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肝豆灵通过LncRNA H19调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路治疗Wilson病肝纤维化

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 131-138页

作者：殷馨汪瀚花代平孙兰婷徐芸芸杨文明安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第一附属医院

目的：研究肝豆灵（GDL）治疗Wilson病肝纤维化可能的作用机制及途径。方法：60只雄性SD大鼠随机分为6组：正常组、模型组、GDL低、中、高剂量组（0.24、0.48、0.96 g·kg-1）及青霉胺组（90 mg·kg-1），每组10只。除正常组以外，其余... 详细信息

目的：研究肝豆灵（GDL）治疗Wilson病肝纤维化可能的作用机制及途径。方法：60只雄性SD大鼠随机分为6组：正常组、模型组、GDL低、中、高剂量组（0.24、0.48、0.96 g·kg-1）及青霉胺组（90 mg·kg-1），每组10只。除正常组以外，其余各组以300 mg·kg-1五水合硫酸铜灌胃造模，构建铜负荷Wilson病大鼠模型。采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察肝脏病理形态改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PC-Ⅲ）、Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）水平；透射电镜观察肝组织超微结构；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝组织肝脏和血清外泌体长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19)、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及其磷酸化蛋白和自噬效应蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)蛋白表达水平；免疫荧光观察Beclin1、LC3-Ⅱ信号强度。结果：与正常组比较，模型组染色结果显示肝细胞出现炎性细胞浸润，细胞核边界不清伴有裂解、坏死，汇管区周围可见胶原纤维沉积；HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量升高（P<0.01）；电镜下观察到自噬小体的数量增多，出现大多数包浆被降解后呈现单层膜结构的自噬溶酶体；Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达升高（P<0.05,P<0.01）;Beclin1、LC3-II荧光信号明显增强；PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低（P<0.01）;LncRNAH19mRNA表达水平升高（P<0.01）,PI3K、Akt、mTORmRNA表达水平降低（P<0.01）。经GDL治疗后，肝组织纤维化程度明显改善；HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ水平降低；自噬小体数量明显减少；Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）;Beclin1、LC3-Ⅱ荧光信号随药物剂量呈不同程度的减弱；PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高（P<0.01）;LncRNA H19 mRNA表达水平降低（P<0.01）,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达水平升高（P<0.05,P<0.01）。结论：GDL可能通过LncRNA H19调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路减轻肝纤维化程度，减少肝损伤。

关键词： Wilson病肝豆灵长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路细胞自噬肝纤维化

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脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架促进大鼠皮肤缺损的修复

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 745-751页

作者：吴辰江佳慧苏豆刘晨慈超皖南医学院第一附属医院皮肤性病科安徽省芜湖市241001 皖南医学院第一附属医院脊柱外科安徽省芜湖市241001

背景:研究证实,将脱细胞基质与聚合物进行混合纺丝不仅可改善纤维的结构性质,还可保存脱细胞基质的生物学活性,但是目前将聚氨酯与脱细胞皮肤基质进行静电纺丝制备皮肤组织工程支架还没有相关报道。目的:观察脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺... 详细信息

背景:研究证实,将脱细胞基质与聚合物进行混合纺丝不仅可改善纤维的结构性质,还可保存脱细胞基质的生物学活性,但是目前将聚氨酯与脱细胞皮肤基质进行静电纺丝制备皮肤组织工程支架还没有相关报道。目的:观察脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架对大鼠皮肤缺损的修复作用。方法:利用静电纺丝技术分别制备聚氨酯静电纺丝纤维支架和脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架。扫描电镜下观察纤维结构;将大鼠脂肪间充质干细胞分别接种于两组支架上,扫描电镜下观察支架上的细胞形态。取10只SD大鼠,在每只大鼠背部制作3个1 cm×1 cm的全层皮肤缺损,其中2处缺损分别植入聚氨酯静电纺丝纤维支架(对照组)、脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架(实验组),剩余缺损处不植入任何材料(空白对照组)。术后第1,2,3周,观察皮肤创面愈合情况;植入后第3周,进行创面苏木精-伊红染色,计算创面瘢痕面积。结果与结论:①扫描电镜下可见两种静电纺丝纤维均为网状结构,并且大鼠脂肪间充质干细胞在两种支架上沿纤维附着,黏附良好。②随着术后时间的延长,各组皮肤创面逐渐愈合,至术后第3周,实验组、对照组皮肤创面基本愈合,空白对照组创面可见小溃疡形成。皮肤创面苏木精-伊红染色显示,对照组、实验组创面表皮覆盖基本完整,真皮层内可见成纤维细胞长入和炎症细胞浸润,并且实验组创面胶原纤维较为丰富、排列规则有序,与表皮面基本平行;空白对照组创面表皮仍有缺损。实验组创面瘢痕面积小于其他两组(P细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架可以有效修复大鼠全层皮肤缺损、改善创面瘢痕形成。

关键词：脱细胞皮肤基质聚氨酯静电纺丝皮肤缺损瘢痕

免疫原性细胞死亡基因风险模型的建立及其对肝细胞癌预后和肿瘤微环境特征的预测价值

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临床肝胆病杂志 2025年第12期40卷 2473-2483页

作者：刘军汪玲姜钰环王靖芝李慧明南昌大学第一附属医院检验科南昌 330006 南昌大学第一临床医学院南昌 330038

目的鉴定肝细胞癌（HCC）免疫原性细胞死亡（ICD）相关基因，并基于相关基因构建评分模型预测HCC的预后和肿瘤微环境特征。方法通过癌症基因组图谱数据库获取HCC数据集，采用热图展示了HCC中57个ICD相关基因的表达。基于ICD相关基因表... 详细信息

目的鉴定肝细胞癌（HCC）免疫原性细胞死亡（ICD）相关基因，并基于相关基因构建评分模型预测HCC的预后和肿瘤微环境特征。方法通过癌症基因组图谱数据库获取HCC数据集，采用热图展示了HCC中57个ICD相关基因的表达。基于ICD相关基因表达进行聚类分析，对2种ICD相关亚型（ICD低表达组和ICD高表达组）进行基因本体富集、京都基因和基因组百科全书富集、体细胞突变差异、免疫细胞浸润差异分析。构建LASSO Cox回归风险预后模型，验证其临床应用价值。构建列线图模型，预测患者1、3和5年的生存率。此外，采用qRT-PCR验证模型中关键基因的表达水平。两组间比较采用成组t检验，采用单因素和多因素Cox回归分析确定临床病理特征中的预后因素。采用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析。采用Spearman秩相关进行相关性分析。结果ICD低表达组预后较差，ICD高表达组与良好的临床结果相关（P=0.004）。进一步研究表明ICD高表达组与免疫活性微环境相关，且ICD高表达组的基因主要富集于免疫相关通路（免疫球蛋白受体结合、造血细胞谱系和B淋巴细胞受体信号通路）。体细胞突变结果显示，ICD高表达组的CD274、CTLA4、HAVCR2、TIGIT、PDCD1和PDCD1LG2的基因表达水平较高（P值均细胞（r=-0.29）、浆细胞（r=-0.3）和CD8+T淋巴细胞（r=-0.37）呈负相关（P值均细胞（r=0.38）、静止树突状细胞（r=0.47）和M0型巨噬细胞（r=0.49）呈正相关（P值均<0.05）。结论本研究确定了与HCC预后相关的ICD基因，为理解不同ICD表达谱相关的免疫特性提供了见解。构建的风险模型和列线图对于预测HCC患者的预后预测和免疫治疗指导具有重要的价值。

关键词：癌, 肝细胞免疫原性细胞死亡预后肿瘤微环境

实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠发病中Tim-3的表达及其作用

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眼科新进展 2025年第1期 10-14页

作者：吴雄飞张秋瑾郑柳杨彬彬李金清丁芝祥桂林医学院桂林医学院附属医院眼科

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发病中的表达和作用。方法选取4～5周龄雄性C57BL/6J小鼠共12只；采用随机数字表法将12只小鼠分为对照组(3只)和实验组(9只)。对照组(造模时间节点为造模... 详细信息

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发病中的表达和作用。方法选取4～5周龄雄性C57BL/6J小鼠共12只；采用随机数字表法将12只小鼠分为对照组(3只)和实验组(9只)。对照组(造模时间节点为造模后0 d)不做任何处理，实验组小鼠诱导建立EAU模型(按造模时间节点分为造模后7 d、14 d、21 d三个小组，每组3只小鼠)。将光感受器间维生素A类结合蛋白651-670和完全弗氏佐剂充分混合乳化后，在实验组小鼠的双侧大腿、尾根部及颈后部皮下注射配制好的免疫乳剂(每只注射200μL免疫乳剂，含500μg光感受器间维生素A类结合蛋白651-670),随后实验组每只小鼠腹腔注射1μg百日咳毒素。通过裂隙灯显微镜观察各组小鼠眼前节及眼底表现并采集图像。根据炎症程度采用Caspi分级标准对小鼠行临床评分及组织病理学评分。ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达；实时荧光定量PCR法检测小鼠脾脏及眼球组织中Tim-3 mRNA的表达；Western blot法检测Tim-3蛋白的表达；免疫组织化学法检测脾脏组织Tim-3蛋白的表达。采用Graphpad Prism 9.0统计软件进行数据分析。结果造模后小鼠的眼前节临床评分、眼底临床评分、组织病理学评分均随造模后时间的延长呈升高趋势，各组间的评分差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达量均随造模后时间的延长呈升高趋势，且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠脾脏与眼球组织中Tim-3 mRNA的相对表达量均随造模后时间的延长呈下降趋势，且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。小鼠眼球和脾脏组织中Tim-3蛋白的表达情况和mRNA相同。结论 Tim-3在EAU发病进程中的表达随着炎症的加重呈下调趋势，Tim-3在葡萄膜炎发病进程中可能发挥着负性免疫调控作用。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎自身免疫性疾病 Tim-3 干扰素-γ 白细胞介素

miRNA-6507增强宫颈癌细胞顺铂敏感性及其机制探讨

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现代肿瘤医学 2025年第1期 26-31页

作者：张海光赵晶晶张敏崔非非王朝辉杨君王国戗新乡医学院第一附属医院妇产科新乡医学院第一附属医院检验科

目的:探讨miRNA-6507对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库下载宫颈癌相关miRNA数据及临床数据，分析癌旁组织与癌组织间miRNA表达差异，并分析得到与患者生存期相关的miRNA;通过RT-qPCR验证所得miRNA在宫颈正常... 详细信息

目的:探讨miRNA-6507对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:通过TCGA数据库下载宫颈癌相关miRNA数据及临床数据，分析癌旁组织与癌组织间miRNA表达差异，并分析得到与患者生存期相关的miRNA;通过RT-qPCR验证所得miRNA在宫颈正常细胞与宫颈癌细胞间表达差异。选取与患者5年生存率相关的miRNA,将miRNA模拟物及对照转染至宫颈癌细胞系中，MTT检测细胞增殖，对转染后的细胞加入顺铂，检测细胞对顺铂的敏感性。结果:分析发现TCGA数据库宫颈癌标本中共有256个肿瘤组织，2个癌旁组织；通过edgeR分析发现宫颈癌相关的1 881个miRNA中肿瘤组织同癌旁组织相比，表达上调的有19个，表达下降的有70个；对这89个miRNA分别分为高表达组和低表达组，进行生存分析结果发现，miRNA-140、miRNA-145、miRNA-200c、miRNA-6507与患者的生存期相关，miRNA-140、miRNA-145、miRNA-6507高表达患者生存期较长，miRNA-200c高表达患者生存期较短。RT-qPCR结果显示，在宫颈癌细胞系Caski、HCC94、Siha中miRNA-140的表达同宫颈细胞H8相比显著升高，在C33A和Hela细胞中miRNA-140无显著性差异。在所有的宫颈癌细胞中miRNA-145的表达均下降，该结果与生存分析一致；在宫颈癌细胞Caski和HCC94中miRNA-200c的表达上调，这与生存分析的结果相同，在C33A、Hela和Siha细胞中miRNA-200c的表达没有显著变化；在验证的5种宫颈癌细胞中miRNA-6507的表达量均低于正常细胞系H8,该结果同生存分析一致。MTT结果显示，C33A和Siha转染miRNA-6507模拟物后，其细胞活力均未受到影响，对转染后的细胞进行顺铂处理，结果显示转染miRNA-6507的细胞活力降低。结论:miRNA-6507可增强宫颈癌细胞的顺铂敏感性，有望成为宫颈癌治疗的候选miRNA靶点。

关键词：宫颈癌 5年生存率顺铂敏感性 miRNA

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基于干性指数模型对肉瘤预后、免疫浸润和铁死亡调控的分析

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4151-4160页

作者：魏婧娴孟莲孙皓张田田刘春霞石河子大学医学院病理学系/石河子大学第一附属医院病理科新疆维吾尔自治区石河子市832000 广州医科大学附属第二医院病理科广东省广州市510260

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测... 详细信息

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测序数据及相关临床信息。利用肉瘤干性指数,对获取的肉瘤RNA测序数据进行分组。利用生存数据进行组间预后情况分析,获取组间差异表达基因后进行通路富集和免疫浸润分析。获得铁死亡相关差异基因,构建蛋白互作网络并进行预后相关性分析。培养横纹肌肉瘤细胞系,分为贴壁细胞组和干细胞组,贴壁细胞组不予任何干预,干细胞组通过无血清培养处理以诱导横纹肌肉瘤干细胞富集,qRT-PCR验证干细胞相关标志物、铁死亡相关差异基因以及铁死亡相关标志物的mRNA表达。结果与结论:①以干性指数中位数为界将患者分成高干性指数组和低干性指数组,通过患病风险预测显示高干性指数组患者的无进展生存期低于低干性指数组,提示预后不佳;②GO、KEGG分析显示肉瘤高、低干性指数组差异表达基因参与不同的细胞通路;高干性指数组和低干性指数组之间免疫浸润存在差异;差异基因中有23个铁死亡相关基因,其中9个可构成相关性较强的蛋白互作网络,其中IDO1、IFNG、AQP5高表达的肉瘤患者预后更好,CA9高表达的肉瘤患者预后不佳;③qRT-PCR结果显示,与贴壁细胞组相比,干细胞组干细胞相关标志物NANOG、SOX2和OCT4 mRNA表达显著升高(P细胞组相比,干细胞组铁死亡相关标志物SLC7A11的mRNA表达显著降低(P细胞组相比,干细胞组差异基因CA9的mRNA表达显著降低,IDO1、IFNG、AQP5的mRNA表达显著升高(P细胞与肉瘤生存、铁死亡过程密切相关,CA9、IDO1、IFNG、AQP5在肉瘤干细胞中异常表达,可能成为肉瘤诊断标志物和治疗新靶点。

关键词：肉瘤干细胞干性指数铁死亡生存预后免疫浸润

端粒长度与10种常见肌肉骨骼疾病的关系孟德尔随机化分析

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中国组织工程研究 2025年第3期29卷 654-660页

作者：罗伟东蒲彬古鹏黄枫郑晓辉陈福洪广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510000 广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510000 川北医学院附属遂宁市中医医院骨一科四川省遂宁市629000

背景:多项观察性研究表明,端粒长度与肌肉骨骼疾病之间存在潜在的关联,然而它们之间的潜在机制仍不清楚。目的:利用两样本孟德尔随机化分析来探索端粒长度与肌肉骨骼疾病之间的遗传因果关系。方法:从英国生物银行中获得端粒长度的全基... 详细信息

背景:多项观察性研究表明,端粒长度与肌肉骨骼疾病之间存在潜在的关联,然而它们之间的潜在机制仍不清楚。目的:利用两样本孟德尔随机化分析来探索端粒长度与肌肉骨骼疾病之间的遗传因果关系。方法:从英国生物银行中获得端粒长度的全基因组关联研究汇总数据。从FinnGen财团中获得了关于10种常见肌肉骨骼疾病(骨坏死、骨髓炎、骨质疏松、类风湿关节炎、腰痛、椎管狭窄、痛风、肩周炎、强直性脊柱炎和下肢深静脉血栓)的全基因组关联研究汇总数据。使用逆方差加权、孟德尔随机化-Egger和加权中位数方法评估端粒长度与10种肌肉骨骼疾病的因果关系,逆方差加权作为主要的孟德尔随机化分析方法,并进行敏感性分析探讨结果稳健性。结果与结论:①逆方差加权法结果表明,遗传预测的端粒长度与类风湿关节炎(OR=0.78,95%CI:0.64-0.95,P=0.015)和骨坏死(OR=0.56,95%CI:0.36-0.90,P=0.016)风险之间存在负向因果关系,但未发现端粒长度与其他8种肌肉骨骼疾病之间存在因果关系(P均>0.05)。②敏感性分析结果表明因果关系稳健,孟德尔随机化-Egger截距分析未检测到潜在的水平多效性(P均>0.05)。③此项孟德尔随机化研究支持端粒长度对类风湿关节炎和骨坏死的保护作用的结论,然而,未来将需要更多的基础和临床研究来验证。

关键词：端粒长度肌肉骨骼疾病孟德尔随机化全基因组关联研究单核苷酸多态性因果关系工具变量

人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗SD大鼠骨质疏松性股骨骨折

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6634-6641页

作者：卜宪敏梁迪张斌徐英杰丁豪吴彬田荣华济宁市第一人民医院病理科山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院检验科山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院创伤骨科山东省济宁市272067

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体并进行鉴定。30只12周龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(6只)和去势组(24只)。去势组采用经典的去势法构建骨质疏松模型,术后12周随机选取去势组6只大鼠与假手术组6只大鼠行Micro-CT及苏木精-伊红染色进行模型验证。验证骨质疏松模型构建成功后,将去势组剩余18只大鼠随机分为3组,均构建骨质疏松性股骨骨折模型,骨折端分别注射PBS(PBS组)、1.5×10^(11)particles/mL(低浓度外泌体组)、3×10^(11)particles/mL(高浓度外泌体组)外泌体。骨折术后4周行影像学及组织学观察评估骨折愈合和骨组织血管生成情况。结果与结论:①大体标本观察:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合速度明显增快,骨折端骨痂生成量显著增加;②X射线片评分:外泌体组显著高于PBS组,差异有显著性意义(P细胞来源外泌体可通过促进血管生成和成骨,最终促进骨质疏松性骨折修复,其机制可能与CD31和骨钙素表达增加有关。

关键词：骨质疏松性骨折人脐带间充质干细胞外泌体骨折愈合骨钙素 CD31

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红外热成像在肺部疾病应用的新进展

中国全科医学 2025年第8期28卷 1012-1016+1022页

作者：杨佳诺王冠理杨佳夫何嘉豪陈舒敏沈毅李娟任妮刘春丽邓方阁广州医科大学附属第一医院广州呼吸健康研究院呼吸内科汕头大学医学院附属肿瘤医院放射科

红外热成像作为一种具备无创性、无辐射性的非接触式临床检测技术，通过检测人体表面温度并重建温度分布图像，可以早期识别多种疾病，并实现早期诊断及干预。本文着重回顾了红外热成像在急性呼吸道传染性疾病、睡眠呼吸暂停综合征、中... 详细信息

红外热成像作为一种具备无创性、无辐射性的非接触式临床检测技术，通过检测人体表面温度并重建温度分布图像，可以早期识别多种疾病，并实现早期诊断及干预。本文着重回顾了红外热成像在急性呼吸道传染性疾病、睡眠呼吸暂停综合征、中医肺疾病研究、新生儿重症监护以及肺栓塞早期筛查等肺部疾病领域中的应用及取得的相关研究进展，具有重要的临床指导意义。红外热成像技术作为一种功能性成像，核心优势在于“早”，不同于疾病过程结构性的改变，疾病早期常出现血流动力学紊乱、局部炎症等所致局部异常温度分布的功能性改变，借助基于热敏性的红外热成像技术可以实现疾病的早期诊断、早期干预以及动态监测等。

关键词：肺疾病红外热成像睡眠呼吸暂停综合征肺栓塞检测技术