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盐酸青藤碱诱导黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞凋亡的机制研究

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生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 959-968页

作者：侯新聚雷洪峰陈勇黎芙希孙敬宁刘佳铭马红梅南昌市洪都中医院南昌330008 广州中医药大学第四临床医学院广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广州510006

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞... 详细信息

目的观察盐酸青藤碱对膝关节黏连强直的家兔成纤维细胞增殖和相关基因表达的影响,并进一步尝试探讨其对抗膝关节黏连强直的作用机制。方法以体外培养法培养成纤维细胞,并设对照组、盐酸青藤碱低中高浓度实验组。CCK-8法检测成纤维细胞增殖的情况;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测经过盐酸青藤碱处理后,成纤维细胞相关基因mRNA表达的改变,用ELISA法检测药物的作用对血清中炎症因子等水平的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白质的表达。结果盐酸青藤碱能降低成纤维细胞存活率,且随浓度升高存活率逐渐降低。盐酸青藤碱中各个组的效果均十分明显(P<0.05)。在相关基因的mRNA表达层面,与对照组比较,盐酸青藤碱各组炎症因子均显著下调(P<0.05),凋亡蛋白的表达量显著上升、Bcl-2的mRNA表达量下降(P<0.05),而PI3K/mTOR/AKT3信号通路分子的mRNA表达量均下降(P<0.05)。在蛋白质表达层面,与对照组相比较,中、高剂量盐酸青藤碱组血清中炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、TGF-β的水平均明显下调(P<0.05),凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达量均上调,并且与给药剂量成正相关,而抗凋亡蛋白Bcl-2、PI3K/AKT3/mTOR信号通路的表达量则与给药剂量成负相关。盐酸青藤碱对家兔膝关节成纤维细胞的存活表现为显著的抑制作用,作用机制或与下调炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达,并促进凋亡蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3/7及Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,抑制其下游PI3K/AKT3/mTOR信号通路的基因表达有关。结论盐酸青藤碱可抑制黏连性膝关节强直家兔膝关节成纤维细胞的炎症反应和加速成纤维细胞的凋亡,或可通过该机制为改善和治疗黏连性膝关节强直提供新的方法。

关键词：盐酸青藤碱黏连性膝关节强直家兔成纤维细胞

子宫腺肌病组织中的雌激素、雌激素受体、miR-21:致病作用和调控作用

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 627-635页

作者：曾玉燕贾金金卢洁曾诚耿红玲陈颐广州中医药大学第二附属医院妇科广东广州510120 广州中医药大学第一附属医院妇科广东广州510405

目的探讨miR-21、雌激素(E2)及其受体(ER)在子宫腺肌病发病中的具体机制。方法采用qRT-PCR检测miR-21在子宫腺肌病组织中水平,以宫颈病变为对照组。体外原代培养子宫腺肌病细胞,qRT-PCR检测E2激活组、ICI82780(ER抑制剂)+E2激活组、E2... 详细信息

目的探讨miR-21、雌激素(E2)及其受体(ER)在子宫腺肌病发病中的具体机制。方法采用qRT-PCR检测miR-21在子宫腺肌病组织中水平,以宫颈病变为对照组。体外原代培养子宫腺肌病细胞,qRT-PCR检测E2激活组、ICI82780(ER抑制剂)+E2激活组、E2剥夺组、E2剥夺+ER抑制组及对照组各组miR-21水平。miR-21mimic、miR-21inhibitor转染子宫腺肌病细胞,分别过表达和干扰miR-21,从正反两方面验证miR-21对子宫腺肌病细胞增殖、凋亡、迁移及细胞自噬等超微结构的影响。结果miR-21在子宫腺肌病病灶组织中的表达水平明显高于正常子宫肌层中表达水平(P0.05);E2激活状态下,E2激活组miR-21表达水平较ER抑制+E2激活组及对照组升高(P<0.05);E2剥夺状态下,E2剥夺+ER抑制组miR-21表达水平较E2剥夺组及对照组降低(P<0.05);干扰miR-21可以抑制子宫腺肌病细胞增殖和迁移,使线粒体内质网不同程度扩张、溶酶体增多、自噬小体出现,促进细胞的凋亡;而过表达miR-21则发挥相反的作用。结论MiR-21在子宫腺肌病细胞中通过改变细胞超微结构而发挥促增殖、迁移及抗凋亡的作用,可能与疾病的早期形成有关;ER除与E2结合调控miR-21外还可通过其他途径调控miR-21,这可能是子宫腺肌病的发病机制之一,其中ER对miR-21的调控作用大于E2。

关键词：子宫腺肌病 miR-21 雌激素雌激素受体

清热化瘀健脾方抑制小鼠结肠炎相关性结肠癌的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 83-90页

作者：郑燕秋游弋晖柯俊羽宋锦彬吴永强刘昌辉李燕舞广州中医药大学科技创新中心广州510405 广州中医药大学附属高州中医院广东高州525200 广州中医药大学中药学院广州510006

目的:探讨清热化瘀健脾方(QHJ)对小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)的干预作用及相关机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、QHJ低剂量(QHJ-L,10 g·kg^(-1))组、QHJ高剂量(QHJ-H,40 g·kg^(-1))组,除正常组外,采用氧化偶氮甲... 详细信息

目的:探讨清热化瘀健脾方(QHJ)对小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)的干预作用及相关机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、QHJ低剂量(QHJ-L,10 g·kg^(-1))组、QHJ高剂量(QHJ-H,40 g·kg^(-1))组,除正常组外,采用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)联合化学诱导CAC小鼠模型,造模时间14周。各药物组于第5周开始按剂量灌胃给药,每天1次至14周结束,正常及模型组平行给予等体积水。评估各组小鼠的生存率、结肠长度、质量及病理形态改变;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt信号蛋白3a(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、非磷酸化β-连环蛋白(Non-p-β-catenin)、胆固醇结合糖蛋白133(CD133)表达;免疫组化(IHC)检测分化簇80(CD80)、CD11抗原样家族成员B(CD11b)蛋白的定位及表达。分离培养CAC小鼠来源的结肠类器官,检测Wnt信号通路相关蛋白表达。结果:QHJ可明显改善CAC小鼠生存率,抑制结肠瘤状体个数。与正常组比较,模型组小鼠结肠组织中Wnt3a、β-catenin、p-β-catenin、CD133蛋白表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,QHJ-L组Wnt3a、β-catenin水平显著降低(P<0.01),QHJ-H组Wnt3a、β-catenin、Non-p-β-catenin和CD133蛋白水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠结肠中CD11b表达水平明显升高,而CD80水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,QHJ-L、QHJ-H组CD11b均明显降低,CD80均明显升高(P<0.05,P<0.01)。CAC模型小鼠结肠类器官中Non-p-β-catenin、CD133蛋白的表达均显著升高;而QHJ干预后可抑制模型小鼠结肠类器官Non-p-β-catenin、CD133蛋白的表达(P<0.01)。结论:QHJ可抑制CAC模型小鼠结肠炎-癌进程,其机制可能与调节微环境并抑制Wnt信号过度激活有关。

关键词：结肠炎相关性结肠癌清热化瘀健脾方 Wnt信号通路结肠类器官

心理一致感视角下晚期癌症患者疾病应对体验的质性研究

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中华护理杂志 2024年第5期59卷 526-532页

作者：黄咏琪田霞王峥孙咪咪周丽群肖文莉广州中医药大学护理学院广州市510006 广州中医药大学第一附属医院肿瘤中心

目的在心理一致感视角下,探索晚期癌症患者的疾病应对体验,为识别其应对资源、制订有效的应对策略提供参考依据。方法采用描述性质性研究法,通过目的抽样,于2023年3月—5月对广州市某三级甲等医院肿瘤中心收治的18例晚期癌症患者进行半... 详细信息

目的在心理一致感视角下,探索晚期癌症患者的疾病应对体验,为识别其应对资源、制订有效的应对策略提供参考依据。方法采用描述性质性研究法,通过目的抽样,于2023年3月—5月对广州市某三级甲等医院肿瘤中心收治的18例晚期癌症患者进行半结构式访谈,采用定向内容分析法对访谈结果进行归纳和提炼主题。结果共归纳出3个主题:①理解疾病经历,包括反思健康行为、正视患病事实、接受生命规律;②管理疾病威胁,包括应对多重困难、调动应对资源;③体会疾病应对意义,包括认同疾病应对意义、感知疾病获益、做好人生规划。结论有效的应对资源可帮助晚期癌症患者应对患病过程中的多重困难。医护人员应加强癌症相关知识宣教,帮助晚期癌症患者挖掘积极应对资源,并强化疾病应对意义,从而增强患者的疾病应对能力,促进其身心健康。

关键词：心理一致感晚期癌症应对体验质性研究护理

金丝桃苷纳米粒与骨髓间充质干细胞协同给药修复子宫内膜损伤

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1302-1311页

作者：韩瑞芳周海忆梁杏珊何斯怡关永格宋阳广州中医药大学护理学院广东广州510006 广州中医药大学第三附属医院广东广州510378

目的体外细胞实验评价金丝桃苷壳聚糖纳米粒(hyperoside/chitosan-nanoparticles,Hyp/CS-NPs,Hyp-NPs)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及作用机制;体内动物实验探讨Hyp-NPs与BMSCs协同修复大鼠子宫内膜损伤的效果。方法采用流式实验鉴定BMSCs;采用离子交联法制备Hyp-NPs,激光粒度分析仪及透射电镜进行表征评价;采用划痕实验检测Hyp-NPs对BMSCs的迁移作用;以及构建NRF2慢病毒载体,检测Hyp-NPs对BMSCs的氧化损伤模型的作用机制;动物实验将Hyp-NPs与BMSCs协同移植入子宫内膜损伤大鼠模型宫腔中,利用HE、Masson、IHC、TUNEL及ELISA实验从子宫内膜的一般病理、纤维化、干细胞募集及炎症情况,评价其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用及妊娠功能。结果成功分离培养BMSCs;成功制备Hyp-NPs;划痕实验表明Hyp-NPs可促进BMSCs迁移;通过成功构建BMSCs的慢病毒NRF2载体以及细胞氧化损伤模型,表明Hyp-NPs可通过激活NRF2调控BMSCs生物轴;动物实验表明Hyp-NPs与BMSCs协同给药可增加子宫内膜厚度及腺体数量,抗纤维化、抗凋亡及抗炎等促进干细胞归巢,恢复子宫内膜损伤大鼠的妊娠功能。结论Hyp-NPs与BMSCs协同给药可修复子宫内膜损伤。

关键词：金丝桃苷纳米粒骨髓间充质干细胞新型给药系统子宫内膜损伤抗氧化应激因子NRF2

补骨脂素对溃疡性结肠炎小鼠肠道屏障及继发性肝损伤的改善作用

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天然产物研究与开发 2024年第7期36卷 1121-1129,1148页

作者：曹柳唐晓晴罗青牛梦园戴卫波广州中医药大学附属中山中医院中山市中医院中山528400

研究补骨脂素(psoralen,PSO)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的肠道屏障及继发性肝损伤的改善作用。40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(control,Con)、模型组(model,Mod)、阳性药柳氮磺吡啶组(sulfasalazine,SASP,200 mg/kg)、PSO低剂量组(PSO-L,20 mg/kg)和PSO高剂量组(PSO-H,40 mg/kg),通过自由饮用2.25%的葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)7 d构建UC模型。实验期间记录小鼠的体重,疾病活动指数(disease activity index,DAI)。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerasechain reaction,RT-qPCR)检测结肠中带状闭合蛋白-1(zonula occludens-1,ZO1)、闭合蛋白-1(Claudin-1)和闭锁蛋白(Occludin)的表达。生化试剂盒检测肝脏中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝脏脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)、C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)含量。蛋白印迹(Western blot)法检测肝脏Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88)以及磷酸化核因子κB(phosphorylated nuclear factor kappa-B,p-NF-κB)的表达。结果显示,与Mod组相比,经PSO治疗后,UC小鼠体重下降得到缓解、DAI评分下降、缓解了结肠长度的缩短;ZO1、Claudin-1和Occludin的mRNA的表达均上调;肝脏AST、ALT、AKP和LDH含量均下降;肝脏LPS、CRP、PCT、IL-6以及TNF-α含量均下降;下调了肝脏TLR4、MyD88以及p-NF-κB蛋白的表达。以上结果表明,PSO可以改善DSS诱导的小鼠肠道屏障功能,并通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善继发性肝损伤。

关键词：补骨脂素溃疡性结肠炎肠道屏障继发性肝损伤炎症

胃食管反流病与阻塞性睡眠呼吸暂停之间的关系:孟德尔随机化研究

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中国循证医学杂志 2024年第9期24卷 1004-1010页

作者：焦欣邵阿雪何清清吴文玉刘建博王凯广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的使用孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR)方法探讨胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)与阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)及其典型症状(打鼾、白天嗜睡)之间的因果关联。方法采用逆方差加权法(inverse variance-weighted,IVW)作为主要的分析方法来评估因果关系,以留一法进行敏感性分析,MR-Egger法进行多效性分析,然后进行异质性检验。结果在MR分析中,基因预测的GERD与更高的OSA风险相关[IVW:OR=1.528,95%CI(1.374,1.699),P=5.315E-15],其他的MR分析结果与IVW结果一致,没有发现多效性和异质性。IVW法分析结果也显示GERD与打鼾[OR=0.959,95%CI(0.949,0.969),P=1.507E-15]、白天嗜睡[OR=1.024,95%CI(1.021,1.036),P=4.580E-5]之间存在因果关系,未发现多效性。结论本研究支持GERD与OSA及典型症状(打鼾、白天嗜睡)发生的风险之间存在因果关系。

关键词：胃食管反流病阻塞性睡眠呼吸暂停打鼾白天嗜睡孟德尔随机化因果关系

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劳绍贤辨治胃痞的数据挖掘分析和经验总结

中药新药与临床药理 2024年第3期35卷 432-437页

作者：王姝烨杨泽虹陈彦彤段文韬陶杨李培武广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院重庆医院重庆400799

目的分析劳绍贤教授辨治胃痞的用药规律。方法收集劳绍贤教授于2017年3月至2022年3月期间治疗胃痞患者的有效处方,提取患者一般资料、主诉、诊断、辨证分型、处方等。采用Excel软件和古今医案云平台(V 2.3.7)工具,构建处方数据库,利用... 详细信息

目的分析劳绍贤教授辨治胃痞的用药规律。方法收集劳绍贤教授于2017年3月至2022年3月期间治疗胃痞患者的有效处方,提取患者一般资料、主诉、诊断、辨证分型、处方等。采用Excel软件和古今医案云平台(V 2.3.7)工具,构建处方数据库,利用其数据挖掘功能对处方进行证型分析、中药使用频次和属性分析,以及药物关联规则分析、聚类分析等。结果共纳入272首处方,涉及164味药物。中医证型以湿热证、气滞证为主;使用频次≥30次的中药有25味,代表性药物为法半夏、甘草、陈皮、紫苏梗、木香;药性主要是温性、平性;药味主要为辛、苦、甘;药物主要归脾、胃、肺三经,其次是肝经;关联规则获得木香-紫苏梗、陈皮-紫苏梗、法半夏-陈皮等23个核心药对;聚类分析将药物分为3个组合,有理气除痞、祛湿化滞、清热解毒等功效。结论劳绍贤教授治疗胃痞的核心处方为木香、紫苏梗、陈皮、法半夏、甘草、柿蒂、枳实、大腹皮;重在调畅中焦气机,脾胃同治,以理气除痞为主要治法,同时重视祛湿化滞、清热解毒类药物的应用,临床疗效显著,可供诊疗参考。

关键词：胃痞中医药诊疗湿热证气滞证用药规律数据挖掘名医经验劳绍贤

针刺通过增加前额叶皮层突触蛋白的表达对两种抑郁症动物模型的快速抗抑郁作用

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World Journal of Acupuncture-Moxibustion 2024年第2期34卷 117-129页

作者：宁百乐王志芳杨晴吴倩邓启粤高静傅文邓颖吴炳鑫黄熙畅王聪符文彬广州中医药大学第二附属医院广州510120 广州中医药大学广州510006 河南中医药大学第一附属医院郑州450006

Objective:To investigate the effect of acupuncture onset time and synaptic structure in two different models of ***:A total of 150 healthy male adult SPF C57BL/6J mice were divided into five time-point groups:1 h,3 h,6 h,12 h and 24 *** time-point group was further divided into three groups:the model,scopolamine and acupuncture groups with 10 rats *** were given forced swimming stimulation(15 min,once)before the intervention.A total of 200 healthy male adult specific pathogen-free(SPF)Sprague-Dawley(SD)rats were divided into 30 normal rats,and 170 modelling ones.A total of 90 rats were successfully modeled,and were randomly divided into three time-point groups:1 h,6 h and 24 *** each time-point group was further divided into the normal,model,scopolamine,and acupuncture *** unpredictable mild stress(CUMS)combined with individual feeding was used to establish the depressed rat *** sucrose preference test(SPT)and open field test(OFT)were used to evaluate the success of the *** were 10 rats in each *** acupuncture intervention was performed once for 20 min on"Baihui(GV20)","Yintang(GV29)","Hegu(LI4)",and"Taichong(LR3)"without any other operations for the corresponding *** groups were given corresponding *** to different time points,the forced swimming test(FST)was conducted in mice,and the FST and novelty-suppressed feeding test(NSFT)were measured in *** neurotransmitters(NE,DA,DOPAC,5-HT,5-HIAA,HVA)in the prefrontal cortex and hippocampus were detected with high performance liquid chromatography(HPLC).The expression of synapsin I,PSD95,p-mTOR,mTOR,and BDNF in the prefrontal cortex and hippocampus was determined by western ***:At the 1 h time point,compared with the model group,the immobility time was significantly decreased in the acupuncture group(P<0.05).At 3 h,6 h,12 h,and 24 h,compared with the model group,the immobility time was significantly reduced in both sco

关键词： Depression Acupuncture Rapidantidepressanteffect Synaptic proteins Prefrontal cortex