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多巴胺奖赏系统参与抑郁环路机制及中医药干预研究思考与展望

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中国药理学通报 2024年第8期40卷 1424-1429页

作者：李卓娴周流畅叶丽宏邓迪赵金兰史亚飞张荣广州中医药大学基础医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120 广州中医药大学中药学院/国际转化医学研究所广东广州510006

在寻找提升抗抑郁疗效新策略的过程中,中医药干预逐渐展露出其独特的防治优势。多巴胺奖赏系统密切参与了抑郁症的病理发生发展过程,现今研究多聚焦于多巴胺奖赏系统中某一特定核团的功能机制,而着眼于神经环路功能机制所开展的研究较... 详细信息

在寻找提升抗抑郁疗效新策略的过程中,中医药干预逐渐展露出其独特的防治优势。多巴胺奖赏系统密切参与了抑郁症的病理发生发展过程,现今研究多聚焦于多巴胺奖赏系统中某一特定核团的功能机制,而着眼于神经环路功能机制所开展的研究较少。当前奖赏环路的微观研究中,奖赏环路异常和焦虑、抑郁等负面情绪的关联性已获得广泛认可,中医药干预可通过影响奖赏环路发挥抗抑郁作用。该文围绕多巴胺奖赏系统参与抑郁症的环路机制以及中医药干预研究做一综述。

关键词：抑郁症奖赏系统神经环路多巴胺腹侧背盖区伏隔核

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心火脾虚证型特应性皮炎患者汗液差异代谢物及相关通路分析

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中国皮肤性病学杂志 2024年第9期38卷 975-981页

作者：王家爵谢凌峰莫秀梅李红毅广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二临床医学院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510120 广东省中医院皮肤科广东广州510120 广东省中医皮肤病研究所广东广州510120

目的探究心火脾虚证型特应性皮炎(AD)患者汗液差异代谢物与相关通路。方法招募心火脾虚证型特应性皮炎患者与健康志愿者各22例。对所收集的汗液标本进行广泛靶向代谢组学检测,通过多元统计分析筛选出差异代谢物。利用京都基因与基因组... 详细信息

目的探究心火脾虚证型特应性皮炎(AD)患者汗液差异代谢物与相关通路。方法招募心火脾虚证型特应性皮炎患者与健康志愿者各22例。对所收集的汗液标本进行广泛靶向代谢组学检测,通过多元统计分析筛选出差异代谢物。利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库、人类代谢组数据库(HMDB)对差异代谢物进行相关通路与关联疾病分析。结果在两组汗液标本间,共筛选出115个差异代谢物。经KEGG数据库注释分析,共涉及15个通路。HMDB关联疾病分析结果提示与消化系统疾病关系密切,包括结直肠癌、嗜酸性食管炎、克罗恩病和溃疡性结肠炎。结论心火脾虚证型特应性皮炎患者与健康对照组间存在众多差异代谢物,可为共病临床早期预警提供线索。

关键词：特应性皮炎汗液代谢组学心火脾虚

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心阳片通过抑制骨桥蛋白介导的心脏纤维化信号改善尿毒症心肌病小鼠的作用和机制

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2273-2280页

作者：倪世豪何星灵欧阳小露张小娇李锦陈星伶刘东华孙术宁李姿儒李思静龙文杰廖慧丽王陵军冼绍祥鲁路杨忠奇中医证候全国重点实验室广州中医药大学第一附属医院广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心广州510405 广东省普通高校慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广州510405 广州市慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广州510405 广东省中医临床研究院广州510405

目的:探究心阳片通过调控骨桥蛋白(OPN)介导的心脏纤维化信号改善尿毒症心肌病(UCM)小鼠的作用和机制。方法:采用5/6肾切除(NPM)术构建UCM小鼠模型,并随机分为模型组、心阳片组、美托洛尔组,每组15只,另外15只假手术小鼠作为假手术组。... 详细信息

目的:探究心阳片通过调控骨桥蛋白(OPN)介导的心脏纤维化信号改善尿毒症心肌病(UCM)小鼠的作用和机制。方法:采用5/6肾切除(NPM)术构建UCM小鼠模型,并随机分为模型组、心阳片组、美托洛尔组,每组15只,另外15只假手术小鼠作为假手术组。心阳片组、美托洛尔组术后分别给予心阳片(0.34 g/kg)、美托洛尔(0.35g/kg)灌胃,假手术组及模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,治疗8周。给药1、4、8周使用小动物超声观察小鼠心功能变化;8周后观察、检测小鼠毛发光泽、精神状态、抓力、自主活动次数和肛温等阳虚证候表现;检测小鼠血肌酐、尿素氮水平;WGA染色法、TUNEL染色法、天狼猩红染色法观察小鼠心脏组织形态学变化及胶原纤维沉积情况;qPCR法检测小鼠心脏纤维化相关基因mRNA表达;免疫荧光法观察小鼠心脏α-SMA表达;通过心脏转录组数据联合实验手段探究心阳片改善UCM心脏纤维化的作用和机制。结果:与模型组比较,心阳片改善UCM小鼠毛发光泽和精神状态,改善抓力、自主活动次数和肛温(P<0.05);改善心脏收缩和舒张功能(P<0.05);改善心肌细胞面积(P<0.05);减少凋亡心肌细胞数量(P<0.05);减少心脏纤维化面积(P<0.05);降低纤维化相关基因(acta2、col1a1、col2a1、mmp3、mmp9)mRNA表达和α-SMA蛋白表达(P<0.05);而对血肌酐和尿素氮水平无明显影响。基因集富集(GSEA)分析结果显示心阳片抑制OPN信号。免疫荧光结果显示心阳片降低UCM小鼠心脏心肌细胞、巨噬细胞与成纤维细胞OPN蛋白表达(P<0.05);qPCR结果表明心阳片降低心脏巨噬细胞spp1 mRNA表达(P<0.05);ELISA检测结果表明心阳片降低血清OPN水平(P<0.05)。然而,OPN表达升高能够抵消心阳片对心脏纤维化的改善作用(P<0.05)。结论:心阳片能有效改善UCM,其作用机制可能是通过抑制OPN介导的心脏纤维化信号实现。

关键词：尿毒症心肌病温阳利水法心阳片骨桥蛋白纤维化

广州市某医院2021—2023年临床分离耐碳青霉烯大肠埃希菌的流行病学特征

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中国热带医学 2024年

作者：陈雨顺张丽玲苏敏璇吴玫娜徐浩祥敖小君陈茶沈聪广州中医药大学第二临床医学院中医证候全国重点实验室/检验医学部广东省中医院

目的探讨广州市某医院2021—2023年临床分离的耐碳青霉烯大肠埃希菌（carbapenem-resistant Escherichia coli, CREC）的流行病学特征，为CREC感染的防控提供科学依据。方法收集2021—2023年该院分离的非重复CREC菌株，分析其临床特... 详细信息

目的探讨广州市某医院2021—2023年临床分离的耐碳青霉烯大肠埃希菌（carbapenem-resistant Escherichia coli, CREC）的流行病学特征，为CREC感染的防控提供科学依据。方法收集2021—2023年该院分离的非重复CREC菌株，分析其临床特征。随机挑选42株进行物种鉴定、抗微生物药物敏感性试验和多位点序列分型。通过全基因组测序及生物信息学分析，探究CREC携带的耐药基因、毒力基因、复制子及碳青霉烯耐药基因所在质粒类型。结果 2021—2023年该院共分离大肠埃希菌（Escherichia coli, EC）2 887株，其中CREC 105株。3年间CREC的检出率分别为1.76%、2.80%和5.69%，呈显著上升趋势（P<0.001）。该院CREC对多种抗生素耐药，其中阿莫西林-克拉维酸、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率均为100.00%，厄他培南和亚胺培南的耐药率为97.62%，左氧氟沙星为83.33%，阿米卡星为45.24%。所有CREC分离株均对替加环素敏感。42株CREC分为14种ST型，主要的ST型为ST167（28.57%）、ST410（26.19%）和ST131（9.52%）。ST410型CREC携带的fim、algA、icsP/sopA和高致病性毒力岛（high-pathogenicity island, HPI）相关毒力基因显著高于ST167型CREC（P<0.05），而aslA、hcp-2显著低于ST167（P<0.05）。该院CREC携带的碳青霉烯耐药基因主要为blaNDM-5（n=34），其次是blaNDM-1（n=6），仅有1株携带blaKPC-2，上述耐药基因主要位于IncF（n=27）和IncX3（n=11）型质粒。结论 2021—2023年该院CREC检出率显著上升，以ST167和ST410型为主。ST410型CREC是一种新流行的高危克隆，携带了黏附、生物膜形成和HPI相关毒力基因，亟需监测其流行现状和传播特征，为防控措施的制定提供依据。

关键词：耐碳青霉烯大肠埃希菌 ST410 细菌耐药全基因组测序

中风醒脑液通过抑制神经元铁死亡发挥抗脑出血损伤的作用机制研究

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中国中药杂志 2024年第17期49卷 4723-4733页

作者：李孟英郭建文邵翀羽泮智勇陈天杭周科峰周惠芬万海同浙江中医药大学第一附属医院浙江杭州310006 浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 全省中医心脑血管病重点实验室浙江杭州310053 广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510120 广州中医药大学第二附属医院脑病中心广东广州510120

中风醒脑液在临床上已被用于治疗脑出血。然而,目前对中风醒脑液的药理作用尚不明确。探讨中风醒脑液的药理作用对指导脑血管疾病的治疗至关重要。向大鼠右侧尾状核注射Ⅶ型胶原酶建立体内脑出血模型。将SD大鼠随机分成5组,用Bederson... 详细信息

中风醒脑液在临床上已被用于治疗脑出血。然而,目前对中风醒脑液的药理作用尚不明确。探讨中风醒脑液的药理作用对指导脑血管疾病的治疗至关重要。向大鼠右侧尾状核注射Ⅶ型胶原酶建立体内脑出血模型。将SD大鼠随机分成5组,用Bederson评分法评估大鼠术后的神经功能缺损情况。核磁共振成像(MRI)用于评估脑出血的体积。苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理改变,透射电镜(TEM)观察脑组织超微结构变化。流式细胞术测定活性氧(ROS)水平。免疫荧光双染法检测脑组织血肿周围神经元中铁转运蛋白标记物谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达。Western blot法检测脑出血后RNA解旋酶和ATP酶1(UPF1)、铁泵蛋白(FPN)、酰基辅酶A连接酶4(ACSL4)、环氧化酶2(COX2)、GPX4、NADPH氧化酶1(NOX1)和胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(SLC7A11)的表达。与模型组相比,中风醒脑液治疗5 d后大鼠神经功能障碍明显减轻,血肿体积减小,脑出血病理损伤减轻;与此同时,Fe^(2+)和氧化应激水平显著降低,抑制铁死亡的蛋白表达量显著增加。综上,中风醒脑液可通过显著抑制神经元铁死亡改善大鼠脑出血的预后,为中风醒脑液的临床应用提供了有价值的指导。中风醒脑液的抗铁死亡作用可能与促进膜转运蛋白SLC7A11和FPN的表达有关。

关键词：脑出血铁死亡中风醒脑液神经元死亡

暖心康抑制内皮间充质转化减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并动脉粥样硬化小鼠斑块形成

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 789-797页

作者：王明炀王陵军梁碧容陈梓欣曹艳红张钰冰李淑贤刘景广州中医药大学第一附属医院/广州中医药大学第一临床医学院/中医证候全国重点实验室广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心/广东省普通高校慢性心力衰竭中医药防治重点实验室/广州市慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广东广州510405 广东省中医临床研究院广东广州510405

目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg·... 详细信息

目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg·kg^(-1))以及暖心康低、中、高剂量组(生药量3.5、7.0、14.0 g·kg^(-1)),每组8只。采用将小鼠长期在睡眠期间暴露于慢性间歇性缺氧(CIH)环境,联合高脂饲料喂养,复制OSAHS合并AS小鼠模型。采用油红O染色法观察小鼠主动脉内壁斑块形成情况;Masson三色染色法评估小鼠主动脉根部粥样斑块的胶原含量;免疫荧光法检测主动脉斑块中内皮细胞标志物CD31及EndMT标志物Vimentin的表达情况;ELISA法测定血脂水平;qPCR法检测主动脉组织中EndMT标志物α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠的主动脉粥样斑块面积显著增加(P部斑块胶原沉积面积显著增加(P部粥样斑块的胶原沉积面积均明显缩小(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠斑块处CD31阳性表达细胞数量明显增加(P<0.05),暖心康中、高剂量组小鼠斑块处Vimentin阳性表达细胞数量明显减少(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠的血清TG水平显著降低(P<0.01),暖心康各给药组小鼠的血清T-CHO、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),暖心康中、高剂量组小鼠的血清HDL-C水平显著升高(P<0.01);暖心康各给药组小鼠主动脉组织中α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论暖心康可以有效减轻OSAHS合并动脉粥样硬化小鼠的斑块形成,可能与其抑制EndMT,减少胶原纤维形成有关。

关键词：暖心康内皮间充质转化阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征动脉粥样硬化小鼠

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气虚痰湿证小鼠模型的构建及评价

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：周绮纯朱港星邹永春蓝宝仪崔展瑜王晰徐梦菲唐青王苏美广州中医药大学第二临床医学院中医药防治非小细胞肺癌临床与基础研究团队广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二临床医学院中医证候全国重点实验室广州中医药大学第二临床医学院省部共建中医湿证国家重点实验室

目的：气虚痰湿证是中医临床常见的证型，但目前尚无规范的、科学准确的气虚痰湿证候动物模型的构建方法报道。本研究旨在运用多因素复合造模的方法构建气虚痰湿证小鼠模型，并对模型进行评价。方法：将21只C57BL/6小鼠随机分为3组，每... 详细信息

目的：气虚痰湿证是中医临床常见的证型，但目前尚无规范的、科学准确的气虚痰湿证候动物模型的构建方法报道。本研究旨在运用多因素复合造模的方法构建气虚痰湿证小鼠模型，并对模型进行评价。方法：将21只C57BL/6小鼠随机分为3组，每组7只，分别为正常组、模型组和参苓白术散组。正常组采用普通饮食，于正常环境下饲养；模型组和参苓白术散组采用高脂饮食喂养、高湿环境饲养、负重力竭游泳和冷水或猪油灌胃的方法构建气虚痰湿证小鼠模型。为了以方测证，在模型构建后参苓白术散组小鼠给予参苓白术散治疗14天。测定小鼠的力竭游泳时长、体质量、血清血脂水平、舌象、“气虚痰湿型”评估量表评分和盲肠指数。将各组小鼠的粪便送检宏基因组和代谢组测序，分析其中肠道菌群和代谢物的变化。结果：气虚痰湿造模后，小鼠的力竭游泳时长明显减短（P湿证候造模后小鼠体内肠道菌群和粪便代谢物发生显著改变，阿克曼氏菌、啮齿粪杆菌、Eubacterium plexicaudatum、Eubacterium sp 14＿2、Candida glabrata、Romboutsia ilealis、Turicibacter sp TS3等菌种发生显著变化，肠道代谢物鹅去氧胆酸、胆碱、L-苯丙氨酸甜菜碱、2-苯基丁酸等等的表达也明显变化，影响了亚油酸代谢、初级胆汁酸生物合成、赖氨酸降解、精氨酸生物合成、α-亚麻酸代谢等等相关代谢通路。结论：高脂饮食喂养、高湿环境饲养、负重力竭游泳和冷水或猪油灌胃的多因素复合造模法可以构建气虚痰湿型小鼠模型，可以将小鼠的血清血脂水平、舌象、“气虚痰湿型”评估量表评分、盲肠指数以及相关肠道菌群和代谢物的变化作为模型评价的关键指标。

关键词：气虚痰湿证小鼠模型多因素复合造模肠道菌群代谢

固本化湿方治疗DNCB诱导的特应性皮炎小鼠的机制研究

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中国皮肤性病学杂志 2024年

作者：马欣程子璇莫秀梅刘俊峰陈达灿贾金靖广州中医药大学第二临床医学院广州中医药大学第二附属医院皮肤科省部共建中医湿证国家重点实验室(广州中医药大学第二附属医院)

目的探索性研究固本化湿方治疗特应性皮炎（AD）可能的作用机制。方法首先通过分子对接分析固本化湿方的活性化合物成分与丝聚蛋白（FLG）及芳香烃受体（AHR）之间的结合能力。随后通过1-氯-2，4-二硝基苯（2，4-dinitrochlorobenzene... 详细信息

目的探索性研究固本化湿方治疗特应性皮炎（AD）可能的作用机制。方法首先通过分子对接分析固本化湿方的活性化合物成分与丝聚蛋白（FLG）及芳香烃受体（AHR）之间的结合能力。随后通过1-氯-2，4-二硝基苯（2，4-dinitrochlorobenzene，DNCB）诱导刺激的AD小鼠模型进一步验证，连续造模给药28 d后观察小鼠皮损严重程度和经表皮水分丢失（TEWL），HE染色观察病理组织、瘙痒回合数、脾脏指数、耳廓厚度。Western blot和免疫组织化学检测皮肤屏障相关蛋白的表达，以及AHR、OVOL1蛋白的表达水平；ELISA检测血清中IgE、IL-13和IL-22含量，流式细胞术检测淋巴结中Th1、Th2、Th17占CD4+T细胞的比例。多因子液相芯片法检测多因子水平。结果分子对接结果显示目标靶点与固本化湿方关键化合物成分之间有较强的结合能力。动物实验结果显示，与AD模型组相比，固本化湿方组和阳性药地塞米松组皮损严重程度、TEWL、瘙痒回合数、脾脏指数和耳廓厚度均显著下降（P＜0.05）。流式细胞术结果显示，与AD模型组相比，固本化湿方治疗后淋巴结中Th1、Th2、Th17比例呈下降趋势，但不低于地塞米松组。ELISA实验结果显示，固本化湿方组和地塞米松组小鼠血清中IgE、IL-13和IL-22水平呈下降趋势。多因子液相芯片结果显示，与AD模型组相比，固本化湿方可显著下调IL-1β、IL-4、IL-5和IL-33的表达，且优于地塞米松组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论固本化湿方可通过调控AD小鼠模型的皮肤屏障功能障碍和免疫平衡紊乱，从而达到治疗或抑制病情发展的作用。

关键词：特应性皮炎固本化湿方皮肤屏障免疫平衡紊乱 T细胞亚群

基于“虚、湿”经典病因构建变应性鼻炎脾虚湿困证大鼠模型及模型质量评价

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 489-493页

作者：梁紫华谭希彭庆源黄镇栋罗秋兰李莎莎陈文勇彭桂原广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院广东广州510120 广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510006

目的构建变应性鼻炎(AR)脾虚湿困证病证结合大鼠模型,并对模型质量进行评价。方法24只SD大鼠随机分为3组,包括空白组、变应性鼻炎组(AR组)、脾虚湿困变应性鼻炎组(PAR组),每组8只。空白组仅予常规饲养,AR组通过“卵清白蛋白(OVA)氢氧化... 详细信息

目的构建变应性鼻炎(AR)脾虚湿困证病证结合大鼠模型,并对模型质量进行评价。方法24只SD大鼠随机分为3组,包括空白组、变应性鼻炎组(AR组)、脾虚湿困变应性鼻炎组(PAR组),每组8只。空白组仅予常规饲养,AR组通过“卵清白蛋白(OVA)氢氧化铝混悬液腹腔注射+OVA生理盐水溶液局部滴鼻激发”构建AR模型,PAR组除施加AR组造模方法外,另外采用“恒温恒湿箱饲养+冷番泻叶水浸液、猪油灌胃+隔日禁食”的多因素复合方法建立AR脾虚湿困证模型。观察各组大鼠的一般情况和鼻部症状;测量脾指数、腹围指数;进行强迫游泳实验(FST)和旷场实验(OFT);ELISA法检测血清免疫球蛋白E(IgE)、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)水平;全自动生化分析仪测定血脂指标;HE染色观察鼻黏膜、肝与结肠组织的病理学改变;Western Blot法检测鼻黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)、水通道蛋白5(AQP5)、AQP8的表达。结果与空白组和AR组比较,PAR组在证候学上出现AR脾虚湿困证的症状与体征,擦鼻、喷嚏、流涕症状更显著,体质量增长缓慢,腹围指数、脾指数均显著升高(P实验中表现出明显脾虚证状态;在分子生物学指标上表现为血清IgE、MTL、GAS、TG、TC、LDL的水平明显升高(P湿箱饲养+冷番泻叶水浸液、猪油灌胃+隔日禁食+OVA氢氧化铝混悬液腹腔注射+OVA生理盐水溶液局部滴鼻激发”的多因素复合造模法可成功构建贴合临床发病机制与致病特点的AR脾虚湿困证病证结合大鼠模型,此构建方法与验证体系可为AR的中医证候研究提供可靠模型。

关键词：变应性鼻炎脾虚湿困证病证结合动物模型构建方法质量评价