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基于网络药理学探讨加味当归芍药散对子宫内膜异位症痛经的作用机制及实验验证

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世界中医药 2024年

作者：孙建华张逸陈春林陈萍周立翟凤霞郭淼河南中医药大学第一临床医学院河南中医药大学第一附属医院妇产科贵州中医药大学第一附属医院广州中医药大学第一附属医院妇儿中心

目的:基于网络药理学探讨加味当归芍药散治疗子宫内膜异位症(EMs)痛经的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、人类孟德尔遗传在线数据库(OMIM)、人类基因数据库(GeneCards)、人类疾病相关基因与突变位点信息数据... 详细信息

目的:基于网络药理学探讨加味当归芍药散治疗子宫内膜异位症(EMs)痛经的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、人类孟德尔遗传在线数据库(OMIM)、人类基因数据库(GeneCards)、人类疾病相关基因与突变位点信息数据库(DisGeNET)、疗效靶点数据库(TTD)等数据库分析组方活性成分及潜在作用靶点,构建加味当归芍药散活性成分-EMs痛经靶点网络,并对核心靶点进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,应用分子对接vina(Autodock vina)软件对组方潜在活性成分及核心靶点进行分子对接,并采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印记法初步验证组方对EMs小鼠模型子宫内膜预测靶点mRNA及相关蛋白表达的影响。结果:组方筛选出活性成分86个,其治疗EMs痛经对应的交集靶点共64个,其中度值较高的靶点包括表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤抑制基因p53(TP53)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、白细胞介素6(IL-6)、基序趋化因子配体8(CXCL8)、基质金属蛋白酶9(MMP9)等。GO功能富集分析共得到1990个条目,KEGG通路分析涉及雌激素、黏着斑等127条通络。分子对接结果显示,组方核心成分槲皮素与VEGFA、AKT1、低氧诱导因子1A(HIF1A)等关键靶点具有良好的结合力。验证实验显示,加味当归芍药散可显著下调EMs小鼠模型VEGFA、CXCL8、TP53等mRNA及MMP9、环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达水平。结论:加味当归芍药散的核心成分可调控EMs痛经的多个靶点,其作用机制可能和调控细胞侵袭、雌激素、免疫、炎症反应等信号通路相关。

关键词：加味当归芍药散网络药理学子宫内膜异位症痛经分子对接作用机制

线粒体动力学相关蛋白影响破骨细胞分化机制探讨

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中华关节外科杂志（电子版） 2024年第1期18卷 60-68页

作者：周月惠江梦钰薛宇轩卫杨文祥凡一诺万子艺刘予豪陈镇秋周驰广州中医药大学第一临床医学院 510405 广州中医药大学岭南医学研究中心 510388 广州中医药大学第三附属医院 510378 广州中医药大学第一附属医院 510405 广州中医药大学茂名医院(茂名市中医院) 525022

目的探讨发动蛋白相关蛋白1(DRP1)通过调节线粒体动力学对破骨细胞分化的影响。方法体外培养稳定生长的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)。将细胞分为正常组、模型组[核因子受体配体激活因子(RANKL)]、实验组[RANKL+线粒体分裂抑制... 详细信息

目的探讨发动蛋白相关蛋白1(DRP1)通过调节线粒体动力学对破骨细胞分化的影响。方法体外培养稳定生长的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)。将细胞分为正常组、模型组[核因子受体配体激活因子(RANKL)]、实验组[RANKL+线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)]。使用细胞毒性实验对不同浓度的DRP1抑制剂(Mdivi-1)作用于RAW264.7细胞的结果进行分析,得出安全有效浓度。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、肌动蛋白环染色和Western Blot实验,观察DRP1对体外破骨细胞分化过程的调控关系。通过透射电镜、流式细胞术和线粒体膜电位荧光探针(JC-1)检测DRP1在破骨细胞分化过程中对线粒体形态、动力学改变的重要作用。TRAP阳性细胞数、肌动蛋白环面积值、JC-1荧光强度及Western Blot结构数据均采用方差分析。结果细胞计数试剂盒(CCK-8)结果显示10μmol/L及以下浓度的Mdivi-1对RAW264.7细胞无明显毒性作用(F=319,P<0.001),所以选取10μmol/L浓度的Mdivi-1干预RAW264.7破骨分化进程。在TRAP染色中发现10μmol/L的Mdivi-1会明显抑制破骨细胞分化,且TRAP阳性细胞数目及破骨细胞的面积明显减少(F=391.7,P<0.0001)。肌动蛋白环染色结果表明,与模型组比,RANKL+Mdivi-1组的破骨细胞数量及肌动蛋白环的面积明显变小(F=321.5、1444,均为P<0.001)。扫描透射电镜观察,与对照相比,RANKL+Mdivi-1组线粒体分裂明显减少。通过Western Blot实验,10μmol/L浓度的Mdivi-1会明显抑制线粒体动力学相关蛋白及破骨细胞分化相关蛋白的表达,包括DRP1、T细胞核因子c1(NFATc1)、组织蛋白酶K(CTSK)(F=317.8、3510、6404,均为P<0.001)。JC-1荧光实验结果发现,与模型组相比,异常的线粒体膜电位表达有所恢复(F=2917,P<0.001)。结论线粒体分裂蛋白DRP1通过影响破骨细胞表面肌动蛋白环的形成参与调节破骨分化;DRP1通过改变线粒体形态和线粒体动力学参与调节破骨分化。

关键词：线粒体线粒体动力学破骨细胞

胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线影响的有限元分析

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中国修复重建外科杂志 2024年第6期38卷 734-741页

作者：韩龙飞林天烨何敏聪何晓铭詹芝玮陆舜曾子俊林锟田佳庆侯文渊魏腾飞魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广州510405 广东省中医骨伤研究院广州510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广州510378 中医证候全国重点实验室/骨科广州中医药大学第三附属医院广州510378

目的采用有限元分析胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线的影响,为临床上胫骨平台下骨量减少的膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者预防下肢力线内移合并膝关节内翻提供力学证据。方法选取1名健康成人为研究对象,获取其X... 详细信息

目的采用有限元分析胫骨平台下低密度区骨量及体积对下肢力线的影响,为临床上胫骨平台下骨量减少的膝关节骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者预防下肢力线内移合并膝关节内翻提供力学证据。方法选取1名健康成人为研究对象,获取其X线片和CT影像数据并导入Mimics 21.0软件,重建完整膝关节模型及3个体积相等、形态不同的胫骨平台下低密度区模型,导入Solidworks 2023软件中进行模型装配、验证。分别构建胫骨平台下低密度区骨量减少22%、33%、44%、55%、66%的5个KOA有限元模型及骨量减少66%的低密度区模型等比例缩放81%、90%、100%、110%、121%的5个KOA有限元模型。根据生理状态下人体下肢负荷情况,胫、腓骨远端设置完全固定,在股骨头表面主要负重区施加沿下肢力线方向、大小为1860 N的轴向压强载荷,利用有限元分析软件Abaqus 2022计算分析胫骨平台内侧最大应力及胫骨皮质骨、松质骨最大位移,进而预测下肢力线改变趋势。结果构建的KOA模型符合下肢正常解剖结构。在相同边界条件、相同载荷情况下,随着胫骨平台下低密度区骨量逐渐减少,以及胫骨平台下低密度区体积逐渐增大,胫骨内侧平台最大应力及胫骨皮质骨、松质骨最大位移均随之增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胫骨平台下出现低密度区提示膝内翻及下肢力线内移可能性增加,且低密度区体积和骨量减少程度是关键促发因素,可指导临床医生提前预防,避免膝内翻发生。

关键词：膝关节骨关节炎下肢力线低密度区膝内翻有限元分析

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和UPLC的六君子汤化学成分定性与定量分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 169-178页

作者：姜奇瑶刘臣臣陈惠玲黄志峰赵威梁颖潘华峰卓越广州中医药大学科技创新中心广州510405 广州中医药大学第一附属医院广州510405 广东工商职业技术大学广东肇庆526100

目的:建立六君子汤化学成分的定性与定量分析方法,明确六君子汤的物质基础。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对六君子汤中的化学成分进行定性分析,利用MassBank、PubChem、ChemSpider、中药系统... 详细信息

目的:建立六君子汤化学成分的定性与定量分析方法,明确六君子汤的物质基础。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对六君子汤中的化学成分进行定性分析,利用MassBank、PubChem、ChemSpider、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库并结合相关文献对所得化合物进行鉴定。采用UPLC建立六君子汤中甘草苷、橙皮苷、党参炔苷、甘草素、甘草酸、川陈皮素、桔皮素、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ的定量分析方法并进行分析。结果:结合相关文献、数据库检索和质谱信息,从六君子汤中共鉴定出79个化合物,包括黄酮类31个,萜类15个,含氮化合物14个,苯丙素类6个,有机酸类6个和其他类化合物7个。建立的定量分析方法中9种代表性成分在各自线性范围内线性关系良好,精密度、稳定性、重复性及加样回收率均符合要求,定量结果显示,甘草苷、橙皮苷、党参炔苷、甘草素、甘草酸、川陈皮素、桔皮素、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ在六君子汤中的质量分数分别为0.3765、2.6021、0.0826、0.1281、1.7786、0.0157、0.0067、0.0304、0.0032 mg·g^(-1)。结论:建立的方法可以快速、灵敏、准确地对六君子汤中的化学成分进行分析,明确了六君子汤的物质基础以黄酮类、萜类及含氮化合物为主,并可对其中的9种成分进行定量,可为该方的质量控制、作用机制及临床应用研究奠定基础。

关键词：六君子汤冻干粉超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS) 化学成分定量分析定性分析黄酮类

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残角子宫侧输卵管妊娠1例并文献分析

山东大学学报（医学版） 2024年第4期62卷 116-119页

作者：林欣仪黄艳茜邱嫔邓高丕广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院妇科广东广州510405

输卵管妊娠是最常见的异位妊娠[1],但合并单角子宫并发生在残角子宫侧却十分少见。残角子宫属于先天性生殖道畸形,是由胚胎期两侧副中肾管中段合并过程中一侧发育不全而形成,与对侧发育相较正常的单角子宫合并存在,临床发病率约1/100 00... 详细信息

输卵管妊娠是最常见的异位妊娠[1],但合并单角子宫并发生在残角子宫侧却十分少见。残角子宫属于先天性生殖道畸形,是由胚胎期两侧副中肾管中段合并过程中一侧发育不全而形成,与对侧发育相较正常的单角子宫合并存在,临床发病率约1/100 000[2]。残角子宫的存在会增加不良孕产结局的发生,包括各种类型的异位妊娠[3]。

关键词：残角侧输卵管妊娠残角子宫单角子宫

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基于Nrf2/HO-1/HIF-1α通路探讨升降散对EAE鼠巨噬细胞的调控作用

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时珍国医国药 2024年第5期35卷 1118-1122页

作者：吴璐璐郑泽泉赵敏吴智兵招远祺许浩游广州中医药大学第二附属医院广东广州510400 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510403

目的为探讨升降散(SJP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)鼠巨噬细胞的调控作用,并进一步揭示其作用的靶点。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组(CON)、模型组(MOD)、升降散低剂量组(SJP-L... 详细信息

目的为探讨升降散(SJP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)鼠巨噬细胞的调控作用,并进一步揭示其作用的靶点。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组(CON)、模型组(MOD)、升降散低剂量组(SJP-L)、升降散高剂量组(SJP-H)和醋酸泼尼松组(PAT)。除正常组以外,余下组别小鼠均构建EAE模型。通过行为学评分、体重变化和组织HE染色病理学评分评估药物疗效。采用免疫组织化学染色法测定CD86和CD206的表达,通过蛋白质免疫印迹法检测脊髓核因子E2相关因子2(Nuclear factor-E2-related factor2,Nrf2),血红素加氧酶1(Heme oxygenase-1,HO-1),超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD),缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的表达水平。结果与MOD相比,SJP各剂量组和PAT组显著缓解了EAE小鼠神经功能的缺损(P一定的调节作用。

关键词：升降散实验性自身免疫性脑脊髓炎 Nrf2/HO-1/HIF-1α通路升清降浊法 M1/M2免疫平衡

基于MAPK/ERK信号通路探讨加味芍药甘草汤对AM病灶细胞的干预机制

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 315-319页

作者：刘学红王帅关永格李坤寅广州中医药大学第三临床医学院广东广州510375 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第三附属医院广东广州510375

目的通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路,探讨加味芍药甘草汤治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)的可能机制。方法临床收集因AM和宫颈病变行全子宫切除术患者的组织标本,分别作为病例组和对照组,采用实时荧光定... 详细信息

目的通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路,探讨加味芍药甘草汤治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,AM)的可能机制。方法临床收集因AM和宫颈病变行全子宫切除术患者的组织标本,分别作为病例组和对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测AM组异位病灶与对照组正常肌层及两组间在位内膜中MAPK/ERK信号通路因子蛋白表达水平的差异。对AM病灶细胞分别用加味芍药甘草汤含药血清、正常血清、MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126、米非司酮进行干预,采用qRT-PCR、Western blot检测不同干预方法对病灶细胞MAPK/ERK信号通路因子蛋白表达水平的差异。结果AM组异位病灶ERK2 mRNA、MEK-2蛋白的表达量高于对照组正常肌层,差异有统计学意义(P<0.05)。筛选10%含药血清组为药物血清浓度。U0126组与空白对照组相比,ERK1 mRNA表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);10%含药血清组、米非司酮组、U0126组与10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,ERK2 mRNA表达量均有减低,差异有统计学意义(P<0.05);与米非司酮组、10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,U0126组中MEK-2表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);与10%正常大鼠血清组、空白对照组相比,U0126组中ERK1/2表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);U0126组、10%含药血清组与其他组相比,NF-κB表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05);两组之间表达量差异无统计学意义;U0126组与米非司酮组、空白对照组相比,c-Fos表达量明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论加味芍药甘草汤含药血清:10%的含药血清能减低MAPK/ERK信号通路中ERK2的表达,抑制AM病灶细胞的过度增殖,进而减缓AM的进展。

关键词：子宫腺肌病加味芍药甘草汤 MAPK/ERK信号通路

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岗梅清咽合剂HPLC特征图谱及同时测定多成分含量

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中国医院药学杂志 2024年

作者：林秀娟刘翠珍雷晓椿曾德浩丘振文李得堂广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学第一附属医院药学部广东省中医临床研究院

目的：建立岗梅清咽合剂的高效液相色谱（HPLC）特征图谱，及同时测定多个特征性成分含量。方法：采用HPLC法建立10批岗梅清咽合剂的特征图谱，评价其相似度，确定共有特征峰，并对各共有峰进行归属；以特征图谱共有峰峰面积为分析对象... 详细信息

目的：建立岗梅清咽合剂的高效液相色谱（HPLC）特征图谱，及同时测定多个特征性成分含量。方法：采用HPLC法建立10批岗梅清咽合剂的特征图谱，评价其相似度，确定共有特征峰，并对各共有峰进行归属；以特征图谱共有峰峰面积为分析对象，进行化学计量法分析，根据变量重要性投影（VIP）值大于1，筛选出差异性成分，并对6个特征性化学成分同时测定其含量。结果：10批岗梅清咽合剂共标定出21个共有的特征峰，10批样品的相似度均大于0.950，与对照品比对出了11个特征峰。CA和PCA结果显示，10批样品可聚为3类；OPLS-DA结果显示，VIP值大于1的成分筛选出了10个成分，依次为4（没食子酸）、10、9（咖啡酸）、13、8（隐绿原酸）、2、3、17（异绿原酸C）、15（异绿原酸A）、7（绿原酸）号峰。10批样品中没食子酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸C的含量分别为0.097～0.591 mg·mL-1、0.055～0.131 mg·mL-1、0.051～0.200 mg·mL-1、0.402～1.171 mg·mL-1、0.013～0.087 mg·mL-1、0.013～0.123 mg·mL-1。结论：建立的HPLC特征图谱方法稳定可行，可用于岗梅清咽合剂的质量控制。

关键词：岗梅清咽合剂特征图谱化学计量法含量测定

基于FAERS数据库对恩曲替尼不良事件信号挖掘与分析

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中国新药杂志 2024年第13期33卷 1396-1402页

作者：丁楚凤王宇婷伍绮敏郑靖萍马麟宿凌暨南大学药学院广州511443 广州中医药大学第二附属医院药学部广州510120

目的:基于美国FDA不良事件报告系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS)数据库挖掘恩曲替尼的不良事件(adverse event,AE)信号,为临床安全用药提供参考。方法:利用OpenVigil 2.1数据平台,收集FAERS数据库中2004年第1季度—2023... 详细信息

目的:基于美国FDA不良事件报告系统(FDA Adverse Event Reporting System,FAERS)数据库挖掘恩曲替尼的不良事件(adverse event,AE)信号,为临床安全用药提供参考。方法:利用OpenVigil 2.1数据平台,收集FAERS数据库中2004年第1季度—2023年第1季度的恩曲替尼相关AE报告,利用比例失衡法中的报告比值比(reporting odds ratio,ROR)法和比例报告比值(proportional reporting ratio,PRR)法进行数据挖掘。结果:共检索到目标药物恩曲替尼相关的AE报告600份,AE报告数呈波动上升趋势;共挖掘到82个AE信号,涉及16种系统器官分类(System Organ Class,SOC),主要为各类神经系统疾病和全身性疾病及给药部位各种反应,其次为肾脏及泌尿系统疾病、心脏系统疾病。报告例次排名靠前的AE信号涉及死亡、头晕、肾功能损坏等首选术语(preferred term,PT),肾功能损害、血肌酐升高、急性肾损伤、心肌炎等PT未被药品说明书收录;信号强度排名靠前的AE信号涉及构音困难、味觉障碍、共济失调等PT,其中构音困难、味觉障碍等大部分PT已被药品说明书收录,肌钙蛋白I升高等PT尚未被药品说明书收录。结论:恩曲替尼导致的AE包括各类神经系统疾病、心脏系统疾病、肾脏及泌尿系统疾病等;临床使用恩曲替尼治疗期间应重点关注患者的各类神经、肾脏和心脏毒性反应。

关键词：恩曲替尼不良事件美国FDA不良事件报告系统信号挖掘