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应用双胎羊水多能干细胞建立诱导分化的内对照模型

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中华医学遗传学杂志 2012年第4期29卷 398-403页

作者：骆玉梅范勇陈欣洁岳磊黎青何文智马晓燕郑育红孙筱放广州医学院第三附属医院广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室510150

目的快速重编程羊水细胞为多能干细胞，建立诱导分化研究的内对照模型。方法应用逆转录病毒介导4种基因（Oct4、Sox2、c-Myc、K脾）诱导双胎羊水细胞，筛选羊水诱导性多能干细胞（human amniotie fluid-derived cells induced pluripote... 详细信息

目的快速重编程羊水细胞为多能干细胞，建立诱导分化研究的内对照模型。方法应用逆转录病毒介导4种基因（Oct4、Sox2、c-Myc、K脾）诱导双胎羊水细胞，筛选羊水诱导性多能干细胞（human amniotie fluid-derived cells induced pluripotent stem cells，hAFDCs—iPSCs），对其进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定。结果双胎hAFDC-iPSCs能维持自我更新状态，在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因，具有体内外分化潜能，在体外长期培养能维持正常核型。结论双胎hAFDCs—iPSCs遗传背景相一致，可以为iPSCs的诱导分化研究提供很好的内对照模型，并为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源。

关键词：异卵双胎内对照诱导分化诱导性多能干细胞自体移植治疗

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加强围生儿脑损伤研究降低脑瘫发生率

中国实用妇科与产科杂志 2012年第11期28卷 801-803页

作者：陈敦金广州医学院第三附属医院广东省产科重大疾病重点实验室广东广州510150

脑瘫（cerebral palsy,CP）是指在孕期至出生后1个月内新生儿大脑发生病变而引起的以非进展性中枢性运动障碍和姿势异常为主要表现的脑损伤综合征,可伴有智力低下、语言障碍、癫痫等并发症。脑瘫虽不是由产科医师诊断的疾病,但脑瘫发生... 详细信息

脑瘫（cerebral palsy,CP）是指在孕期至出生后1个月内新生儿大脑发生病变而引起的以非进展性中枢性运动障碍和姿势异常为主要表现的脑损伤综合征,可伴有智力低下、语言障碍、癫痫等并发症。脑瘫虽不是由产科医师诊断的疾病,但脑瘫发生原因与围产期因素密切相关。

关键词：脑瘫胎儿生长受限子宫内环境早产缺氧缺血

无饲养层和动物源蛋白的β-地中海贫血诱导多能干细胞系的建立

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中国生物工程杂志 2012年第6期32卷 69-73页

作者：范勇骆玉梅陈欣杰孙筱放广东省产科重大疾病重点实验室广州医学院第三附属医院广州510150

β-地中海贫血患者因无合适的造血干细胞供体来源从而不得不靠输血维持生命。诱导多能干细胞(iPS)技术为获得患者自身遗传背景的干细胞进行临床治疗开拓了新途径。目前,建立iPS细胞系的过程需要使用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层和动物... 详细信息

β-地中海贫血患者因无合适的造血干细胞供体来源从而不得不靠输血维持生命。诱导多能干细胞(iPS)技术为获得患者自身遗传背景的干细胞进行临床治疗开拓了新途径。目前,建立iPS细胞系的过程需要使用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层和动物源的蛋白成分,因此建立的iPS细胞系存在病原体和动物源蛋白污染的可能性,不能应用于临床。采用目前商品化的TeSRTM2和StemAdhereTMDefined Matrix限定培养体系,利用Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc 4个转录因子组装在同一表达载体的可切除的慢病毒感染人β-地中海贫血成纤维细胞,建立了5株无饲养层和动物源蛋白的β-地中海贫血iPS细胞系,这些iPS细胞系具有人胚胎干细胞典型的特征,表达人胚胎干细胞的多能性分子标记,如Oct4、Nanog、Tra-1-60等。在体外分化能够形成拟胚体,在体内分化能够形成含有3个胚层类型细胞的畸胎瘤。

关键词： β-地中海贫血诱导多能干细胞无饲养层无动物源蛋白

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脑卒中中西医结合防治指南(2023版)

中国全科医学 2025年第5期28卷 521-533页

作者：倪小佳林浩罗旭飞邝卓然刘云兰郭建文陈耀龙蔡业峰脑卒中中西医结合防治指南工作组广东省中医院、广东省中医药科学院、广州中医药大学第二临床医学院广东省广州市510120 广东省中医急症研究重点实验室广东省广州市510120 省部共建中医湿证国家重点实验室广东省广州市510120 兰州大学基础医学院循证医学中心甘肃省兰州市730000 兰州大学GRADE中心甘肃省兰州市730000 世界卫生组织指南实施与知识转化合作中心甘肃省兰州市730000 兰州大学公共卫生学院甘肃省兰州市730000 不详

近年来我国脑卒中疾病负担仍持续增长,同时目前中西医结合治疗脑卒中领域涌现出许多新的临床证据。为更好地指导中西医结合防治脑卒中的临床实践,本工作组在《中西医结合脑卒中循证实践指南(2019)》的基础上,开展指南更新必要性评估与... 详细信息

近年来我国脑卒中疾病负担仍持续增长,同时目前中西医结合治疗脑卒中领域涌现出许多新的临床证据。为更好地指导中西医结合防治脑卒中的临床实践,本工作组在《中西医结合脑卒中循证实践指南(2019)》的基础上,开展指南更新必要性评估与临床问题遴选,确定了需要更新的12个临床问题,并以《脑卒中中西医结合防治指南》在中华中医药学会申请立项。参考最新的国内外临床实践指南,基于研究证据的系统检索与客观评价,结合我国中西医临床专家的经验,经过工作组的充分讨论及广泛征求意见,最终形成18条推荐意见,以期为各级医疗机构的医务工作者提供科学、具体的指导,促进中西医结合治疗脑卒中的规范应用,从而降低脑卒中的死亡率、复发率、残疾率。

关键词：脑卒中中西医结合循证实践指南

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剖宫产术后3d,一过性抽搐1d

中国实用妇科与产科杂志 2012年第10期28卷 793-794页

作者：贺芳陈敦金王天红苏春宏广州医学院第三附属医院妇产科广东省产科重大疾病重点实验室广东广州510150

陈敦金（主持人，妇产科教授）：妊娠合并血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）少见，近期我们对此病例进行诊治，现将此疑难病例进行回顾性分析，和大家分享诊治过程中的经验，共同提高诊疗水平。首先... 详细信息

陈敦金（主持人，妇产科教授）：妊娠合并血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）少见，近期我们对此病例进行诊治，现将此疑难病例进行回顾性分析，和大家分享诊治过程中的经验，共同提高诊疗水平。首先请住院医师介绍病例。

关键词：血栓性血小板减少性紫癜妊娠血浆置换血管性血友病因子裂解蛋白酶

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Turner综合征羊水干细胞的分离及特征

中国组织工程研究 2013年第14期17卷 2586-2591页

作者：龚余骆玉梅田霖刘海波陈欣洁孙筱放陈耀勇广州医学院第三附属医院广东省产科重大疾病重点实验室广东省广州市510150

背景:羊水干细胞的分离培养及生物学特性相关研究取得了明显进展,但未见45,X/46,XX(Turner综合征)羊水细胞建系的报道。目的:建立体外培养人羊水来源干细胞的方法,初步探讨羊水干细胞的生物学特性。方法:孕中期羊膜腔穿刺获得1例染色体... 详细信息

背景:羊水干细胞的分离培养及生物学特性相关研究取得了明显进展,但未见45,X/46,XX(Turner综合征)羊水细胞建系的报道。目的:建立体外培养人羊水来源干细胞的方法,初步探讨羊水干细胞的生物学特性。方法:孕中期羊膜腔穿刺获得1例染色体核型异常(45,X/46,XX)羊水标本,采用梯度稀释后低密度种植的方法获得羊水干细胞,体外传代培养,倒置显微镜观察细胞的贴壁生长情况,细胞染色体检查确认核型,流式细胞仪检测羊水干细胞特异性表面标志和细胞周期,进行成骨诱导分化及碱性磷酸酶染色和茜素红染色鉴定。结果与结论:羊水干细胞在体外培养体系中增殖迅速,核型为45,X/46,XX,流式细胞仪检测羊水干细胞表达CD29、CD44、CD90和CD105间充质干细胞表面标志,不表达造血干细胞标志CD45和CD34;大部分细胞处于G1期,增殖能力强。羊水干细胞经成骨诱导分化后,碱性磷酸酶染色和茜素红染色阳性。结果可见该实验成功分离获得45,X/46,XX(Turner综合征)羊水干细胞,其增殖能力强,表现间充质干细胞的特性。

关键词：干细胞干细胞培养与分化 Turner综合征羊水细胞羊水干细胞染色体核型成骨分化省级基金干细胞图片文章

用高分辨率微阵列比较基因组杂交分析一个孤独症家系的新生拷贝数变异

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中华医学遗传学杂志 2012年第3期29卷 266-269页

作者：何文智刘维强钟鑫琪陈晓林李少英张慧敏黎青崔其亮孙筱放广州医学院第三附属医院妇产科研究所实验部广东省产科重大疾病重点实验室广州市生殖与遗传重点实验室510150

目的对1个孤独症家系进行新发拷贝数变异（copynumbervariations，CNV）分析。方法应用高分辨率全基因组芯片（AffymetrixCytogeneticsWhole-Genome2．7MArray）检测该家系4名成员的基因组拷贝数，用AffymetrixChromosomeAnalysisSuite软件分析结果。以基因组变异数据库亚洲正常人群及先证者父母、同胞为对照，分析先证者的新发CNV。结果先证者存在89个新发拷贝数变异，其中5号、11号和14号染色体新发CNV总长占染色体全长超过1‰。3p26．1、4q2．2、5p15．2等区域也存在新发CNV，涉及GRM7、GRID2、CTNND2等10个与神经系统发育相关基因。结论先证者多个与神经系统发育相关的基因存在新发拷贝数变异，这为探索孤独症的发病机理提供了新的线索。高分辨率基因组CNV芯片能够快速、准确地检测基因组的微小失衡，在遗传病诊断方面具有广阔的应用前景。

关键词：孤独症拷贝数变异微阵列比较基因组

国内首对同一父母来源HLA相同的人胚胎干细胞系的建立

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实用医学杂志 2012年第10期28卷 1592-1595页

作者：骆玉梅范勇陈欣洁杜红姿张文红黎青李少英孙筱放广州医学院第三附属医院广东省产科重大疾病重点实验室 510150

目的:建立国内首对同父母来源的人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)系,为干细胞的定向诱导分化提供内参对照模型。方法:利用体外受精后第3天不适宜进行胚胎移植的低质量胚胎,采用机械切割法分离囊胚内细胞团(ICM),接种到丝... 详细信息

目的:建立国内首对同父母来源的人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)系,为干细胞的定向诱导分化提供内参对照模型。方法:利用体外受精后第3天不适宜进行胚胎移植的低质量胚胎,采用机械切割法分离囊胚内细胞团(ICM),接种到丝裂霉素C处理的小鼠饲养层上,对建立的hESC进行多能性潜能检测。结果:成功建立一对具有多能特性的hESC系,体外长期培养维持正常核型,STR显示较高的亲缘性,HLA配型完全相同。结论:本研究建立了国内首对同一父母来源的HLA完全相同的hESC,其遗传背景一致,这为细胞的定向诱导分化体系筛选提供一个很好的内参对照,同时也为干细胞的移植排斥反应、培养扩增等研究提供很好的对比参照模型。

关键词：胚胎干细胞相同HLA配型同一父母来源内对照诱导分化

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镜像综合征的研究进展

中华围产医学杂志 2013年第3期16卷 182-184页

作者：程澄李映桃广州医学院第三附属医院产科广东省产科重大疾病重点实验室510150

镜像综合征（mirrorsyndrome）罕见，病因及发病机制尚不明确，临床表现因类似于子痫前期而常被误诊，胎儿预后不良，诊断治疗无规范的临床指南。现对镜像综合征的病因、发病机制、临床表现和诊断标准、治疗及预后评估等研究进展进行综述。

关键词：综合征镜像发病机制临床表现诊断治疗子痫前期预后不良临床指南