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刺梨果多糖对异丙肾上腺素诱导的心肌缺血小鼠保护作用及机制

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食品科学 2024年第5期45卷 78-85页

作者：王琪文罗青徐洋洋王曦旻曾聪彦戴卫波彭伟文董更婷广州中医药大学附属中山中医院广东中山528400

目的:探究刺梨果(Rosa roxburghii Tratt)多糖对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌缺血(myocardial ischemia,MI)小鼠保护作用及作用机制。方法:将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:对照组,模型组,普萘洛尔(30 mg/kg)组,刺梨果... 详细信息

目的:探究刺梨果(Rosa roxburghii Tratt)多糖对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌缺血(myocardial ischemia,MI)小鼠保护作用及作用机制。方法:将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:对照组,模型组,普萘洛尔(30 mg/kg)组,刺梨果多糖低、高剂量(50、100 mg/kg)组,每组8只。各给药组小鼠连续灌胃(ig)给药14 d,从第8天开始,ig给药1 h后,除对照组腹腔注射(ip)相同剂量的生理盐水外,其余各组小鼠ip ISO(10 mL/kg),连续7 d,构建MI小鼠模型。末次给药1 h后检测小鼠心电图变化,麻醉后取心脏,计算心脏指数;采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察心肌组织病理变化;采用2%2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色液(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色检测心肌梗死面积;采用生化试剂盒检测小鼠血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用免疫印迹法(Western blot)检测心脏组织中NADPH氧化酶2(NADPH oxidase2,NOX2)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma2,Bcl2)、Bcl2相关X(Bcl2-associatedX,Bax)、半胱天冬酶3(Caspase 3)、中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-related protein 1,Keap1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白的表达情况。结果:与对照组小鼠比较,模型组小鼠心脏肿大,心电图ST段发生明显升高,HE染色可观察到心脏组织出现明显的炎症浸润和细胞间隙,TTC染色结果发现明显的心肌组织梗死。进一步实验发现模型组小鼠血清MDA含量和LDH活性显著升高(P<0.001),自由基清除酶SOD活性降低(P<0.05),Western blot结果显示,Nrf2、HO-1和Bcl2显著下调(P<0.05,P<0.01),Keap1、NOX2、Bax和Caspase 3显著上调(P<0.05,P<0.01)。与模型组小鼠比较,刺梨果多糖组小鼠心肌损伤都有不同程度的恢复,心电图ST段降低,小鼠心脏组织病理损伤减少,血清MDA含量和LDH活性显著降低(P<0.001),SOD活性显著升高(P<0.01,P<0.001),心脏组织蛋白Nrf2、HO-1和Bcl2表达显著上调(P<0.05,P<0.01),Keap1、NOX2、Bax和Caspase 3表达显著下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论:刺梨果多糖能通过调节Keap1-Nrf2信号通路,抑制氧化应激损伤,继而调控Caspase 3、Bax、Bcl2蛋白,减少心肌细胞凋亡发生,从而对ISO诱导的MI小鼠起到保护作用。

关键词：刺梨果多糖心肌缺血异丙肾上腺素氧化应激凋亡

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剑叶龙血素A对破骨细胞分化影响的研究

中国骨质疏松杂志 2024年第10期 1405-1411页

作者：莫亮卫杨文祥周月惠王章正周驰刘予豪广州中医药大学广州中医药大学第一附属医院

目的探讨剑叶龙血素A(Cochinchinenin A)对破骨细胞分化的影响及作用机制。方法采用网络药理学技术预测CCA干预破骨细胞分化的作用机制，并用Auto Dock Tool软件对CCA与破骨细胞分化关键靶点进行分子对接。体外采用巨噬细胞集落刺激因... 详细信息

目的探讨剑叶龙血素A(Cochinchinenin A)对破骨细胞分化的影响及作用机制。方法采用网络药理学技术预测CCA干预破骨细胞分化的作用机制，并用Auto Dock Tool软件对CCA与破骨细胞分化关键靶点进行分子对接。体外采用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF)和核因子受体配体激活因子(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand, RANKL)诱导小鼠骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages, BMMs)分化为破骨细胞，并通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAcP)和F-actin染色观察CCA对破骨细胞形成的影响，最后通过Western Blot检测CCA对MAPK和NF-κB信号通路的调控作用。结果通过网络药理学技术共筛选获得20个CCA抗破骨细胞分化的潜在靶点，功能富集分析发现CCA可通过调节MAPK、破骨细胞分化和肌动蛋白细胞骨架组成等信号通路及PIK3CA、MTOR、ESR1及MAPK1等关键靶点发挥抑制破骨细胞分化的作用。分子对接进一步验证了CCA和关键靶点的结合能力。体外实验结果表明CCA可显著抑制RANKL诱导的破骨细胞分化及F-actin形成，同时抑制NFATc1、Integrin β3、c-Fos蛋白及破骨细胞功能相关蛋白CTSK的表达。此外，CCA抑制了p38的磷酸化和IκB-α的降解。结论 CCA可通过调控p38/MAPK及NF-κB信号通路抑制破骨细胞分化。

关键词：剑叶龙血素A 破骨细胞网络药理学分子对接 MAPK

子宫腺肌病组织中的雌激素、雌激素受体、miR-21:致病作用和调控作用

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 627-635页

作者：曾玉燕贾金金卢洁曾诚耿红玲陈颐广州中医药大学第二附属医院妇科广东广州510120 广州中医药大学第一附属医院妇科广东广州510405

目的探讨miR-21、雌激素(E2)及其受体(ER)在子宫腺肌病发病中的具体机制。方法采用qRT-PCR检测miR-21在子宫腺肌病组织中水平,以宫颈病变为对照组。体外原代培养子宫腺肌病细胞,qRT-PCR检测E2激活组、ICI82780(ER抑制剂)+E2激活组、E2... 详细信息

目的探讨miR-21、雌激素(E2)及其受体(ER)在子宫腺肌病发病中的具体机制。方法采用qRT-PCR检测miR-21在子宫腺肌病组织中水平,以宫颈病变为对照组。体外原代培养子宫腺肌病细胞,qRT-PCR检测E2激活组、ICI82780(ER抑制剂)+E2激活组、E2剥夺组、E2剥夺+ER抑制组及对照组各组miR-21水平。miR-21mimic、miR-21inhibitor转染子宫腺肌病细胞,分别过表达和干扰miR-21,从正反两方面验证miR-21对子宫腺肌病细胞增殖、凋亡、迁移及细胞自噬等超微结构的影响。结果miR-21在子宫腺肌病病灶组织中的表达水平明显高于正常子宫肌层中表达水平(P0.05);E2激活状态下,E2激活组miR-21表达水平较ER抑制+E2激活组及对照组升高(P<0.05);E2剥夺状态下,E2剥夺+ER抑制组miR-21表达水平较E2剥夺组及对照组降低(P<0.05);干扰miR-21可以抑制子宫腺肌病细胞增殖和迁移,使线粒体内质网不同程度扩张、溶酶体增多、自噬小体出现,促进细胞的凋亡;而过表达miR-21则发挥相反的作用。结论MiR-21在子宫腺肌病细胞中通过改变细胞超微结构而发挥促增殖、迁移及抗凋亡的作用,可能与疾病的早期形成有关;ER除与E2结合调控miR-21外还可通过其他途径调控miR-21,这可能是子宫腺肌病的发病机制之一,其中ER对miR-21的调控作用大于E2。

关键词：子宫腺肌病 miR-21 雌激素雌激素受体

皮肤黑色素瘤差异表达基因的生物信息学分析及调控中药预测

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中草药 2024年第2期55卷 551-562页

作者：王梓霞黄羽欣谢锦楠王沐瑶王文辉广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510499 广州中医药大学东莞医院广东东莞523000

目的通过生物信息学技术分析皮肤黑色素瘤患者皮肤组织与非癌皮肤组织的基因表达微阵列数据,筛选出皮肤黑色素瘤的差异表达基因,预测可用于诊断和治疗皮肤黑色素瘤的生物标志物及潜在中药。方法从基因表达数据库(Gene Expression Omni... 详细信息

目的通过生物信息学技术分析皮肤黑色素瘤患者皮肤组织与非癌皮肤组织的基因表达微阵列数据,筛选出皮肤黑色素瘤的差异表达基因,预测可用于诊断和治疗皮肤黑色素瘤的生物标志物及潜在中药。方法从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)提取GSE3189、GSE114445、GSE46517基因芯片,使用GEO2R工具筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。利用DAVID数据库对DEGs进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;使用String数据库构蛋白-蛋白互作网络,应用Cytoscape软件及其插件筛选PPI网络中关键基因,应用GSCA数据库进行关键基因的突变分析。通过Gepia 2.0数据库结合癌症基因组图谱数据集(Cancer Genome Atlas,TCGA)对关键基因进行生存分析。根据度(degree)值和生存分析结果综合筛选出核心基因(集),应用GSCA数据库对核心基因(集)进行泛癌分析和免疫浸润分析,并使用TIMER 2.0数据库对核心基因分别进行免疫浸润分析。使用Coremine Medical数据库预测作用于关键基因的潜在中药。结果共筛选出DEGs 114个,其中上调基因36个,下调基因78个。上调DEGs主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号等通路,下调DEGs主要富集在细胞黏附、细胞增殖的正调控等方面。15个关键基因为EGFR、KPNA2、GATA3、AURKA、TYMS、PKP1、SPP1、MMP1、KLF4、EPCAM、KIF23、DTL、CLDN1、LCP2、FGFR2,其中共3个基因KPNA2、AURKA、DTL被视为核心基因(集)。潜在治疗中药有丹参、人参、构皮、高良姜、甘草、蓖麻子、油桐叶等。结论皮肤黑色素瘤中关键基因的突变以FGFR2的错义突变为主,突变方式多为胞嘧啶(C)向胸腺嘧啶(T)的转换。EGFR、KPNA2、GATA3、AURKA、PKP1、DTL、LCP2对皮肤黑色素瘤的生存预后存在显著影响。核心基因集在多种癌症中显著上调,并与自然调节性T细胞(natural regulatory T-cells,nTreg)细胞、树突状细胞、单核细胞等免疫细胞的浸润有关。潜在调控中药包括补虚药、清热解毒药、拔毒生肌药、消肿拔毒药、温里药、健脾利湿药、利水渗湿药、活血化瘀药、安神药9类,在相关古籍中存在对应的中医内外治经验记载,其中药活性成分亦被证明对皮肤黑色素瘤存在一定的调控和抑制作用。

关键词：皮肤黑色素瘤差异表达基因核心基因中药预测生物信息学丹参人参构皮高良姜甘草蓖麻子油桐叶

清热化瘀健脾方抑制小鼠结肠炎相关性结肠癌的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 83-90页

作者：郑燕秋游弋晖柯俊羽宋锦彬吴永强刘昌辉李燕舞广州中医药大学科技创新中心广州510405 广州中医药大学附属高州中医院广东高州525200 广州中医药大学中药学院广州510006

目的:探讨清热化瘀健脾方(QHJ)对小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)的干预作用及相关机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、QHJ低剂量(QHJ-L,10 g·kg^(-1))组、QHJ高剂量(QHJ-H,40 g·kg^(-1))组,除正常组外,采用氧化偶氮甲... 详细信息

目的:探讨清热化瘀健脾方(QHJ)对小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)的干预作用及相关机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组、QHJ低剂量(QHJ-L,10 g·kg^(-1))组、QHJ高剂量(QHJ-H,40 g·kg^(-1))组,除正常组外,采用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)联合化学诱导CAC小鼠模型,造模时间14周。各药物组于第5周开始按剂量灌胃给药,每天1次至14周结束,正常及模型组平行给予等体积水。评估各组小鼠的生存率、结肠长度、质量及病理形态改变;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt信号蛋白3a(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、非磷酸化β-连环蛋白(Non-p-β-catenin)、胆固醇结合糖蛋白133(CD133)表达;免疫组化(IHC)检测分化簇80(CD80)、CD11抗原样家族成员B(CD11b)蛋白的定位及表达。分离培养CAC小鼠来源的结肠类器官,检测Wnt信号通路相关蛋白表达。结果:QHJ可明显改善CAC小鼠生存率,抑制结肠瘤状体个数。与正常组比较,模型组小鼠结肠组织中Wnt3a、β-catenin、p-β-catenin、CD133蛋白表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,QHJ-L组Wnt3a、β-catenin水平显著降低(P<0.01),QHJ-H组Wnt3a、β-catenin、Non-p-β-catenin和CD133蛋白水平明显下降(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠结肠中CD11b表达水平明显升高,而CD80水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,QHJ-L、QHJ-H组CD11b均明显降低,CD80均明显升高(P<0.05,P<0.01)。CAC模型小鼠结肠类器官中Non-p-β-catenin、CD133蛋白的表达均显著升高;而QHJ干预后可抑制模型小鼠结肠类器官Non-p-β-catenin、CD133蛋白的表达(P<0.01)。结论:QHJ可抑制CAC模型小鼠结肠炎-癌进程,其机制可能与调节微环境并抑制Wnt信号过度激活有关。

关键词：结肠炎相关性结肠癌清热化瘀健脾方 Wnt信号通路结肠类器官

金丝桃苷纳米粒与骨髓间充质干细胞协同给药修复子宫内膜损伤

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1302-1311页

作者：韩瑞芳周海忆梁杏珊何斯怡关永格宋阳广州中医药大学护理学院广东广州510006 广州中医药大学第三附属医院广东广州510378

目的体外细胞实验评价金丝桃苷壳聚糖纳米粒(hyperoside/chitosan-nanoparticles,Hyp/CS-NPs,Hyp-NPs)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及作用机制;体内动物实验探讨Hyp-NPs与BMSCs协同修复大鼠子宫内膜损伤的效果。方法采用流式实验鉴定BMSCs;采用离子交联法制备Hyp-NPs,激光粒度分析仪及透射电镜进行表征评价;采用划痕实验检测Hyp-NPs对BMSCs的迁移作用;以及构建NRF2慢病毒载体,检测Hyp-NPs对BMSCs的氧化损伤模型的作用机制;动物实验将Hyp-NPs与BMSCs协同移植入子宫内膜损伤大鼠模型宫腔中,利用HE、Masson、IHC、TUNEL及ELISA实验从子宫内膜的一般病理、纤维化、干细胞募集及炎症情况,评价其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用及妊娠功能。结果成功分离培养BMSCs;成功制备Hyp-NPs;划痕实验表明Hyp-NPs可促进BMSCs迁移;通过成功构建BMSCs的慢病毒NRF2载体以及细胞氧化损伤模型,表明Hyp-NPs可通过激活NRF2调控BMSCs生物轴;动物实验表明Hyp-NPs与BMSCs协同给药可增加子宫内膜厚度及腺体数量,抗纤维化、抗凋亡及抗炎等促进干细胞归巢,恢复子宫内膜损伤大鼠的妊娠功能。结论Hyp-NPs与BMSCs协同给药可修复子宫内膜损伤。

关键词：金丝桃苷纳米粒骨髓间充质干细胞新型给药系统子宫内膜损伤抗氧化应激因子NRF2

骨碎补及其活性成分防治骨质疏松症的作用机制

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中国骨质疏松杂志 2024年第10期 1540-1547页

作者：刘博丁龙龙陈志健张桂鑫王博龚春柱张洪健刘华忠廖家俊广州中医药大学广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院

骨碎补是补肾强骨的经典药材，药理学研究显示其主要活性成分为黄酮类和二氢黄酮类柚皮苷，其在抗骨质疏松、修复骨缺损等方面发挥着积极作用。细胞分子生物学研究提示骨碎补对成骨细胞、破骨细胞和间充质干细胞具有多通路、多因子调节... 详细信息

骨碎补是补肾强骨的经典药材，药理学研究显示其主要活性成分为黄酮类和二氢黄酮类柚皮苷，其在抗骨质疏松、修复骨缺损等方面发挥着积极作用。细胞分子生物学研究提示骨碎补对成骨细胞、破骨细胞和间充质干细胞具有多通路、多因子调节作用，如Wnt/β-catenin、MAPK、OPG/RANKL/RANK、Notch、BMP-Smads、PI3K/Akt等信号通路和TNF-α、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)、雌激素及其受体、组织蛋白酶K(CTSK)等细胞因子。笔者重点综述了中药骨碎补及其提取物防治骨质疏松的信号通路和细胞因子研究进展，旨在为骨碎补的药理药效研究及临床应用提供参考。

关键词：骨质疏松症骨碎补骨碎补总黄酮柚皮苷成骨细胞破骨细胞间充质干细胞

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劳绍贤辨治胃痞的数据挖掘分析和经验总结

中药新药与临床药理 2024年第3期35卷 432-437页

作者：王姝烨杨泽虹陈彦彤段文韬陶杨李培武广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院重庆医院重庆400799

目的分析劳绍贤教授辨治胃痞的用药规律。方法收集劳绍贤教授于2017年3月至2022年3月期间治疗胃痞患者的有效处方,提取患者一般资料、主诉、诊断、辨证分型、处方等。采用Excel软件和古今医案云平台(V 2.3.7)工具,构建处方数据库,利用... 详细信息

目的分析劳绍贤教授辨治胃痞的用药规律。方法收集劳绍贤教授于2017年3月至2022年3月期间治疗胃痞患者的有效处方,提取患者一般资料、主诉、诊断、辨证分型、处方等。采用Excel软件和古今医案云平台(V 2.3.7)工具,构建处方数据库,利用其数据挖掘功能对处方进行证型分析、中药使用频次和属性分析,以及药物关联规则分析、聚类分析等。结果共纳入272首处方,涉及164味药物。中医证型以湿热证、气滞证为主;使用频次≥30次的中药有25味,代表性药物为法半夏、甘草、陈皮、紫苏梗、木香;药性主要是温性、平性;药味主要为辛、苦、甘;药物主要归脾、胃、肺三经,其次是肝经;关联规则获得木香-紫苏梗、陈皮-紫苏梗、法半夏-陈皮等23个核心药对;聚类分析将药物分为3个组合,有理气除痞、祛湿化滞、清热解毒等功效。结论劳绍贤教授治疗胃痞的核心处方为木香、紫苏梗、陈皮、法半夏、甘草、柿蒂、枳实、大腹皮;重在调畅中焦气机,脾胃同治,以理气除痞为主要治法,同时重视祛湿化滞、清热解毒类药物的应用,临床疗效显著,可供诊疗参考。

关键词：胃痞中医药诊疗湿热证气滞证用药规律数据挖掘名医经验劳绍贤

胃食管反流病与阻塞性睡眠呼吸暂停之间的关系:孟德尔随机化研究

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中国循证医学杂志 2024年第9期24卷 1004-1010页

作者：焦欣邵阿雪何清清吴文玉刘建博王凯广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的使用孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR)方法探讨胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)与阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)及其典型症状(打鼾、白天嗜睡)之间的因果关联。方法采用逆方差加权法(inverse variance-weighted,IVW)作为主要的分析方法来评估因果关系,以留一法进行敏感性分析,MR-Egger法进行多效性分析,然后进行异质性检验。结果在MR分析中,基因预测的GERD与更高的OSA风险相关[IVW:OR=1.528,95%CI(1.374,1.699),P=5.315E-15],其他的MR分析结果与IVW结果一致,没有发现多效性和异质性。IVW法分析结果也显示GERD与打鼾[OR=0.959,95%CI(0.949,0.969),P=1.507E-15]、白天嗜睡[OR=1.024,95%CI(1.021,1.036),P=4.580E-5]之间存在因果关系,未发现多效性。结论本研究支持GERD与OSA及典型症状(打鼾、白天嗜睡)发生的风险之间存在因果关系。

关键词：胃食管反流病阻塞性睡眠呼吸暂停打鼾白天嗜睡孟德尔随机化因果关系