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女性骨关节炎患者外周血单个核细胞基因表达谱的生物信息学分析

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西安交通大学学报（医学版） 2022年第3期43卷 373-382页

作者：杨威袁普卫杜龙龙韩清民广州中医药大学第三临床医学院广东广州510405 陕西中医药大学陕西咸阳712046 广州中医药大学第三附属医院广东广州510405

目的通过生物信息学方法分析中老年女性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者与正常人(NC)外周血单个核细胞(PBMCs)基因表达谱差异,探索血液中OA的诊疗靶点。方法从GEO数据库中下载GSE48556数据集。用R语言筛选出OA和NC之间的差异表达基因... 详细信息

目的通过生物信息学方法分析中老年女性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者与正常人(NC)外周血单个核细胞(PBMCs)基因表达谱差异,探索血液中OA的诊疗靶点。方法从GEO数据库中下载GSE48556数据集。用R语言筛选出OA和NC之间的差异表达基因。利用基因集合富集分析(GSEA)获取目的基因子集;通过DAVID对其进行GO和KEGG通路分析。用STRING和Cytoscape软件构建PPI网络,Mcode和centiscape插件进行模块分析,Cytohubba筛选出关键基因。结果GSEA分析及***0.2筛选出292个目的基因,其中上调81个,下调211个,对其进行GO富集分析主要集中在“NIK/NF-κB的调节”、“单核细胞增殖”、“凋亡信号通路的调控”、“TNF介导的信号通路”、“Wnt信号通路的调控”、“MAP激酶活性的调节”和“自噬的调节”等生物功能上;KEGG主要富集在以下4条通路:自然杀伤细胞介导的细胞毒性、TNF信号通路、MAPK信号通路和细胞凋亡。利用PPI网络及相关插件筛选出MAPK1、I L10、PTGS2、IL18、GSK3B、NFKBIA、TNFRSF1A、EGR1八个核心基因与OA炎症和细胞凋亡高度相关。结论通过生物信息学分析发现OA和NC的PBMCs基因表达差异集中在细胞凋亡和炎症反应,使其成为OA的诊疗靶点。

关键词：骨关节炎外周血单个核细胞基因集合富集分析凋亡炎症

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坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰疗效的荟萃分析

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中国现代应用药学 2020年第1期37卷 78-84页

作者：沈秋娴张璐璐林小杨梁元君刘冠彤卢如玲广州中医药大学广州510405 广州中医药大学第一附属医院三妇科广州510405

目的系统评价坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰的临床疗效,以期为临床提供循证参考。方法计算机搜索PubMed、Embase、Cochrane library、CNKI、VIP、万方数据库,收集关于坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰的随机对照试验(randomized contro... 详细信息

目的系统评价坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰的临床疗效,以期为临床提供循证参考。方法计算机搜索PubMed、Embase、Cochrane library、CNKI、VIP、万方数据库,收集关于坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs),2名研究者独立严格进行纳入研究的质量评价和资料提取,采用RevMan 5.2软件进行meta分析。结果最终纳入14个RCTs,共1380例患者。Meta分析结果显示,与对照组比较,坤泰胶囊联合克龄蒙组总有效率[OR=3.76,95%CI=(2.49,5.70),P<0.00001]、缓解临床症状(Kupperman评分)[MD=-3.95,95%CI=(-4.88,-3.03),P<0.00001]、降低血中FSH水平[MD=-8.25,95%CI=(-10.70,-5.79),P<0.00001]、提高血中E2水平[MD=14.62,95%CI=(12.05,17.19),P<0.00001]均存在明显优势,差异均有统计学意义;而在降低血中LH水平、降低不良反应发生率方面,则差异无统计学意义。结论坤泰胶囊联合克龄蒙治疗卵巢早衰具有一定疗效,但现有研究质量偏低,且数量偏少,需要更多高质量、多中心的随机双盲临床试验的进一步验证。

关键词：坤泰胶囊克龄蒙卵巢早衰荟萃分析

金丝桃苷纳米粒与骨髓间充质干细胞协同给药修复子宫内膜损伤

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1302-1311页

作者：韩瑞芳周海忆梁杏珊何斯怡关永格宋阳广州中医药大学护理学院广东广州510006 广州中医药大学第三附属医院广东广州510378

目的体外细胞实验评价金丝桃苷壳聚糖纳米粒(hyperoside/chitosan-nanoparticles,Hyp/CS-NPs,Hyp-NPs)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及作用机制;体内动物实验探讨Hyp-NPs与BMSCs协同修复大鼠子宫内膜损伤的效果。方法采用流式实验鉴定BMSCs;采用离子交联法制备Hyp-NPs,激光粒度分析仪及透射电镜进行表征评价;采用划痕实验检测Hyp-NPs对BMSCs的迁移作用;以及构建NRF2慢病毒载体,检测Hyp-NPs对BMSCs的氧化损伤模型的作用机制;动物实验将Hyp-NPs与BMSCs协同移植入子宫内膜损伤大鼠模型宫腔中,利用HE、Masson、IHC、TUNEL及ELISA实验从子宫内膜的一般病理、纤维化、干细胞募集及炎症情况,评价其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用及妊娠功能。结果成功分离培养BMSCs;成功制备Hyp-NPs;划痕实验表明Hyp-NPs可促进BMSCs迁移;通过成功构建BMSCs的慢病毒NRF2载体以及细胞氧化损伤模型,表明Hyp-NPs可通过激活NRF2调控BMSCs生物轴;动物实验表明Hyp-NPs与BMSCs协同给药可增加子宫内膜厚度及腺体数量,抗纤维化、抗凋亡及抗炎等促进干细胞归巢,恢复子宫内膜损伤大鼠的妊娠功能。结论Hyp-NPs与BMSCs协同给药可修复子宫内膜损伤。

关键词：金丝桃苷纳米粒骨髓间充质干细胞新型给药系统子宫内膜损伤抗氧化应激因子NRF2

超声分子成像检测大鼠激素性股骨头坏死整合素αvβ3并发现H亚型血管的表达

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中国超声医学杂志 2022年第10期38卷 1187-1190页

作者：闫美俊赵帅何敏聪赵萍广州中医药大学广州中医药大学第三附属医院关节骨科广州中医药大学第一附属医院超声科

目的制备iRGD靶向造影剂，USMI解读大鼠激素性股骨头坏死发展过程中新生血管内皮细胞整合素αβ的时空信息，初步探索H亚型血管的存在。方法制备iRGD靶向造影剂，检测其表征及体外成像性能。对大鼠行超声分子成像，股骨头切片行αβ、... 详细信息

目的制备iRGD靶向造影剂，USMI解读大鼠激素性股骨头坏死发展过程中新生血管内皮细胞整合素αβ的时空信息，初步探索H亚型血管的存在。方法制备iRGD靶向造影剂，检测其表征及体外成像性能。对大鼠行超声分子成像，股骨头切片行αβ、CD31、Emcn免疫荧光双染。结果 iRGD靶向造影剂制备成功。USMI检测第3周信号强度比第1周高，差异有统计学意义(P<0.05),第5周比第1、第3周高，差异有统计学意义(P<0.05),随坏死加重信号强度逐渐增强。免疫荧光双染显示整合素αβ与CD31融合，随SIONFH进展表达增多。空白组CD31和Emcn数量定位比造模5周组多。结论成功制备iRGD靶向造影剂，超声分子信号随坏死加重逐渐增强，大鼠股骨头坏死中H亚型血管的低表达有望为今后治疗股骨头坏死提供新靶点。

关键词：超声分子成像整合素αvβ3 激素性股骨头坏死 H亚型血管

Notch1信号通过调控细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解参与子宫腺肌病的发生及发展

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南方医科大学学报 2024年第8期44卷 1599-1604页

作者：温小慧黄诗雅刘学红李坤寅关永格广州中医药大学第三临床医学院广东广州510400 广州中医药大学岭南医学研究中心广东广州510400 广州中医药大学第三附属医院妇科广东广州510100

目的基于Notch1信号观察子宫腺肌病(AM)在位内膜及Ishikawa细胞系糖酵解相关因子和蛋白的表达,并探讨子宫腺肌病的发生机制。方法收集AM(AM组,n=8)及子宫肌瘤(CON组,n=8)在位子宫内膜组织,通过临床特征评估两组子宫内膜的可比性,qRT-PCR... 详细信息

目的基于Notch1信号观察子宫腺肌病(AM)在位内膜及Ishikawa细胞系糖酵解相关因子和蛋白的表达,并探讨子宫腺肌病的发生机制。方法收集AM(AM组,n=8)及子宫肌瘤(CON组,n=8)在位子宫内膜组织,通过临床特征评估两组子宫内膜的可比性,qRT-PCR和Western blot检测其Notch1信号及糖酵解相关因子和蛋白的表达,通过葡萄糖和乳酸试验检测其葡萄糖和乳酸的含量;建立过表达Notch1的Ishikawa细胞慢病毒稳转株,CCK-8检测其细胞存活率,Transwell迁移和侵袭实验检测其迁移和侵袭能力,细胞外酸化速率检测其糖酵解储备。结果与CON组子宫内膜组织比较,AM组糖类抗原125(CA125)水平明显高于CON组(P<0.01),AM患者在位子宫内膜组织Notch1、HK2和PDHA的mRNA相对表达量增加(P<0.01或P<0.05),Notch1、GLUT1、HK2、PKM和PDHA蛋白相对表达量均显著升高(P<0.01或P<0.05),葡萄糖含量显著下降、乳酸水平显著升高(P<0.01或P<0.05)。与对照病毒空载体(ov-NC)比较,过表达Notch1的Ishikawa细胞慢病毒稳转株(ov-Notch1)的细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞迁移和侵袭细胞数量显著增加(P<0.05),酵解容量和酵解储备显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论Notch1信号可能通过调控细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解过程,进而参与AM的发生发展。

关键词：子宫腺肌病子宫内膜糖酵解 Ishikawa细胞系慢病毒

Transwell小室内建立小鼠成骨-破骨细胞共培养体系

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中国骨伤 2018年第3期31卷 241-247页

作者：莫国业张顺聪李永贤郭惠智郭丹青李大星唐永超莫凌罗培杰马延怀广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广东广州510405 广州中医药大学第三附属医院骨科广东广州510100

目的 :Transwell小室内建立体外小鼠成骨-破骨细胞共培养体系,并检测体系对成骨及破骨细胞活性的影响。方法:体外培育小鼠成骨细胞MC3T3-E1和小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,RANKL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞后,于Transw... 详细信息

目的 :Transwell小室内建立体外小鼠成骨-破骨细胞共培养体系,并检测体系对成骨及破骨细胞活性的影响。方法:体外培育小鼠成骨细胞MC3T3-E1和小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,RANKL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞后,于Transwell小室内建立成骨-破骨细胞共培养体系。通过CCK-8实验、茜素红染色、TRAP染色检测细胞的成骨、破骨活性。采用PCR、Western Blot方法检测成骨细胞MC3T3-E1中OPG、ALP、RANKL、TGF-b1的基因表达以及RANKL的蛋白表达,检测破骨细胞RANK、NF-κB的基因表达和蛋白表达。结果 :小鼠成骨细胞MC3T3-E1和小鼠破骨细胞可在Transwell小室内建立共培养体系;共培养体系影响小鼠成骨细胞与破骨细胞的分化活性,镜下可见成骨细胞分化增多,破骨细胞分化稍减少。共培养体系中成骨细胞基因OPG(0.65±0.08)、ALP(0.16±0.01)较单独培养OPG(1.00±0.08)、ALP(1.01±0.16)表达下降,而TGF-b1(4.42±0.21)、RANKL(4.12±1.04)较单独培养组TGF-b1(1.00±0.10)、RANKL(1.00±0.09)表达上升;破骨细胞相关RANK(0.63±0.06)、NF-κB(0.64±0.08)基因表达较单独培养组的RANK(1.00±0.08)、NF-κB(1.00±0.09)下降,差异均有统计学意义。同时共培养组的OPG(0.43±0.05)、NF-κB(0.59±0.05)的蛋白表达较单独培养组的OPG(0.84±0.06)、NF-κb(1.13±0.03)减少;共培养组RANKL(0.54±0.03)的蛋白表达则较单独培养组的RANKL(0.31±0.03)增加,差异有统计学意义,均与基因表达变化趋势一致。结论:小鼠成骨细胞MC3T3-E1和小鼠破骨细胞可在Transwell小室内建立共培养体系,共培养体系中成骨细胞活性高于破骨细胞活性。

关键词：成骨细胞破骨细胞基因表达

针刺联合穴位贴敷对慢性阻塞性肺病急性加重期患者中医证候、生活质量以及肺功能的影响

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针刺研究 2016年第3期41卷 251-254页

作者：刘慧广州中医药大学第三附属医院内科广州510360

目的:观察针刺和穴位贴敷疗法对慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者肺功能的影响,比较其对患者中医证候、生命质量的改善作用。方法:将62例AECOPD患者分为对照组及试验组,每组31例。两组均给予常规西医治疗,试验组在此基础上配合针... 详细信息

目的:观察针刺和穴位贴敷疗法对慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者肺功能的影响,比较其对患者中医证候、生命质量的改善作用。方法:将62例AECOPD患者分为对照组及试验组,每组31例。两组均给予常规西医治疗,试验组在此基础上配合针刺列缺、尺泽、膻中等穴,并在肺俞、天突、肾俞及脾俞穴进行中药穴位贴敷,两组均每日治疗1次,共治疗15d。分别于治疗前后观察肺功能指标第1秒用力呼气容积(FEV 1%)、FEV 1与用力肺活量之比(FEV 1/FVC),评价中医证候积分、生活质量评分和临床疗效。结果:在改善AECOPD患者的肺功能、中医证候、生活质量评分及临床疗效方面,两组治疗后均较治疗前改善(P<0.05),而试验组疗效更佳(P<0.05)。结论:针刺联合穴位贴敷可提高AECOPD患者肺通气功能、生活质量,并改善急性期临床症状。

关键词：慢性阻塞性肺病针刺穴位贴敷肺功能

加味芍药甘草汤含药血清对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞迁移、侵袭和血管生成的影响

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中药药理与临床 2024年第11期40卷 16-21页

作者：温小慧刘学红黄诗雅李坤寅关永格广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学第三附属医院

目的:通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病(Adenomyosis, AM)异位子宫内膜间质细胞(EScs)的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法:原代收集、培养并分离EScs,利用细胞免疫组化法进行细胞鉴定；通过Transwell迁移、侵袭试验检... 详细信息

目的:通过体外实验探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌病(Adenomyosis, AM)异位子宫内膜间质细胞(EScs)的迁移、侵袭和血管生成过程的影响。方法:原代收集、培养并分离EScs,利用细胞免疫组化法进行细胞鉴定；通过Transwell迁移、侵袭试验检测加味芍药甘草汤对EScs迁移、侵袭能力的影响；通过RT-qPCR法检测EScs中血管生成相关因子mRNA的表达；通过免疫荧光标记细胞中微血管密度(MVD)。结果:收集、培养并分离的6例人AM原代细胞均为EScs。与空白对照组相比，1.69 g/kg加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素0.31μg/mL组的细胞迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.01),加味芍药甘草汤10%含药血清组Vegf、Hif-1α、Pdgf、Ang、Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01),MVD免疫荧光强度明显降低(P<0.05),地诺孕素0.31μg/mL组Vegf、Pdgf、Ang和Fgf1的mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01);与正常对照血清组相比，加味芍药甘草汤10%含药血清组和地诺孕素0.31μg/mL组的细胞迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05或P<0.01),加味芍药甘草汤10%含药血清组Fgf1和Fgf2的mRNA表达明显下调(P<0.05),地诺孕素0.31μg/mL组Ang的mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论:所获细胞为EScs,加味芍药甘草汤含药血清可以限制EScs的迁移、侵袭能力，抑制血管生成相关因子的表达。

关键词：加味芍药甘草汤子宫腺肌病迁移侵袭血管生成

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UC旋转平台假体置换治疗膝关节骨关节炎的疗效观察

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中国修复重建外科杂志 2015年第11期29卷 1342-1347页

作者：霍少川王海彬周驰陈群群董路珏唐宏宇郭承陈建发刘勇广州中医药大学第三临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院关节科广州中医药大学附属骨伤科医院关节科广州中医药大学第一临床学院

目的通过与固定平台假体比较,探讨采用UC旋转平台假体行人工全膝关节置换（total knee arthroplasty,TKA）治疗膝关节骨关节炎的疗效。方法回顾分析2011年1月-2012年12月因膝关节骨关节炎行TKA的98例（98膝）患者临床资料,其中56例采... 详细信息

目的通过与固定平台假体比较,探讨采用UC旋转平台假体行人工全膝关节置换（total knee arthroplasty,TKA）治疗膝关节骨关节炎的疗效。方法回顾分析2011年1月-2012年12月因膝关节骨关节炎行TKA的98例（98膝）患者临床资料,其中56例采用UC高型合度型旋转平台假体（旋转平台组）,42例采用Gemini PS后稳定型固定平台假体（固定平台组）。两组患者性别、年龄、患膝关节侧别、体质量、病程、骨关节炎分级、内外翻畸形例数及术前膝关节活动度、膝关节学会评分系统（KSS）评分、疼痛视觉模拟评分（VAS）、股胫角、胫骨角、膝关节面夹角比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）,具有可比性。比较两组手术时间（包括麻醉时间）、术中失血量、住院时间、住院费用以及术后膝关节活动度、KSS评分及VAS评分。摄膝关节正侧位X线片,测量股胫角、胫骨角、膝关节面夹角,观察假体有无松动。结果两组手术时间、术中失血量及住院时间比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;但固定平台组住院费用显著低于旋转平台组（t=8.506,P=0.000）。两组患者均获随访,旋转平台组随访时间为16-30个月,固定平台组为16-38个月。术后固定平台组3例（7.14%）发生并发症,包括切口脂肪液化、关节僵硬、膝前区疼痛各1例;旋转平台组3例（5.36%）发生并发症,包括切口延迟愈合1例、膝前区疼痛2例;两组并发症发生率比较差异无统计学意义（χ2=0.133,P=0.516）。末次随访时,两组KSS评分、VAS评分、膝关节活动度以及股胫角、胫骨角、膝关节面夹角均显著优于术前（P〈0.05）,但两组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。X线片复查示,两组无透亮线及衬垫脱位征象,未发现髌骨脱位、假体松动及骨折。结论采用UC旋转平台假体行TKA治疗膝关节骨关节炎,膝关节功能获得有效改善,疼痛缓解明显,疗效与固定平台假体置换相似。

关键词：骨关节炎人工全膝关节置换术膝关节假体固定平台旋转平台