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全转录组学关联分析研究开心散缓解乳腺癌化疗性认知障碍的作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：吴迎朝吴芃田欢崔佳琦左谦皮大锦陈利国罗雪花陈前军欧阳明子广州中医药大学第二临床医学院暨南大学中医学院广州中医药大学第二附属医院中医证候全国重点实验室广东省中医院乳腺科广东省中医药科学院广州中医药大学东莞医院暨南大学附属第一医院

研究开心散对化疗小鼠行为学和脑组织的影响，以探究开心散治疗荷瘤小鼠化疗性认知障碍的作用机制。将30只雌性BALB/c小鼠通过乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型，并随机均分为肿瘤组、阿霉素组和开心散组。通过旷场实验、... 详细信息

研究开心散对化疗小鼠行为学和脑组织的影响，以探究开心散治疗荷瘤小鼠化疗性认知障碍的作用机制。将30只雌性BALB/c小鼠通过乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型，并随机均分为肿瘤组、阿霉素组和开心散组。通过旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验、悬尾实验、Morris水迷宫、新物体识别实验等行为学检测，苏木素-伊红染色、尼氏染色、固蓝染色、Fluoro-Jade B染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记、免疫荧光染色、透射电子显微镜等病理检测，运用网络药理学和全转录组学测序等方法分析化疗性认知障碍产生的机制以及开心散的作用靶点。结果显示，开心散可以防止化疗引起的行为学改变（P<0.001），增加旷场实验总运动路程和中央区停留时间比，增加高架十字迷宫实验开臂区探索时间，减少强迫游泳实验和悬尾实验静止时间，减少Morris水迷宫逃逸潜伏期和增加穿越平台次，提高新物体识别实验认知指数；抑制化疗引起的前额叶皮质神经炎症、细胞凋亡、细胞自噬等组织损伤；并重塑化疗过程中前额叶皮质组织的RNA表达谱（P<0.05）。综上研究表明，开心散可能通过重塑化疗过程中前额叶皮质组织的RNA表达谱，减轻神经元组织损伤，最终缓解荷瘤小鼠的化疗性认知障碍。

关键词：开心散转录组学网络药理学化疗性认知障碍乳腺癌

基于“浊害清和”理论探讨糖尿病视网膜病变的病机与辨治

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2623-2626页

作者：马倩常蕊庞龙广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院广州510120

“浊害清和”是明代眼科大家傅仁宇提出的有关中医病机的理论思想,其对阐释糖尿病视网膜病变的发生、发展、转归及治疗具有重要的指导意义,但既往研究对这一理论的认识较少,文章旨在探讨“浊、清、和”的意义以及“浊害清和”的内涵,从... 详细信息

“浊害清和”是明代眼科大家傅仁宇提出的有关中医病机的理论思想,其对阐释糖尿病视网膜病变的发生、发展、转归及治疗具有重要的指导意义,但既往研究对这一理论的认识较少,文章旨在探讨“浊、清、和”的意义以及“浊害清和”的内涵,从微循环视角探讨“浊害清和”在糖尿病视网膜病变中的作用机制。同时,文章认为,浊邪内蕴、精气虚衰、清窍失濡是糖尿病视网膜病变的关键病机,湿热痰瘀毒为病理产物,脾肝肾是病后虚衰的主要脏腑,并从“浊害清和”逆向确立“化浊补虚”的基本治疗思路,以清热除湿、化痰活血、解毒祛浊、补脾调肝益肾为核心治法,以期为中西医结合治疗糖尿病视网膜病变提供借鉴。

关键词：浊害清和糖尿病视网膜病变微循环病机治疗

基于循证医学原则探讨针刺双盲试验装置与举例

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中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1566-1569页

作者：宁百乐邓启粤吴倩王舢泽梁雪松符文彬广州中医药大学第二临床医学院广州510120 广东省中医院广州510120

循证医学中强调随机对照临床试验是目前评估医学干预措施临床效果最严谨、最可靠的科学方法,但目前针刺试验面临着棘手的问题——如何设计规范的安慰针对照组。针对此问题,本团队研发了一款针刺临床双盲试验装置,该装置有如下特点:安慰... 详细信息

循证医学中强调随机对照临床试验是目前评估医学干预措施临床效果最严谨、最可靠的科学方法,但目前针刺试验面临着棘手的问题——如何设计规范的安慰针对照组。针对此问题,本团队研发了一款针刺临床双盲试验装置,该装置有如下特点:安慰组与治疗组所用装置外观一致,操作简易,对操作者及受试者都有良好的蒙蔽作用;装置由针管与球体的螺纹连接,其可实现360°试验角度,满足斜刺等多角度针刺试验;装置可调节针刺深度,也满足留针要求,可应用于针刺手法临床试验;可配合已有针具,一根针一个器具使用,降低针刺感染等风险,适用范围广。本装置可在临床试验研究中推广应用,为针刺双盲试验中安慰针组设计提供思路。

关键词：临床随机试验安慰组针刺循证医学双盲试验装置

皮肤黑色素瘤差异表达基因的生物信息学分析及调控中药预测

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中草药 2024年第2期55卷 551-562页

作者：王梓霞黄羽欣谢锦楠王沐瑶王文辉广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510499 广州中医药大学东莞医院广东东莞523000

目的通过生物信息学技术分析皮肤黑色素瘤患者皮肤组织与非癌皮肤组织的基因表达微阵列数据,筛选出皮肤黑色素瘤的差异表达基因,预测可用于诊断和治疗皮肤黑色素瘤的生物标志物及潜在中药。方法从基因表达数据库(Gene Expression Omni... 详细信息

目的通过生物信息学技术分析皮肤黑色素瘤患者皮肤组织与非癌皮肤组织的基因表达微阵列数据,筛选出皮肤黑色素瘤的差异表达基因,预测可用于诊断和治疗皮肤黑色素瘤的生物标志物及潜在中药。方法从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)提取GSE3189、GSE114445、GSE46517基因芯片,使用GEO2R工具筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。利用DAVID数据库对DEGs进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;使用String数据库构蛋白-蛋白互作网络,应用Cytoscape软件及其插件筛选PPI网络中关键基因,应用GSCA数据库进行关键基因的突变分析。通过Gepia 2.0数据库结合癌症基因组图谱数据集(Cancer Genome Atlas,TCGA)对关键基因进行生存分析。根据度(degree)值和生存分析结果综合筛选出核心基因(集),应用GSCA数据库对核心基因(集)进行泛癌分析和免疫浸润分析,并使用TIMER 2.0数据库对核心基因分别进行免疫浸润分析。使用Coremine Medical数据库预测作用于关键基因的潜在中药。结果共筛选出DEGs 114个,其中上调基因36个,下调基因78个。上调DEGs主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号等通路,下调DEGs主要富集在细胞黏附、细胞增殖的正调控等方面。15个关键基因为EGFR、KPNA2、GATA3、AURKA、TYMS、PKP1、SPP1、MMP1、KLF4、EPCAM、KIF23、DTL、CLDN1、LCP2、FGFR2,其中共3个基因KPNA2、AURKA、DTL被视为核心基因(集)。潜在治疗中药有丹参、人参、构皮、高良姜、甘草、蓖麻子、油桐叶等。结论皮肤黑色素瘤中关键基因的突变以FGFR2的错义突变为主,突变方式多为胞嘧啶(C)向胸腺嘧啶(T)的转换。EGFR、KPNA2、GATA3、AURKA、PKP1、DTL、LCP2对皮肤黑色素瘤的生存预后存在显著影响。核心基因集在多种癌症中显著上调,并与自然调节性T细胞(natural regulatory T-cells,nTreg)细胞、树突状细胞、单核细胞等免疫细胞的浸润有关。潜在调控中药包括补虚药、清热解毒药、拔毒生肌药、消肿拔毒药、温里药、健脾利湿药、利水渗湿药、活血化瘀药、安神药9类,在相关古籍中存在对应的中医内外治经验记载,其中药活性成分亦被证明对皮肤黑色素瘤存在一定的调控和抑制作用。

关键词：皮肤黑色素瘤差异表达基因核心基因中药预测生物信息学丹参人参构皮高良姜甘草蓖麻子油桐叶

胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线影响的有限元分析

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中国修复重建外科杂志 2024年第6期38卷 734-741页

作者：韩龙飞林天烨何敏聪何晓铭詹芝玮陆舜曾子俊林锟田佳庆侯文渊魏腾飞魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广州510405 广东省中医骨伤研究院广州510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广州510378 中医证候全国重点实验室/骨科广州中医药大学第三附属医院广州510378

目的采用有限元分析胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线的影响,为临床上胫骨平台下骨量减少的膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者预防下肢力线内移合并膝关节内翻提供力学证据。方法选取1名健康成人为研究对象,获取其X... 详细信息

目的采用有限元分析胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线的影响,为临床上胫骨平台下骨量减少的膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者预防下肢力线内移合并膝关节内翻提供力学证据。方法选取1名健康成人为研究对象,获取其X线片和CT影像数据并导入Mimics 21.0软件,重建完整膝关节模型及3个体积相等、形态不同的胫骨平台下低密度区模型,导入Solidworks 2023软件中进行模型装配、验证。分别构建胫骨平台下低密度区骨量减少22%、33%、44%、55%、66%的5个KOA有限元模型及骨量减少66%的低密度区模型等比例缩放81%、90%、100%、110%、121%的5个KOA有限元模型。根据生理状态下人体下肢负荷情况,胫、腓骨远端设置完全固定,在股骨头表面主要负重区施加沿下肢力线方向、大小为1860 N的轴向压强载荷,利用有限元分析软件Abaqus 2022计算分析胫骨平台内侧最大应力及胫骨皮质骨、松质骨最大位移,进而预测下肢力线改变趋势。结果构建的KOA模型符合下肢正常解剖结构。在相同边界条件、相同载荷情况下,随着胫骨平台下低密度区骨量逐渐减少,以及胫骨平台下低密度区体积逐渐增大,胫骨内侧平台最大应力及胫骨皮质骨、松质骨最大位移均随之增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胫骨平台下出现低密度区提示膝内翻及下肢力线内移可能性增加,且低密度区体积和骨量减少程度是关键促发因素,可指导临床医生提前预防,避免膝内翻发生。

关键词：膝关节骨关节炎下肢力线低密度区膝内翻有限元分析

2型糖尿病患者中医湿证与冠状动脉周围脂肪组织参数相关性研究

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中国中西医结合杂志 2024年第5期44卷 529-536页

作者：唐雨青郭思恩李禹慧陈文生田铁桥刘国清王磊广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广州中医药大学第二附属医院心律失常科广州510120 广州中医药大学第二附属医院影像科广州510120

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者中医湿证与冠状动脉周围脂肪组织(PCAT)的相关性。方法纳入585例接受冠脉CT血管造影(CTA)且住院治疗的T2DM患者,根据中医证候分为湿证组(366例)和非湿证组(219例),收集患者临床资料,使用自动图像分析软件... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者中医湿证与冠状动脉周围脂肪组织(PCAT)的相关性。方法纳入585例接受冠脉CT血管造影(CTA)且住院治疗的T2DM患者,根据中医证候分为湿证组(366例)和非湿证组(219例),收集患者临床资料,使用自动图像分析软件测量PCAT相关参数—右冠状动脉脂肪组织衰减指数(RCA-FAI)。比较两组间基线资料[体重指数(BMI)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等],采用Pearson或者Spearman分析湿证与各变量相关性,二元Logistic回归分析T2DM湿证患者影响因素,建立ROC曲线分析PCAT对T2DM合并冠状动脉疾病(CAD)湿证的预测价值。结果 T2DM湿证组RCA-FAI高于T2DM非湿证组(P<0.001),且T2DM湿证组BMI、TG、TC和LDL-C高于T2DM非湿证组(P<0.05)。相关性分析显示,湿证积分与RCA-FAI、BMI、TG、TC和LDL-C呈正相关关系(P<0.05)。多因素回归分析显示,BMI、RCA-FAI是T2DM湿证患者影响因素。其中ROC曲线显示RCA-FAI预测T2DM合并CAD湿证的曲线下面积为0.638(95%CI:0.588~0.687)。结论 PCAT相关参数RCA-FAI与T2DM湿证患者显著相关。(中国临床试验注册中心***2400079869)

关键词： 2型糖尿病湿证冠状动脉周围脂肪组织血管周围脂肪衰减指数

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中医湿证动物模型宏观评价工具的研制

中医杂志 2024年第14期65卷 1449-1457页

作者：黎创徐鹏田瑞敏曹肇睿刘铭家张蕾卢钊宇蓝涛华王晓婉毛炜广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东省广州市510120 广东省中医院广州中医药大学第二临床医学院

目的构建中医湿证动物模型宏观评价工具,为中医湿证的实验研究提供依据。方法明确中医湿证动物模型相关研究涉及的概念及其内涵,构建理论框架,建立中医湿证动物模型评价的维度。检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文... 详细信息

目的构建中医湿证动物模型宏观评价工具,为中医湿证的实验研究提供依据。方法明确中医湿证动物模型相关研究涉及的概念及其内涵,构建理论框架,建立中医湿证动物模型评价的维度。检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)及中国生物医学文献数据库建库至2023年6月30日纳入的动物实验类文献,构建湿证动物模型评价宏观条目池,筛选并提取核心条目进行因子分析、聚类分析。基于文献研究结果形成专家重要性评分问卷,分析各条目得分的重要程度分布、重要性均值、变异系数、肯德尔和谐系数,综合文献分析、专家重要性评分及专家具体意见,删除不能满足“重要性评分均值≥2.04”“变异系数≤30%”“文献评价中出现频率≥2%”三个条件中至少一个的条目,初步构建中医湿证动物模型宏观评价工具。结果以神态形态、自主活动状态、体表特征、饮食、二便、舌象、运动行为学评估作为中医湿证动物模型宏观评价的7个维度。经过筛选共纳入文献348篇,形成包含72个条目的饱和条目池,筛选优化后获得38个核心条目,因子分析抽取16个公因子,进一步聚类分析成2类,分别命名为“湿从热化证”和“湿从寒化证”。专家重要性评分结果表明,肯德尔和谐系数为0.359 (P中医湿证动物模型宏观评价工具及相应的评判湿证成模标准。结论中医湿证动物模型宏观评价工具具有较强的科学性、可信度及可操作性,经实测数据考评其特性后可供湿证动物实验过程中评估使用。

关键词：湿证动物模型模型评价工具专家重要性评分

清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎痰热壅肺证的多中心随机对照研究

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中草药 2024年第12期55卷 4099-4107页

作者：金少涵朱梦婷罗胜刘兴华范斐婷肖晶旻吴蕾林琳陈远彬中医证候全国重点实验室/呼吸科广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院)广东广州510000 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州市番禺区中医医院广东广州511400 东莞市中西医结合医院广东东莞523819

目的观察清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)痰热壅肺证患者的疗效和安全性。方法采用多中心、随机双盲、安慰剂平行对照临床试验设计,纳入成人CAP痰热壅肺证患者80例,按1∶1比例随机... 详细信息

目的观察清咳平喘颗粒联合西医常规治疗成人社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)痰热壅肺证患者的疗效和安全性。方法采用多中心、随机双盲、安慰剂平行对照临床试验设计,纳入成人CAP痰热壅肺证患者80例,按1∶1比例随机分为治疗组和对照组,在西医常规治疗基础上,治疗组给予清咳平喘颗粒,对照组给予清咳平喘颗粒模拟剂,两组疗程均为10 d。观察两组患者的临床疗效,比较两组患者治疗前后肺炎影像学吸收评价得分、咳嗽和咳痰症状消失的患者比例和时间、咳嗽和咳痰评估问卷(cough and sputum assessment questionnaire,CASA-Q)、CURB-65(confusion,urea,respiratory rate blood pressure,age 65)评分、血白细胞计数、中性粒细胞百分比、C反应蛋白、抗感染治疗天数及不良事件发生率的差异。结果治疗后,治疗组的总有效率为94.87%,明显高于对照组的74.36%,具有统计学意义(P0.05);针对咳痰严重程度进行亚组分析,治疗组中重度咳痰患者的肺炎影像学吸收评分明显低于对照组(P0.05)。试验期间未发生严重不良事件,两组不良事件发生率无差异。结论在西医常规治疗基础上,清咳平喘颗粒能有效减少CAP抗感染治疗天数,改善咳痰症状,缩短咳痰症状消失时间,且安全性良好。

关键词：社区获得性肺炎痰热壅肺证清咳平喘颗粒随机对照试验中西医结合

解毒活血汤调控YAP/ACSL4通路抑制铁死亡治疗急性肾损伤的作用与机制研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 151-161页

作者：程冉田瑞敏黄丽华王晓婉郭珊吴爱君黎创陈静李淑菊陈明毛炜徐鹏广州中医药大学第二附属医院&广东省中医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510120 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广东省中医药科学院广东广州510006 澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 黑龙江省中医药科学院黑龙江哈尔滨150036

解毒活血汤出自王清任《医林改错》,是国医大师张琪教授根据急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)热毒瘀滞病机从古方中筛选出应用临床数十年的有效方剂,该文拟从调控铁死亡(ferroptosis)角度阐释解毒活血汤对AKI的治疗作用及其潜在机... 详细信息

解毒活血汤出自王清任《医林改错》,是国医大师张琪教授根据急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)热毒瘀滞病机从古方中筛选出应用临床数十年的有效方剂,该文拟从调控铁死亡(ferroptosis)角度阐释解毒活血汤对AKI的治疗作用及其潜在机制。将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组及解毒活血汤低、高剂量组,每组8只。由于临床AKI的治疗普遍以支持或替代疗法为主,尚无特效药,故该实验未设置阳性药物组。解毒活血汤低剂量组对应0.5倍的临床等效剂量,高剂量组则对应临床等效剂量,予以每日晨间灌胃,连续干预7 d;正常组及模型组小鼠分别灌以相应体积的纯水。给药第5天时,除正常组外其余各组小鼠均按20 mg·kg^(-1)的剂量腹腔注射顺铂溶液进行造模,正常组给予生理盐水注射。造模72 h后取材,留取小鼠血清及肾脏组织,检测血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平以评价小鼠肾脏功能变化;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,KIM-1)的表达水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察小鼠肾组织病理学改变;过碘酸雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色法观察肾脏糖原沉积变化;普鲁士蓝染色观察肾组织铁沉积水平;生化比色法检测肾组织中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)活力。采用Wes-tern blot法检测小鼠肾组织中酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)、溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3(lysophosphatidylcholine acyltransferase 3,LPCAT3)及Hippo通路关键分子Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)蛋白表达;免疫组化法检测YAP在肾组织中的定位与相对表达;再采用实时荧光定量PCR法检测ACSL4及谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)mRNA表达。结果显示,与正常组相比,顺铂诱导的AKI小鼠血清中Scr、BUN、KIM-1水平显著升高;肾组织病理显示,模型组小鼠肾小管上皮细胞发生显著萎缩坏死脱落,肾小管刷状缘消失,管内大量蛋白管型填充,小管空泡样变性,肾间质增宽且可见水肿,肾脏结构严重损伤,肾小管损伤评分显著升高;肾组织部分区域有明显的铁沉积;肾组织GSH含量、SOD及CAT活力显著降低;同时,肾组织中铁死亡标志分子ASCL4、LPCAT3显著升高,GPX4显著降低,YAP显著上调。与模型组相比,高剂量解毒活血汤可有效保护肾脏功能,降低Scr、BUN、KIM-1水平,减轻肾脏病理损伤及糖原沉积和铁沉积;提升肾组织中GSH含量、SOD及CAT活力。进一步的机制研究表明,解毒活血汤组ACSL4、LPCAT3及YAP蛋白表达较模型组显著降低,而GPX4水平显著升高。综上,解毒活血汤可以通过调控YAP/ACSL4信号通路抑制铁死亡,对顺铂诱导的AKI发挥保护作用。

关键词：解毒活血汤急性肾损伤(AKI) 铁死亡 Yes相关蛋白(YAP) 酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)