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新橙皮苷对非酒精性脂肪性肝炎小鼠NLRP3/NF-κB信号通路的影响

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 602-607页

作者：陆一慧黄超原王恺疌雍秋红郑逸远彭冲赵利娜刘凤斌广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院广东广州510120 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 岭南医学实验研究中心广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院白云医院广东广州510470

目的探讨新橙皮苷(Neohesperidin,NHP)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠的治疗作用及其机制。方法24只SPF级C57BL6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和NHP组(40mg/kg)。通过喂饲高脂高胆固醇饲料(HFHC)制备NASH小鼠模型,造模同时给予相应... 详细信息

目的探讨新橙皮苷(Neohesperidin,NHP)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠的治疗作用及其机制。方法24只SPF级C57BL6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和NHP组(40mg/kg)。通过喂饲高脂高胆固醇饲料(HFHC)制备NASH小鼠模型,造模同时给予相应药物治疗,12周后进行葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验,计算小鼠的体重、肝重、肝指数,采集血清和肝组织标本,检测血清中胆固醇(TC),甘油三酯(TG),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏中炎症小体3(NLRP3)的蛋白表达及磷酸化核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达情况;苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色观察肝脏病理形态学变化。结果与正常组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、ALT、AST含量、肝脏中NLRP3和NF-κB的mRNA和蛋白表达及p-NF-κB的蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,NHP组小鼠血清中TC、TG、ALT、AST含量、肝脏中NLRP3和NF-κB的mRNA和蛋白表达及p-NF-κB的蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。HE染色和油红O染色结果提示其能明显减轻肝脏脂肪变性程度。结论NHP可能通过抑制NLRP3/NF-κB信号通路,减轻炎症反应来治疗NASH。

关键词： NHP 非酒精性脂肪肝性炎炎症小体3/核转录因子-κB(NLRP3/NF-κB)信号通路

臀肌腱炎、原发性髋关节病可能导致髂胫束综合征—一项孟德尔随机化研究

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南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1821-1830页

作者：姚辰李文佳庞瑞明周继红广州中医药大学附属宝安中医院骨伤科一区广东深圳518000 广州中医药大学附属宝安中医院呼吸与危重症学科广东深圳518000

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-... 详细信息

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-Egger回归和加权中位数法进行MR分析,判断臀肌腱炎及原发性髋关节病和髂胫束综合征是否存在因果关系,并通过异质性检验、多效性检验及敏感性分析、临床数据验证分析结果的可靠性。结果臀肌腱炎与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.32(1.03~1.68),P=0.026]。原发性髋关节病与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.40(1.06~1.84),P=0.017]。结论臀肌腱炎及原发性髋关节病可能增加髂胫束综合征的发病风险。

关键词：臀肌腱炎原发性髋关节病髂胫束综合征孟德尔随机化

Hp相关胃病病理演变及不同证候IL-1β蛋白差异表达特征

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中国中西医结合杂志 2024年第9期44卷 1072-1078页

作者：王奕琛李玉萍张云展陈昫代云凯吴云博罗琦兰绍阳陈苇菁胡玲广州中医药大学科技创新中心脾胃研究所广州510405 广州中医药大学第一附属医院脾胃病科广州510405

目的通过对白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的定性定位分析,探索幽门螺杆菌相关胃病(HpGD)病理演变及不同证候的蛋白差异表达特征。方法收集548例HpGD受试者临床四诊资料,其中92例为常规体检受试者,456例为慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩... 详细信息

目的通过对白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的定性定位分析,探索幽门螺杆菌相关胃病(HpGD)病理演变及不同证候的蛋白差异表达特征。方法收集548例HpGD受试者临床四诊资料,其中92例为常规体检受试者,456例为慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡或胃癌患者。所有受试者辨证分为无症状者、脾胃湿热、肝胃不和、脾气虚、瘀血内阻证5组。所有受试者在胃窦或胃黏膜病变处钳取标本,采用快速尿素酶和美蓝染色法检测Hp感染情况;HE染色观察胃黏膜病理组织学改变,分为相对正常、炎症、萎缩、癌前病变、重度异型增生、胃癌6组;Elivision plus标记法检测IL-1β蛋白并观察胃黏膜上皮表层、胃小凹、固有层腺体区的表达差异。结果与炎症组比较,Hp阴性者中IL-1β蛋白在胃癌及癌前病变组表达增高(P<0.05);与相对正常及炎症组比较,Hp阳性者IL-1β蛋白在癌前病变、重度异型增生及胃癌组表达增高(P<0.05),且重度异型增生组表达高于萎缩及癌前病变组(P<0.01)。不同证候间可见Hp阳性者中脾胃湿热证表达强度最高的趋势。胃黏膜上皮表层、胃小凹和固有层腺体区的IL-1β蛋白表达主要定位在胞浆,胞膜、胞核也见少量表达。随着胃黏膜从上皮表层、胃小凹到固有层腺体区,以及病理表现异型增生、肠化、癌变阶段,IL-1β蛋白胞浆表达强度不断增强(P<0.05)。结论IL-1β可能主要通过胞浆表达及Hp感染协同参与HpGD病理演变,且Hp感染、脾胃湿热证与IL-1β高表达或可为HpGD胃黏膜恶性病理演变提供早期预警信号。

关键词：幽门螺杆菌相关胃病 IL-1β/蛋白定性定位表达证候特征中西医结合

益肺散结丸联合顺铂对Lewis肺癌瘤源小鼠血浆外泌体微小核糖核酸的影响

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中医杂志 2024年第19期65卷 2032-2040页

作者：孙玲玲綦向军李晏龙胡磊颢林丽珠广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405 广州中医药大学第一临床医学院

目的探究益肺散结丸治疗肺癌的抑瘤效果及作用机制。方法构建Lewis肺癌瘤源小鼠,并将其分为模型对照组、顺铂组、顺铂+益肺散结低剂量组以及顺铂+益肺散结高剂量组各12只,分别进行相应干预14天,给药第0天、第3天、第7天、第10天、第1... 详细信息

目的探究益肺散结丸治疗肺癌的抑瘤效果及作用机制。方法构建Lewis肺癌瘤源小鼠,并将其分为模型对照组、顺铂组、顺铂+益肺散结低剂量组以及顺铂+益肺散结高剂量组各12只,分别进行相应干预14天,给药第0天、第3天、第7天、第10天、第14天测量瘤体体积,评价瘤体生长情况,第15天留取小鼠血浆、瘤体组织。选取模型对照组、顺铂组、顺铂+益肺散结高剂量组的血浆,提取血浆外泌体,采用二代测序技术检测分析各组间血浆外泌体微小核糖核酸(miRNA)的表达差异,并通过主成分分析、生物功能富集分析、miRNA-靶基因调控网络分析探究益肺散结丸的潜在作用机制。采用实时荧光定量PCR检测肿瘤组织中miRNA-615-3p的表达,利用Kaplan-Meier plotter (kmplot. com)数据库分析miRNA-615-3p与肺癌总生存期的关系。结果与模型对照组比较,顺铂组第10天、顺铂+益肺散结低剂量组以及顺铂+益肺散结高剂量组第7天、第10天、第14天肿瘤体积均明显缩小(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,顺铂+益肺散结低剂量组以及顺铂+益肺散结高剂量组第10天、第14天肿瘤体积均明显缩小(P<0.05)。miRNA表达谱主成分分析表明,不同干预组间miRNA的表达有明显差异,模型对照组与顺铂组之间共有21个差异表达的miRNA,模型对照组与顺铂+益肺散结高剂量组之间共有50个差异表达的miRNA,顺铂组与顺铂+益肺散结高剂量组之间共有6个差异表达的miRNA。生物功能富集分析表明,差异表达的miRNA主要参与调控与细胞增殖、分化、自噬等生物活动相关的信号通路。miRNA-靶基因调控网络展示了被靶次数前20的基因,其中既包含已被证实的与肺癌相关miRNA及基因,亦存在值得深入挖掘功能的miRNA。与模型对照组比较,顺铂组及顺铂+益肺散结高剂量组瘤体组织中miRNA-615-3p的相对表达量明显下降(P<0.05或P<0.01)。miRNA-615-3p的表达水平与肺癌患者的总生存呈负相关(P<0.05)。结论顺铂联合益肺散结丸可有效抑制Lewis肺癌肿瘤增殖,其抑瘤效果与调节多种miRNA,特别是下调miRNA-615-3p的表达有关。

关键词：肺癌微小核糖核酸益肺散结丸顺铂 miRNA-615-3p

盐酸小檗胺通过调控自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路改善索拉非尼耐药的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 78-88页

作者：吴泽明黄欣慧彭琴肖灵黄梓源林翊雅谭宇蕙广州中医药大学基础医学院广州510006 同济大学生命科学与技术学院上海200092 广州中医药大学附属宝安中医院广东深圳518133

目的:研究盐酸小檗胺改善肝癌细胞对索拉非尼耐药的作用及相关机制。方法:以1.25μmol·L^(-1)索拉非尼为起始浓度采用药物浓度递增法筛选索拉非尼耐药细胞株SMMC-7721/S,SMMC-7721和SMMC-7721/S分别设置0、2.5、5、10、15、20μmol·L^... 详细信息

目的:研究盐酸小檗胺改善肝癌细胞对索拉非尼耐药的作用及相关机制。方法:以1.25μmol·L^(-1)索拉非尼为起始浓度采用药物浓度递增法筛选索拉非尼耐药细胞株SMMC-7721/S,SMMC-7721和SMMC-7721/S分别设置0、2.5、5、10、15、20μmol·L^(-1)索拉菲尼给药组,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)实验检测半抑制浓度(IC50)、计算耐药指数(RI);采用蛋白免疫印迹法(Western blot)比较SMMC-7721和SMMC-7721/S细胞自噬和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关蛋白表达差异。设置5μmol·L^(-1)盐酸小檗胺与2.5、5、10μmol·L^(-1)索拉非尼单独和联合组,进行CCK-8实验检测各组对肝癌细胞SMMC-7721/S细胞生长的影响;分别设置5μmol·L^(-1)小檗胺与5μmol·L^(-1)索拉非尼单独和联合组,进行平板克隆形成实验检测各组对SMMC-7721和SMMC-7721/S细胞增殖的影响;分别设置5μmol·L^(-1)盐酸小檗胺、0.1μmol·L^(-1)自噬抑制剂巴氟洛霉素(Baf)组,进行免疫荧光实验检测溶酶体酸化标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)及LysoTracker探针检测SMMC-7721细胞溶酶体酸化情况;设置盐酸小檗胺5μmol·L^(-1)、Baf 0.1μmol·L^(-1)设置0、2.5、5、10μmol·L^(-1)盐酸小檗胺组及0.1μmol·L^(-1)Baf组,进行Western blot实验比较各组对SMMC-7721细胞自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果:CCK-8实验表明索拉非尼对SMMC-7721/S细胞24 h的IC50为9.56 mol·L^(-1)(P1.15),盐酸小檗胺能够改善肝癌细胞对索拉非尼的部分耐药性。免疫荧光检测LC3结果显示,盐酸小檗胺和自噬抑制剂Baf显著增加了SMMC-7721中自噬小体LC3的数量,LysoTracker探针检测结果显示,盐酸小檗胺显著抑制SMMC-7721细胞溶酶体酸性程度(P<0.01),表明细胞自噬水平被抑制。Western blot实验显示,在SMMC-7721细胞中,盐酸小檗胺能够进一步增强索拉非尼下调p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平的作用,对Akt蛋白无明显改变;在SMMC-7721/S细胞中,盐酸小檗胺能够抑制索拉非尼诱导的p-mTOR蛋白表达相对于野生株的增加,共同降低p-Akt蛋白,对Akt总蛋白无明显影响。结论:盐酸小檗胺能够改善肝癌细胞对索拉非尼的耐药性,机制可能与其抑制细胞自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

关键词：盐酸小檗胺索拉非尼耐药自噬磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR) 肝癌

柴胡疏肝颗粒调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路改善四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤

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中国药学杂志 2024年第8期59卷 703-712页

作者：黄海锋庞晓妍戴卫波黄曼婷曾聪彦广州中医药大学附属中山中医院广东中山528400 广东江门中医药职业学院广东江门529000

目的探讨柴胡疏肝颗粒对小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。方法将柴胡疏肝颗粒按低、中、高(生药量:11.4、22.8、45.6 g·kg^(-1))3个剂量连续给药7 d,末次给药2 h后,除正常对照组外,用体积分数0.2%四氯化碳(tetrachloromethane,CC... 详细信息

目的探讨柴胡疏肝颗粒对小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。方法将柴胡疏肝颗粒按低、中、高(生药量:11.4、22.8、45.6 g·kg^(-1))3个剂量连续给药7 d,末次给药2 h后,除正常对照组外,用体积分数0.2%四氯化碳(tetrachloromethane,CCl4)溶液造模,12 h后,收集小鼠的血清和肝组织,制作肝组织病理切片。测定血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α),以及活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量;转录组学获得肝脏组织差异表达mRNA并富集与差异表达基因显著相关的通路;代谢组学研究肝组织中内源性代谢物变化并进行通路富集分析;免疫组织化学法及Western blot法检测肝组织中c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MARK)、Kelch样ECH关联蛋白1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达及定位情况。结果与模型组比较,柴胡疏肝颗粒能显著降低小鼠血清ALT、AST和肝组织MDA、IL-6、TNF-α及ROS水平(P<0.05或P<0.01),显著升高肝组织中SOD水平(P<0.01),明显减轻肝细胞坏死及炎性浸润程度;上调Nqo1基因,上调醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]表达;下调Ccl2基因,下调单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)表达,且代谢物中有机酸类显著下调,糖类显著上调。肝组织中JNK、p38 MARK、Keap1表达均显著下调(P<0.05或P<0.01),Nrf2、HO-1表达显著上调(P<0.01)。结论柴胡疏肝颗粒可能通过激活Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用。

关键词：柴胡疏肝颗粒急性肝损伤氧化应激 Kelch样ECH关联蛋白-核因子E1/血红素加氧酶-1信号通路

基于性别差异探析傅青主辨治“怒”“郁”“狂”“惊”思路

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辽宁中医杂志 2024年

作者：侯佳睿曹晓静黄旭春宋雷王小云广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二临床附属医院

全球心理及精神类疾病的发病率呈逐年增高的趋势，是现代医学的重点难点问题。在临床诊治中，天地乾坤，自分阴阳，氤氲造化则生男女，故男女两者辨治有差。傅青主先生著有《傅青主男科》和《傅青主女科》两书，认为男女有别，当分而治... 详细信息

全球心理及精神类疾病的发病率呈逐年增高的趋势，是现代医学的重点难点问题。在临床诊治中，天地乾坤，自分阴阳，氤氲造化则生男女，故男女两者辨治有差。傅青主先生著有《傅青主男科》和《傅青主女科》两书，认为男女有别，当分而治之，且其深谙情志病治疗之道，有着“善疏气机，善调脏腑”的特点。故文章基于男女生理病理之差异，来探讨傅青主于怒病、郁证、狂病、惊病的辨证方法及相关的用药特点，以期对临床诊治男、女情志病有所裨益。

关键词：男性女性情志病傅青主辨治思路

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人迎寸口脉针法在儿科疾病的思考及应用

中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1835-1839页

作者：董秀兰袁靖沣刘滨赵楷波苏浩东庄礼兴广州中医药大学第一附属医院广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第四临床医学院深圳518033 广州中医药大学深圳临床医学院深圳518116 广州中医药大学第一附属医院岭南针灸康复研究所广州510405

《黄帝内经》所载人迎寸口脉针法,是通过辨别阴阳虚实、经脉脏腑病变,用针刺补虚泻实的手法,以达到阴阳调和、邪祛正安的作用。通过对《黄帝内经》人迎寸口脉针法的操作方法和思路进行解读,有如下几个方面值得我们去思考:①人迎寸口脉... 详细信息

《黄帝内经》所载人迎寸口脉针法,是通过辨别阴阳虚实、经脉脏腑病变,用针刺补虚泻实的手法,以达到阴阳调和、邪祛正安的作用。通过对《黄帝内经》人迎寸口脉针法的操作方法和思路进行解读,有如下几个方面值得我们去思考:①人迎寸口脉的具体定位;②“盛”的界定;③“躁”的判定;④双侧脉象对比不一致时的补泻;⑤治疗时取穴方法;⑥补泻手法及治疗时间;⑦人迎寸口脉针法的禁忌。因小儿脏器轻灵,随拨即应,人迎寸口脉针刺法对儿科常见病、疑难病及急危重症的临床效果令人满意。

关键词：人迎寸口脉针法儿科《黄帝内经》调和阴阳守神

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藤石松的生物碱类成分研究

中草药 2024年第5期55卷 1460-1465页

作者：陈烨琪潘亚茹卓越张一帆顾继洪广州中医药大学科技创新中心广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广东省中医临床研究院广东广州510405

目的研究藤石松Lycopodiastrum casuarinoides的生物碱类成分。方法利用多种色谱方法对藤石松总生物碱部位进行分离纯化。通过多种波谱技术以及单晶X-射线衍射鉴定化合物的结构。结果从藤石松全株植物中分离到11个化合物,分别鉴定为6-羟... 详细信息

目的研究藤石松Lycopodiastrum casuarinoides的生物碱类成分。方法利用多种色谱方法对藤石松总生物碱部位进行分离纯化。通过多种波谱技术以及单晶X-射线衍射鉴定化合物的结构。结果从藤石松全株植物中分离到11个化合物,分别鉴定为6-羟基-β-玉柏碱(1)、去-N-甲基-β-玉柏碱(2)、casuarine B(3)、石杉碱乙(4)、casuarinine B(5)、β-玉柏碱(6)、蛇足石杉碱(7)、N-demethylhuperzinine(8)、石杉碱丙(9)、8,15-dihydrohuperzinine(10)、casuarinine I(11)。结论化合物1为新的石松碱类化合物。

关键词：藤石松石松碱 6-羟基-β-玉柏碱去-N-甲基-β-玉柏碱石杉碱乙蛇足石杉碱