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尿石素A介导p38/MAPK通路抑制破骨细胞活性

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中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1149-1154页

作者：黄浩然凡一诺卫杨文祥江梦钰方汉军王海彬陈镇秋刘予豪周驰广州中医药大学第一附属医院广东省广州市510405 广州中医药大学第三附属医院广东省广州市510378

背景:过度活跃的破骨细胞可破坏骨稳态,并在骨质疏松、脆性骨折、骨关节炎等相关性骨骼疾病的病理机制中起重要作用。研究证实,鞣花酸和鞣花单宁有抑制破骨细胞分化的潜能,尿石素A作为其天然代谢产物,具有抗氧化、抗炎、抗增殖及抗癌作... 详细信息

背景:过度活跃的破骨细胞可破坏骨稳态,并在骨质疏松、脆性骨折、骨关节炎等相关性骨骼疾病的病理机制中起重要作用。研究证实,鞣花酸和鞣花单宁有抑制破骨细胞分化的潜能,尿石素A作为其天然代谢产物,具有抗氧化、抗炎、抗增殖及抗癌作用,但其对破骨细胞分化的影响及其潜在的分子机制尚不清楚。目的:探讨尿石素A对核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞分化的影响及作用机制。方法:体外培养稳定生长的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7),使用细胞毒性MTS实验检测不同浓度尿石素A(0,0.1,0.5,1.5,2.5μmol/L)对RAW264.7细胞的毒性,筛选出安全作用浓度。再使用不同浓度的尿石素A干预核因子κB受体活化因子配体诱导的RAW264.7细胞体外分化过程,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色和肌动蛋白环及细胞核染色,观察尿石素A对破骨细胞形成和功能的影响。最后通过Western Blot及RT-qPCR实验,观察尿石素A干预后丝裂原活化蛋白激酶信号通路中上下游基因和蛋白的表达情况。结果与结论:①尿石素A呈浓度依赖性地抑制体外破骨细胞分化及肌动蛋白环形成,2.5μmol/L的抑制作用最强;②尿石素A可抑制与破骨形成及骨吸收相关的Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Atp6v0d2基因的表达及Nfatc1、Ctsk蛋白的合成;③尿石素A可通过抑制p38蛋白的磷酸化,抑制丝裂原活化蛋白激酶信号通路传导,从而抑制破骨细胞的活性。

关键词：尿石素A 破骨细胞 MAPK p38 RANKL

基于p53/SLC7A11/GPX4通路研究疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 74-82页

作者：蔡晓钧杨仁义王智槟龚怡琳王科林丽珠钟崇李菁湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学长沙410208 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的:基于肿瘤蛋白53(p53)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡。方法:将MHCC97H细胞分为空白血清组(含10%空白血清培养基)、疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)低浓度组(含5%含药... 详细信息

目的:基于肿瘤蛋白53(p53)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡。方法:将MHCC97H细胞分为空白血清组(含10%空白血清培养基)、疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)低浓度组(含5%含药血清、5%空白血清培养基)、SGQYJDF中浓度组(含7.5%含药血清、2.5%空白血清培养基)、SGQYJDF高浓度组(含10%含药血清的培养基)和索拉非尼组(索拉非尼浓度为10μmol·L-1的10%空白血清培养基)。按分组干预24 h后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖能力;亚铁离子荧光探针(FerroOrange)染色法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)水平;比色法检测细胞内丙二醇(MDA)及谷胱甘肽(GSH)水平;透射电镜观察细胞线粒体超微形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11和GPX4表达水平。结果:细胞活性方面,与空白血清组比较,SGQYJDF各浓度组能够呈浓度相关性地降低MHCC97H细胞存活率,SGQYJDF中、高浓度组的MHCC97H细胞存活率显著降低(P<0.01);同时EdU结果显示SGQYJDF中、高浓度组均能够明显抑制MHCC97H细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01)。铁死亡生化指标方面,与空白血清组比较,SGQYJDF中、高浓度组能够呈浓度相关性地提高细胞内Fe2+水平(P<0.01);SGQYJDF低、中、高浓度组能够呈浓度相关性地降低MHCC97H细胞内GSH的水平(P<0.01),同时提高细胞内MDA水平(P<0.05,P<0.01)。在通路相关蛋白表达方面,与空白血清组比较,SGQYJDF中、高浓度组可显著增加p53表达(P<0.01);SGQYJDF低、中、高浓度组能够显著降低GPX4表达(P<0.01);SGQYJDF高浓度组能够显著降低SLC7A11的表达(P<0.01)。铁死亡细胞形态方面,与空白血清组比较,透射电镜发现SGQYJDF低浓度组存在变性线粒体,而SGQYJDF中、高浓度组可观察到线粒体体积缩小、双层膜密度增加和线粒体嵴减少,这些特征与索拉非尼组诱导的铁死亡相似。此外与索拉非尼组比较,SGQYJDF高浓度组细胞存活率、增殖能力、Fe2+水平、MDA水平和GSH水平差异无统计学意义。结论:提示SGQYJDF可能通过上调肝细胞癌MHCC97H细胞内p53的表达、抑制GPX4和SLC7A11的表达,下调GSH的水平,同时导致细胞内Fe2+和MDA的累积,从而诱导其发生铁死亡,抑制其增殖。

关键词：疏肝祛瘀解毒方肝细胞癌铁死亡增殖

清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎痰热壅肺证的多中心随机对照研究

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中草药 2024年第12期55卷 4099-4107页

作者：金少涵朱梦婷罗胜刘兴华范斐婷肖晶旻吴蕾林琳陈远彬中医证候全国重点实验室/呼吸科广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广州中医药大学第二临床医学院广州市番禺区中医医院东莞市中西医结合医院

目的观察清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎（community acquired pneumonia,CAP）痰热壅肺证患者的疗效和安全性。方法采用多中心、随机双盲、安慰剂平行对照临床试验设计，纳入成人CAP痰热壅肺证患者80例，按1∶1比... 详细信息

目的观察清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎（community acquired pneumonia,CAP）痰热壅肺证患者的疗效和安全性。方法采用多中心、随机双盲、安慰剂平行对照临床试验设计，纳入成人CAP痰热壅肺证患者80例，按1∶1比例随机分为治疗组和对照组，在西医常规治疗基础上，治疗组给予清咳平喘颗粒，对照组给予清咳平喘颗粒模拟剂，两组疗程均为10 d。观察两组患者的临床疗效，比较两组患者治疗前后肺炎影像学吸收评价得分、咳嗽和咳痰症状消失的患者比例和时间、咳嗽和咳痰评估问卷（cough and sputum assessment questionnaire,CASA-Q）、CURB-65(confusion,urea, respiratory rate blood pressure, age 65)评分、血白细胞计数、中性粒细胞百分比、C反应蛋白、抗感染治疗天数及不良事件发生率的差异。结果治疗后，治疗组的总有效率为94.87%，明显高于对照组的74.36%，具有统计学意义（P0.05）；针对咳痰严重程度进行亚组分析，治疗组中重度咳痰患者的肺炎影像学吸收评分明显低于对照组（P0.05）。试验期间未发生严重不良事件，两组不良事件发生率无差异。结论在西医常规治疗基础上，清咳平喘颗粒能有效减少CAP抗感染治疗天数，改善咳痰症状，缩短咳痰症状消失时间，且安全性良好。

关键词：社区获得性肺炎痰热壅肺证清咳平喘颗粒随机对照试验中西医结合

基于MAPK/ERK信号通路探讨加味芍药甘草汤对AM病灶细胞的干预机制

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 315-319页

作者：刘学红王帅关永格李坤寅广州中医药大学第三临床医学院广东广州510375 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第三附属医院广东广州510375

目的通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路,探讨加味芍药甘草汤治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)的可能机制。方法临床收集因AM和宫颈病变行全子宫切除术患者的组织标本,分别作为病例组和对照组,采用实时荧光定... 详细信息

目的通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路,探讨加味芍药甘草汤治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)的可能机制。方法临床收集因AM和宫颈病变行全子宫切除术患者的组织标本,分别作为病例组和对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测AM组异位病灶与对照组正常肌层及两组间在位内膜中MAPK/ERK信号通路因子蛋白表达水平的差异。对AM病灶细胞分别用加味芍药甘草汤含药血清、正常血清、MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126、米非司酮进行干预,采用qRT-PCR、Western blot检测不同干预方法对病灶细胞MAPK/ERK信号通路因子蛋白表达水平的差异。结果AM组异位病灶ERK2 mRNA、MEK-2蛋白的表达量高于对照组正常肌层,差异有统计学意义(P<0.05)。筛选10%含药血清组为药物血清浓度。U0126组与空白对照组相比,ERK1 mRNA表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);10%含药血清组、米非司酮组、U0126组与10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,ERK2 mRNA表达量均有减低,差异有统计学意义(P<0.05);与米非司酮组、10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,U0126组中MEK-2表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);与10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,U0126组中ERK1/2表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);U0126组、10%含药血清组与其他组相比,NF-κB表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);两组之间表达量差异无统计学意义;U0126组与米非司酮组、空白对照组相比,c-Fos表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论加味芍药甘草汤含药血清:10%的含药血清能减低MAPK/ERK信号通路中ERK2的表达,抑制AM病灶细胞的过度增殖,进而减缓AM的进展。

关键词：子宫腺肌病加味芍药甘草汤 MAPK/ERK信号通路

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血红蛋白与老年骨质疏松性骨折的相关性分析

中国骨质疏松杂志 2024年第1期30卷 27-31页

作者：李兵尚奇江睿轩秦威城刘慧雯戴新华招文华陈弘林梁德江晓兵任辉广州中医药大学广东广州510405 广西中医药大学第一附属医院广西南宁530000 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州医科大学附属第二医院广东广州510260

目的探讨血红蛋白水平与老年骨质疏松骨折的关系。方法选取2021年1月至2022年5月在广州中医药大学第一附属医院骨二科住院的50岁以上且诊断为脊柱骨折的324例患者。从电子病历中收集患者骨密度、血红蛋白等医疗数据。结果对男性骨质疏... 详细信息

目的探讨血红蛋白水平与老年骨质疏松骨折的关系。方法选取2021年1月至2022年5月在广州中医药大学第一附属医院骨二科住院的50岁以上且诊断为脊柱骨折的324例患者。从电子病历中收集患者骨密度、血红蛋白等医疗数据。结果对男性骨质疏松骨折,贫血发生率明显升高,血红蛋白水平明显降低(P二元Logistic回归发现男性中血红蛋白水平与骨质疏松症之间存在关联(OR=0.956,95%CI:0.917~0.997,P=0.035);女性未发现关联。结论血红蛋白水平和骨密度相关,血红蛋白水平降低可能会致老年男性骨质疏松骨折高风险。

关键词：骨质疏松贫血血红蛋白骨密度老年人骨质疏松性骨折

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裙带菜多糖抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制

中国药理学通报 2024年第4期40卷 670-678页

作者：刘伟萍陈建芬安金琪罗艺刘凤斌广州中医药大学第一附属医院脾胃病科广东广州510405 广州中医药大学博士后科研流动站广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广东燕岭医院中医骨伤科广东广州510507 粤北人民医院中医科广东韶关512000 广州中医药大学第一附属医院白云分院内一科广东广州510000

目的探讨裙带菜多糖(sulfated polysaccharide from Undaria pinnatifida,SPUP)对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在机制。方法MTT和克隆形成实验检测SPUP对肝癌细胞HepG2、SMMC-7721增殖的影响;Hoechst 33258染色和Western blot法检测SPUP干预后对HepG2、SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell和划痕法检测HepG2、SMMC-7721细胞的迁移和侵袭;免疫荧光和Western blot法检测SPUP对肝癌细胞自噬、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9蛋白的影响。结果SPUP对HepG2、SMMC-7721细胞有短期和长期的抑制增殖作用,对正常肝细胞L-02无明显抑制作用,SPUP可促进两种肝癌细胞凋亡和自噬水平。同时,SPUP可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力,降低EMT和MMPs水平。结论SPUP通过促进凋亡和自噬、抑制EMT和MMPs,进而抑制肝癌细胞的增殖和迁移。

关键词：裙带菜多糖肝细胞癌增殖自噬凋亡侵袭迁移上皮间质转化基质金属蛋白酶

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基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP诱导的肺泡上皮细胞凋亡探讨人参皂苷Rg减轻脓毒症急性肺损伤的作用和机制

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中国中药杂志 2024年

作者：仲凯强黄荫桂陈秀萍陈瑞邬楚雯邹佳桢奚小土李俊闫春江广州中医药大学第二附属医院广州中医药大学第一附属医院广州中医药大学第二临床医学院广东省中医急诊研究重点实验室广东药科大学生命科学与生物制药学院

探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对脓毒症急性肺损伤(SALI)的干预疗效与作用机制。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SALI小鼠模型，随机分组给予GRg1干预，记录存活与体质量变化情况，小鼠无创肺功能检测系统检测肺功能，苏木精-伊红染色法(HE)染色... 详细信息

探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对脓毒症急性肺损伤(SALI)的干预疗效与作用机制。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SALI小鼠模型，随机分组给予GRg1干预，记录存活与体质量变化情况，小鼠无创肺功能检测系统检测肺功能，苏木精-伊红染色法(HE)染色观察肺组织损伤情况，酶联免疫吸附实验(ELISA)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子含量与表达，流式细胞术、TUNEL染色等检测凋亡情况，蛋白质印迹(Western blot)、qRT-PCR检测凋亡相关分子胱天蛋白酶3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl2-相关X蛋白(Bax)与内质网应激相关分子蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译起始因子2α激酶(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的活化表达情况。此外，利用脂多糖(LPS)体外诱导小鼠肺泡上皮细胞损伤模型，给予内质网应激激动剂衣霉素(TUN)验证GRg1的作用机制。结果显示，与模型组相比，GRg1干预可提高CLP小鼠生存时间，减缓其体质量下降，改善其受损的肺功能指标。同时，与模型组相比，GRg1给药组小鼠肺组织病理损伤评分降低，肺组织湿干比和肺泡灌洗液蛋白含量降低，血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肺组织中上述细胞因子的mRNA表达下降，肺泡上皮细胞凋亡比例明显下降，caspase-3、Bax、Bcl-2表达下调，PERK、eIF2α、ATF4、CHOP活化及表达下调。体外结果显示联合TUN后，GRg1降低凋亡细胞比例、下调凋亡相关蛋白表达的作用被抑制。综上，GRg1可减少肺泡上皮细胞凋亡，抑制肺部炎症渗出，减轻肺损伤，改善肺功能，可能与PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关。

关键词：脓毒症人参皂苷Rg 急性肺损伤内质网应激细胞凋亡

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后交叉韧带重建的国际研究趋势与热点分析

中国组织工程研究 2024年第18期28卷 2947-2952页

作者：葛昊刘贤旺黄艺伟叶鹏程樊粤光曾建春广州中医药大学广东省广州市510000 广州中医药大学第一附属医院关节骨科广东省广州市510000 广州中医药大学第一附属医院白云医院骨科广东省广州市510000

背景:现如今由运动损伤或车辆创伤引起的后交叉韧带损伤比人们想象的更常见,后交叉韧带重建是其主要治疗方式之一,而目前后交叉韧带重建的手术方式和韧带选择尚存在大量争议。目的:全面分析全球后交叉韧带重建的应用趋势,并基于文献计... 详细信息

背景:现如今由运动损伤或车辆创伤引起的后交叉韧带损伤比人们想象的更常见,后交叉韧带重建是其主要治疗方式之一,而目前后交叉韧带重建的手术方式和韧带选择尚存在大量争议。目的:全面分析全球后交叉韧带重建的应用趋势,并基于文献计量学和视觉分析确定有前景的后交叉韧带重建研究热点。方法:从Web of Science数据库(WOS)中检索了2000-2022年与后交叉韧带重建相关的出版物(文章和评论),提取并详细分析了国家、机构、出版年份、作者、期刊、每篇文章的平均引用率、H指数、标题、出版物的关键词以及被引用次数最多的25篇文章。利用VOSviewer/citespace/Pajek软件分析关键词的共现结果,预测后交叉韧带重建的热点。结果与结论:共纳入664篇文章。①在过去的22年里,后交叉韧带重建文章的数量总体上呈上升趋势。前3个国家(美国、中国和韩国)占所有发表文章的65.51%,美国的文章数量最多。University of Pittsburgh是最大的贡献者。《Knee Surgery Sports Traumatol Arthrosc》和《American Journal of Sports Medicine》是最有影响力的杂志。Laprade,Robert F是在后交叉韧带重建领域发文量最多的教授,Fanelli,GC是在后交叉韧带重建领域总链强度最高的教授。②研究方向可分为以下5个组别:“后交叉韧带解剖及生物力学研究”“后交叉韧带重建的预后、结果和并发症”“后交叉韧带重建方式与肌腱选择”“手术技术”和“后交叉韧带撕裂联合多韧带损伤”。③提示:从往年的趋势来看,未来将有越来越多与后交叉韧带重建有关的文献发表。在后交叉韧带重建领域,美国处于世界领先地位,中国和韩国则呈现出巨大的潜力。后交叉韧带解剖及生物力学研究、后交叉韧带重建方式与肌腱选择、后交叉韧带撕裂联合多韧带损伤可能是未来后交叉韧带重建研究领域的热点。

关键词：文献计量学研究趋势热点后交叉韧带重建术可视化图谱生物力学

外周血单核细胞预测老年重症流感风险模型的建立及靶向中药预测

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中草药 2024年第10期55卷 3420-3432页

作者：黎祖鸣封杰妮符珊珊陈俊旭甘考卢月陈剑坤刘云涛杨荣源李际强黄涛亮广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的... 详细信息

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的性味归经、药物分类,为中医药治疗老年流感提供理论支持。方法通过scRNA-seq和RNA-seq数据集得到具有较高预测能力的老年流感相关免疫细胞群及其关键基因。基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)、标志性基因集(Hallmark gene set)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和Reactome生物通路知识库富集分析揭示关键基因参与的生物过程及通路。循环算法用于构建老年重症流感风险预测模型。CTD和COREMINE数据库查找对关键基因有调控作用的化学成分及中药,并通过古今医案云平台统计高频中药的性味归经、药物分类。结果单核细胞及其相关基因对于老年流感具有较高的预测能力。老年流感单核细胞相关基因显著富集在感染、代谢和炎症免疫等生物过程及信号通路。5个基因(BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9)的组合可较为准确预测老年重症流感。根据参考文献筛选出42种化学成分,得到高频中药石斛、灵芝、地骨皮、人参、桑叶等;药性以平、寒、温为主;药味以甘、苦、辛为主;归经以肝、脾、肺经居多;以补虚药、清热药、利水渗湿药、解表药、活血化瘀药、消食药、止咳平喘药为主。结论单核细胞可能在老年流感中发挥重要作用。BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9可能是老年重症流感的潜在诊断及治疗靶标。通过生物信息学分析得出老年流感单核细胞相关基因及对应的高频中药,为治疗老年流感的中药新药开发及临床应用提供了新思路。

关键词：老年重症流感单细胞转录组转录组风险预测模型单核细胞石斛灵芝地骨皮人参桑叶