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miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用及补肾健脾活血方的影响

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中国中药杂志 2024年

作者：陈桐莹付赛李小韵刘树华杨贻富杨东升曾韵杰李扬博罗丹黄宏兴万雷广州中医药大学广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科学实验室广州中医药大学第二附属医院广州中医药大学第三附属医院

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病，补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机，以补肾健脾活血为法，对治疗OP有显著效果，微核糖核酸（microRNA，miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1（B-cell lymphoma-2-lik... 详细信息

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病，补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机，以补肾健脾活血为法，对治疗OP有显著效果，微核糖核酸（microRNA，miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1（B-cell lymphoma-2-like protein 1，BCL2L1）与骨细胞代谢密切相关，故该研究采用双荧光素酶法、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）法检测miR-140-5p与BCL2L1的结合情况；沉默或过表达miR-140-5p后，流式检测、蛋白免疫印迹（Western blot）观察人胎成骨细胞（human fetal osteoblast cell line1.19，HFOB1.19）凋亡与自噬的发生与成骨功能；大鼠灌胃补肾健脾活血方后制备含药血清，采用不同浓度的补肾健脾活血方含药血清分别干预含或不含miR-140-5p micmi的HFOB1.19，观察各组细胞的成骨蛋白表达，研究miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用，并观察补肾健脾活血方对其的影响。研究发现，双荧光素酶检测显示miR-140-5p与BCL2L1结合；流式检测、Western blot检测结果显示miR-140-5p促进HFOB1.19细胞凋亡且miR-140-5p抑制HFOB1.19细胞自噬；高、中、低剂量补肾健脾活血方含药血清干预HFOB1.19后，与miR-140-5p NC组对比，miR-140-5p micmic组的成骨蛋白骨钙蛋白（osteocalcin，OCN）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2，RUNX2)、转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1，TGF-β1）表达下降，而高剂量干预下的micmic组骨形成蛋白2（bone morphogenetic protein 2，BMP2）表达无明显差别。故miR-140-5p/BCL2L1可促进HFOB1.19凋亡与抑制自噬的发生，补肾健脾活血方可通过BMP2影响miR-140-5p的抑成骨作用。

关键词：骨质疏松症补肾健脾活血方 miR-140-5p BCL2L1 凋亡自噬

臀肌腱炎、原发性髋关节病可能导致髂胫束综合征—一项孟德尔随机化研究

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南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1821-1830页

作者：姚辰李文佳庞瑞明周继红广州中医药大学附属宝安中医院骨伤科一区广东深圳518000 广州中医药大学附属宝安中医院呼吸与危重症学科广东深圳518000

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-... 详细信息

目的利用孟德尔随机化方法,分析臀肌腱炎、原发性髋关节病与髂胫束综合征发生的潜在因果关系。方法利用已知臀肌腱炎、原发性髋关节病及髂胫束综合征的GWAS数据,筛选出高相关性单核苷酸多态性(SNPs),采用随机效应逆方差加权法(IVW)、MR-Egger回归和加权中位数法进行MR分析,判断臀肌腱炎及原发性髋关节病和髂胫束综合征是否存在因果关系,并通过异质性检验、多效性检验及敏感性分析、临床数据验证分析结果的可靠性。结果臀肌腱炎与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.32(1.03~1.68),P=0.026]。原发性髋关节病与髂胫束综合征呈显著正相关[IVW:OR(95%CI)=1.40(1.06~1.84),P=0.017]。结论臀肌腱炎及原发性髋关节病可能增加髂胫束综合征的发病风险。

关键词：臀肌腱炎原发性髋关节病髂胫束综合征孟德尔随机化

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裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制

中国药理学通报 2024年第4期40卷 670-678页

作者：刘伟萍陈建芬安金琪罗艺刘凤斌广州中医药大学第一附属医院脾胃病科广东广州510405 广州中医药大学博士后科研流动站广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广东燕岭医院中医骨伤科广东广州510507 粤北人民医院中医科广东韶关512000 广州中医药大学第一附属医院白云分院内一科广东广州510000

目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。

关键词：裙带菜多糖肝细胞癌增殖自噬凋亡侵袭迁移上皮间质转化基质金属蛋白酶

双层探测器光谱CT多参数评估直肠腺癌病理肿瘤分期的价值

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中国医学影像学杂志 2024年第1期32卷 81-86页

作者：陈维翠周思繁郑吴熙张汉良卢健烨林韵颖黄伟康陈加良广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院)放射科广东广州510120

目的探讨双层探测器光谱CT(DLSCT)术前评估直肠腺癌(RA)病理肿瘤(T)分期的价值。资料与方法回顾性收集2021年5月—2022年3月广东省中医院术前1周内接受DLSCT平扫及双期增强扫描的78例RA患者资料。以病理T(pT)分期为“金标准”,计算基于D... 详细信息

目的探讨双层探测器光谱CT(DLSCT)术前评估直肠腺癌(RA)病理肿瘤(T)分期的价值。资料与方法回顾性收集2021年5月—2022年3月广东省中医院术前1周内接受DLSCT平扫及双期增强扫描的78例RA患者资料。以病理T(pT)分期为“金标准”,计算基于DLSCT多参数图和常规120 kVp混合能量图像术前判断RA T分期的准确度。测量肿瘤平扫期的有效原子序数(Z-eff)、动脉期(AP)及静脉期(VP)的碘浓度(IC),并计算双期增强标准化碘浓度(NIC)值。比较Z-eff、NICAP及NICVP在pT1~2、pT3及pT4期间的差异,并评估以上参数与pT分期的相关性与诊断效能。结果DLSCT多参数图术前诊断RA pT分期的总准确度(88.46%比67.95%;χ^(2)=9.628,P=0.002),pT1~2期(80.00%比40.00%;χ^(2)=6.667,P=0.01)及p T3期(88.10%比69.05%;χ^(2)=4.525,P=0.033)的准确度均高于120 kVp混合能量图像。Z-eff、NICAP及NICVP值在不同pT分期中差异有统计学意义(F=6.456、11.029、12.698,P均<0.05),并与pT分期呈正相关(r=0.371、0.367、0.363,P均<0.01)。Z-eff、NICAP及NICVP值术前诊断pT3~4期RA的曲线下面积分别为0.77、0.71、0.74。结论DLSCT多参数图能提高RA术前T分期的准确度,平扫期Z-eff及双期增强NIC值有助于区分pT1~2期及pT3~4期RA。

关键词：直肠肿瘤体层摄影术 X线计算机光谱CT T分期

血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

芒柄花素抑制脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5328-5334页

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞... 详细信息

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词：芒柄花素髓核间充质干细胞炎症椎间盘退变核因子κB

强直性脊柱炎患者T淋巴细胞亚群水平变化与疾病严重程度及预后的相关性分析

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第5期45卷 769-775页

作者：陈丽珍施进兴柳晓林徐胜杰林文平莆田九十五医院福建医科大学附属第二医院福建泉州362000 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东深圳518010

目的研究强直性脊柱炎患者外周血T淋巴细胞亚群水平变化与疾病严重程度、预后的相关性,为诊断和预后提供参考。方法选取2020年1月-2023年3月收治的强直性脊柱炎患者120例作为研究组,以同期体检的健康者120例作为健康组,使用流式细胞术... 详细信息

目的研究强直性脊柱炎患者外周血T淋巴细胞亚群水平变化与疾病严重程度、预后的相关性,为诊断和预后提供参考。方法选取2020年1月-2023年3月收治的强直性脊柱炎患者120例作为研究组,以同期体检的健康者120例作为健康组,使用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)值变化,比较两组T淋巴细胞亚群差异,并分析其与患者疾病严重程度的相关性。120例强直性脊柱炎患者在治疗后均行6个月的预后随访,比较不同预后患者一般资料及T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)值变化,分析T淋巴细胞亚群对强直性脊柱炎患者预后的预测价值。结果研究组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于健康组,CD8^(+)高于健康组(P<0.05)。晚期强直性脊柱炎患者CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于早期、中期患者,CD8^(+)高于早期、中期患者(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)联合诊断强直性脊柱炎患者疾病严重程度的曲线下面积(AUC)为0.878,诊断灵敏度高于单项诊断(P<0.05)。预后不良组CD8^(+)高于预后优良组,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)值低于预后优良组(P<0.05)。Pearson检验分析结果显示,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)与强直性脊柱炎患者预后负相关(r=-0.568、-0.656,P<0.001);CD8^(+)与强直性脊柱炎患者预后正相关(r=0.623,P<0.001)。ROC曲线分析显示,CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)联合诊断强直性脊柱炎患者预后的AUC为0.910,诊断灵敏度高于单项诊断(P<0.05)。结论强直性脊柱炎患者外周血T淋巴细胞亚群水平异常,并且与疾病严重程度、预后密切相关,可作为诊断强直性脊柱炎疾病严重程度、预后的参考指标。

关键词：强直性脊柱炎 T淋巴细胞亚群疾病严重程度预后

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基于网络药理学及动物实验研究温肾宣痹汤抗骨质疏松的机制

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中国药理学通报 2024年第2期40卷 344-351页

作者：王海平袁兆丰夏天卫张超沈计荣南京中医药大学附属医院/江苏省中医院骨伤科江苏南京210029 盐城市大丰中医院骨伤科江苏盐城224100

目的应用网络药理学、分子对接及体内实验技术,预测以及验证温肾宣痹汤(wenshen xuanbi tang,WSXBT)抗骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机制。方法利用网络药理学筛选WSXBT治疗OP的关键成分及核心靶点,Metascape数据库对核心靶点进行基... 详细信息

目的应用网络药理学、分子对接及体内实验技术,预测以及验证温肾宣痹汤(wenshen xuanbi tang,WSXBT)抗骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机制。方法利用网络药理学筛选WSXBT治疗OP的关键成分及核心靶点,Metascape数据库对核心靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,AutoDockTools 1.5.7软件进行分子对接模拟关键活性成分与核心靶点的结合活性。切除大鼠双侧卵巢建立OP大鼠模型,研究WSXBT对OP大鼠的药效及验证相关靶点通路。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中OPG、PINP、RANKL水平,生物力学测试仪测定大鼠股骨生物力学,Micro-CT检测股骨骨密度,进而通过Western blot法检测PI3K和Akt的蛋白表达水平。结果筛选出WSXBT活性成分156个,涉及229个潜在作用靶点,筛选核心靶点23个,共涉及145条信号通路;分子对接结果显示,槲皮素、异补骨脂黄酮、β-谷甾醇等关键成分与PIK3R1、AKT1核心靶点均拥有良好的结合能力。体内实验结果表明,WSXBT可明显升高OP大鼠骨密度,改善OP大鼠骨组织微结构,提高大鼠股骨生物力学,增加大鼠PINP表达及OPG/RANKL比值,Western blot结果显示,WSXBT可明显升高p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值。结论WSXBT可能通过PI3K/Akt信号通路及升高OPG/RANKL比值改善绝经后OP大鼠骨密度。

关键词：网络药理学分子对接温肾宣痹汤骨质疏松 p-PI3K/PI3K

基于DR的深度学习模型预测非血管化腓骨移植术的保髋疗效

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临床放射学杂志 2024年第7期43卷 1170-1175页

作者：陈浩薛鹏席洪钟何帅孙光权刘锌杜斌南京中医药大学附属医院骨伤科 210029

目的探讨基于数字X线摄影(DR)的深度学习(DL)模型在预测非血管化腓骨移植术(NVFG)疗效中的价值。方法纳入2009年6月至2021年6月接受NVFG进行保髋的339例(432髋)股骨头坏死(ONFH)患者,以3∶1的比例划分为训练集(n=324)和测试集(n=108)。... 详细信息

目的探讨基于数字X线摄影(DR)的深度学习(DL)模型在预测非血管化腓骨移植术(NVFG)疗效中的价值。方法纳入2009年6月至2021年6月接受NVFG进行保髋的339例(432髋)股骨头坏死(ONFH)患者,以3∶1的比例划分为训练集(n=324)和测试集(n=108)。每侧髋术前均拍摄标准正位、蛙位DR且分布于同一个数据集中。根据术后2年的随访结果定义保髋成败。以ResNet-50作为骨干网络构建DL模型,在训练集中训练、优化模型,并在测试集中采用受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)、准确率(Acc)、精确率(Pre)、召回率(Rec)和F1-score进行模型的预测性能评估。结果截至2023年6月,309髋随访结果优良,保髋成功率达71.52%。联合正位、蛙位DR图像构建的模型,对NVFG疗效的预测性能最佳(P<0.05),其AUC为0.780,Acc为0.789,Pre为0.787,Rec为0.960,F1-score为0.865。基于正位DR的模型AUC为0.660,Acc为0.662,Pre为0.703、Rec为0.900、F1-score为0.790;基于蛙位DR的模型AUC为0.710,Acc为0.761,Pre为0.762,Rec为0.960,F1-score为0.850。结论基于DR的DL模型能准确预测NVFG的保髋疗效,具有一定的临床应用价值。

关键词：深度学习股骨头坏死非血管化腓骨移植精准医学数字X线摄影