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重症肌无力患者外周血单个核细胞中线粒体自噬和凋亡相关基因表达及其诊断价值

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 481-488页

作者：蔡东红李青柯铃铃钟慧雅江其龙张涵宋雅芳广州中医药大学科技创新中心广州中医药大学脾胃研究所广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院脾胃病科广东广州510405 广东药科大学中药学院广东广州510405

目的:探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中线粒体自噬和凋亡相关基因的表达水平,阐明其对MG诊断的指导价值。方法:收集并提取50名健康对照者(对照组)和50例MG患者(MG组)的PBMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western b... 详细信息

目的:探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中线粒体自噬和凋亡相关基因的表达水平,阐明其对MG诊断的指导价值。方法:收集并提取50名健康对照者(对照组)和50例MG患者(MG组)的PBMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测线粒体自噬因子磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)诱导激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶PARK2(Parkin)、泛素结合蛋白62(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)及凋亡因子细胞色素C(Cyt-C)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶9(caspase 9)的mRNA以及蛋白表达水平,根据mRNA检测结果设定多个不同临界值,在每个临界值处计算出相应的灵敏度和特异度,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线。结果:与对照组比较,MG组患者PBMCs中的自噬因子PINK1、Parkin和LC3Ⅱ的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p62 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01);凋亡因子Cyt-C、Bax、caspase 3和caspase 9 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Cyt-C mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。ROC曲线检测,PINK1、Parkin、p62和LC3Ⅱ的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.9696(95%CI:0.9435~0.9957)、0.9440(95%CI:0.9047~0.9833)、0.8556(95%CI:0.7767~0.9345)及0.9088(95%CI:0.8526~0.9650)(P<0.01),灵敏度分别为92%、92%、78%和84%,特异度分别为88%、82%、92%和82%;而Cyt-C、Bax、Bcl-2、caspase 3和caspase 9的AUC均为1.000(P<0.01),灵敏度和特异度均达到100%。结论:MG患者PBMCs中存在线粒体自噬障碍和凋亡增加现象,其对临床诊断MG具有较高的指导价值。

关键词：重症肌无力线粒体自噬细胞凋亡外周血单个核细胞诊断价值

高血压脑出血患者阴阳类证分型细胞因子变化规律研究

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中国中西医结合杂志 2024年第7期44卷 792-798页

作者：赵海宁郑雁文罗杰莲崔菀真郭建文广州中医药大学第二临床医学院广州510120 上海中医药大学附属龙华医院急诊科上海200323

目的探讨细胞因子在高血压脑出血(ICH)及卒中相关肺炎(SAP)患者血清细胞因子变化规律。方法共纳入ICH患者60例,根据证型分为阴类证组19例(伴SAP 6例,不伴SAP 13例)及阳类证组41例(伴SAP 37例,不伴SAP 4例)。进行患者病情评分比较;采... 详细信息

目的探讨细胞因子在高血压脑出血(ICH)及卒中相关肺炎(SAP)患者血清细胞因子变化规律。方法共纳入ICH患者60例,根据证型分为阴类证组19例(伴SAP 6例,不伴SAP 13例)及阳类证组41例(伴SAP 37例,不伴SAP 4例)。进行患者病情评分比较;采用液体芯片和ELISA检测ICH发病后0~3(T1)、4~7(T2)、8~14(T3)、15~25天(T4)四个时点炎性细胞因子的血清浓度。结果与阴类证组比较,阳类证组入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、肺炎严重程度评分系统(PSI)、脑出血临床分级评分(ICH-S)、出院时改良Rankin量表(mRS)评分升高(P<0.05,P<0.01),入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分降低(P<0.01)。ICH患者中至少有一个时点两组差异有统计学意义的细胞因子有:白细胞介素(IL)-88、IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)、巨噬细胞炎症因子1(MIP-1)β、IL-18、IL-5、趋化因子干扰素诱导蛋白10(IP-10)、IL-7、IL-12p70、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、IL-1α、IL-22、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)α(P<0.05)。阳类证患者在T1、T2大量促炎性细胞因子浓度升高,包括MIP-1α、MIP-β、IL-18、IL-17A、IL-31;早期升高的抗炎细胞因子包括IL-10、IL-4、IL-8;上述细胞因子在阴类证组的T1时点则水平降低。调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)的血清浓度不论是否合并SAP,在阴阳类证中均表现为T1升高,T2时点降低,最终T4低于基线状态的浓度。ICH合并SAP患者中至少有一个时点两组之间差异有统计学意义的细胞因子有:IP-10、IL-1RA、MIP-1β、IL-18(P<0.05)。ICH合并SAP阳类证患者促炎细胞因子在T1、T2浓度升高,包括:IP-10、MCP-1、IL-8、IL-17A、MIP-1α、MIP-1β、IL-31、干扰素γ(IFN-γ)、IL-1α、IL-21、IL-22。结论 ICH患者血清细胞因子在阴阳类证分型下呈现动态变化规律,促炎反应是阳类证的基础。

关键词：高血压性脑出血卒中相关肺炎血清细胞因子阴阳类证中西医结合

中药明视方控制儿童低度近视心阳不足证的多中心、随机双盲安慰剂对照临床研究

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中医杂志 2024年

作者：王健全侯昕玥亢泽峰杨迎新刘新泉沈志华俞晓艺姚靖梁凤鸣张风梅喻京生王宁利宋曼孙宏睿晏鑫中国中医科学院眼科医院黑龙江中医药大学附属第一医院广州中医药大学第一附属医院湖南中医药大学第一附属医院深圳市中医院天津中医药大学第一附属医院上海中医药大学附属龙华医院首都医科大学附属北京同仁医院福建中医药大学附属福州中医院河南省中医院首都医科大学附属北京中医医院

目的观察中药明视方颗粒控制儿童低度近视心阳不足证的有效性和安全性。方法采用多中心、前瞻性、双盲、随机对照的研究方法，将就诊于8家分中心的290例心阳不足证患儿随机分为治疗组和对照组各145例，治疗组给予宣教+配镜+中药明视... 详细信息

目的观察中药明视方颗粒控制儿童低度近视心阳不足证的有效性和安全性。方法采用多中心、前瞻性、双盲、随机对照的研究方法，将就诊于8家分中心的290例心阳不足证患儿随机分为治疗组和对照组各145例，治疗组给予宣教+配镜+中药明视方颗粒，对照组给予宣教+配镜+明视方安慰剂颗粒。明视方及安慰剂颗粒均口服，每次1袋，每日2次，口服4周休息2周为1个疗程，共4个疗程（共24周）。分别在治疗前、治疗后12周、治疗后24周、36周随访时、48周随访时观察等效球镜、最佳裸眼远视力、眼轴、角膜曲率K1、调节幅度、中医证候评分及安全性指标。结果 48周随访时治疗组等效球镜度数进展量低于对照组（P中医证候总积分各时间段与本组治疗前比较均明显降低（P中医证候等作用，且具有较好安全性。

关键词：明视方儿童青少年近视近视精筋失衡论心阳不足证

罗浮山风湿膏药在膝骨关节炎患者中的应用分析

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辽宁中医杂志 2024年

作者：刘明岭徐强刘丽娟张明英广州中医药大学第一附属医院风湿病科

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照... 详细信息

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照组的基础上外敷罗浮山风湿膏药，1次/d；两组患者均治疗3周。观察两组临床疗效，比较两组运动功能指标、关节疼痛情况。结果治疗后，观察组临床有效率高于对照组（P＜0.05）。治疗后，观察组膝关节（LKSS）评分和美国膝关节协会评分量表AKS功能评分显著高于对照组（P＜0.05）；且观察组视觉模拟评分法（VAS）评分在静息状态下、行走时、上下楼时均低于对照组（P＜0.05）。结论罗浮山风湿膏药联合艾瑞昔布片治疗可以显著缓解KOA患者疼痛，改善膝关节功能，促进运动功能恢复，提高临床疗效。

关键词：膝骨关节炎罗浮山风湿膏药艾瑞昔布片运动功能疼痛

穴位结扎联合埋线法对顽固性面瘫患者面神经肌电图及血清神经营养因子的影响

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中医杂志 2024年第15期65卷 1578-1585页

作者：李虹竹赖国安林诗雨马秀宜陈广贤李月梅王澍欣广州医科大学附属市八医院广东省广州市510180 广州中医药大学第一附属医院广州中医药大学第一临床医学院

目的观察穴位结扎联合埋线法治疗顽固性面瘫的临床疗效,并从神经营养因子角度探讨可能机制。方法将168例顽固性面瘫患者随机分为穴位结扎联合埋线组和电针组,每组84例。两组均口服甲钴胺片,在此基础上穴位结扎联合埋线组于颧髎、地仓... 详细信息

目的观察穴位结扎联合埋线法治疗顽固性面瘫的临床疗效,并从神经营养因子角度探讨可能机制。方法将168例顽固性面瘫患者随机分为穴位结扎联合埋线组和电针组,每组84例。两组均口服甲钴胺片,在此基础上穴位结扎联合埋线组于颧髎、地仓、颊车穴行结扎术,患侧面部局部取穴结合远端配穴行埋线法,30天行穴位结扎联合埋线法1次,共治疗3次;电针组取穴同穴位结扎联合埋线组,予电针治疗,疏密波,隔日1次。两组均治疗90天。于治疗前及治疗30天、60天、90天、120天(随访时)观察两组患者面神经功能评价(HB)分级情况、改良Portmann评分;于治疗前及治疗90天时检测面神经肌电图,记录面神经运动传导的波幅及潜伏期,检测血清脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)水平;治疗90天时比较两组临床疗效;观察并记录所有患者治疗过程中出现的不良反应。结果治疗30天、60天、90天、随访时两组患者HB分级较治疗前改善(P<0.05);治疗60天、90天和随访时穴位结扎联合埋线组患者HB分级人数分布情况优于电针组(P<0.05);与本组治疗前比较,两组治疗90天时面神经肌电图最大波幅均升高、潜伏期均降低(P<0.05),且穴位结扎联合埋线组最大波幅高于电针组、潜伏期短于电针组(P<0.05)。两组患者治疗30天、60天、90天及随访时改良Portmann评分比本组治疗前升高,且穴位结扎联合埋线组评分高于电针组(P<0.05)。治疗90天时两组患者血清BDNF、NGF和FGF2水平较本组治疗前上升,且穴位结扎联合埋线组显著高于电针组(P<0.05)。穴位结扎联合埋线组临床总有效率(92.68%)高于电针组(81.01%,P<0.05)。两组患者均有不良反应发生,主要包括局部血肿或皮下出血,过敏反应、剧烈疼痛、晕针,均在对症处理后症状消失。结论穴位结扎联合埋线法可有效治疗顽固性面瘫,改善面神经功能,其作用机制可能与提高血清神经营养因子水平从而促进面神经修复有关。

关键词：顽固性面瘫穴位结扎埋线面神经神经营养因子

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特定肠道菌群和骨质疏松症的因果关系

医学研究与战创伤救治 2024年第5期37卷 449-455页

作者：高志杰汪悦东张志海广州中医药大学第二临床医学院广州510080 广州中医药大学第一附属医院中医住陪基地广州510080 广州中医药大学第三附属医院骨质疏松科广州510145

目的采用孟德尔随机化分析方法来研究特定肠道菌群与骨质疏松症发病风险的因果关系。方法获取肠道菌群与骨质疏松症的全基因组关联研究数据,将单核苷酸多态性(SNP)作为工具变量并选择敏感的SNPs进行分析。通过逆方差加权法(IVW)、加权... 详细信息

目的采用孟德尔随机化分析方法来研究特定肠道菌群与骨质疏松症发病风险的因果关系。方法获取肠道菌群与骨质疏松症的全基因组关联研究数据,将单核苷酸多态性(SNP)作为工具变量并选择敏感的SNPs进行分析。通过逆方差加权法(IVW)、加权中位数法(WM)、MR-Egger回归法进行两样本孟德尔随机化分析,以OR值检验肠道菌群与骨质疏松症之间的因果关系,并完成敏感性和多效性检验。结果筛选到1531个SNPs作为工具变量,狭义梭菌属1、粪球菌属3、粪杆菌属、纺锤链杆菌属、考拉杆菌属、瘤胃球菌科NK4A214群、塞利单胞菌属与骨质疏松症的孟德尔随机化分析结果显示,IVW法的OR值分别为1.291(95%CI 1.037~1.607,P=0.022)、0.627(95%CI 0.440~0.894,P=0.010)、1.520(95%CI 1.125~2.054,P=0.006)、1.271(95%CI 1.037~1.558,P=0.021)、0.801(95%CI 0.674~0.951,P=0.012)、1.220(95%CI 1.010~1.473,P=0.039)、0.854(95%CI 0.744~0.979,P=0.024),表明肠道菌群与骨质疏松症之间存在因果关系。IVW(P>0.05)和MR-Egger回归(P>0.05)的CochranQ检验表明SNPs并不存在异质性。MR-Egger法的egger_intercept和0差异无统计学意义(P>0.05),SNPs不存在水平多效性。结论狭义梭菌属1、粪球菌属3、粪杆菌属、纺锤链杆菌属、考拉杆菌属、瘤胃球菌科NK4A214群、塞利单胞菌属与骨质疏松症之间存在因果关系,为探讨肠道菌群介导的骨质疏松症的发病机制提供了新的认知。

关键词：孟德尔随机化肠道菌群骨质疏松症基因组关联研究因果关系

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基于《伤寒论》六经方证思路论治乙型肝炎

中西医结合肝病杂志 2024年第1期34卷 1-4页

作者：刘重麟蒋开平广州中医药大学附属佛山市中医院广东佛山528000

本文以伤寒六经辨证为切入点,以方证路径为导向,总结蒋开平教授论治乙型肝炎的学术经验。急性乙型肝炎或慢性乙型肝炎急性发作者,在太阳病经证、腑证、兼证、变证中寻觅相应的方证;病情持续进展为里热实证者,可仿阳明病论治,并区分实证... 详细信息

本文以伤寒六经辨证为切入点,以方证路径为导向,总结蒋开平教授论治乙型肝炎的学术经验。急性乙型肝炎或慢性乙型肝炎急性发作者,在太阳病经证、腑证、兼证、变证中寻觅相应的方证;病情持续进展为里热实证者,可仿阳明病论治,并区分实证、热证、变证而择选相应的方剂;病情慢性化进程中表现为“相火上炎,枢机不利”者,则按少阳病论治,并因兼表、兼里、兼水饮之不同而针对性选方;病从寒化而为太阴病者,基于太阴病的病机特点而借用方剂;病情发展为重症乙型肝炎出现伤阳、耗阴之象者,可从少阴病论治,并因寒化、热化、兼变之不同而重点选方;难治性患者或抗病毒治疗耐药患者,出现寒热虚实错杂时,可从厥阴病论治中寻求突破点。

关键词：伤寒论六经辨证方证乙型肝炎

基于转录组学技术探讨基底外侧杏仁核参与电针治疗癌痛及其诱发的抑郁情绪的分子机制

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针刺研究 2024年第7期49卷 667-677页

作者：刘文浩刘文婷梁莹郭子宁黄乐天张海波许能贵何怡瀚广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510006 广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院广州510120 省部共建中医湿证国家重点实验室广州510120 广州中医药大学华南针灸研究中心广州510006

目的:观察电针对癌痛模型小鼠疼痛及其诱发的抑郁情绪的影响,采用转录组学技术从基因层面探讨基底外侧杏仁核(BLA)参与癌痛多维度调节效应的分子机制。方法:将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、电针组,每组10只。于股骨内注射含有Lewi... 详细信息

目的:观察电针对癌痛模型小鼠疼痛及其诱发的抑郁情绪的影响,采用转录组学技术从基因层面探讨基底外侧杏仁核(BLA)参与癌痛多维度调节效应的分子机制。方法:将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、电针组,每组10只。于股骨内注射含有Lewis肺癌细胞的PBS悬液建立骨癌痛模型。电针组小鼠在造模后第10天开始进行电针干预“足三里”“三阴交”,每日1次,每次20 min,连续干预12 d。采用X线和HE染色观察荷瘤股骨远端骨质损伤情况;von Frey检测小鼠机械性痛阈值变化;糖水偏好实验和强迫游泳实验观察小鼠抑郁情绪;提取小鼠BLA组织RNA建库,转录组学测序筛选差异基因并进行生物信息学分析;实时荧光定量PCR检测差异表达基因肿瘤坏死因子超家族8(Tnfsf8)、骨髓基质细胞抗原1(Bst1)、前强啡肽原(Pdyn)、电压门控钠离子通道β4(Scn4b)mRNA表达水平。结果:X线和HE染色可见小鼠股骨远端显著骨质损伤。与假手术组比较,模型组小鼠造模后第1、4、7、10、14、21天机械性痛阈值显著降低(P科全书(KEGG)通路分析,GO注释结果显示上述差异基因主要功能富集在与神经炎性反应相关的配体受体活性、细胞因子受体结合及细胞因子活性,以及与神经元兴奋相关的神经肽信号通路、钙离子介导的信号传导等方面;KEGG通路分析显示差异基因主要富集在与炎性反应相关的通路如白细胞介素-17通路等。模型组Tnfsf8、Bst1 mRNA的表达较假手术组显著升高(P<0.01,P<0.05),电针组较模型组显著下降(P<0.01,P<0.05);模型组Pdyn、Scn4b mRNA的表达较假手术组显著下降(P<0.01),电针组较模型组显著升高(P<0.05,P<0.01),实时荧光定量PCR结果与基因测序结果变化趋势相一致。结论:电针可以显著缓解癌痛及其诱发的抑郁样情绪,其机制可能与模型动物BLA内神经炎性反应的缓解及特定神经元的异常活动的恢复有关。

关键词：电针转录组学癌痛抑郁基底外侧杏仁核

氯诺昔康可溶性微针的制备及对类风湿性关节炎的药效学研究

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中国医院药学杂志 2024年第3期44卷 287-294页

作者：陈淼李亚欣苏安宇王敏纯吴颖袁秋虹张盼盼王利胜广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院广东广州510120

目的:制备氯诺昔康可溶性微针贴片,并对其进行表征和抗类风湿性关节炎药效评价。方法:采用分步干燥法制备氯诺昔康可溶性微针(LN-DMNs),使用HPLC法测定其载药量,通过扫描电镜、皮内溶解试验、穿刺试验等方法检测微针的形态、稳定性、皮... 详细信息

目的:制备氯诺昔康可溶性微针贴片,并对其进行表征和抗类风湿性关节炎药效评价。方法:采用分步干燥法制备氯诺昔康可溶性微针(LN-DMNs),使用HPLC法测定其载药量,通过扫描电镜、皮内溶解试验、穿刺试验等方法检测微针的形态、稳定性、皮肤穿刺性能及恢复力;用Franz扩散池法对其体外渗透特性进行研究;药效学实验考察LN-DMNs对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用。结果:所制备的微针排列整齐,针型较佳,平均载药量为(154.07±5.09)μg,具备较好的力学性能,能在大鼠皮肤留下明显孔洞。经微针治疗后,6 h内大鼠皮肤即可愈合至原来状态。体外透皮实验结果显示,LN-DMNs在36 h内累计渗透量为(78.39±1.15)μg·cm^(-2),药物累计透皮率达90.06%。药效学实验结果显示,LN-DMNs能够明显抑制类风湿性关节炎大鼠关节肿胀,显著降低血清中TNF-α、IL-1β含量、脾指数和胸腺指数(P<0.01),抑制滑膜炎症。结论:制备的LN-DMNs性能较佳,能够促进氯诺昔康的透皮递送,具有临床应用前景。

关键词：氯诺昔康可溶性微针药物递送经皮给药