检索结果-南通市图书馆

2015年9月-2016年9月广州中医药大学附属骨伤科医院骨伤科门诊中药饮片处方药物剂量调查分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中医药信息杂志 2018年第1期25卷 121-123页

作者：袁德俊陈诗敏周英敏广州中医药大学附属骨伤科医院广东广州510240

目的统计分析广州中医药大学附属骨伤科医院(以下简称"本院")骨伤科门诊中药超量使用情况,为骨伤科临床合理使用中药提供参考。方法随机抽取本院2015年9月-2016年9月骨伤科门诊处方1200张,以2015年版《中华人民共和国药典》和新世纪第... 详细信息

目的统计分析广州中医药大学附属骨伤科医院(以下简称"本院")骨伤科门诊中药超量使用情况,为骨伤科临床合理使用中药提供参考。方法随机抽取本院2015年9月-2016年9月骨伤科门诊处方1200张,以2015年版《中华人民共和国药典》和新世纪第二版教材《中药学》为参考依据,对使用量排名前30位中药饮片进行回顾性分析。结果使用频率最高的前30位品种100%超量使用,其中超量50%以上的品种有11个;95.93%的处方均在18味以内。结论本院骨伤科门诊中药处方超量使用现象普遍,造成中药资源浪费,增加患者经济负担。

关键词：骨伤科中药饮片临床药学

过表达HDAC1通过诱导SP1去乙酰化改善类固醇诱导的小鼠骨细胞凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2025年

作者：张申尧卢敏邝高艳许晓彤付俊曾楚然湖南中医药大学湖南中医药大学第二附属医院骨伤科湖南中医药大学第一附属医院骨伤科

目的探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死（SONFH）的作用机制。方法将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素（TSA）组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HDAC1组、oe-NC组、oe-HDAC1组... 详细信息

目的探究组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)通过特异性蛋白1(SP1)调控激素性股骨头坏死（SONFH）的作用机制。方法将小鼠骨样细胞MLY-O4分为对照组、曲古抑菌素（TSA）组、类固醇组、类固醇+oe-NC组、类固醇+oe-HDAC1组、oe-NC组、oe-HDAC1组。对照组细胞正常培养，不接受试剂诱导及细胞转染；TSA组细胞接受400 nmol/L TSA处理24 h；类固醇组接受1μmol/L地塞米松诱导24 h；类固醇+oe-NC组或类固醇+oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染，通过LipoHigh脂质体高效转染试剂行细胞转染，转染48 h后进行类固醇诱导。oe-NC组或oe-HDAC1组接受oe-NC或oe-HDAC1转染。观察各组细胞在HDAC、HDAC1蛋白、SP1蛋白、凋亡相关蛋白（裂解Capase 3及Bax）、乙酰化水平、细胞增殖、细胞凋亡方面的差异，采用通过免疫共沉淀验证HDAC1与SP1的相互作用。结果类固醇组与对照组相比细胞凋亡率升高，HDAC1下调，裂解Caspase-3及Bax上调，细胞增殖显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。TSA组、类固醇组与对照组相比，乙酰化水平显著升高，SP1蛋白显著上调，类固醇+oc-HDAC1组与类固醇+oe-NC组相比，乙酰化水平降低，HDAC1上调，SP1、裂解Caspase-3、Bax下调，细胞增殖增强，细胞凋亡降低（P<0.05）。oe-NC组及oe-HDAC1组Input样本存在HDAC1蛋白条带，表明两组样本均可表达HDAC1，两组IgG抗体上并未检测出HDAC1蛋白，而两组SP1抗体上均存在HDAC1，表明HDAC1可与SP1相互作用。结论 HDAC1通过介导去乙酰化修饰抑制SP1表达，从而抑制类固醇诱导的骨细胞凋亡，并促进骨细胞增殖。

关键词：激素性股骨头坏死 SP1 HDAC1 去乙酰化

基于国家食品药品监督管理总局药品审评中心公示平台的生物制品临床试验现状及药物靶点研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国新药与临床杂志 2025年

作者：张震坡宿凌王宇婷马麟暨南大学药学院广州中医药大学第二附属医院药学部

目的分析我国生物制品药物研发情况，为我国生物制品的研发和发展方向提供建议与参考。方法收集2013—2022年在我国国家食品药品监督管理总局药品审评中心（CDE）信息公示平台中登记的生物制品类药物的临床试验信息，从临床试验情况... 详细信息

目的分析我国生物制品药物研发情况，为我国生物制品的研发和发展方向提供建议与参考。方法收集2013—2022年在我国国家食品药品监督管理总局药品审评中心（CDE）信息公示平台中登记的生物制品类药物的临床试验信息，从临床试验情况、涉及靶点和适应证领域分布等方面对我国生物制品药物临床试验的现状进行分析。结果共纳入3 863项生物制品临床试验，2013—2022年，我国各年登记的生物制品临床试验数量总体呈上升趋势，试验申请主体以国内申请人为主（83.92%）；已完成的临床试验有979项（占25.34%），I 期临床试验占比最高（37.77%）；适应证主要集中在肿瘤领域（44.42%）；靶点主要集中在PD-1（程序性死亡蛋白-1）、PD-L1（程序性死亡配体-1）、VEGF/VEGFR（血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体）等；靶点丰度为6.90%；单靶点和多靶点生物制品临床试验分别有2 474、354项；联合开发的靶点以PD-1和CTLA-4（细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4）、TGF-β（转化生长因子-β）和PD-L1等为主。结论我国生物制品临床试验发展态势蓬勃，但生物制品研发靶点和适应证同质化严重、靶点丰度低，临床试验效率有待提高。

关键词：生物制品临床试验适应证靶点趋势

血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

芒柄花素抑制脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5328-5334页

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞... 详细信息

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词：芒柄花素髓核间充质干细胞炎症椎间盘退变核因子κB

不同来源抗氧化剂与骨关节炎：基于欧洲人群全基因组的关联分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年

作者：刘小武刘金萍吴婷贺宪蔡坚雄广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学番禺区中医院广州中医药大学第二附属医院

背景：目前大量观察性研究表明膳食抗氧化剂摄入及体内循环抗氧化剂水平与骨关节炎有关，但这些关联的因果关系尚无充分的阐明。因此，文章拟利用公开的全基因组关联数据，从遗传层面探究膳食抗氧化剂的摄入与体内循环抗氧化剂水平与骨... 详细信息

背景：目前大量观察性研究表明膳食抗氧化剂摄入及体内循环抗氧化剂水平与骨关节炎有关，但这些关联的因果关系尚无充分的阐明。因此，文章拟利用公开的全基因组关联数据，从遗传层面探究膳食抗氧化剂的摄入与体内循环抗氧化剂水平与骨关节炎的因果关联，为骨关节炎的防治提供证据参考。目的：运用孟德尔随机化方法，评估常见的膳食抗氧化剂(维生素A、C、E和胡萝卜素)与循环抗氧化剂(谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、抗坏血酸、α-生育酚、γ-生育酚、白蛋白、尿酸、胆红素、锌和硒)与骨关节炎潜在的因果关联。方法：采用公开发表的4种膳食抗氧化剂与12种循环抗氧化剂的全基因组关联分析数据作为暴露因素，以骨关节炎遗传学联盟数据作为结局(骨关节炎77 052例和健康人群378 169例)。运用逆方差加权法、MR-Egger回归法及加权中位数法评估两者因果效应。采用水平多效性检验与敏感性分析评估结论的稳定性与可信度。结果与结论：(1)结果显示膳食维生素C(OR=0.83,95%CI:0.71-0.96,P=0.015)摄入与膝骨关节炎呈负向因果关系，维生素E摄入与膝骨关节炎(OR=1.20,95%CI:1.05-1.34,P=0.004)、膝或髋骨关节炎(OR=1.15,95%CI:1.03-1.27,P=0.008)均呈正向因果关系。(2)循环抗氧化剂中，白蛋白水平与膝骨关节炎(OR=0.94,95%CI:0.91-0.97,P=0.001)、髋骨关节炎(OR=0.95,95%CI:0.91-0.99,P=0.03)、膝或髋骨关节炎(OR=0.95,95%CI:0.92-0.98,P=0.01)均呈负向因果关系。尿酸与膝骨关节炎(OR=1.10,95%CI:1.03-1.17,P=0.003)呈正向因果关系。(3)敏感性分析提示结果稳定，且未检测到潜在的水平多效性。(4)基于欧洲人群全基因组数据发现维生素C摄入可降低膝骨关节炎的风险，血清白蛋白与膝和髋关节炎的风险降低相关，而摄入维生素E和血清尿酸与膝关节炎的风险增加相关。(5)上述结论为骨关节炎的公共健康教育和营养干预提供了证据，并且提示血清白蛋白可能成为骨关节炎风险评估的生物标志物。文章强调了特定抗氧化剂摄入在骨关节炎预防中的重要性，为中国居民的营养指南和公共卫生政策提供了参考依据，为关节炎的生物标志物研究提供了新的线索，有助于开发针对中国人群的早期诊断和风险评估方法。

关键词：抗氧化物膝骨关节炎髋骨关节炎孟德尔随机化逆方差加权法全基因组关联研究因果关系单核苷酸多态性

怀珍养肝胶囊对碘乙酸钠致膝骨关节炎模型小鼠的关节保护效应

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年

作者：孙海亮庞坚史万忠石瑛上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市中医药研究院骨伤科研究所

背景：前期研究显示怀珍养肝胶囊有较好的抗炎、镇痛和抗氧化等作用，但具体药效产生机制和对膝骨关节炎的治疗效果尚未做详细阐述。目的：评价怀珍养肝胶囊的抗炎镇痛作用及其对膝骨关节炎模型小鼠的关节保护作用。方法：(1)实验一：... 详细信息

背景：前期研究显示怀珍养肝胶囊有较好的抗炎、镇痛和抗氧化等作用，但具体药效产生机制和对膝骨关节炎的治疗效果尚未做详细阐述。目的：评价怀珍养肝胶囊的抗炎镇痛作用及其对膝骨关节炎模型小鼠的关节保护作用。方法：(1)实验一：以二甲苯致小鼠耳郭肿胀实验评价怀珍养肝胶囊对小鼠的抗炎作用，ELISA法检测耳郭组织中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平，苏木精-伊红染色观察抗炎小鼠耳郭组织形态。(2)实验二：以小鼠热板镇痛实验评价怀珍养肝胶囊对小鼠的镇痛作用，ELISA法检测小鼠血清中5-羟色胺、前列腺素E2、缓激肽和β内啡肽水平。(3)实验三：以注射碘乙酸钠膝骨关节炎模型小鼠研究怀珍养肝胶囊对膝骨关节炎的治疗作用，采用步幅分析评价镇痛效果，总抗氧化能力试剂盒检测血清中总抗氧化能力，Micro-CT扫描分析骨微结构及骨体积分数，苏木精-伊红与番红O-固绿染色观察关节软骨组织形态，改良Mankin’s评分评估关节软骨损伤程度，免疫组织化学染色检测关节软骨中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和Ⅱ型胶原的表达。结果与结论：(1)实验一：与空白组比较，怀珍养肝胶囊能显著抑制小鼠耳郭肿胀度(P <0.05)，降低耳郭组织肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平(P <0.05);(2)实验二：与空白组比较，怀珍养肝胶囊中、高剂量组能明显提高痛阈值(P <0.05)，降低血清中5-羟色胺、前列腺素E2、缓激肽水平(P <0.05)，升高β内啡肽水平(P <0.05);(3)实验三：与模型组相比，怀珍养肝胶囊组小鼠的步幅明显增大(P <0.05)，血清总抗氧化能力显著升高(P <0.05),Micro-CT扫描显示软骨下骨破坏得到抑制，骨体积分数明显增加(P <0.05)，苏木精-伊红染色与番红O-固绿染色观察到关节软骨表面较平整，改良Mankin’s评分明显下降(P <0.05)，免疫组织化学染色观察到Ⅱ型胶原表达增加(P <0.05)，白细胞介素6和肿瘤坏死因子α表达减少(P <0.05);(4)整体实验结果表明，怀珍养肝胶囊具有抗炎、镇痛和关节保护效应，可减轻膝骨关节炎模型小鼠疼痛，增强机体抗氧化能力，改善软骨组织形态和软骨下骨微结构，抑制骨关节炎进展。

关键词：怀珍养肝胶囊河蚌多糖提取物抗炎镇痛膝骨关节炎软骨软骨下骨抗氧化 Micro-CT 工程化组织构建

扶正通络解毒方对慢性萎缩性胃炎“炎-癌”转化小鼠的作用及机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中药新药与临床药理 2025年

作者：杨泽虹麦紫涵陈彦彤江晓涛安金琪阮舒琪曾颖凤文艺李培武刘凤斌广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院广州中医药大学博士后科研流动站广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学继续教育学院梅州市中医医院广州中医药大学第一附属医院白云医院

目的探讨扶正通络解毒方（FTJF）干预慢性萎缩性胃炎（CAG）“炎-癌”转化的作用机制。方法（1）通过检索TCMSP、HERB数据库检索、筛选出FTJF方中各中药的活性成分及其对应的作用靶点；通过GeneCards、OMIM、Drugbank、TTD和DisDeNet... 详细信息

目的探讨扶正通络解毒方（FTJF）干预慢性萎缩性胃炎（CAG）“炎-癌”转化的作用机制。方法（1）通过检索TCMSP、HERB数据库检索、筛选出FTJF方中各中药的活性成分及其对应的作用靶点；通过GeneCards、OMIM、Drugbank、TTD和DisDeNet数据库检索、筛选获得CAG“炎-癌”转化相关疾病靶点；使用Venny 2.1在线平台对FTJF活性成分作用靶点与CAG“炎-癌”转化疾病靶点取交集，获得FTJF干预CAG“炎-癌”转化的潜在作用靶点。通过Cytoscape 3.9.1软件构建“药物-活性成分-靶点”网络，并筛选出核心活性成分；通过STRING数据库进行潜在作用靶点蛋白互作（PPI）网络分析，筛选核心靶点；通过DAVID数据库对核潜在作用靶点进行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。（2）采用N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）化学诱导法复制CAG “炎-癌”转化小鼠模型。将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及FTJF低、中、高剂量组(生药量9.56、19.11、38.22 g·kg-1)，每组10只，灌胃给药，每日1次，持续8周。采用苏木精-伊红（HE）染色法及阿利新蓝/过碘酸雪夫（AB/PAS）染色法观察胃黏膜组织病理变化；ELISA法检测血清胃功能激素胃蛋白酶原I（PGⅠ）、胃蛋白酶原II（PGⅡ）、胃泌素17（G-17）和炎性因子白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（L-1β）的水平；q-PCR法检测胃黏膜组织肿瘤蛋白p53（TP53）、髓细胞增生原癌基因（MYC）、表皮生长因子受体（EGFR）基因表达水平。结果（1）共筛选得到199种活性成分，795个作用靶点，2 074个疾病相关靶点，FTJF干预CAG“炎-癌”转化的307个潜在作用靶点。分析得到槲皮素、黄酮、芹菜素、木犀草素、熊果酸等核心活性成分；TP53、AKT1、GAPDH、MYC、EGFR、VEGFA、TNF、JUN、CASP3、INS等核心靶点；KEGG通路富集分析主要涉及癌症通路、乙型肝炎、PI3K /Akt信号通路等。（2）与空白组比较，模型组小鼠胃黏膜结构严重破坏，细胞排列紊乱，可见大量炎性细胞浸润，细胞明显空泡样变，腺腔形成大小不等的黏液湖，有分泌酸性黏液的肠化生腺体形成；部分黏膜呈锯齿样或U型管样，两个或多个腺腔单层上皮变为多层无规则排列、无管腔结构的细胞团，表现出组织异型性；血清PGⅠ水平显著降低（P＜0.001），PGⅡ、G-17、IL-6、TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P＜0.001）；胃黏膜组织TP53 mRNA表达显著下调（P＜0.001），MYC、EGFR mRNA表达显著上调（P＜0.05，P＜0.01）。与模型组比较，FTJF各剂量组小鼠胃黏膜组织细胞形态异常情况均有所好转，炎性浸润区域减少，空泡样变、黏液湖及组织异型性减少；血清PGI水平显著升高（P＜0.05，P＜0.001），PGⅡ、IL-6、TNF-α水平均显著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）；胃黏膜组织TP53 mRNA表达显著上调（P＜0.05，P＜0.01），MYC、EGFR mRNA表达明显下调（P＜0.05，P＜0.01）。FTJF中、高剂量组的血清G-17、IL-1β水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。结论 FTJF可能通过槲皮素、黄酮、芹菜素等多种活性成分，调节胃功能激素分泌水平、减轻炎症反应、下调癌症信号通路，发挥干预CAG “炎-癌”转化的作用。

关键词：扶正通络解毒方慢性萎缩性胃炎 “炎-癌”转化胃功能激素炎症反应癌症通路小鼠

雌激素受体α激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进成骨细胞的增殖与分化

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2025年

作者：杨锋龙欢杨冯春张桂鑫姜涛陈庆真邵敏广州中医药大学第三附属医院广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学广东省第二中医院

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白... 详细信息

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白激酶的分子机制及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法：(1)将传代的MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞分3组：空白对照组、mock组(转染pCDNA3.1对照质粒)、雌激素受体α组(转染pCDNA3.1-雌激素受体α过表达质粒)，RT-qPCR和Western blot法检测肝激酶B1、CaMKKβ和腺苷酸活化蛋白激酶α1 mRNA、蛋白及磷酸化水平。(2)ChIP-qPCR证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子互作；双荧光素酶实验证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子区域互作激活其转录表达。(3)细胞分3组：mock+shNC组、雌激素受体α+shNC组、雌激素受体α+shLKB1组，采用Western blot检测细胞中肝激酶B1、磷酸化肝激酶B1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α1蛋白的表达水平变化。(4)细胞分4组：mock组、雌激素受体α组、雌激素受体α+5μmol/L Compound C(腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂)组、雌激素受体α+10μmol/L Compound C组，Western blot法检测腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关蛋白和成骨分化相关蛋白的表达。细胞转染24 h后给予成骨诱导14 d，检测各组细胞碱性磷酸酶染色及活性情况。成骨诱导21d采用茜素红染色检测矿化结节形成情况。(5)按分组转染及不同浓度腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂预处理，通过CCK8检测细胞活力。结果与结论：(1)雌激素受体α能激活MC3T3-E1细胞中腺苷酸活化蛋白激酶信号通路；(2)雌激素受体α可促进肝激酶B1转录介导腺苷酸活化蛋白激酶信号通路激活；(3)雌激素受体α通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖分化，腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂干预下腺苷酸活化蛋白激酶α1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α、骨保护素、骨桥蛋白、Runx2蛋白表达下调，成骨细胞活力下降；(4)结果说明，雌激素受体α可通过肝激酶B1启动子激活腺苷酸活化蛋白激酶通路，促进成骨细胞增殖和成骨分化，起到防治骨质疏松症的作用。

关键词：绝经后骨质疏松症雌激素受体α过表达 AMPK 信号通路肝激酶B1 工程化组织构建