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野菊不同花期转录组的比较分析

分子植物育种 2024年

作者：赵景岳黄秋怡詹若挺马新业广州中医药大学中药学院岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心

利用新一代高通量测序技术获得野菊花蕾、初花、盛花三个时期的高质量转录组数据，通过比较样品间转录组差异，探讨野菊花传统采摘最适期的基因表达内涵。联合趋势分析显示KEGG显著富集结果中通路ko00061 (脂肪酸的生物合成)、ko01040 ... 详细信息

利用新一代高通量测序技术获得野菊花蕾、初花、盛花三个时期的高质量转录组数据，通过比较样品间转录组差异，探讨野菊花传统采摘最适期的基因表达内涵。联合趋势分析显示KEGG显著富集结果中通路ko00061 (脂肪酸的生物合成)、ko01040 (不饱和脂肪酸的生物合成)、ko00940 (苯丙素的生物合成)、ko00941 (黄酮类化合物的生物合成)、ko00909 (倍半萜和三萜生物合成)、ko00900 (萜类骨架生物合成)相关基因在花蕾时期高表达，发育过程中整体表达下降；通路ko01100 (代谢途径)、ko01200 (碳代谢)、ko00190 (氧化性磷酸化)、ko00040 (戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化)、ko00592 (α-亚麻酸代谢)等相关基因则在花蕾时期低表达，发育过程中整体表达增加。野菊花中黄酮类、脂肪酸类、萜类成分和绿原酸合成相关基因在花蕾时期高表达，在发育进程中表达整体下降；而在发育进程中与能量代谢相关的基因表达整体增加，趋势与次生代谢活动相反。关键次生代谢和能量代谢基因的表达模式表明传统野菊花最佳采摘时期经验有其遗传学依据。

关键词：野菊花花期转录组趋势分析差异表达基因

HS-GC-MS结合ROAV分析不同品种橘红花挥发性成分

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中国现代中药 2024年第4期26卷 616-624页

作者：杨洁慧杜佳林李静文倪晨刘伟琼陈泳琪詹若挺严萍广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心/岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)/国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525099

目的:系统研究不同品种橘红花挥发性成分差异和香气特征。方法:利用顶空-气相色谱-质谱法(HSGC-MS)对4个品种(“光青”“假西洋”“密叶正毛”和“黄龙正毛”)共40批橘红花的挥发性成分进行检测,结合相对气味活度值(ROAV)分析其中的关... 详细信息

目的:系统研究不同品种橘红花挥发性成分差异和香气特征。方法:利用顶空-气相色谱-质谱法(HSGC-MS)对4个品种(“光青”“假西洋”“密叶正毛”和“黄龙正毛”)共40批橘红花的挥发性成分进行检测,结合相对气味活度值(ROAV)分析其中的关键香气成分。采用多元统计分析筛选不同品种橘红花显著性差异成分和特征香气成分。结果:HS-GC-MS检测结果显示,从4个品种橘红花中共鉴定出40个挥发性成分,主要包括烯烃类、醇类、酯类、酮类和醛类,其中以柠檬烯、β-月桂烯、芳樟醇、反式-橙花叔醇等为共有且含量较高的成分。通过ROAV确定了4个品种橘红花共有关键香气成分8个。挥发性成分差异分析结果显示,21个差异标志物可用于品种判别,其中β-蒎烯是“假西洋”的特征香气成分,芳樟醇是“密叶正毛”的特征香气成分,苯乙醛、反式-橙花叔醇和邻氨基苯甲酸甲酯是“黄龙正毛”的特征香气成分。结论:HS-GC-MS结合ROAV系统分析可区分不同品种橘红花并鉴定差异性的特征香气成分,该方法可为橘红花的品种判别和资源综合开发利用提供参考。

关键词：橘红花顶空-气相色谱-质谱法相对气味活度值挥发性成分品种

苍术根际橘绿木霉的生防功能及培养条件的探索

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 192-199页

作者：李阔王升王红阳彭政郭秀芝王铁霖王月枫郭兰萍广东药科大学中药学院广州510006 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室北京100700

目的:苍术根腐病是苍术种植生产上最为严重的病害之一。木霉菌是有效防治植物根腐病且对环境污染小的生防菌。该研究旨在从苍术根际中分离和研究具有根腐病防治功能的木霉菌,用于解决苍术种植生产过程面临的病害防治问题。方法:稀释涂... 详细信息

目的:苍术根腐病是苍术种植生产上最为严重的病害之一。木霉菌是有效防治植物根腐病且对环境污染小的生防菌。该研究旨在从苍术根际中分离和研究具有根腐病防治功能的木霉菌,用于解决苍术种植生产过程面临的病害防治问题。方法:稀释涂布法和内转录间隔区(ITS)测序分离并鉴定木霉T2204;对峙培养实验和对扣培养实验验证T2204及其挥发性物质对两株病原菌的抑制活性;通过盆栽实验和气相色谱-质谱法(GC-MS)探究T2204对苍术根腐病的生防潜力及对苍术根茎4种主要挥发油成分的含量积累的影响;通过不同培养基、光照、温度、pH、碳氮源条件培养探究T2204适宜培养条件。结果:分离得到对2株强致病力苍术根腐病病原真菌具有直接抑制能力的一株木霉T2204,鉴定为橘绿木霉(Trichoderma citrinoviride);对峙培养实验显示T2204对2株镰刀菌的抑菌率分别达到77.90%和76.80%;对扣培养实验显示抑菌率分别达57.11%和81.11%。盆栽实验证明,T2204不同处理后苍术幼苗受根腐病侵染后成活率达到100%,而不接种T2204的实验组仅为50%;生长150 d后,接种T2204的苍术植株根茎干重比无处理对照(CK)组提升32%(P研究奠定基础。

关键词：苍术橘绿木霉根腐病生物防治促生促进次生代谢

蒙古黄芪、膜荚黄芪及混伪品种子的位点特异性PCR鉴别

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 21-28页

作者：罗丽胡力蒋超陈梓媛李晓琳袁媛广东药科大学中药学院广州510006 安徽中医药大学药学院合肥230012 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700

目的:基于特异性聚合酶链式反应(PCR)建立一种可以准确、快速鉴别蒙古黄芪、膜荚黄芪种子的方法。方法:利用叶绿体基因组综合数据库(CGIR)及IdenDSS软件分别获取蒙古黄芪、膜荚黄芪的DNA特征片段,在此基础上筛选获得蒙古黄芪与膜荚黄芪... 详细信息

目的:基于特异性聚合酶链式反应(PCR)建立一种可以准确、快速鉴别蒙古黄芪、膜荚黄芪种子的方法。方法:利用叶绿体基因组综合数据库(CGIR)及IdenDSS软件分别获取蒙古黄芪、膜荚黄芪的DNA特征片段,在此基础上筛选获得蒙古黄芪与膜荚黄芪的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,根据该位点设计蒙古黄芪特异性鉴别引物对MG-F/MG-R和膜荚黄芪特异性鉴别引物对MJ-F/MJ-R。分别建立蒙古黄芪和膜荚黄芪特异性PCR鉴别方法,优化PCR反应体系,并对该方法的专属性和适用性进行考察。结果:蒙古黄芪特异性PCR鉴别方法,采用引物对MG-F/MG-R、退火温度62℃、循环次数28次,经PCR扩增和凝胶电泳后蒙古黄芪在约220 bp处得到特异性条带,而膜荚黄芪和其他混伪品种子无条带;膜荚黄芪特异性PCR鉴别方法,采用引物对MJ-F/MJ-R、退火温度58℃、循环次数28次,经PCR扩增和凝胶电泳后膜荚黄芪扩增得到约150 bp的条带,而蒙古黄芪及混伪品无扩增产物。结论:该研究建立的特异性PCR鉴别方法,可以准确、快速对蒙古黄芪、膜荚黄芪进行种源鉴别,为黄芪种子的分类与准确鉴定提供了一定的科学依据。

关键词：蒙古黄芪膜荚黄芪种子聚合酶链式反应

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中药材种子鉴别技术研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 1-11页

作者：刘志浩查良平罗丽赵玉洋李晓琳袁媛中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 中国药科大学中药学院南京211198 安徽中医药大学药学院合肥230012 广东药科大学中药学院广州510006

种子是中药材生产的源头。中药材种子的真伪、优劣直接影响到药材的有效性和安全性。中药材种子质量参差不齐,存在种源混杂、真伪混淆、陈种新卖、成熟度和净度低等问题。为保证中药产业高质量、可持续发展,亟需对中药材种子进行鉴别和... 详细信息

种子是中药材生产的源头。中药材种子的真伪、优劣直接影响到药材的有效性和安全性。中药材种子质量参差不齐,存在种源混杂、真伪混淆、陈种新卖、成熟度和净度低等问题。为保证中药产业高质量、可持续发展,亟需对中药材种子进行鉴别和质量评价,对中药材种子市场进行规范。种子鉴别的方法包括性状鉴别、显微鉴别、微性状鉴别、化学指纹图谱鉴别、分子鉴别及电子鼻、X射线衍射法、电化学指纹图谱鉴别、光谱成像与人工智能识别技术等新兴技术。各类鉴别方法的应用范围及其优缺点各有不同,根据中药材种子品种不同、检测场所要求不同,可选择合适的鉴别方法,以实现鉴别准确、时间和经济成本降低的目标。未来中药材种子鉴别技术发展的方向应基于各项快速发展的新兴技术,开展学科交叉融合,朝着智能化、无损化、单粒检测的方向发展,以满足现代中药产业的需求。该文对目前科研和生产中应用的种子鉴别技术进行系统总结,对不同技术的原理、适用范围和优缺点进行比较,同时对未来种子鉴别技术的发展前景进行展望,以期为中药材种子鉴别及质量评价提供参考。

关键词：中药材种子传统鉴别分子鉴别化学指纹图谱电子鼻光谱鉴别人工智能

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市售鱼鳔氨基酸及蛋白质成分分析

中成药 2024年第2期46卷 499-506页

作者：张金聚卢一泓何倾吴孟华马志国张英曹晖暨南大学岭南传统中药研究中心广东广州510632 国家中药现代化工程技术研究中心岭南资源分中心广东广州510632 广东省中医药信息化重点实验室广东广州510632

目的分析16批不同基原的市售鱼鳔中氨基酸及蛋白质成分。方法建立一种6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯柱前衍生、高效液相色谱法,测定鱼鳔中17种氨基酸含量,并对不同基原鱼鳔中氨基酸类成分进行分析;采用十二烷基硫酸钠聚丙烯... 详细信息

目的分析16批不同基原的市售鱼鳔中氨基酸及蛋白质成分。方法建立一种6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯柱前衍生、高效液相色谱法,测定鱼鳔中17种氨基酸含量,并对不同基原鱼鳔中氨基酸类成分进行分析;采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鱼鳔中的蛋白质分子量分布,并采用蛋白质组学法鉴定鱼鳔中的蛋白质。结果 17种氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(R2≥0.998 0),平均加样回收率85.62%~109.60%,精密度、稳定性、重复性RSD均小于3.5%。16批鱼鳔氨基酸组成与含量存在差异,氨基酸总含量介于468.31~620.05 mg/g;从16批鱼鳔中共鉴定688种蛋白质,包括Ⅰ型在内的胶原蛋白多达11种,此外,鱼鳔中还含有较多分子质量52~95 kDa的低丰度蛋白。结论该研究可为鱼鳔的质量评价和开发利用提供参考。

关键词：鱼鳔氨基酸蛋白质高效液相色谱蛋白质组学

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基于传统品质评价的野生与栽培潞党参比较

中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 156-164页

作者：兰晓燕田春芳詹志来周利李翔邱子栋南铁贵袁其里林晓亮田从魁陈美兰康利平中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中医药健康产业研究所南昌330000 无限极(中国)有限公司广州510663 湖北民族大学硒资源研究与生物应用湖北省重点实验室湖北恩施445000

目的:从性状、显微、初生与次生代谢产物含量3个方面对野生和栽培潞党参进行系统的比较研究。方法:收集野生及栽培潞党参样品,使用游标卡尺、卷尺及天平测量其性状数据,番红固绿染色法制作石蜡切片并利用光学显微镜观察其显微结构;按照2... 详细信息

目的:从性状、显微、初生与次生代谢产物含量3个方面对野生和栽培潞党参进行系统的比较研究。方法:收集野生及栽培潞党参样品,使用游标卡尺、卷尺及天平测量其性状数据,番红固绿染色法制作石蜡切片并利用光学显微镜观察其显微结构;按照2020年版《中华人民共和国药典》(一部)党参项下浸出物测定方法检测醇溶性浸出物的含量,蒽酮比色法测定淀粉含量,多糖试剂盒测定总多糖含量,纤维分析仪测定纤维类成分含量,超高效液相色谱法(UPLC)测定单糖、二糖及部分次生代谢产物的含量。结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1、P部外侧裂隙明显较多,木心较大;显微特征方面,野生潞党参的石细胞较多,木质部占比较大,且木质部存在成环的木栓细胞,栽培潞党参的韧皮部占比较大,导管直径较小且排列疏松。初生代谢产物方面,栽培潞党参的45%乙醇浸出物和总多糖含量均明显高于野生潞党参(P研究结果,建议增加炔类化合物、果糖与蔗糖的含量比为指标来表征不同生产方式的党参,以引导党参高品质生产。

关键词：党参野生栽培传统品质评价性状显微结构化学成分

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基于胆南星挥发性成分的发酵年份识别

中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 197-204页

作者：何佳南铁贵刘天睿赵玉洋刘颖金艳袁媛广东药科大学中药学院广州510006 道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室中国中医科学院中药资源中心北京100700 中国中医科学院中医药健康产业研究所南昌330115 北京市双桥燕京中药饮片厂北京100024

目的:该研究采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱-质谱法(GC-MS),分析未发酵胆南星、一年制胆南星、二年制胆南星和三年制胆南星的挥发性成分的差异,以识别不同发酵年份的胆南星。方法:采集不同发酵年份的胆南星样本,利用HS-SPME-G... 详细信息

目的:该研究采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱-质谱法(GC-MS),分析未发酵胆南星、一年制胆南星、二年制胆南星和三年制胆南星的挥发性成分的差异,以识别不同发酵年份的胆南星。方法:采集不同发酵年份的胆南星样本,利用HS-SPME-GC-MS技术检测各样本的挥发性成分。通过主成分分析(PCA)、聚类热图分析(HCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等化学计量学分析方法,对检测到的挥发性成分的相对含量进行处理和分析。结果:共鉴定出145种挥发性物质,其中杂环类、醇类、醛类和芳香类是相对含量较高的挥发性成分。采用PCA、HCA和PLS-DA等分析方法均可直观地对不同发酵年份的胆南星进行有效区分。根据VIP值>1的标准,筛选出73种具有差异性标志的挥发性成分。在未发酵胆南星2,6,11-三甲基十二烷、间二甲苯的含量最高,且与发酵样品的含量差异均有显著统计学意义(P研究基于HS-SPME-GC-MS技术所建立的胆南星挥发性成分识别方法,可实现胆南星未发酵与1~3年发酵年份的快速判别,为胆南星炮制工艺规范化及质量标准研究提供科学依据。

关键词：胆南星顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用挥发性成分发酵年份

基于主要药效成分统计的两面针最佳采收期与合理药用部位研究

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 2889-2896页

作者：蒙兰花马庆贡保草姚英刘信丹马志国曹晖张英吴孟华暨南大学岭南传统中药研究中心/国家中药现代化工程技术研究中心岭南资源分中心/广东省中医药信息化重点实验室广东广州510632 华润三九医药股份有限公司广东深圳518110 佛山科学技术学院广东佛山528051

通过分析不同生长年限、不同采收月份、不同部位的两面针栽培品主要药效成分含量的变化规律,并与野生品比较,确定两面针的最佳采收期和合理药用部位。采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Kinetex C_(18)(4.6 mm×100 mm,2.6μm),流动相为... 详细信息

通过分析不同生长年限、不同采收月份、不同部位的两面针栽培品主要药效成分含量的变化规律,并与野生品比较,确定两面针的最佳采收期和合理药用部位。采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Kinetex C_(18)(4.6 mm×100 mm,2.6μm),流动相为0.2%三乙胺的0.3%磷酸水溶液-乙腈(80∶20),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长273 nm,柱温30℃,以主要药效成分氯化两面针碱和白屈菜红碱为指标,对两面针样品进行含量测定。结果表明野生与栽培两面针根的主要药效成分含量无显著性差异,栽培两面针根与根+茎无显著性差异;由层次聚类分析(HCA)与主成分分析(PCA)结果说明两面针根与茎能明显区分,但无法区分野生与栽培品,与显著性分析结果一致;1~6年两面针根的氯化两面针碱和白屈菜红碱质量分数之和为0.114%~0.256%,茎0.030%~0.133%,主要药效成分含量与生长年限呈正相关;4个季节采样均无显著性差异,说明采收季节对两面针主要药效成分含量无影响;3个种植基地的两面针(不含枝)以干燥品计算氯化两面针碱和白屈菜红碱含量之和,云浮为0.308%±0.123%,茂名为0.192%±0.025%,南宁为0.197%±0.052%,3个种植基地均≥0.15%,即移栽2年6个月以上的两面针同时以根(含须根、主根和地下茎)和茎(地上茎)入药可满足要求。综上,两面针栽培品可以作为两面针野生品的合理替代,为实现两面针资源的可持续开发与应用提供保障;根与茎均可作为两面针的药用部位,建议《中国药典》两面针的药用部位修订为干燥根和茎,全年均可采挖。为保障有效成分含量及临床有效性,建议采收移栽3年以上的两面针根和茎入药。

关键词：两面针氯化两面针碱白屈菜红碱含量测定茎