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芒柄花素抑制脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5328-5334页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞... 详细信息

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词：芒柄花素髓核间充质干细胞炎症椎间盘退变核因子κB

血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

身痛逐瘀汤合地龙汤加减治疗腰椎间盘突出症气滞血瘀证的疗效及机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 47-54页

作者：谭黄圣王银波黄勇赖居易冯华龙蓝志明付远飞蒋勇何升华广州中医药大学第四临床医学院深圳市中医院

目的：观察身痛逐瘀汤合地龙汤加减治疗腰椎间盘突出症（LDH）气滞血瘀证的临床疗效及对髓核重吸收和免疫炎症因子的影响，从重吸收的角度探讨其治疗机制。方法：选择广州中医药大学第四临床医学院2020年6月至2023年1月的120例LDH患者... 详细信息

目的：观察身痛逐瘀汤合地龙汤加减治疗腰椎间盘突出症（LDH）气滞血瘀证的临床疗效及对髓核重吸收和免疫炎症因子的影响，从重吸收的角度探讨其治疗机制。方法：选择广州中医药大学第四临床医学院2020年6月至2023年1月的120例LDH患者作为研究对象，采用随机数字表法分为对照组52例（脱落8例）和观察组49例（脱落11例）。对照组予以常规治疗方案，观察组在常规治疗基础上加用身痛逐瘀汤合地龙汤加减治疗。分别于治疗前、治疗3疗程后测定患者的视觉模拟评分法（VAS）、Oswestry功能障碍指数问卷（ODI）、日本骨科协会评分（JOA）、中医证候积分，抽取静脉血完成血清学指标测定，并于治疗后6个月随访时完善核磁共振检查，计算吸收率。结果：与本组治疗前比较，两组患者治疗后VAS评分、ODI评分、中医证候积分、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子（VEGF）水平均明显降低（P中医证候积分、血清TNF-α、MMP-9、VEGF水平均明显降低（P中医临床症状，影像学提示能促进髓核突出重吸收，实验室检测能降低血清TNF-α、MMP-9、VEGF水平，有利于患者康复。

关键词：腰椎间盘突出症气滞血瘀证身痛逐瘀汤地龙汤髓核重吸收免疫炎症因子

ADSCs通过PI3K/Akt和NF-κB途径调控神经元存活及炎症反应

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脑与神经疾病杂志 2025年第1期33卷 1-7页

作者：李伟宽周治来谢欢张辉南方医科大学第二临床医学院广东省第二人民医院脊柱骨科广州暨南大学第一临床学院

目的探究体外脂肪间充质干细胞(ADSCs)对神经元的保护作用及机制。方法培养并鉴定原代ADSCs,并建立谷氨酸诱导的HT22神经元细胞系损伤模型。细胞免疫荧光检测损伤模型中HT22细胞分支数目及分支长度的变化。构建ADSCs与HT22共培养,检测... 详细信息

目的探究体外脂肪间充质干细胞(ADSCs)对神经元的保护作用及机制。方法培养并鉴定原代ADSCs,并建立谷氨酸诱导的HT22神经元细胞系损伤模型。细胞免疫荧光检测损伤模型中HT22细胞分支数目及分支长度的变化。构建ADSCs与HT22共培养,检测ADSCs对HT22细胞凋亡的调节作用。采用ELISA研究ADSCs对HT22损伤细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)的影响。通过Western blot检测PI3K/Akt及NF-κB的磷酸化变化,探讨ADSC对损伤HT22的机制。结果细胞免疫荧光验证酶解法培养的ADSCs高表达CD44。相较于对照组,细胞毒性试验表明随着谷氨酸增高,HT22细胞存活率下降,且20mM为半数抑制浓度,该浓度下HT22支数目及分支长度显著减少。相较于谷氨酸组,ADSCs共培养有效降低了谷氨酸诱导的HT22细胞系突起的分细胞凋亡,减少了Cleaved caspase3的表达。ELISA结果显示ADSCs共培养显著降低损伤HT22细胞中促炎因子的表达,同时提高抗炎因子IL-10的水平。ADSCs通过促进PI3K/Akt的磷酸化和抑制NF-κB的磷酸化,调节神经元存活及炎症反应。结论 ADSCs具有显著的神经保护作用,通过调节关键信号途径促进受损神经元的存活和功能恢复。这为脊髓损伤的治疗提供了新的研究方向和希望。

关键词：脊髓损伤脂肪间充质干细胞 HT22 谷氨酸

骨水泥-椎体体积比及椎体骨壁裂口与经皮椎体成形术骨水泥渗漏的相关性分析

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中国修复重建外科杂志 2014年第11期28卷 1358-1363页

作者：梁德叶林强江晓兵黄伟权姚珍松唐永超张顺聪晋大祥广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广州510405 广州中医药大学第一临床医学院

目的探讨经皮椎体成形术（percutaneous vertebroplasty,PVP）治疗骨质疏松性椎体压缩骨折（osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF）骨水泥渗漏的影响因素。方法回顾性分析2011年3月-2012年3月,采用PVP治疗的98例单节段OVCF患者临床资料。其中男13例,女85例;年龄54-95岁,平均77.2岁。病程15-120 d,平均43 d。骨密度T值为—6.7-—2.5,平均—3.8。所有患者均使用经双侧椎弓根穿刺置管。根据术后CT观察是否发生骨水泥渗漏将患者分成渗漏组和未渗漏组,单因素分析比较两组患者在骨密度、手术节段、术前手术节段椎体前缘和中部压缩程度、术前矢状面Cobb角、术前合并椎体骨壁裂口、骨水泥注入量及骨水泥-椎体体积比方面的差异;将有统计学意义的因素进行多因素logistic回归分析,分析骨水泥渗漏的危险因素。结果患者均顺利完成手术;手术时间为30-50 min,平均40 min。骨水泥-椎体体积比为7.84%-38.99%,平均24.88%。术后所有患者疼痛症状明显减轻。98例均获随访,随访时间为6-12个月,平均8个月。49例手术节段发生骨水泥渗漏。单因素分析显示,两组骨水泥-椎体体积比和术前合并椎体骨壁裂口比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;骨密度、手术节段、术前手术节段椎体前缘及中部压缩程度、矢状面Cobb角及骨水泥注入量比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。logistic回归分析显示,骨水泥-椎体体积比和术前合并椎体骨壁裂口是发生骨水泥渗漏的危险因素（P〈0.05）。结论 PVP治疗OVCF时,术前合并椎体骨壁裂口和骨水泥-椎体体积比越大的手术节段,发生骨水泥渗漏的风险越高。

关键词：经皮椎体成形术骨质疏松性椎体压缩骨折骨水泥渗漏骨水泥 - 椎体体积比椎体骨壁裂口

糖皮质激素干预后大鼠骨量、骨转换指标、雌激素水平变化及其相互关系

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中国修复重建外科杂志 2015年第3期29卷 307-314页

作者：任辉沈耿杨江晓兵梁德唐晶晶崔健超林顺鑫庄洪杨志东张顺聪姚珍松广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科

目的探讨糖皮质激素（glucocorticoid,GC）干预后不同时间点大鼠骨量、骨转换指标、雌激素水平的变化及其相互关系。方法取3月龄雌性SD大鼠34只,体质量（208.73±23.94）g,随机分为基线组（n=6）、对照组（n=14）、地塞米松（dexamethas... 详细信息

目的探讨糖皮质激素（glucocorticoid,GC）干预后不同时间点大鼠骨量、骨转换指标、雌激素水平的变化及其相互关系。方法取3月龄雌性SD大鼠34只,体质量（208.73±23.94）g,随机分为基线组（n=6）、对照组（n=14）、地塞米松（dexamethasone,DXM）组（n=14）。DXM组皮下注射DXM 0.75 mg/kg,每周2次,连续12周;对照组注射等量生理盐水;基线组大鼠不做处理。基线组于实验前,对照组及DXM组于4、8、12周取大鼠,测量体质量及子宫、肾上腺重量;ELISA法测量血清中Ⅰ型前胶原氨基末端前肽（N-terminal propeptide of type I procollagen,PINP）、Ⅰ型胶原羧基端肽（C-terminal cross-linking telopeptide of type I collagen,β-CTX）及雌激素水平;采用双能X线骨密度仪扫描L1-3椎体及左侧股骨,测量股骨头颈、股骨粗隆、股骨干、股骨全段和L1、L2、L3、L1-3区域的骨密度（bone mineral density,BMD）、骨矿物含量（bone mineral content,BMC）、骨面积（bone area,BA）。对大鼠的体质量、腰椎BMD、股骨BMD、PINP、β-CTX、雌激素水平进行相关性分析。结果各时间点DXM组大鼠体质量及子宫、肾上腺重量均显著低于对照组及基线组（P〈0.05）。DXM组激素干预后大鼠血清PINP、β-CTX升高,但4、8周时与基线组及对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,12周时差异有统计学意义（P〈0.05）;大鼠血清雌激素水平下降,各时间点均较基线组及对照组明显降低（P〈0.05）。各时间点DXM组BMD、BMC、BA均显著低于对照组（P〈0.05）,其中以L2及股骨粗隆部骨量丢失最严重。4周时,L1 BMC、BA及股骨干BA较基线组显著降低（P〈0.05）,而其余部位BMD、BMC、BA在各时间点与基线组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。相关分析显示,腰椎及股骨BMD与PINP、β-CTX成负相关（P〈0.05）,与雌激素水平成正相关（P〈0.05）。结论 GC干预后大鼠腰椎及股骨骨量呈先快速降低、再维持低水平趋势,骨转换指标在激素干预后呈持续上升趋势,血清雌激素水平呈整体下降趋势,体质量、骨转换指标及雌激素水平与骨量密切相关。

关键词：糖皮质激素性骨质疏松骨量 Ⅰ型前胶原氨基末端前肽 Ⅰ型胶原羧基端肽雌激素大鼠

经皮椎体成形术和经皮椎体后凸成形术治疗伴椎体内真空裂隙的骨质疏松椎体压缩骨折比较研究

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中国修复重建外科杂志 2016年第9期30卷 1104-1110页

作者：余伟波梁德江晓兵叶林强姚珍松广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广州510405 广州中医药大学第一临床医学院

目的比较经皮椎体成形术（percutaneous vertebroplasty,PVP）和经皮椎体后凸成形术（percutaneous kyphoplasty,PKP）治疗伴椎体内真空裂隙（intravertebral vacuum cleft,IVC）的骨质疏松椎体压缩骨折（osteoporotic vertebral compression fracture,OVCF）疗效。方法回顾分析2010年1月-2013年12月,行PVP或PKP治疗并符合选择标准的68例伴IVC的OVCF患者临床资料。其中48例行PVP治疗（PVP组）,20例行PKP治疗（PKP组）。两组患者性别、年龄、病程、损伤节段、骨密度以及术前背部疼痛视觉模拟评分（VAS）、Oswestry功能障碍指数（ODI）、影像学测量指标等一般资料比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）,具有可比性。比较两组术中骨水泥渗漏率、骨水泥注入量、手术时间,采用VAS评分评价背部疼痛程度,ODI评价功能障碍严重程度,2年内邻椎再骨折率。手术前后摄正侧位X线片,测量伤椎椎体高度及后凸角,并计算椎体压缩率（rate of vertebral compression,CR）、复位率（reduction rate,RR）、进展性高度丢失率（progressive height loss,PHL）、复位角度（reduction angle,RA）、进展性后凸角（progressive angle,PA）。结果两组骨水泥注入量及骨水泥渗漏发生率比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;但PVP组手术时间较PKP组显著缩短（t=—8.821,P=0.000）。术后患者均获随访,随访时间2.0~3.1年,平均2.4年。两组术后1 d、1年及2年VAS评分、ODI均较术前显著降低（P〈0.05）;术后各时间点间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后2年内,PVP组5例（10.4%）、PKP组2例（10.0%）发生邻椎骨折,骨折发生率比较差异无统计学意义（χ~2=0.003,P=0.963）。术后1、2年两组骨密度均较术前显著改善（P〈0.05）,但两组间比较差异无统计学意义（t=0.463,P=0.642;t=0.465,P=0.646）。X线片测量显示,两组CR及后凸角均获得明显矫正,术后即刻两指标与术前比较差异有统计学意义（P〈0.05）;但术后1、2年时与术后即刻比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;术后各时间点两组间CR及后凸角比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。两组RR、RA、PHL、PA比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 PVP及PKP治疗伴IVC的OVCF可获得相似疗效,术后均可能发生再塌陷及后凸畸形,因此需注意随访观察。

关键词：椎体内真空裂隙骨质疏松椎体压缩骨折经皮椎体成形术经皮椎体后凸成形术

3种不同后路内固定方式及其横连治疗胸腰段骨折的力学性能比较

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医用生物力学 2016年第2期31卷 142-147页

作者：余伟波梁德叶林强江晓兵黄学成姚珍松广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广州510405

目的比较3种不同后路内固定方式及其有无横连杆治疗胸腰段骨折的生物力学性能差异,寻找最优化的后路内固定方式。方法在已验证的正常T12~L2有限元模型基础上,模拟L1椎体爆裂性骨折。将T12椎体上半皮质骨切除并赋予内部松质骨损伤材料属... 详细信息

目的比较3种不同后路内固定方式及其有无横连杆治疗胸腰段骨折的生物力学性能差异,寻找最优化的后路内固定方式。方法在已验证的正常T12~L2有限元模型基础上,模拟L1椎体爆裂性骨折。将T12椎体上半皮质骨切除并赋予内部松质骨损伤材料属性,分别建立无、有横连杆经伤椎单侧螺钉（模型A1、A2）、常规短节段（模型B1、B2）和经伤椎双侧螺钉（模型C1、C2）6种内固定模型。分别比较6组模型在各种生理应力下的活动范围（range of the motion,ROM）以及螺钉和棒的最大Von Mises应力情况。结果在屈伸和侧屈应力下,经伤椎单侧和双侧螺钉内固定模型组ROM均明显小于常规短节段内固定组;而经伤椎单侧和双侧螺钉内固定组,在屈伸应力下两者ROM无显著差异,在侧屈应力下经伤椎双侧螺钉模型的稳定性优于经伤椎单侧螺钉固定。应力主要集中在上位螺钉钉尾和上位螺钉与伤椎螺钉之间的棒体,经伤椎双侧内固定组上位螺钉最大应力明显低于经伤椎单侧和常规短节段内固定组螺钉最大应力。横连可增加各内固定组在扭转应力下的稳定性,也可降低上位螺钉和棒在扭转应力下的最大应力,而屈伸和侧屈应力下螺钉和棒的最大应力未见明显差异。结论经伤椎置钉后路内固定可获得较好的生物力学稳定性,且添加横连不仅能改善构型扭转刚度,而且能降低螺钉和棒的最大扭转应力,是治疗胸腰椎不稳定骨折良好选择。

关键词：胸腰段骨折横连内固定力学特性有限元分析

智能手机Scoliometer软件在L4－S1融合术中获得最优化腰椎前凸角的价值

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中国修复重建外科杂志 2015年第10期29卷 1249-1252页

作者：余伟波梁德叶林强江晓兵姚珍松唐晶晶唐永超广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科广州510405 广州中医药大学第一临床医学院

目的探讨智能手机Scoliometer软件在L4-S1融合术中获得最优化腰椎前凸角（lumbar lordosis,LL）的价值,并观察其准确性。方法将2014年11月-2015年2月收治并拟行L4-S1融合术的20例腰椎退行性疾病患者纳入研究。男8例,女12例;年龄41-65... 详细信息

目的探讨智能手机Scoliometer软件在L4-S1融合术中获得最优化腰椎前凸角（lumbar lordosis,LL）的价值,并观察其准确性。方法将2014年11月-2015年2月收治并拟行L4-S1融合术的20例腰椎退行性疾病患者纳入研究。男8例,女12例;年龄41-65岁,平均52.3岁。病程6个月-6年,平均3.4年。术前摄标准腰骶椎侧位X线片,采用PACS影像系统测量骨盆入射角（pelvic incidence,PI）及L4-S1 Cobb角,参照公式[（PI＋9°）×70%]计算理想L4-S1 Cobb角;术中矫形过程使用Scoliometer软件测量L4-S1 Cobb角,直至达理想L4-S1 Cobb角±5°范围;术后再次测量L4-S1 Cobb角。比较Scoliometer软件与PACs影像系统测量角度的一致性,以评估该软件测得角度的准确性及可靠性;比较理想L4-S1 Cobb角分别与手术前后L4-S1 Cobb角的差值,分析该方法的有效性。结果术前计算理想L4-S1 Cobb角为（36.17±1.53）°,PACS影像系统测得L4-S1 Cobb角为（22.57±5.50）°;术中矫正后Scoliometer软件测得L4-S1 Cobb角为（32.25±1.46）°;术后PACS影像系统测得L4-S1 Cobb角为（34.43±1.72）°。术中Scoliometer软件与术后PACS影像系统测量角度比较,组内相关系数为0.96、95%可信区间为（0.93,0.97）,提示两者相关性很好;平均绝对误差为1.23°,提示Scoliometer软件与PACS影像系统测量角度有约1.23°的误差范围。理想L4-S1 Cobb角与手术前后PACS影像系统测得的L4-S1 Cobb角绝对差值分别为（13.60±1.85）、（2.31±0.23）°,比较差异有统计学意义（t=6.065,P=0.001）。结论智能手机Scoliometer软件可辅助医师在L4-S1融合术中获得最优化LL。

关键词： Scoliometer软件 L4-S1融合术 Cobb角骨盆入射角腰椎前凸角