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巴戟天AP2/ERF基因家族的全基因组鉴定及生物信息学分析

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中草药 2024年第20期55卷 7062-7071页

作者：陈纪佟刘楚弦韩逸飞潘芸燕段礼新季爱加广州中医药大学中药学院国际中医药转化医学研究所教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东省中医药防治肿瘤转化药学研究重点实验室

目的研究鉴定巴戟天Morinda officinalis AP2/ERF转录因子家族,为巴戟天次生代谢调控网络提供理论基础。方法通过对巴戟天AP2/ERF转录因子家族的探索,利用TBtools、MEGA等生物信息分析软件对巴戟天基因组基因结构注释信息等文件进行... 详细信息

目的研究鉴定巴戟天Morinda officinalis AP2/ERF转录因子家族,为巴戟天次生代谢调控网络提供理论基础。方法通过对巴戟天AP2/ERF转录因子家族的探索,利用TBtools、MEGA等生物信息分析软件对巴戟天基因组基因结构注释信息等文件进行基本分析、进化分析,得出巴戟天中AP2/ERF家族的基因,以及这些基因中内含子排列情况、共线性分析的结果,并且通过进化树的构建可视化AP2/ERF基因家族的分类。结果初步筛选出可能调节巴戟天生长发育和代谢的转录因子。在巴戟天基因组中,鉴定到有131条基因属于AP2/ERF基因家族成员,通过基因结构注释文件,得到MoAP2/ERF在染色体定位分析、系统发育进化树、内含子外显子模式、motif、保守结构域分析和共线性分析等,最终根据MoAP2/ERF的表达量确认13条在巴戟天根部高表达的转录因子。结论通过生物信息分析筛选出在根部特异性表达的基因13条巴戟天AP2/ERF转录因子,为增加巴戟天主要有效成分产率奠定理论基础,为后续研究提供信息。

关键词：巴戟天 AP2/ERF基因家族基因家族鉴定生物信息学表达分析

鸢尾糖基转移酶编码基因ItUGT349和ItUGT419克隆及特性研究

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中草药 2023年第1期54卷 254-261页

作者：张李兵李静陶无恙黄梓璐陈嘉杰段礼新季爱加广州中医药大学、中药学院国际中医药转化医学研究所教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东省中医药防治肿瘤转化药学研究重点实验室广东广州510000

目的克隆获得鸢尾Iris tectorum糖基转移酶基因It UGT349和ItUGT419,并对其进行生物信息学分析、基因差异表达检测和蛋白原核表达等特性分析。方法以鸢尾转录组中筛选到的It UGTs基因全长开放阅读框(openreadingframe,ORF)设计特异性... 详细信息

目的克隆获得鸢尾Iris tectorum糖基转移酶基因It UGT349和ItUGT419,并对其进行生物信息学分析、基因差异表达检测和蛋白原核表达等特性分析。方法以鸢尾转录组中筛选到的It UGTs基因全长开放阅读框(openreadingframe,ORF)设计特异性引物,进行PCR扩增,经测序后获得基因序列并进行生物信息学分析;通过荧光定量PCR(real-time PCR,q RT-PCR)进行基因差异表达检测;最后构建pET-32a(+)原核表达载体在大肠杆菌中表达蛋白。结果 PCR扩增ItUGT349和It UGT419的ORF长度分别为1461、1488 bp,编码蛋白相对分子质量大小分别为53 830、54 910。荧光定量PCR显示,It UGT349的表达量在叶片中最高,而It UGT419在花器官中表达最高。进化树表明,ItUGT419与三萜类糖基转移酶聚类在一起,ItUGT349与三萜、黄酮和木质素等多种类型的糖基转移酶聚类到一支。ItUGT349和ItUGT419在大肠杆菌中均成功的表达出可溶性蛋白。结论通过It UGT349和ItUGT419基因全长ORF克隆,并对其进行序列分析,基因差异表达检测及原核表达等研究,为后续进一步鉴定其催化功能奠定基础。

关键词：鸢尾糖基转移酶基因克隆生物信息学分析原核表达 qRT-PCR

淫羊藿低糖苷组分安全性评价及其5种主要成分的药代动力学研究

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中药新药与临床药理 2024年第3期35卷 402-410页

作者：林婷婷李小翠邱华伟刘中秋朱丽君广州中医药大学中药学院国际中医药转化医学研究所教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东省中医药防治肿瘤转化药学研究重点实验室广东广州510006

目的评价淫羊藿低糖苷组分的安全性并研究其中5种低糖苷成分的药代动力学。方法4组KM小鼠分别灌胃玉米油溶媒以及1968、2625、3500 mg·kg^(-1)淫羊藿低糖苷组分后,连续7 d观察小鼠的毒性反应和死亡情况,观察结束后解剖。计算各组小鼠... 详细信息

目的评价淫羊藿低糖苷组分的安全性并研究其中5种低糖苷成分的药代动力学。方法4组KM小鼠分别灌胃玉米油溶媒以及1968、2625、3500 mg·kg^(-1)淫羊藿低糖苷组分后,连续7 d观察小鼠的毒性反应和死亡情况,观察结束后解剖。计算各组小鼠的脏体比和脏脑比,ELISA法测定血浆中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝脏病理变化。C57BL/6J小鼠分别尾静脉注射或灌胃宝藿苷Ⅰ、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、箭藿苷B和箭藿苷C后于不同时间点采血,超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法测定5种低糖苷的血药浓度并计算药动学参数。结果与空白对照组相比,小鼠灌胃不同剂量淫羊藿低糖苷组分后体质量、脏体比、脏脑比及血浆中ALT和AST含量均无显著性差异,肝脏病理切片也无显著变化。静脉注射后,5种低糖苷的药时曲线下面积(AUC_(0-t))分别为4.82、82.54、276.64、88.77、178.02 min·μg·mL^(-1),半衰期(t1/2)分别为60.42、115.27、67.63、131.61、129.87 min。灌胃后,5种低糖苷的AUC_(0-t)分别为31.64、18.59、3.48、2.41、2.42 min·μg·mL^(-1),峰浓度(Cmax)分别为147.23、86.76、15.58、24.34、26.12 ng·mL^(-1),达峰时间(tmax)分别为21.00、78.00、78.00、30.00、28.00 min。宝藿苷Ⅰ、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、箭藿苷B、箭藿苷C口服生物利用度分别为1.91%、0.51%、0.05%、0.06%、0.04%。结论淫羊藿低糖苷组分安全性高,在3500 mg·kg^(-1)剂量下仍没有观察到肝毒性,其中5种低糖苷成分在小鼠体内吸收快、消除快,生物利用度低。

关键词：淫羊藿低糖苷药代动力学口服生物利用度安全性小鼠

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冬凌草中1个新的黄烷类化合物

中草药 2019年第12期50卷 2791-2793页

作者：张彦焘雷翔王红刚吴鹏广州卫生职业技术学院广东广州510405 广州中医药大学中药学院中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东广州510006 广东药科大学中药学院广东广州510006

目的研究冬凌草(碎米桠Rabdosia rubescens地上部分)的化学成分。方法采用硅胶柱、十八烷基硅烷键合硅胶开放柱、小孔树脂凝胶柱以及反相高效液相色谱法进行分离纯化,通过理化性质及波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从冬凌草中分离得... 详细信息

目的研究冬凌草(碎米桠Rabdosia rubescens地上部分)的化学成分。方法采用硅胶柱、十八烷基硅烷键合硅胶开放柱、小孔树脂凝胶柱以及反相高效液相色谱法进行分离纯化,通过理化性质及波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果从冬凌草中分离得到1个黄烷类化合物,鉴定为3'-羟基-2',4'-二甲氧基-3-烯-黄烷(1)。结论化合物1为新的黄烷类化合物,命名为冬凌烷A。

关键词：冬凌草超临界CO2萃取黄烷类 3'-羟基-2',4'-二甲氧基-3-烯-黄烷冬凌烷A

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塔拉萨敏的抗炎镇痛活性评价及体内处置研究

中药新药与临床药理 2022年第11期33卷 1545-1551页

作者：许仪红黄秋珍李小翠杨彩华扶玲朱丽君刘中秋广州中医药大学中药学院国际中医药转化医学研究所广东广州510006 中华人民共和国教育部中医药防治肿瘤转化医学研究联合实验室广东广州510006 南方医科大学南方医院药学部广东广州510515 广州中医药大学惠州医院广东惠州516000 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东广州510006

目的探讨塔拉萨敏(Talatisamine)的抗炎镇痛活性和体内处置特征。方法采用λ角叉菜胶致急性炎症模型评价塔拉萨敏的抗炎活性,醋酸致痛扭体模型和红外热板致痛模型评价塔拉萨敏的镇痛活性。C57BL/6J小鼠分别静脉注射1 mg·kg^(-1)或灌胃1... 详细信息

目的探讨塔拉萨敏(Talatisamine)的抗炎镇痛活性和体内处置特征。方法采用λ角叉菜胶致急性炎症模型评价塔拉萨敏的抗炎活性,醋酸致痛扭体模型和红外热板致痛模型评价塔拉萨敏的镇痛活性。C57BL/6J小鼠分别静脉注射1 mg·kg^(-1)或灌胃10 mg·kg^(-1)塔拉萨敏,采集血浆、组织、尿液和粪便样品,用超高效液相色谱与质谱联用(UHPLC-MS/MS)技术分析塔拉萨敏在小鼠体内的处置特征。结果与生理盐水组相比,塔拉萨敏能显著降低小鼠的足跖肿胀率(P<0.05,P<0.01或P<0.001);显著减少小鼠的疼痛扭体次数(P<0.001);显著增加小鼠的痛阈值(P<0.001)。小鼠静脉注射1 mg·kg^(-1)塔拉萨敏后,t_(1/2)为75.61 min,AUC_(0-t)为91.77 min·μmol·L^(-1)。小鼠灌胃10 mg·kg^(-1)塔拉萨敏后,t_(max)为16.00 min,C_(max)为6.38μmol·L^(-1),AUC_(0-t)为763.45 min·μmol·L^(-1),t_(1/2)为84.63 min。塔拉萨敏在小鼠体内的口服生物利用度为83.84%;在组织中分布广泛,尤其在肾和脾脏中分布较多;其消除快,在尿液和粪便中24 h的累计排泄率分别为40.95%和0.89%。结论塔拉萨敏抗炎镇痛活性显著,生物利用度高,吸收快,组织分布广泛,排泄快。

关键词：塔拉萨敏镇痛抗炎药代动力学组织分布排泄小鼠

多巴胺奖赏系统参与抑郁环路机制及中医药干预研究思考与展望

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中国药理学通报 2024年第8期40卷 1424-1429页

作者：李卓娴周流畅叶丽宏邓迪赵金兰史亚飞张荣广州中医药大学基础医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120 广州中医药大学中药学院/国际转化医学研究所广东广州510006

在寻找提升抗抑郁疗效新策略的过程中,中医药干预逐渐展露出其独特的防治优势。多巴胺奖赏系统密切参与了抑郁症的病理发生发展过程,现今研究多聚焦于多巴胺奖赏系统中某一特定核团的功能机制,而着眼于神经环路功能机制所开展的研究较... 详细信息

在寻找提升抗抑郁疗效新策略的过程中,中医药干预逐渐展露出其独特的防治优势。多巴胺奖赏系统密切参与了抑郁症的病理发生发展过程,现今研究多聚焦于多巴胺奖赏系统中某一特定核团的功能机制,而着眼于神经环路功能机制所开展的研究较少。当前奖赏环路的微观研究中,奖赏环路异常和焦虑、抑郁等负面情绪的关联性已获得广泛认可,中医药干预可通过影响奖赏环路发挥抗抑郁作用。该文围绕多巴胺奖赏系统参与抑郁症的环路机制以及中医药干预研究做一综述。

关键词：抑郁症奖赏系统神经环路多巴胺腹侧背盖区伏隔核

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多药耐药蛋白1a对苯甲酰新乌头原碱的效-毒-体内暴露的调控研究

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中药新药与临床药理 2023年第7期34卷 959-969页

作者：左慧琳李小翠区晓君杨彩华刘中秋梁奇朱丽君广州中医药大学中药学院国际中医药转化医学研究所广东广州510006 中华人民共和国教育部中医药防治肿瘤转化医学研究联合实验室广东广州510006 南方医科大学南方医院药学部广东广州510515 广州中医药大学粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东广州510006 深圳市宝安区中医院广东深圳518133

目的探究多药耐药蛋白1a(Multidrug resistance protein 1a,Mdr1a)对苯甲酰新乌头原碱(Benzoylmesaconine,BMA)的镇痛和抗炎活性、神经和心脏毒性以及体内暴露的调控作用。方法Mdr1a^(-/-)和野生型FVB小鼠分别灌胃20 mg·kg^(-1)BMA后,采用醋酸致疼痛扭体模型和角叉菜胶诱导急性炎症模型来考察Mdr1对BMA的镇痛和抗炎活性的调控作用,同时采用脑和心脏组织病理切片和ELISA法考察Mdr1对BMA神经和心脏毒性的调控作用。Mdr1a^(-/-)和野生型FVB小鼠静脉注射1 mg·kg^(-1)或灌胃20 mg·kg^(-1)BMA后,采用超高效液相-质谱(UHPLC-MS/MS)技术测定小鼠各组织和血浆中BMA的浓度,考察Mdr1a对BMA组织分布及药动学特征的影响。采用在体单向肠灌流模型考察Mdr1a对BMA肠道吸收的影响。结果口服20 mg·kg^(-1)BMA后,Mdr1a^(-/-)小鼠的疼痛扭体次数较野生型FVB小鼠下降60.82%(P实验结果表明,与野生型FVB小鼠相比,BMA在Mdr1a^(-/-)小鼠上的生物利用度(F)增加了4.53倍,同时,口服20 mg·kg^(-1)BMA后,药时曲线下面积(AUC_(0-t))和AUC_(0-∞)分别增加了1.46和2.63倍,清除率(Cl)和表现分布容积(V_(d))分别降低了66.13%和78.85%(P实验结果表明,与野生型FVB小鼠相比,BMA在Mdr1a^(-/-)小鼠十二指肠上的有效表观渗透系数,吸收率和吸收量分别显著增加了4.00、3.96和3.96倍(P<0.05)。结论Mdr1a通过改变BMA的组织蓄积、体内暴露量和肠道吸收,参与调节BMA的镇痛作用和神经毒性,但BMA的抗炎作用和心脏毒性可能与Mdr1a的缺失无关。

关键词：苯甲酰新乌头原碱多药耐药蛋白药效毒性体内暴露小鼠

胃痞灵通过Nrf2/NQO1/HO-1信号通路调控胃“炎-癌”转化氧化应激机制

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中华中医药杂志 2023年第3期38卷 1241-1246页

作者：潘华峰林琨洋罗敏怡林泽龙倪家慧周兴挺李思怡广州中医药大学科技创新中心广州510006 广州中医药大学临床药理研究所广州510006 广州中医药大学脾胃研究所广州510006 南方医科大学中医药学院广州510515 广东南粤集团有限公司广州510095 教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际联合实验室广州510006 广州中医药大学国际中医药转化医学研究所广州510006

目的:探讨胃痞灵在体内抑制胃“炎-癌”转化氧化应激的作用机制。方法:50只Ba l b/c小鼠分为空白组(10只)及造模组[40只,其中模型组,胃痞灵高、低剂量组,阳性药组(维生素B_(12)),各10只],构建胃癌前病变小鼠模型,使用相应药物干预后,观... 详细信息

目的:探讨胃痞灵在体内抑制胃“炎-癌”转化氧化应激的作用机制。方法:50只Ba l b/c小鼠分为空白组(10只)及造模组[40只,其中模型组,胃痞灵高、低剂量组,阳性药组(维生素B_(12)),各10只],构建胃癌前病变小鼠模型,使用相应药物干预后,观察小鼠整体情况(尾巴、体型)、体质量增长情况、胃黏膜组织结构变化、检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/醌氧化还原酶1(NQO1)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白、基因表达及血清SOD值。结果:与空白组比较,模型组小鼠尾巴细短、色泽较瘀暗,体型明显减小,体质量增长缓慢,胃黏膜组织细胞异型增生明显,胃黏膜Nrf2/NQO1/HO-1信号通路被激活;与模型组比较,胃痞灵高、低剂量组小鼠整体情况改善,胃黏膜组织结构重塑、异型增生减少,且Nrf2/NQO1/HO-1信号通路受到一定程度抑制(表达增多),提示氧化应激被阻断。结论:MNNG自由饮用可诱导小鼠胃黏膜上皮发生氧化应激,胃痞灵可能在一定程度阻断氧化应激进而抑制胃“炎-癌”转化,从而发挥抗胃癌前病变的作用。

关键词：氧化应激胃癌前病变胃痞灵健脾化瘀解毒法

健脾化瘀解毒方调控AKT/p38蛋白磷酸化改善胃癌前病变小鼠脾虚证研究

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世界科学技术-中医药现代化 2022年第12期24卷 4953-4959页

作者：李思怡麦伟栅林琨洋林泽龙罗敏怡潘华峰广州中医药大学国际中医药转化医学研究所广州510006 教育部中医药防治肿瘤转化医学研究国际联合实验室广州510006 深圳大学体育学院深圳518000 广州中医药大学科技创新中心广州510006 南方医科大学中医药学院广州510515

目的探讨健脾化瘀解毒方在体内改善胃癌前病变小鼠脾虚证的作用机制。方法构建脾虚证胃癌前病变小鼠模型,使用健脾化瘀解毒方干预后,观察小鼠体质量增长及摄食情况、脾脏组织结构变化、脾/胸腺指数、并检测AKT/p38信号通路相关蛋白表... 详细信息

目的探讨健脾化瘀解毒方在体内改善胃癌前病变小鼠脾虚证的作用机制。方法构建脾虚证胃癌前病变小鼠模型,使用健脾化瘀解毒方干预后,观察小鼠体质量增长及摄食情况、脾脏组织结构变化、脾/胸腺指数、并检测AKT/p38信号通路相关蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量增长缓慢,摄食明显减少,脾脏指数减小,胃黏膜AKT/p38信号通路被激活;与模型组比较,健脾化瘀解毒方干预组小鼠脾虚症状得到改善,脾脏组织结构重塑,且AKT/p38信号通路受到一定程度抑制。结论 MNNG可诱导胃癌前病变小鼠出现脾虚症状,健脾化瘀解毒方可能在一定程度抑制AKT/p38信号通路进而改善胃癌前病变小鼠脾虚症状,与其以健脾法为基础的治法相符合,进而发挥抑制甚至逆转胃癌前病变的作用。

关键词：小鼠脾虚模型胃癌前病变健脾化瘀解毒方 AKT蛋白磷酸化 p38蛋白磷酸化