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解毒通络调肝方干预TGR5/cAMP信号通路靶向NLRP3炎症小体保护胰岛β细胞的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 95-103页

作者：张琦肖洋徐菁晗刘添娇王丽朴春丽广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000 长春中医药大学长春130117

目的:探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路靶向NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用。方法:选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组(3.6... 详细信息

目的:探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路靶向NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用。方法:选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组(3.6、7.2 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1)),8只db/m小鼠作为空白组,药物干预8周,每2周检测各组小鼠空腹血糖(FBG),并在末次给药后,进行口服糖耐量实验(OGTT),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹胰岛素(FINS)并计算β细胞功能稳态指数(HOMA-β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β水平。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胰腺组织病理学改变,免疫荧光测定小鼠胰腺组织胰岛素(Insulin)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测TGR5/cAMP信号通路和NLRP3炎症小体关键靶点的蛋白、mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠FBG、OGTT、FINS、IL-6、TNF-α和IL-1β显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物治疗6周后,解毒通络调肝方组和二甲双胍组的FBG水平显著下降(P<0.01);OGTT实验结果表明,与模型组比较,各给药小组小鼠各时间点的血糖均有降低(P<0.05,P<0.01),解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组FINS、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05,P<0.01),解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组IL-1β水平显著降低(P<0.01)。胰腺病理显示模型组小鼠的胰岛形状不规则,分布不均匀,有萎缩的征象,解毒通络调肝方干预后,其细胞计数增加,边界更清晰;免疫荧光结果表示,空白组小鼠的胰岛细胞排列有序,形态饱满,伴有适当的胰岛素分泌,而模型组胰岛细胞形态扭曲,结构萎缩,胰岛素分泌变少,解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组小鼠的胰岛素含量显著增加。与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1) mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组促进了TGR5和cAMP mRNA的上调,并下调了NLRP3、ASC和Caspase-1的mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠TGR5蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组TGR5蛋白显著升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方各剂量组、二甲双胍组Caspase-1、ASC蛋白表达显著降低(P<0.01),解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组NLRP3蛋白表达显著降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中cAMP含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组小鼠cAMP含量明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:解毒通络调肝方保护db/db小鼠的胰岛β细胞,其作用机制可能与调节TGR5/cAMP信号通路抑制NLRP3炎症小体有关。

关键词：解毒通络调肝方胰岛β细胞胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路 NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体

水痘-带状疱疹病毒对小鼠脑星形胶质细胞内NLRP3炎症小体的作用

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中华皮肤科杂志 2024年第6期57卷 524-529页

作者：冯虹燕王兴旺赵阳杨慧兰广州中医药大学广州510006 解放军南部战区总医院皮肤科广州510010

目的研究水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染小鼠脑星形胶质细胞后,不同VZV浓度及感染时间对细胞内核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的影响。方法用不同稀释度[100(原倍未稀释)~10-7]的VZV无细胞悬液感染小鼠脑星形... 详细信息

目的研究水痘-带状疱疹病毒(VZV)感染小鼠脑星形胶质细胞后,不同VZV浓度及感染时间对细胞内核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的影响。方法用不同稀释度[100(原倍未稀释)~10-7]的VZV无细胞悬液感染小鼠脑星形胶质细胞,光学显微镜下观察各组细胞病变效应,以确定后续实验中VZV浓度和时间。用100、10-2、10-4、10-6稀释度的VZV无细胞悬液分别感染小鼠脑星形胶质细胞,于第5天收样;用1.0×105/ml(半数组织感染量)的VZV无细胞悬液感染小鼠脑星形胶质细胞,分别在感染第3、5、7、9天收样;均以正常培养的小鼠脑星形胶质细胞为对照组。用Western印迹法检测各组中VZV糖蛋白E(gE)、NLRP3、胱天蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达水平,比较不同VZV浓度及感染时间对小鼠脑星形胶质细胞内蛋白表达的影响。符合正态分布的数据比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用LSD-t检验。结果100稀释度VZV感染细胞,第3天可观察到细胞数目减少,部分细胞胞体形状变得不规则,失去原有形态,细胞质呈颗粒样,细胞核结构不清,部分细胞融合,形成“多核巨细胞”;第5天,100稀释度组≥50%细胞出现上述改变,部分细胞间隙增大成网状;第9天,100稀释度组至10-6稀释度组细胞间网状间隙扩大,≥50%细胞出现明显的细胞病变表现;第10天,对照组可见部分细胞出现胞质空泡化、脱落漂浮。据此设置实验浓度梯度范围为100~10-6稀释度,观察时间为第3天至第9天。Western印迹结果显示,VZV感染组中VZV gE、NLRP3、caspase-1、IL-1β的蛋白表达量均高于对照组,且不同VZV浓度组间(F=21.45、43.82、21.85、29.53,均P<0.05)、不同感染时间组间(F=224.10、78.79、186.50、85.08,均P<0.05)蛋白表达量差异有统计学意义。随着稀释倍数提高,炎症小体相关蛋白(NLRP3、caspase-1、IL-1β)表达量降低,100稀释度组的蛋白表达量最高,10-6稀释度组表达量最低(均P<0.05);在感染第3、5、7天,炎症小体相关蛋白表达量依次增加,而第9天时降低,第7天感染组中3种蛋白的表达量最高,第3天表达量最低(均P<0.05)。结论VZV感染小鼠脑星形胶质细胞后细胞内NLRP3炎症小体相关蛋白表达上调,且表达量在一定范围内随着病毒浓度及感染时间的增加而增加。

关键词：疱疹病毒3型人星形胶质细胞 Nod样受体蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 白细胞介素1β

小肠系膜扇形固定术在小肠系膜扭转治疗中的体会

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中华胃肠外科杂志 2024年第5期27卷 510-513页

作者：周良弼罗云冯文浩万治力黄龙李桂忠刘彬曾海平罗立杰王伟广州中医药大学第一附属医院重庆医院外一科重庆400700 广州中医药大学第一附属医院胃肠外科广州510405

目的报告本团队近10年开展小肠系膜固定术治疗小肠系膜扭转的初步结果,重点介绍小肠系膜扇形固定术预防小肠系膜扭转复发的情况。方法对广州中医药大学第一附属医院重庆医院2010年12月至2022年3月期间的12例术前急诊CT确诊或剖腹探查确... 详细信息

目的报告本团队近10年开展小肠系膜固定术治疗小肠系膜扭转的初步结果,重点介绍小肠系膜扇形固定术预防小肠系膜扭转复发的情况。方法对广州中医药大学第一附属医院重庆医院2010年12月至2022年3月期间的12例术前急诊CT确诊或剖腹探查确诊为全小肠系膜扭转患者,行小肠系膜扇形固定术预防小肠系膜扭转复发。该技术适应证为术前急诊CT确诊或剖腹探查确诊为全小肠系膜扭转患者,经系膜扭转复位后小肠系膜及肠管无坏死的病例。小肠系膜扇形固定术包括以下4个部分:(1)剖腹探查,检查肠管有无坏死以及除扭转外有无其他病变;(2)肠扭转复位;(3)小肠系膜线性固定,将小肠系膜的右后下缘(末端回肠系膜)间断缝合固定于右下腹的后腹膜,增加小肠系膜根部的宽度;(4)小肠系膜扇形固定,将小肠系膜向左下方扇形展开,呈扇形固定于后腹膜,缩短系膜长度并进一步增加系膜与后腹膜固定的宽度。结果12例患者共施行15次小肠系膜扭转手术。其中行小肠大部分切除3例,无复发;单纯性肠扭转复位术3例共4次,2例复发,其中1例2次复发;肠扭转复位+线性固定术4例,1例复发;肠扭转复位+小肠系膜扇形固定术4例,无复发。结论小肠系膜扇形固定术可能是降低或避免术后复发的一种有效治疗方式。

关键词：小肠扭转诊断治疗扇形固定

针灸对颈动脉粥样硬化早期患者血管弹性的影响

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针刺研究 2024年第6期49卷 611-617页

作者：黄熙畅赵琳张建兴叶思婷孟令萃周俊合周婷戚芷琪周鹏符文彬广州中医药大学第二临床医学院广州510000 广州中医药大学第二附属医院超声科广州510000 广州中医药大学第二附属医院针灸科广州510000 深圳市宝安区妇幼保健院康复科广东深圳518000 深圳市宝安区中医院广东深圳518000 符文彬广东省名中医传承工作室广州510000

目的:观察针灸对颈动脉粥样硬化早期患者动脉弹性的影响。方法:将62例颈动脉粥样硬化早期患者随机分为空白组(12例,脱落1例)、假针灸组(25例,脱落5例)和针灸组(25例,脱落3例)。针灸组予针灸治疗,包括①针刺:百会、印堂、人迎、内关、阳... 详细信息

目的:观察针灸对颈动脉粥样硬化早期患者动脉弹性的影响。方法:将62例颈动脉粥样硬化早期患者随机分为空白组(12例,脱落1例)、假针灸组(25例,脱落5例)和针灸组(25例,脱落3例)。针灸组予针灸治疗,包括①针刺:百会、印堂、人迎、内关、阳陵泉;②精灸:引气归元(中脘、下脘、气海、关元)、四花(膈俞、胆俞);③皮内针:心俞、胆俞。假针灸组予安慰针刺、艾灸和皮内针治疗,穴位同针灸组。以上两组每周治疗2次,共治疗12周。空白组不进行干预。3组均予饮食及生活方式宣教。观察3组患者治疗前及治疗1、2、3个月后极速脉搏波速度,包括收缩初期脉搏波速度(BS)和收缩末期脉搏波速度(ES),以及各时点血脂水平和血小板计数(PLT),并进行安全性评价。结果:与治疗前比较,针灸组治疗2个月和3个月后双侧BS值、ES值均下降(P<0.05);与空白组比较,针灸组治疗2个月后双侧ES均下降(P<0.05),治疗3个月后双侧BS与ES均下降(P<0.05);与假针灸组比较,针灸组治疗3个月后左侧BS与左侧ES均下降(P<0.05),针灸组左侧整体下降幅度优于右侧。各组患者治疗前后和组间血脂水平、PLT比较,差异均无统计学意义。治疗期间3组均无严重不良事件发生。结论:针灸疗法具有改善颈动脉粥样硬化早期患者动脉弹性的作用,且安全有效。

关键词：颈动脉粥样硬化血管弹性针灸极速脉搏波技术

基于国家专利数据库中药复方内服治疗斑秃的用药规律研究

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中国临床研究 2024年第5期37卷 778-783页

作者：崔钰桐杨泽琳田茸眭道顺广州中医药大学广东广州510006 成都中医药大学四川成都610075 广州中医药大学第一附属医院皮肤科广东广州510405

目的探讨斑秃专利中药复方内服用药规律,为中医药治疗斑秃及新药研发提供参考。方法检索国家知识产权局中国专利公布公告网站中治疗斑秃的专利中药复方数据,应用Microsoft Excel 2016软件建立数据库,进行药物频数、性味、归经统计;以Apr... 详细信息

目的探讨斑秃专利中药复方内服用药规律,为中医药治疗斑秃及新药研发提供参考。方法检索国家知识产权局中国专利公布公告网站中治疗斑秃的专利中药复方数据,应用Microsoft Excel 2016软件建立数据库,进行药物频数、性味、归经统计;以Apriori关联规则进行建模分析;Cytoscape 3.9.1软件构建中药核心复杂网络;IBM SPSS Statistics 26.0软件对核心网络中的药物进行系统聚类分析。结果筛选得到符合要求的内服复方134项,涉及中药307味;其中内服复方高频中药有当归(76次)、熟地黄(73次)、生地黄(48次)、川芎(47次)等;药物功效以补虚类、活血化瘀类为主;中药四气以温性为主;五味以甘味、苦味为主;归经以肝、肺、肾经为主。复方高置信度关联规则以当归为主联合熟地黄、生地黄等;聚类分析得到新处方8类。结论国家内服中药复方专利治疗斑秃以补益肝肾、益气养血为主,配伍活血化瘀、清热凉血祛风药。

关键词：斑秃专利用药规律当归地黄油风

基于代谢重编程探讨中药干预恶性肿瘤转移的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：李贺生李春婵郭华慧黄家晟兰聪颖陈鹏辉黄仁发广州中医药大学深圳医院<福田>

恶性肿瘤转移是导致患者预后不佳的关键因素，也是肿瘤治疗领域亟待攻克的棘手难题。代谢重编程作为调控肿瘤转移活性的关键环节，通过改变细胞内物质（如葡萄糖、氨基酸、脂质和核苷酸）代谢途径，影响肿瘤细胞的生长、侵袭及转移能力... 详细信息

恶性肿瘤转移是导致患者预后不佳的关键因素，也是肿瘤治疗领域亟待攻克的棘手难题。代谢重编程作为调控肿瘤转移活性的关键环节，通过改变细胞内物质（如葡萄糖、氨基酸、脂质和核苷酸）代谢途径，影响肿瘤细胞的生长、侵袭及转移能力。尤其在肿瘤转移相关的多级联步骤中，代谢重编程都扮演着关键角色，可以对肿瘤组织原位解离、血行转移及远端定植等多个关键阶段发挥着至关重要的影响。恶性肿瘤细胞能够通过选择性的调整自身代谢状态，以适应不同转移微环境和定植部位生长条件，进而选择最有利的生长代谢策略。从中医学的整体观念出发，恶性肿瘤的转移一般都与全身代谢状态紧密相连。中药治疗恶性肿瘤的优势之一即为全身调节，中药以其多途径、多靶点、多成分的治疗特点，能够通过调节肿瘤上皮间质转化（EMT）、细胞外基质（ECM）的降解，肿瘤细胞锚定非依赖性生长及肿瘤微环境，有效控制恶行肿瘤的转移。本文深入探讨了代谢重编程对恶性肿瘤转移的潜在调控作用，并综述了中药调节代谢重编程抑制肿瘤转移的最新研究进展。同时，本文还梳理了中药及其生物活性成分在干预肿瘤转移过程中的关键靶点。此研究旨在为利用中药调节代谢重编程以治疗恶性肿瘤转移提供更具价值的依据和更为清晰的思路。

关键词：代谢重编程恶性肿瘤转移中医药上皮间质转化肿瘤微环境生长代谢

冠心病不同阶段临床特征与证素分布的回顾性横断面调查

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1406-1414页

作者：钟森杰赵新元高翔黄汝银陈洁吴辉方红城冼绍祥广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学博士后科研流动站广东广州510006 深圳市中西医结合医院广东深圳518104

回顾性采集2022年1月—2023年3月在广州中医药大学第一附属医院、深圳市中西医结合医院诊疗的冠心病(CHD)患者临床资料,描述性分析人口学特征、临床症状与舌脉特征,χ2检验分析不同阶段的证素及证素组合分布差异,探讨CHD不同病理阶段的... 详细信息

回顾性采集2022年1月—2023年3月在广州中医药大学第一附属医院、深圳市中西医结合医院诊疗的冠心病(CHD)患者临床资料,描述性分析人口学特征、临床症状与舌脉特征,χ2检验分析不同阶段的证素及证素组合分布差异,探讨CHD不同病理阶段的临床特征与证素规律。研究提取28条症状条目、10条舌象条目与7条脉象条目;归纳心、肺、肝、脾、肾5个主要病位,血瘀、痰湿、气滞、热(火)、水饮、气虚、阴虚、阳虚8个主要病性,凝练8种病性组合形式。证素分布的χ2检验结果示,肺、肝、脾、肾、血瘀、气滞、热(火)、水饮、气虚、阴虚、阳虚证素在CHD不同阶段的分布差异显著,肝、血瘀、热(火)、气滞证素在不稳定期占比最高,肺、脾、肾、水饮、气虚、阴虚、阳虚证素在终末期占比最高;气虚证素在经皮冠状动脉介入术(PCI)术后不同时间段的分布差异显著。证素组合的χ2检验结果示,单病位、多病位、单病性、双病性、多病性、单纯实证、虚实夹杂组合在CHD不同阶段的分布差异显著,单病位、单病性、单纯实证在稳定期占比最高,双病性在不稳定期占比最高,多病位、多病性、虚实夹杂在终末期占比最高。结果表明,稳定期痰瘀并重,不稳定期存在瘀毒致变的病理转折,PCI术后总体气虚加剧,终末期损及阴阳、水饮渐盛。CHD不同阶段的临床特征与证素分布存在显著差异,是以虚实消长、痰瘀共病为基本病机的病理过程。

关键词：冠心病急性冠脉综合征经皮冠状动脉介入术慢性心力衰竭证素回顾性研究

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脑卒中症状群评估量表的编制及信效度检验

护理学杂志 2024年第3期39卷 10-13页

作者：吴蒙袁竺方游旅丁瑶陈丽金罗菁叶美霞广州中医药大学深圳医院(福田)康复科广东深圳518034 广州中医药大学第六临床医学院康复科广州中医药大学深圳医院(福田)推拿科广东深圳518034 广州中医药大学深圳医院(福田)护理部广东深圳518034

目的编制脑卒中患者症状群评估量表,进行信效度检验,为精准护理提供评估工具。方法以症状管理理论为框架,通过文献回顾、德尔菲法、预调查形成量表初稿后,选取353例脑卒中患者进行调查,采用项目分析、探索性因子分析、信度分析筛选条目... 详细信息

目的编制脑卒中患者症状群评估量表,进行信效度检验,为精准护理提供评估工具。方法以症状管理理论为框架,通过文献回顾、德尔菲法、预调查形成量表初稿后,选取353例脑卒中患者进行调查,采用项目分析、探索性因子分析、信度分析筛选条目、检验信效度。结果编制的脑卒中症状群评估量表包括躯体活动、认知言语、感知觉、吞咽、消化排泄、情绪心理6个症状群共35个条目,累积方差贡献率为69.095%。量表总Cronbach’sα系数为0.905,折半信度为0.728。量表水平的内容效度指数为0.886,条目水平的内容效度指数为0.920~1.000。结论脑卒中患者症状群评估量表具有良好的信效度,可用于脑卒中患者症状群的评估。

关键词：脑卒中症状群评估量表信度效度症状护理

地黄饮通过调控JAK1/STAT3信号通路治疗特应性皮炎小鼠的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 11-19页

作者：马雪宁张君成于腾杨素清温晓文贾淑琳王随天张洁琳广州中医药大学深圳医院(福田) 广州深圳518000 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040

目的:探讨地黄饮对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的特应性皮炎(AD)模型小鼠的作用及潜在机制。方法:通过DNCB反复刺激小鼠背部皮肤建立小鼠AD模型,造模成功后,随机分为模型组、润燥组(0.78 g·kg^(-1))、地黄饮高、中、低剂量组(40.30、20.1... 详细信息

目的:探讨地黄饮对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的特应性皮炎(AD)模型小鼠的作用及潜在机制。方法:通过DNCB反复刺激小鼠背部皮肤建立小鼠AD模型,造模成功后,随机分为模型组、润燥组(0.78 g·kg^(-1))、地黄饮高、中、低剂量组(40.30、20.15、10.08 g·kg^(-1)),每组12只,空白组12只,共72只。给药组按剂量灌胃给予相应药液,空白组和模型组灌胃给予同体积纯净水,1次/d,连续给药2周后观察小鼠皮损及搔抓次数;取小鼠背部皮损进行苏木素-伊红(HE)染色和甲苯胺蓝染色观察病理情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time-PCR)检测皮损组织中IFN-γ、IL-4、IL-6、Janus激酶1(JAK1)、转录激活因子3(STAT3)mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损组织JAK1、磷酸化(p)-JAK1、STAT3、p-STAT3蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠背部皮肤可见大量结痂、干燥、糜烂、肥厚伴搔抓,皮损组织可见表皮增生,伴角化过度和角化不全,棘层肥厚伴水肿,真皮层可见大量肥大细胞浸润,部分处于脱颗粒状态,小鼠血清中IgE、IL-4、IL-6、IFN-γ含量显著升高(P皮肤仅见少量干燥、脱屑,细胞水肿减轻,炎性浸润明显减轻,肥大细胞浸润数明显降低,小鼠血清中IgE、IL-4、IL-6、IFN-γ均有不同程度降低(P皮肤屏障功能有关。

关键词：地黄饮特应性皮炎辅助性T细胞(Th)1/Th2 Janus激酶1(JAK1)/转录激活因子3(STAT3)3 作用机制