均经早期血清学唐氏筛查、无创DNA检测或染色体核型分析排除胎儿染色体异常可能;2.详细记录孕妇的临床资料,包括姓名、年龄、电话、孕产史、末次月经、夫妻双方身高、超声诊断日期及孕周、超声诊断、基因学诊断、妊娠方式、既往病史、不良生育史、羊膜腔穿刺术指征;3.收集此32例胎儿超声检查资料:包括孕11-13-(+6)周胎儿颈后透明层厚度超声检查的结果、孕20-24周排畸超声筛查的结果、各孕周胎儿生长监测结果,主要数据包括:头臀长(crown-rump length,CRL)、颈后透明层厚度(nuchal translucency,NT)、头围(head circumference,HC)、双顶径(biparietal diameter,BPD)、腹围(abdominal circumference,AC)、股骨长(FL)、股骨长/腹围(FL/AC)、心胸比值以及有无胎儿多发结构畸形、颅骨骨化程度、羊水指数(amniotic fluid index,AFI)。4.此32例病例均行羊膜腔穿刺术,抽取羊水行遗传性骨病基因检测或医学外显子测序作为诊断参考。6.收集孕妇及其丈夫外周血进行Sanger验证共27例,夫妻双方同时行医学外显子测序的共5例。【结果】1.孕妇平均孕次为(1.56±0.61)次,均否认既往不良妊娠史,均否认既往不良妊娠史,此次妊娠均为单胎妊娠。孕妇平均年龄(28.94±3.56)岁,孕妇平均身高为(160.63±2.77)cm。配偶平均的年龄为(30.56±3.22)岁,配偶平均身高为(171.66±2.90)cm。超声诊断骨骼异常时孕周为12-(+5)-32-(+5)周,平均孕周为(23.88±3.27)周。2.超声提示胎儿骨骼发育异常的32例病例中,长骨短小共32例(100%),长骨成角弯曲共20例(62.5%),头围增大共2例(6%),宫内骨折1例(3.1%),骨骼缺如2例(6%),心/胸比例增大15例(46.8%),股骨长/腹围比例减少10例(31.2%),颅骨骨化程度降低6例(18%),羊水过多6例(18%)。3.本研究超声与基因均诊断为致死性骨骼发育异常病例共6例,其中3例为成骨发育不全II型,2例为软骨发育不全,1例为致死性发育不良I型,3例与超声表现型相符,超声诊断对致死性骨骼发育异常病例敏感度为100%。4.基因诊断32例病例中,27例(84%)行遗传性骨病基因检测,5例(16%)行医学外显子组测序检测。32例(100%)病例均行父母双方验证,其中Sanger验证有27例,医学外显子测序验证有5例。基因检测提示胎儿基因异常病例共29例(90.6%),未提示基因异常共3例(9.3%)且均为行遗传性骨病基因检测病例。基因检测诊断成骨不全6例(18.7%),软骨生成不全2例(6.25%),软骨发育不良7例(21.8%),致死性发育不良1例(3.1%),Marinesco-Siogren综合征1例(3.1%),Robinow综合征1例(3.1%),纤维软骨增生I型1例(3.1%),Bruck综合征1例(3.1%),有9例(28.1%)病例诊断为骨骼发育异常,未能明确分型。5.两种不同的基因检测方法对比,骨骼发育异常基因panel检测阳性率为88.9%(24/27),医学外显子测序检测阳性率为100%(5/5)。【结论】1.胎儿骨骼异常可仅表现为长骨偏短,对产前超声仅提示长骨偏短的胎儿行基因检测是必要的。2.产前超声可鉴别部分致死性骨骼发育异常,但对具体骨骼异常分型仍存在困难3.产前超声检查提示股骨长度低于相应孕周均值8SDs,心/胸比例>0.6和(或)股骨长/腹围医学外显子检测以排除其他系统遗传性疾病;4.医学外显子可提高骨骼发育异常在产前的检出率,对其父母双方外周血行医学外显子检测不仅能进行验证,并能发现新的致病位点,指导下次妊娠。

关键词：胎儿骨骼发育异常产前检查超声基因检测医学外显子

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子痫前期患者血清vaspin水平与血压的相关性研究

子痫前期患者血清vaspin水平与血压的相关性研究

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作者：唐小林广州医科大学

学位级别：硕士

目的子痫前期是妊娠期特有疾病,以高血压和蛋白尿为表现特征,可导致多脏器功能损害,仍然是孕产妇和围产儿死亡率和发病率的主要原因。子痫前期的发病机理纷繁复杂,目前研究认为其发病与血管内皮受损,胰岛素抵抗,胎盘缺血缺氧,子宫螺旋... 详细信息

目的子痫前期是妊娠期特有疾病,以高血压和蛋白尿为表现特征,可导致多脏器功能损害,仍然是孕产妇和围产儿死亡率和发病率的主要原因。子痫前期的发病机理纷繁复杂,目前研究认为其发病与血管内皮受损,胰岛素抵抗,胎盘缺血缺氧,子宫螺旋动脉重铸障碍,母性遗传和环境因素相互作用等有关。内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin是新近发现的脂肪因子。既往研究表明vaspin有改善血管内皮损伤、改善高血压、改善胰岛素抵抗、抗动脉粥样硬化等作用。子痫前期与心血管疾病、代谢性疾病有着共同的危险因素,但子痫前期与血清vaspin的研究较少。本研究通过子痫前期患者血清vaspin的水平变化,探讨子痫前期患者血清vaspin水平与血压的相关性。希望为防治子痫前期提供新的理论依据。方法1.研究对象:(1)子痫前期组:随机选择2015年5月到2017年7月在广州医科大学附属第三医院产检并住院分娩的子痫前期患者62例。(2)正常组:随机选取同期住院分娩的孕周匹配的健康孕妇60例。两组孕妇均排除妊娠期高血压,慢性高血压,糖尿病,心脏疾病,肝肾疾病,多囊卵巢综合症患者,免疫性疾病,感染性疾病,多胎妊娠等。2.实验方法:两组孕妇均在清晨空腹采集肘静脉血5ml并离心,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清vaspin水平。3.统计学方法:采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析,计量资料以x±S表示,应用Kolmogorov-Smirnov检验各组间变量是否符合正态分布,Levene方差齐性检验用于检验各组方差是否齐同。非正态分布资料经自然对数转换后再进行分析。正态分布资料组间比较用t检验,非正态分布资料组间比较Mann-Whitney U检验。行相关性分析应用Pearson或Spearman相关分析,P一定水平的vaspin;2.血清vaspin水平与收缩压呈显著负相关;3.血清vaspin水平与孕周、CHOL呈显著正相关;***水平的下降可能是子痫前期血压升高的评价指标,vaspin可能参与子痫前期的发生发展过程。

关键词：子痫前期脂肪因子 vaspin

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绿原酸联合左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌生物膜的体外抑制现象观察

绿原酸联合左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌生物膜的体外抑制现象观察

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作者：李秋明广州医科大学

学位级别：硕士

背景与目的:肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,简称KPN)是导致医院内感染的常见病原菌,可引起呼吸道、消化道和泌尿系统感染。根据2013年中国CHINET细菌耐药性监测报道,在肠杆菌科细菌中克雷伯菌属耐药性较上年有所增多,且在对碳青... 详细信息

背景与目的:肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,简称KPN)是导致医院内感染的常见病原菌,可引起呼吸道、消化道和泌尿系统感染。根据2013年中国CHINET细菌耐药性监测报道,在肠杆菌科细菌中克雷伯菌属耐药性较上年有所增多,且在对碳青霉烯类耐药株中,以肺炎克雷伯菌为最多,其对亚胺培南和美洛培南的耐药率均>10.0%。KPN容易产生生物膜(biofilm,BF),将细菌层层包裹,增加该菌对抗菌药物的耐受性。随着对生物被膜研究的深入,发现KPN对抗生素的耐药性与生物膜形成密切有关。生物膜的主要组成物质是多糖蛋白复合物,国内外研究表明,喹诺酮类药物与大环内酯类药物联合使用可以有效抑制细菌合成多糖蛋白复合物,从而抑制生物膜的形成。绿原酸(Chlorogenic acid,简称CA)是中药有效成分,由金银花等中草药提取。有资料显示绿原酸可以抑制铜绿假单胞菌的生物膜形成,但绿原酸对同样容易产生生物膜的KPN抑制作用如何则鲜有报道。本研究拟先对某医院肺炎克雷伯菌临床分布及耐药情况进行分析,同时检测形成BF肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型,再通过体外实验,探讨绿原酸对KPN生物膜的影响及与左氧氟沙星(LEV)联合对KPN的作用。为临床制定合理科学的抗菌治疗策略提供依据。方法:收集广州某三甲医院临床分离肺炎克雷伯菌62株,进行鉴定及药敏分析,采用半定量结晶紫染色法进行生物膜阳性菌株筛选,同时采用PCR法对这类菌株进行ESBLs基因型检测、并构建生物膜模型及进行药物干扰研究。结果:共分离鉴定出62株肺炎克雷伯菌株,其中33株菌生物膜检测阳性,占53.2%(33/62)。产BF菌株中检出超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株24株,这24株ESBLs阳性菌株中SHV基因型的占54.17%(13/24),TEM基因型占41.67%(10/24),有4株同时存在SHV和TEM基因,未检测出CTX-M基因。经体外建模及药物干扰,单独药物组显微镜下黑色絮状物(代表致密生物膜)所占比例小于25%,而绿原酸和左氧氟沙星联合药物组显微镜下黑色絮状物所占比例小于15%,未处理组黑色絮状物所占比例为60%左右。结论:1.产生生物膜肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以TEM基因型和SHV基因型为主。2.绿原酸具有抑制肺炎克雷伯菌生物膜作用,与左氧氟沙星联合,作用效果更显著。

关键词：肺炎克雷伯菌生物膜 ESBLs基因型绿原酸左氧氟沙星

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家庭医生签约服务在老年慢性病患者中的应用效果及满意度调查研究

家庭医生签约服务在老年慢性病患者中的应用效果及满意度调查研究

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作者：王存孝广州医科大学

学位级别：硕士

研究背景:老年慢性疾病是当今全球面临的公共卫生挑战,老年慢性病管理是人口老龄化下我国卫生服务的重要内容。尤其是糖尿病、高血压患者,是目前公共卫生服务重度服务对象,两种疾病合并的患者更是工作重点。家庭医生签约服务面向城乡居... 详细信息

研究背景:老年慢性疾病是当今全球面临的公共卫生挑战,老年慢性病管理是人口老龄化下我国卫生服务的重要内容。尤其是糖尿病、高血压患者,是目前公共卫生服务重度服务对象,两种疾病合并的患者更是工作重点。家庭医生签约服务面向城乡居民的公共卫生服务需要,开展全方位、综合的城乡居民健康服务。2018年,国务院政府办公室印发了第5次大督查认为的典型经验办法,其中包括广东省广州市积极推进家庭医生签约服务,以广州、深圳等地为示范积极探索和实践并提升家庭医生服务水平,提高人民健康水平。然而目前很多患者对家庭医生签约服务认识还不够深,不能很好的理解家庭医生签约服务相关内容,评价老年慢性病患者家庭医生签约服务的应用效果,实现临床医学与预防医学的有效结合,将提升老年慢性病患者的健康水平和社会福祉。研究目的:(1)针对在社区慢病管理的糖尿病/高血压患者,评估家庭医生签约服务对慢病患者应用效果及家庭医生签约服务的工作成效。(2)分析签约和未签约家庭医生签约服务老年慢病患者对社区卫生服务的满意度及相关影响因素。研究方法:在广州市天河区社区卫生服务信息系统中,首先筛选2019年11月-2020年10月在广州市天河区林和街道社区卫生服务中心全科慢性病门诊就诊的高血压且合并糖尿病的患者917例,其中符合条件年龄≥60岁有638例,另外279例小于60岁、216例未全程接受慢性病服务管理,10例有重性精神病病史、12例无法进行面对面随访者不符合入组标准,最后入组符合条件的老年慢性病患者,共计385例,根据患者是否签约分为两组,其中研究组是接受签约家庭医生服务的慢病患者(n=301);拒绝签约的患者纳入为对照组(n=84)。研究组为同意进行家庭医生签约服务的慢性病患者,具体服务措施为:与家庭医生签订家庭医生签约服务协议;收集患者的个人信息和慢性病信息建立居民健康档案和慢性病档案;根据患者的健康状况及疾病情况,评估患者的病情,制定个性化的治疗方案;在门诊的基础上,每季度开展一次详细的面对面随访,其中包括4次血压和4次血糖测量以及一次免费体检,以掌握病人的血压、血糖控制状态和用药情况;通过各种方式开展健康教育,定期组织学习慢性病相关知识,采用讲座(每月一次)宣教以及定期发放慢性病宣传手册等方式,以提升患者理解,加强对患者的健康教育;获得签约医生的联系方式,进入家庭医生签约微信群,提供健康咨询、健康宣教等服务;提供预约就诊、绿色通道优先转诊等服务。对照组为拒绝签约未接受家庭医生签约服务的慢性病患者,仅按常规社区卫生服务慢性病进行管理,进行一般常规的按需取药治疗,过程中提供4次面对面的慢性病随访(其中包括4次血压、血糖测量)和一次免费体检(1次糖化血红蛋白测量)。动态观察两组患者一年内的血压、血糖控制水平,并调查慢性病患者对社区卫生服务的满意度。计量资料使用独立样本t检验、计数资料使用卡方检验、非正态变量采用秩和检验比较样本组间差异。统计学显著性水平设为ɑ=0.05。研究结果:本次研究纳入385例慢性病患者,其中301例患者选择签约家庭医生,84例慢性病患者拒绝签约家庭医生,结果表明:(1)研究组与对照组患者性别、文化水平、婚姻状况、职业、经济来源等一般资料无明显差异,研究组随访期间三个月、六个月、九个月、一年后的收缩压、舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白等各项指标水平控制均优于对照组老年慢性病患者,差异有统计学意义(P一般满意,没有不满意的患者。对照组中58.3%对卫生服务表示满意,38.1%一般满意,3.6%表示不满意。从满意率中可以看出,研究组对家庭医生的满意情况明显比对照组高,统计学分析结果显示研究组与对照组家庭医生满意度情况比较有统计学意义(P<0.05)。经过二元Logistic回归分析可知研究组和对照组患者是否签约会对患者的满意度产生影响关系,性别、年龄、文化程度、婚姻状况、职业、经济来源等因素不会对患者满意度产生影响关系。结论:老年慢性病患者例如糖尿病、高血压疾病负担重,家庭医生签约服务相比于常规社区卫生服务在慢病管理有其优势,家庭医生签约服务的普及将有助于巩固慢性病治疗的临床疗效,同时提升医疗效率和构建和谐的医患关系。

关键词：家庭医生家庭医生签约服务老年慢性病满意度

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IER3蛋白质水平上调预测膀胱癌患者的不良预后

IER3蛋白质水平上调预测膀胱癌患者的不良预后

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作者：叶剑恒广州医科大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤,尽管现今对膀胱癌的研究已经取得很大进展,但由于其复杂的发病原因以及缺乏有效的治疗策略,膀胱癌患者的发病率和死亡率仍然很高。有流行病学研究发现,持续增高的膀胱癌患者死亡率与... 详细信息

研究背景及目的:膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤,尽管现今对膀胱癌的研究已经取得很大进展,但由于其复杂的发病原因以及缺乏有效的治疗策略,膀胱癌患者的发病率和死亡率仍然很高。有流行病学研究发现,持续增高的膀胱癌患者死亡率与多种环境暴露因素相关,包括吸烟、空气污染、饮用井水、城市居住环境及矿业环境等。此外,虽然大部分膀胱癌属于非肌肉侵袭性肿瘤,但仍有约25%的膀胱癌患者发生肌肉侵袭或肿瘤转移,从而导致不良的预后。因此,为了提高膀胱癌患者的诊断率和预测预后的准确率,探索新的、高效的生物分子标志物具有重大的临床意义。人早期应答基因3(immediate early response gene 3)缩写是IER3,别称包括IEX-1,Dif-2,gly96和p22/PRG-1。它是一个压力诱导基因,因此可以被转录因子、炎症因子、病毒、化学致癌物、生长因子和激素等多种因子迅速激活。在不同的刺激下,IER3被激活后参与调节细胞周期和细胞凋亡,并根据其不同的结构域而发挥着不同的作用。此外,越来越多的研究发现,IER3可以影响NF-kappa B/Ik B和MAPK/ERK1/2等多种细胞信号通路,发挥着促进或抑制肿瘤进展的功能。IER3已经被证实在人类上皮组织中广泛表达。大量研究表明IER3表达水平在不同肿瘤中发生异常改变,并且与患者临床预后密切相关。但是,IER3蛋白质在膀胱癌组织中的表达情况及其意义仍未被探究。因此,本文目的在于研究膀胱癌组织中IER3蛋白质水平表达情况,并分析其临床意义。材料和方法:1、实验样本来源于2002年至2010年期间美国哈佛麻省总医院泌尿外科和病理科收集的88例膀胱癌患者组织。2、用免疫组织化学分析方法验证IER3蛋白水平在膀胱癌组织中的表达位置和表达量水平。3、通过免疫反应评分系统作评分标准,评分依据包括IER3蛋白表达的强度以及阳性细胞占据肿瘤组织的百分比。4、数据统计分析用Stata 14(College Station,TX,USA)统计软件进行处理。Pearson’s Chi-squared test及Fisher’s exact test用于分析IER3蛋白表达水平与患者临床病理特征的关系,Kaplan-Meier方法及log-rank检验用于生存分析,Cox比例风险回归模型分析用于单因素和多因素分析IER3是否能作为预测膀胱癌预后的独立指标。死亡的相对风险表示为校正的风险比和相应的95%置信区间。P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1、从88例膀胱癌组织切片的免疫组织化学染色结果显示,IER3蛋白表达于膀胱癌的细胞质中。根据免疫染色评分标准,IER3蛋白水平在39例(44.3%)膀胱癌组织中表达升高,在49例(55.7%)膀胱癌组织中表达下调。2、Pearson’s Chi-squared test及Fisher’s exact test分析结果显示IER3蛋白水平上调与病理淋巴结高分期呈正相关(P=0.018)。3、Kaplan-Meier方法及log-rank检验结果显示IER3蛋白水平上调的膀胱癌患者的总体生存时间较IER3蛋白水平下调的患者的总体生存时间短,差异有统计学意义(P=0.0023)。4、基于Cox比例风险回归模型的单因素分析显示,老年(P=0.029)、病理分期(P=0.006)、淋巴结病理分期(P<0.001)、淋巴血管浸润(P=0.006)、手术切缘阳性(P=0.002)、远处转移(P=0.001)以及IER3蛋白水平上调(P=0.01)分别与总体生存时间呈负相关。多因素分析显示,IER3表达上调与IER3表达下调的风险比为2.17,P值为0.010,IER3可作为膀胱癌患者预后的独立预测因子。结论:1、IER3蛋白质在膀胱癌组织中表达上调与膀胱癌的病理淋巴结高分级呈正相关,检测IER3的表达可初步预测膀胱癌的恶性程度。2、IER3可作为膀胱癌患者预后的独立预测因子,通过检测其表达量可预测患者的预后状况。

关键词：人早期应答基因3 膀胱癌临床病理特征预后

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体外受精治疗非典型21-羟化酶缺乏症患者成功妊娠1例

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中华生殖与避孕杂志 2017年第10期37卷 837-842页

作者：杨洁阮静贤曾洁张莹许培牛晓华广州医科大学附属第三医院生殖医学中心 510150 广东普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150 广州医科大学附属第三医院内分泌科 510150 广州妇产科研究所 510150

目的 21-羟化酶缺乏症(21-OHD)、17α-羟化酶缺乏症(17-OHD)为先天性肾上腺皮质增生的2种类型,因酶缺乏程度不同,临床表现不一又分为多种亚型,其中非典型21-OHD与不完全型17-OHD皆症状轻微,临床不易发现,目前此类患者妊娠率较正常者低下... 详细信息

目的 21-羟化酶缺乏症(21-OHD)、17α-羟化酶缺乏症(17-OHD)为先天性肾上腺皮质增生的2种类型,因酶缺乏程度不同,临床表现不一又分为多种亚型,其中非典型21-OHD与不完全型17-OHD皆症状轻微,临床不易发现,目前此类患者妊娠率较正常者低下,如何鉴别疾病,改善临床预后并提高生育能力是临床诊治及随访的重点。方法对本院生殖中心1例罕见的非典型21-OHD合并人细胞色素P450c17A1(CYP17A1)、卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHCGR)基因多态性病例的诊断、治疗及促排卵的过程进行回顾性分析。结果该患者经基因型检测获得明确诊断,高孕酮血症及时得到治疗,并予以个体化促排卵方案,最终获得良好妊娠结局。结论生殖科临床医生应提高对先天性肾上腺皮质增生的认识,适当利用基因型分析协助诊断,在助孕过程中灵活制定个体化促排卵方案。

关键词：非典型21-羟化酶缺乏症(21-OHD) 基因多态性促排卵妊娠

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