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地黄环烯醚萜苷类通过调控TGF-β1/Smads信号通路保护糖尿病小鼠肾脏作用

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期 56-66页

作者：张宏伟刘明王慧森葛文静张雪侠周倩李华妮唐素勤李更生河南大学药学院河南省中西医结合医院/河南省中医药研究院中药所河南中医药大学中医药科学院

目的：观察地黄环烯醚萜苷类（RIG）成分对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠肾脏的保护作用，并探讨其机制。方法：雄性C57BL/6J小鼠72只，随机抽取12只为正常组，其余60只进行高脂饲料喂养6周联合60 mg·kg-1链脲佐菌素连续注射4 d进行... 详细信息

目的：观察地黄环烯醚萜苷类（RIG）成分对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠肾脏的保护作用，并探讨其机制。方法：雄性C57BL/6J小鼠72只，随机抽取12只为正常组，其余60只进行高脂饲料喂养6周联合60 mg·kg-1链脲佐菌素连续注射4 d进行2型糖尿病造模，造模成功后随机分为模型组、二甲双胍组(250 mg·kg-1)、梓醇组(100 mg·kg-1)、地黄环烯醚萜苷类低剂量组(RIG-L,200 mg·kg-1)和地黄环烯醚萜苷类高剂量组(RIG-H,400 mg·kg-1)，每组11只。各给药组小鼠灌胃对应药物，正常组和模型组给予等体积去离子水灌胃，1次/d。干预8周后，进行口服糖耐量（OGTT）实验，并计算OGTT曲线下面积（AUC），处死小鼠并剥离双肾组织。测定小鼠体质量、双肾质量、空腹血糖（FBG）；生化试剂盒检测血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）含量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清胰岛素（FINS）含量，计算胰岛素敏感指数（ISI）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色观察肾脏组织病理变化；免疫组化法（IHC）检测肾脏组织白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、胶原蛋白-3（ColⅢ）的表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织TGF-β1、细胞信号转导分子3（Smad3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、ColⅢ蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠体质量、ISI显著降低（P<0.01），肾脏绝对质量、FBG、AUC、FINS、HOMA-IR、TC、TG、SCr、BUN水平显著升高（P<0.01），肾组织出现肾小球肥大、肾小囊腔窄小及胶原沉积，肾组织IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-β1、ColⅢ、Smad3蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,MMP-9蛋白表达水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，各给药组小鼠体质量变化差异无统计学意义；各给药组小鼠肾脏绝对质明显降低（P<0.05,P<0.01）;RIG-H组小鼠给药第4～8周及二甲双胍、梓醇和RIG-L组小鼠给药第6～8周，FBG显著降低（P<0.01）;RIG-L、RIG-H和二甲双胍组小鼠AUC明显降低（P<0.05,P<0.01）；各给药组小鼠血清TC、SCr、BUN水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,RIG-L、RIG-H和二甲双胍组小鼠TG明显降低（P<0.05,P<0.01）；梓醇组、RIG-L和二甲双胍组小鼠FINS显著降低（P<0.01）；各给药组小鼠HOMA-IR显著降低（P<0.01）；各给药组小鼠ISI显著升高（P<0.01）；镜下各给药组小鼠肾脏组织病变均得到不同程度改善；各给药组小鼠肾脏组织IL-1、TGF-β1蛋白，RIG-H和二甲双胍组小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α、ColⅢ蛋白及RIG-L小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01），梓醇组小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α、ColⅢ蛋白及RIG-L小鼠肾脏组织ColⅢ蛋白含量呈下降趋势，差异无统计学意义；RIG-H和二甲双胍组小鼠肾脏组织TGF-β1、Smad3、ColⅢ蛋白表达显著降低（P<0.01），各给药组小鼠肾脏MMP-9蛋白表达量显著升高（P<0.01）。结论：地黄环烯醚萜苷类可以改善糖尿病小鼠肾组织结构和功能，其机制可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。

关键词：地黄环烯醚萜苷类 2型糖尿病转化生长因子-β1(TGF-β1)/细胞信号转导分子3(Smad3) 胶原蛋白-3(ColⅢ) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)

清心解瘀颗粒抗动脉血栓形成及对TNF-α诱导的***926细胞中Akt/NF-κB信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期 89-97页

作者：何晨晨韦琛谊吕正豪蔡巧燕高铸烨张铃褚剑锋福建中医药大学中西医结合学院中西医结合研究院福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建中医药大学陈可冀学术思想传承工作室中国中医科学院西苑医院

目的：观察清心解瘀颗粒对三氯化铁（FeCl3）诱导大鼠颈动脉血栓形成的作用及其对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导人脐静脉细胞融合细胞（***926）中血栓形成相关蛋白组织因子（TF）、组织因子途径抑制因子（TFPI）的表达及蛋白激酶B（Ak... 详细信息

目的：观察清心解瘀颗粒对三氯化铁（FeCl3）诱导大鼠颈动脉血栓形成的作用及其对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导人脐静脉细胞融合细胞（***926）中血栓形成相关蛋白组织因子（TF）、组织因子途径抑制因子（TFPI）的表达及蛋白激酶B（Akt）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响，初步探究清心解瘀颗粒抑制血栓形成的药效作用机制。方法：取36只SD大鼠，随机分为正常组、模型组、阿司匹林组、清心解瘀颗粒低、中、高剂量组，每组各6只。清心解瘀颗粒低、中、高组给药剂量分别为0.99、1.98、3.96 g·kg-1；阿司匹林组给药剂量为9 mg·kg-1，正常组与模型组给予等体积蒸馏水灌胃。连续预防性灌胃给药14 d后，采用45%的FeCl3溶液建立大鼠颈总动脉血栓模型，取下血管组织后称量大鼠血栓湿重；采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠颈总动脉血栓形成情况；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血浆中血管性血友病因子（vWF）、血小板内皮细胞黏附分子-1（PECAM-1）、组织型纤溶酶原激活物（t-PA）及纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的含量；利用TNF-α诱导***926细胞建立内皮细胞损伤模型；采用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）筛选清心解瘀颗粒干预浓度；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞中TF、TFPI、Akt、p-Akt、NF-κB p65、磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白的表达。结果：动物实验结果显示，与正常组比较，模型组的颈动脉血栓质量明显增加（P<0.05），血管结构不清晰，管腔内有大量血栓形成；血浆中的vWF、PECAM-1、PAI-1含量明显升高，t-PA含量明显降低（P<0.05）。与模型组比较，各给药组均可降低FeCl3诱导的大鼠颈动脉血栓质量（P<0.05），明显减少管腔中的血栓形成；同时，明显降低血浆中PECAM-1、PAI-1含量，增加t-PA含量（P<0.05）；且清心解瘀颗粒各剂量给药组还可明显降低血浆中vWF的含量（P<0.05），但阿司匹林组则与模型组间差异无统计学意义。细胞实验结果显示，31.25、62.5、125、250、500 mg·L-1的清心解瘀颗粒对***926细胞活性无影响，因此后续采用250、500 mg·L-1的清心解瘀颗粒作为干预浓度；Western blot结果显示，与空白组比较，TNF-α刺激后***926细胞中TFPI的表达明显下调（P<0.05）,TF的表达及p-Akt/Akt、p-NF-κB p65/NF-κB p65的比值均明显升高（P<0.05）；清心解瘀颗粒干预后可上调TFPI的表达（P<0.05）并抑制TF的表达及下调p-Akt/Akt、p-NF-κB p65/NF-κB p65的比值（P<0.05）。结论：清心解瘀颗粒具有抑制血栓形成及调节TNF-α诱导内皮细胞中血栓形成相关因子TF、TFPI表达的作用，其机制可能与抑制Akt/NF-κB信号通路的异常活化有关。

关键词：清心解瘀颗粒血栓内皮细胞组织因子蛋白激酶B/核转录因子-κB(Akt/NF-κB)信号通路

靶向成纤维细胞生长因子受体1信号改善类风湿关节炎的骨破坏

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中国组织工程研究 2025年第9期29卷 1905-1912页

作者：韩海慧冉磊孟晓辉辛鹏飞向峥边艳琴施杞肖涟波上海中医药大学上海市201203 上海市光华中西医结合医院上海市200052 上海市中医药研究院中西医结合关节炎研究所上海市200052

背景:尽管科研人员已注意到成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中展现出巨大潜力,但尚未有学者对成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的研究进展作全面综述。目的:通过查阅国内外相关文献,综合分析成纤维细胞生长... 详细信息

背景:尽管科研人员已注意到成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中展现出巨大潜力,但尚未有学者对成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的研究进展作全面综述。目的:通过查阅国内外相关文献,综合分析成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的机制。方法:以“成纤维细胞生长因子受体1,类风湿关节炎,骨破坏,骨细胞,成骨细胞,破骨细胞,软骨细胞,巨噬细胞,滑膜成纤维细胞,T细胞,血管内皮细胞”为检索词检索中国知网数据库,以“fibroblast growth factor receptor 1,rheumatoid arthritis,bone destruction,osteocytes,osteoblasts,osteoclasts,chondrocytes,macrophages,synovial fibroblasts,T cells,endothelial cells”为检索词检索PubMed数据库,检索时间范围重点为1992年4月至2024年1月。通过阅读文献题目、摘要及全文,根据纳入与排除标准进行筛选,最后纳入82篇文献进行综述。结果与结论:成纤维细胞生长因子受体1广泛表达于骨组织相关细胞,包括骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等,可以通过调控这些细胞的功能来影响骨重塑过程和维持骨稳态,促进类风湿关节炎骨破坏的发生和发展。成纤维细胞生长因子受体1还可以在滑膜成纤维细胞和巨噬细胞中参与炎症反应,在内皮细胞中调控滑膜血管生成,从多个方面促进骨破坏。成纤维细胞生长因子受体1可能是类风湿关节炎骨破坏的一个重要参与因素,为进一步研究类风湿关节炎治疗靶点提供依据。

关键词：类风湿关节炎成纤维细胞生长因子受体1 骨破坏成骨细胞破骨细胞滑膜成纤维细胞血管内皮细胞

人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程

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膝骨关节炎疼痛领域热点与前沿的可视化分析

中国组织工程研究 2025年第15期29卷 3280-3289页

作者：赵盾祁令臣徐金凡邵敏广州中医药大学广东省广州市510000 广州中医药大学顺德医院广东省广州市510000

背景:疼痛是膝骨关节炎的主要症状,严重影响老年患者的生活质量。膝骨关节炎疼痛机制复杂,涉及多组织、多学科,需要可视化分析了解其主要内容与研究热点。目的:运用文献计量学可视化软件分析归纳膝骨关节炎疼痛领域的前沿内容和研究热... 详细信息

背景:疼痛是膝骨关节炎的主要症状,严重影响老年患者的生活质量。膝骨关节炎疼痛机制复杂,涉及多组织、多学科,需要可视化分析了解其主要内容与研究热点。目的:运用文献计量学可视化软件分析归纳膝骨关节炎疼痛领域的前沿内容和研究热点。方法:从Web of Science核心合集(Web of Science Core Collection,WoSCC)中检索2014-2024年膝骨关节炎疼痛领域的相关文献,运用Citespace、VOSviewer和Bibliometrix R-package三个可视化软件进行文献计量与可视化分析。结果与结论:①膝骨关节炎疼痛研究的发文量呈现逐年递增的趋势;②美国、中国、澳大利亚是该领域10年内发文量排名前三的国家;波士顿大学、悉尼大学、弗洛里达大学是发文量前三的科研机构;《OSTEOARTHRITIS AND CARTILAGE》是出版该领域文献最多的期刊,《PAIN》则是该领域被引次数最多的期刊;发文量最多的作者是Fillingim Roger B,该领域的核心作者之间已经建立了一些稳定的团队,但国际性合作尚有欠缺;③膝骨关节炎疼痛患者的日常管理(运动、心理、智能管理)、疼痛的炎症机制、蛋白组学、联合用药、中枢敏化和疼痛调节是膝骨关节炎疼痛研究的重点内容;人工智能辅助、体外冲击波疗法、射频消融术、神经冷冻术、关节腔内注射血液或细胞制剂可能是该领域的研究前沿。

关键词： VOSviewer软件 Citespace软件 Bibliometrix R-package 文献计量学炎症因子体外冲击波疗法疼痛管理神经阻滞蛋白组学

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全国名中医治疗多发性硬化用药规律分析

亚太传统医药 2025年第1期21卷 121-127页

作者：丁双凤张颖刘明媛上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200083

目的:总结全国名中医治疗多发性硬化(MS)的用药规律。方法:采用数据挖掘、聚类分析和关联规则分析,研究名老中医用药遣方规律,并应用网络药理学方法研究高频核心药物的作用机制,同时采用分子对接方法验证预测结果。结果:共筛选出109首方... 详细信息

目的:总结全国名中医治疗多发性硬化(MS)的用药规律。方法:采用数据挖掘、聚类分析和关联规则分析,研究名老中医用药遣方规律,并应用网络药理学方法研究高频核心药物的作用机制,同时采用分子对接方法验证预测结果。结果:共筛选出109首方剂,其中高频中药23味,以温、寒、平药性为主,苦、甘、辛味最常见,归经以肝、脾、肾经居多,使用最多的药物为补虚、清热、活血化瘀药。同时挖掘出2个高频核心药物聚类及6种有效关联规则。网络药理学分析显示“黄芪、当归、茯苓、薏苡仁、白术”与MS共有31个关键靶点,涉及转录调控、细胞迁移、细胞凋亡等生物过程和IL-17、TNF等信号通路。分子对接结果显示槲皮素、山柰酚等与核心靶点IL-6、TNF、IL-1β有较强结合活性。结论:名医治疗MS注重补益脾肾,兼以化痰通络、活血祛瘀、清热解毒等,基本符合中医发病机制。网络药理学和分子对接结果提示高频药物中的关键活性成分可通过调控IL-6、TNF、IL-1β等靶点,借助IL-17、TNF等信号通路发挥治疗作用,为临床治疗MS提供参考。

关键词：多发性硬化全国名中医用药规律网络药理学

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线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6708-6716页

作者：谢铱子林雪莹张欣欣黄秀芳詹少锋江勇蔡彦广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510000 广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510000 广州中医药大学岭南医学研究中心广东省广州市510000 广东省中医临床研究院广东省广州市510000 深圳市中西医结合医院广东省深圳市518104 广东省中医院珠海医院广东省珠海市519015

背景:线粒体自噬与特发性肺纤维化的发生发展关系密切,但其作用机制尚不清楚。目的:探讨线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制,为临床特发性肺纤维化风险预测及亚型区分提供思路。方法:通过GEO和Reactome Pathway数据库等获取特发... 详细信息

背景:线粒体自噬与特发性肺纤维化的发生发展关系密切,但其作用机制尚不清楚。目的:探讨线粒体自噬在特发性肺纤维化中的生物学机制,为临床特发性肺纤维化风险预测及亚型区分提供思路。方法:通过GEO和Reactome Pathway数据库等获取特发性肺纤维化的线粒体自噬相关基因,基于组间差异、随机森林模型筛选特发性肺纤维化的线粒体自噬特征基因。采用g:Profiler数据库进行GO功能富集分析和KEGG、Reactome、WIKI通路富集分析。通过共识聚类法区分特发性肺纤维化线粒体自噬亚型,进行亚型间免疫浸润分析,并筛选出线粒体自噬关键基因。最后,通过列线图模型量化线粒体自噬关键基因对临床特发性肺纤维化发生风险的预测价值,并探索线粒体自噬关键基因与特发性肺纤维化临床特征的相关性。结果与结论:①特发性肺纤维化中与线粒体自噬相关的基因共13个,经组间差异、随机森林模型筛选出线粒体自噬特征基因5个,分别是PINK1、RPS27A、SRC、HIF1A和CDH6;②GO分析主要涉及泛素蛋白连接酶结合、细胞对缺氧的反应;通路富集分析主要涉及PINK1-PRKN介导的线粒体自噬、NOTCH信号通路、EGFR的信号传递和血管生成等;③HIF1A在不同特发性肺纤维化亚型间具有显著的表达差异,可能成为特发性肺纤维化线粒体自噬亚型区分的关键基因;④免疫浸润分析提示骨髓来源抑制性细胞、中性粒细胞与1型辅助性T细胞可能在不同亚型之间存在浸润差异,而HIF1A与多种免疫细胞浸润程度呈正相关;⑤列线图模型提示通过HIF1A的表达水平可能预测临床特发性肺纤维化的发生风险;⑥临床特征分析提示,HIF1A高表达患者可能肺功能更差,纤维化程度更严重。结果表明,PINK1、RPS27A、SRC、HIF1A和CDH6可能通过线粒体自噬影响特发性肺纤维化的发生发展,其中HIF1A可能成为特发性肺纤维化风险预测及临床亚型区分的关键基因,且与患者的肺功能水平密切相关。

关键词：特发性肺纤维化线粒体自噬自噬关键基因亚型分析富集分析免疫浸润分析肺功能生物信息学

全髋关节置换后的低蛋白血症:危险因素及列线图预测模型建立

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中国组织工程研究 2025年第15期29卷 3147-3152页

作者：郑泽炜叶凯静张阔赵庆华陈秀天江禹来易艳梓张庆文广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006 广州中医药大学惠州医院广东省惠州市516005 广州中医药大学第三附属医院关节中心广东省广州市510405

背景:患者接受全髋关节置换后多发低蛋白血症,影响术后愈合及康复。目的:探讨及筛选全髋关节置换后发生低蛋白血症的危险因素,建立列线图为临床中判断全髋关节置换后是否发生低蛋白血症提供指导。方法:共纳入行全髋关节置换患者355例,... 详细信息

背景:患者接受全髋关节置换后多发低蛋白血症,影响术后愈合及康复。目的:探讨及筛选全髋关节置换后发生低蛋白血症的危险因素,建立列线图为临床中判断全髋关节置换后是否发生低蛋白血症提供指导。方法:共纳入行全髋关节置换患者355例,根据术后第1天是否出现低蛋白血症分为低蛋白血症组238例、正常组117例,低蛋白血症发生率为67%。收集患者年龄、性别、糖尿病、高血压、高尿酸血症、高血脂、麻醉方式、置换前白细胞、置换前红细胞、置换前血红蛋白、置换前血小板、置换前血浆凝血酶原时间、置换前活化部分凝血酶原时间、置换前国际标准化比值、置换前凝血酶时间、置换前纤维蛋白原、置换前血沉、置换前C-反应蛋白、置换前D-二聚体、置换前平均红细胞血红蛋白含量、置换前平均红细胞体积、手术时间、体质量指数、置换前降钙素原、置换前红细胞压积等资料。利用SPSS 27.0软件进行单因素分析,随后利用R语言(4.3.1)再次对观察指标进行最小绝对收缩和选择算子回归分析及10倍交叉验证,取二者危险因素交集,使用SPSS 27.0进行多因素二元Logistic回归分析得到最终危险因素,通过R语言构建全髋关节置换后低蛋白血症的预测模型,并构建受试者特征曲线曲线、校准曲线、临床决策曲线评估预测模型预测能力。结果与结论:①经过单因素分析、最小绝对收缩和选择算子回归、多因素二元Logistic回归,筛选出年龄(OR=1.024,P=0.023)、置换前血小板(OR=0.995,P=0.028)、置换前血沉(OR=1.031,P=0.045)在判断置换后是否会发生低蛋白血症方面具有统计学意义(P<0.05);②基于多因素Logistic回归所筛选出的最终危险因素构建列线图预测模型,并通过构建受试者特征曲线评估模型预测能力,经计算受试者工作特征曲线的曲线下面积达到0.835(95%CI=0.779-0.891),C-index=0.835,经临床决策曲线计算,模型在阈值为0-0.83可带来更好的临床效能,该预测模型具有良好的灵敏度与准确性,可为医护人员及患者在全髋关节置换前更好地识别置换后发生低蛋白血症的风险。

关键词：全髋关节置换低蛋白血症危险因素预测模型列线图

缺血性脑卒中铁死亡特征基因NFE2L2的鉴定与验证

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1466-1474页

作者：王咪马书杰刘杨齐瑞上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院康复医学科上海市200437 上海中医药大学上海市201203 上海市第二康复医院上海市200431

背景:铁死亡与缺血性脑卒中的发病密切相关,靶向铁死亡是一种治疗缺血性脑卒中有前景的方案,但具体调控靶点尚不明确。目的:通过生物信息学和机器学习方法筛选缺血性脑卒中铁死亡相关特征基因,并通过细胞实验进行验证,探讨铁死亡在缺血... 详细信息

背景:铁死亡与缺血性脑卒中的发病密切相关,靶向铁死亡是一种治疗缺血性脑卒中有前景的方案,但具体调控靶点尚不明确。目的:通过生物信息学和机器学习方法筛选缺血性脑卒中铁死亡相关特征基因,并通过细胞实验进行验证,探讨铁死亡在缺血性脑卒中的作用。方法:基于GEO数据库和FerrDb数据库选取符合条件的缺血性脑卒中相关数据集和铁死亡表达数据集,通过t检验筛选铁死亡相关差异基因。对铁死亡相关差异基因进行GO功能富集分析与KEGG信号通路富集分析。通过PPI网络分析和机器学习筛选缺血性脑卒中铁死亡的特征基因,利用ROC分析和GSEA分析探究特征基因的准确性和生物功能。然后进行细胞实验,将HT22细胞分为对照组与缺血性脑卒中组,对照组不作任何干预,缺血性脑卒中组加入0.1 mol/L的H_(2)O_(2)干预24 h诱导细胞氧化应激和铁死亡,通过实时荧光定量RT-PCR和Western Blot验证铁死亡的发生和特征基因表达。结果与结论:(1)共获取45个铁死亡相关差异基因,GO和KEGG富集分析发现差异基因与氧化应激、自噬、铁死亡、脂肪细胞因子信号通路和线粒体代谢密切相关。(2)通过PPI网络中的MCODE插件和cytoHubba插件与机器学习中的LASSO算法和SVM-RFE算法共鉴定出1个铁死亡特征基因核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NFE2L2)。(3)对NFE2L2进行ROC曲线分析,发现在训练集和验证集中构建的诊断预测模型具有良好的准确性与特异性;对NFE2L2进行GSEA分析,发现特征基因通过免疫、炎症反应、氨基酸代谢及神经因子调控等方面参与缺血性脑卒中发病机制的调控。(4)细胞实验的RT-PCR和Western Blot分析表明,与对照组对比,缺血性脑卒中组中的酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶4 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与对照组对比,缺血性脑卒中组中特征基因NFE2L2 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。(5)上述结果证实,缺血性脑卒中与铁死亡密切相关,靶向特征基因NFE2L2可以为研究和治疗缺血性脑卒中提供一定的思路与方向。

关键词：缺血性脑卒中铁死亡生物信息学 HT22细胞机器学习特征基因细胞实验 NFE2L2 ASCL4 GPX4