目的 检测膀胱癌组织及膀胱癌细胞5637、BIU-87、TCCSUP、HT-1376中miR-383-5p表达情况,探讨miR-383-5p靶向CIP2A对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法 选取人膀胱癌组织及对应的癌旁组织,人膀胱癌细胞5637、BIU-87、TCCSUP、HT-1376和人膀胱移行上皮细胞,采用qRT-PCR法检测miR-383-5p的表达情况,选取miR-383-5p表达较低的细胞BIU-87进行后续试验。将BIU-87细胞分为空白组(正常培养)、miR-383-5p NC组(转染miR-383-5p阴性对照)、miR-383-5p mimic组(转染miR-383-5p模拟物)以及miR-383-5p mimic+pc-CIP2A组(共转染miR-383-5p模拟物和CIP2A过表达质粒pc-CIP2A),采用CCK-8试剂盒检测各组BIU-87细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax)、侵袭相关(MMP-2、MMP-9)、CIP2A/PP2A相关蛋白的表达情况,双荧光素酶实验验证miR-383-5p与CIP2A的靶向关系。结果 miR-383-5p在膀胱癌组织及膀胱癌细胞中呈低表达;与空白组相比,miR-383-5p mimic组BIU-87细胞的miR-383-5p水平显著升高(0.91±0.10 vs. 1.67±0.24,P<0.01),CIP2A蛋白表达显著降低(1.32±0.17 vs. 0.45±0.03,P<0.001),细胞活力、侵袭、迁移能力、侵袭相关蛋白(MMP-2、MMP-9)表达、Bcl-2蛋白表达均显著降低[(100.00±4.36)%vs.(32.15±2.65)%、(150.20±12.95)个vs.(82.35±7.01)个、(77.91±3.63)%vs.(46.12±2.54)%、1.02±0.11 vs. 0.22±0.04、1.03±0.18 vs. 0.21±0.04、1.01±0.14 vs. 0.27±0.05,P<0.001)],凋亡率、凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax)、PP2A表达均显著升高[(14.02±2.29)%vs.(38.21±3.20)%、0.81±0.11 vs. 1.78±0.24、0.83±0.12 vs. 1.72±0.24、0.27±0.02 vs. 0.95±0.16,P<0.001];与miR-383-5p mimic组相比,miR-383-5p mimic+pc-CIP2A组BIU-87细胞活力、侵袭、迁移能力、侵袭相关蛋白(MMP-2、MMP-9)表达、Bcl-2蛋白表达均显著升高[(32.15±2.65)%vs.(50.18±3.77)%、(82.35±7.01)个vs.(116.30±13.70)个、(46.12±2.54)%vs.(58.43±3.15)%、0.22±0.04 vs. 0.60±0.08、0.21±0.04 vs. 0.58±0.06、0.27±0.05 vs. 0.64±0.08,P<0.05],凋亡率、凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax)、PP2A表达均显著降低[(38.21±3.20)%vs.(23.15±2.74)%、1.78±0.24 vs. 1.25±0.21、1.72±0.24 vs. 1.23±0.18、0.95±0.16 vs. 0.60±0.13,P<0.05]。双荧光素酶实验结果显示miR-383-5p与CIP2A存在相应的靶向关系。结论 提高miR-383-5p表达可抑制膀胱癌细胞BIU-87的增殖、侵袭、迁移能力,增强细胞凋亡能力,可能是通过靶向调节CIP2A实现的。
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