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HIF-1α基因RNA干扰质粒在胃癌细胞中的构建与鉴定

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世界华人消化杂志 2012年第24期20卷 2254-2258页

作者：龚青方淑环高国全广州医学院基础学院生化教研室广东省广州市510182 广州中医药大学临床药理研究所dme中心广东省广州市510405 中山大学中山医学院生物化学教研室广东省广州市510080

目的:构建转录因子HIF-1α表达的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路及以HIF-1α为靶点的基因治疗提供稳定转染细胞的RNAi.方法:选取HIF-1α基因的19nt特异性序列,设计针对HIF-1α的shRNA序列,应用基... 详细信息

目的:构建转录因子HIF-1α表达的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路及以HIF-1α为靶点的基因治疗提供稳定转染细胞的RNAi.方法:选取HIF-1α基因的19nt特异性序列,设计针对HIF-1α的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer1.0-U6表达载体中,利用EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切和DNA测序鉴定重组克隆.低氧条件下,将包含HIF-1α基因RNAi序列的重组载体转染人胃癌细胞SGC-7901,转染48h后,收集细胞裂解液,Western blotting分析低氧条件下对照组与转染组HIF-1α蛋白的表达水平.结果:双酶切证实shRNA插入pSilencer1.0-U6质粒,DNA测序证实插入的序列正确;HIF-1α基因RNAi质粒转染胃癌细胞SGC-7901成功;Western blotting结果显示与空质粒对照组比转染组细胞HIF-1α表达下调.结论:成功构建人HIF-1α基因RNAi质粒,为研究HIF-1α参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒.同时,阻断HIF-1α的信号通路将为肿瘤基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以HIF-1α为靶向的基因治疗提供了有利工具.

关键词：载体低氧诱导因子1α RNA干扰胃癌

基于“治未病”思想量化分析PCOS胰岛素抵抗治法规律

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时珍国医国药 2021年第3期32卷 750-753页

作者：王镘佳邓志远曾诚广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院国家区域(华南区)中医妇科诊疗中心广东广州510405

目的基于"治未病"思想,量化分析PCOS胰岛素抵抗的治法规律,为中医临床应用提供依据和参考。方法通过中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,收集中医药治疗PCOS-IR的文献,建立方剂数据库... 详细信息

目的基于"治未病"思想,量化分析PCOS胰岛素抵抗的治法规律,为中医临床应用提供依据和参考。方法通过中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)、万方数据库、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,收集中医药治疗PCOS-IR的文献,建立方剂数据库。最后,运用数据挖掘的方法进行了分析。结果数据库包含75种方剂和118种草药,高频中药包括当归、苍术、茯苓、山茱萸、菟丝子等。根据双层频权剪叉算法,高表达功效为补肾、健脾、疏肝、补肝、散寒、行气、止痛、通经活络、活血、化瘀、补血、固精、敛阴、止带、止汗、消痈疮、祛风、除痹、解毒、祛湿、化痰饮、散结、消肿等,并归纳了12种配伍功效和药物组合,并总结针对邪气的高权药物。结论 PCOS胰岛素抵抗处方的病机及用药要点在于中焦失运,木郁水虚,气血虚滞以及脏腑失调、风火瘀毒湿食等浊气内生。祛邪用药选用兼顾祛除多种邪气之品,防止浊气互结。

关键词：治未病 PCOS胰岛素抵抗量化分析双层频权剪叉算法配伍规律

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李赛美教授运用经方经验介绍

新中医 2007年第3期39卷 15-16页

作者：阮氏心顺（NGUYEN THI TAM THUAN）阮氏甘（NGUYEN VIET CAM）王保华李赛美（指导）广州中医药大学2004级越南籍博士研究生广东广州510405 广州中医药大学2003级（非医攻博）博士研究生广东广州510405 不详

李赛美是广州中医药大学教授、主任医师、博士研究生号师、《伤寒论》教研室主任。擅用经方治疗糖尿病、甲亢、朋病等疑难病症，积累了丰富的临床经验。笔者有幸随师侍诊，受益良多。兹择二三，以飨读者。

关键词：经方治疗应用《伤寒论》李赛美

项痹通颗粒对颈后肌炎症损伤大鼠细胞形态学及TGF-β、TNF-α、IL-1β、PGE_(2)、NGF的影响

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中华中医药学刊 2022年第11期40卷 110-113,I0038页

作者：杨淑荃范德辉杨佳曼岳挺罗孟西钟毅恒欧志文苏美意广州中医药大学第五临床医学院广东广州510095 广东省第二中医院广东广州510095 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

目的观察项痹通颗粒对颈后肌炎症损伤大鼠肌细胞形态学及转化生长因子-β(transforming growth factor beta, TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1,IL-1β)、前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_(2))、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)的影响,探讨其可能的作用机制。方法将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组、中药组(每组10只),以手术方式切开术口、用弯头止血钳钳夹C_(2-6)棘突旁开0.2 cm的颈后肌中段(持续钳夹10 s、后松开间隔10 s、扣满3扣)以建立颈后肌炎症损伤大鼠模型。西药组、中药组分别予以塞来昔布、项痹通颗粒灌胃,假手术组及模型组予以生理盐水灌胃。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察大鼠颈后肌细胞的形态学变化,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测大鼠造模后第2天(干预前)及干预7 d后的TGF-β、TNF-α、IL-1β、PGE_(2)、NGF水平。结果造模后第2天(干预前),与假手术组比较,模型组颈后肌中段颜色暗红,TGF-β、TNF-α、IL-1β、PGE_(2)及NGF显著升高(P0.05),但数据有所下降。结论项痹通颗粒可改善颈后肌炎症损伤大鼠肌细胞的病理学变化、减轻炎症反应,其机制可能与调控TGF-β表达、抑制炎症相关因子TNF-α、IL-1β、PGE_(2)、NGF有关。

关键词：项痹通颗粒颈后肌炎症损伤 TGF-β

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针灸治疗糖尿病性胃轻瘫的网状Meta分析

中国中医基础医学杂志 2020年第10期26卷 1535-1541页

作者：周锐陈婉薇李克嵩黄楚栓庄礼兴庄贞毅广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510405 中国中医科学院广安门医院北京100053 广州中医药大学第一临床医学院广州510405

目的:基于网状Meta分析探索针灸治疗糖尿病胃轻瘫(DGP)的优化方案。方法:检索Cochrane Library、PubMed、Scopus、EMbase、中国生物医学文献光盘数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)等,严格按照纳排标准筛选文献,对纳入文献的研究方... 详细信息

目的:基于网状Meta分析探索针灸治疗糖尿病胃轻瘫(DGP)的优化方案。方法:检索Cochrane Library、PubMed、Scopus、EMbase、中国生物医学文献光盘数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)等,严格按照纳排标准筛选文献,对纳入文献的研究方法学进行质量评价和偏倚风险评估,提取相关数据资料,运用STATA 14.0进行网状Meta分析。结果:共纳入37篇文献共2885例样本,网状Meta分析结果显示“最优”治疗概率排序前3者分别为艾灸+西药(74.7%)、艾灸+中药(8.9%)、穴位注射+中药(5.2%),干预方案疗效累积排序前6位分别为艾灸+西药、针刺+西药、电针+中药、穴位注射+中药、电针+西药、艾灸。结论:针灸治疗DGP选择2种干预措施联合可以取得更好的疗效,其中最优方案是艾灸+西药,在单干预措施中,艾灸治疗DGP的优势较为显著,建议医者结合临床合理选择治疗方案。

关键词：针灸糖尿病性胃轻瘫网状Meta分析循证医学

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肝脏因子与代谢性疾病的关系

中华肝脏病杂志 2015年第5期23卷 397-400页

作者：詹会霞荣向路郭姣广州中医药大学 510405 广东药学院、广东省代谢性疾病中医药防治重点实验室、国家中医药管理局高脂血症调肝降脂重点研究室

代谢性疾病是近年来国内外关注的热点,其主要特征为多重心血管代谢危险因素的聚集,包括向心性肥胖、胰岛素抵抗、糖尿病、高血压及高脂血症[1].越来越多的研究结果显示肝脏在机体代谢中占有重要地位,不但是三大代谢完成的主要场所,还通... 详细信息

代谢性疾病是近年来国内外关注的热点,其主要特征为多重心血管代谢危险因素的聚集,包括向心性肥胖、胰岛素抵抗、糖尿病、高血压及高脂血症[1].越来越多的研究结果显示肝脏在机体代谢中占有重要地位,不但是三大代谢完成的主要场所,还通过分泌各种蛋白对机体代谢产生广泛的影响.

关键词：代谢疾病胰岛素样生长因子肝脏因子

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脑水肿的中医证治探讨

中华中医药杂志 2020年第2期35卷 760-763页

作者：周子懿王立新黄培新(指导) 广州中医药大学第二附属医院广东省中医院广州510120

脑水肿属于中医脑病中的临床危急重症,它通常由颅脑外伤、大面积脑梗死、脑出血、脑脓肿、脑肿瘤、败血症、过敏或缺氧等毒性或代谢因素引起。如何有效控制脑水肿进展是现代医学及中医学共同面临的挑战。脑水肿涉及多种中医病症,临床证... 详细信息

脑水肿属于中医脑病中的临床危急重症,它通常由颅脑外伤、大面积脑梗死、脑出血、脑脓肿、脑肿瘤、败血症、过敏或缺氧等毒性或代谢因素引起。如何有效控制脑水肿进展是现代医学及中医学共同面临的挑战。脑水肿涉及多种中医病症,临床证候错综复杂,病机多为虚实夹杂。笔者将现代医学对脑水肿的病因学的认识和中医临证经验相结合,认为脑水肿的中医证治主要为分两大类:实证者多为肝胆湿热证、肝阳亢盛证或兼有腑气不通,虚证者多为气虚血瘀证和脾肾亏虚、水浊蒙窍证,并在此基础上阐述常用的中医治法。

关键词：脑水肿辨证论治治法

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国医大师洪广祥“中医救急”经验浅析

中华中医药杂志 2019年第5期34卷 1965-1968页

作者：柯诗文李少峰朱伟张元兵兰智慧刘良徛江西中医药大学南昌330006 江西中医药大学附属医院肺病科南昌330006 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

呼吸衰竭是临床危急重证,国医大师洪广祥教授将其分为热毒犯肺、痰火壅肺、腑结肺痹、气阴两竭、痰瘀阻肺、水凌心肺、喘脱等7类证型,分别对应清热解毒、泻火逐痰、通下救肺、益气救阴、祛痰行瘀、温阳利水、回阳固脱等7类治法,并结合... 详细信息

呼吸衰竭是临床危急重证,国医大师洪广祥教授将其分为热毒犯肺、痰火壅肺、腑结肺痹、气阴两竭、痰瘀阻肺、水凌心肺、喘脱等7类证型,分别对应清热解毒、泻火逐痰、通下救肺、益气救阴、祛痰行瘀、温阳利水、回阳固脱等7类治法,并结合其兼证、转归延伸出一系列应对方法。以呼吸衰竭治疗经验为例,由此引发了"中医救急"的系统性思考,即"提纲挈领辨病证"是先决条件,"争分夺秒论施治"是有力武器,"运筹帷幄判转归"是后续保障。

关键词：洪广祥中医救急呼吸衰竭经验传承

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限制性酶切片段差异显示及其应用

生物技术通讯 2004年第1期15卷 65-66页

作者：胡岳山李杰芬王剑广州中医药大学生化教研室中基公共实验室广州510405

差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly穴T雪引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly穴A雪非编码区的大量扩增。改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD... 详细信息

差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly穴T雪引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly穴A雪非编码区的大量扩增。改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用TaqI酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率。由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏。本文简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点。

关键词：限制性酶切片段差异显示接头假阳性率基因表达差异