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紫云英苷抑制APP/PS 1小鼠大脑皮质神经元凋亡

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中山大学学报（医学科学版） 2023年第6期44卷 983-990页

作者：王姝涵杨翠珠张润恒林佳泓杨雅琪刘靖李国营马宇昕广东药科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系广东广州510006

【目的】探讨紫云英苷(AST)对APP/PS1转基因小鼠大脑皮质神经元凋亡的影响。【方法】将18只6月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为APP/PS1、APP/PS1+40 mg/kg AST、APP/PS1+20 mg/kg DNP(Donepezil,DNP)三组,每组各6只动物。同时另选6只... 详细信息

【目的】探讨紫云英苷(AST)对APP/PS1转基因小鼠大脑皮质神经元凋亡的影响。【方法】将18只6月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为APP/PS1、APP/PS1+40 mg/kg AST、APP/PS1+20 mg/kg DNP(Donepezil,DNP)三组,每组各6只动物。同时另选6只同月龄C57BL/6雄性小鼠作为正常对照组(Control)。腹腔注射给药AST,每日一次,连续给药一个月后,Tunel染色法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡情况;免疫荧光染色法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase9、Cleaved-Caspase3表达情况;Western blot法检测APP/PS1小鼠大脑皮质内Bax、Bcl-2、Caspase9及Caspase3表达水平的变化。【结果】Tunel染色结果显示,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均可减少APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元凋亡,其中AST抑制效果尤为明显。免疫荧光染色结果表明,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均抑制APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元中Bax、Caspase9及Cleaved-Cas⁃pase3的表达,增加Bcl-2的表达。Western blot结果进一步证实,40 mg/kg AST及20 mg/kg DNP均可下调APP/PS1小鼠大脑皮质内神经元Bax(P<0.05,P<0.05)、Caspase9(P<0.005,P<0.05)及Caspase3(P<0.0001,P<0.0001),上调Bcl-2(P<0.05,P<0.05)。【结论】AST能够抑制APP/PS1小鼠大脑皮质神经元凋亡。

关键词：紫云英苷 APP/PS1小鼠大脑皮质神经元凋亡

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海洋中药治疗骨质疏松的用药规律及作用机制

中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3713-3723页

作者：赖越林轩徐淼刘欢沈剑粦黄文华广东医科大学第一临床医学院广东省湛江市524023 莆田学院环境与生物工程学院福建省莆田市351100 福建医科大学基础医学院福建省福州市350100 西南医科大学附属中医医院骨科四川省泸州市646000 莆田学院附属医院中心实验室福建省莆田市351100 南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广东省数字医学与生物力学重点实验室广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心广东省广州市510515

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗... 详细信息

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗骨质疏松的海洋中药专利处方进行用药模式和作用机制研究,并特别关注这些处方中的核心中药成分,利用超高效液相色谱串联质谱对牡蛎-续断-淫羊藿组成的复方药组核心成分进行全面的鉴定分析。结果与结论:①从国家知识产权局(SIPO)网站建立到2024-04-01,检索发现381项骨质疏松治疗的授权专利,共鉴定出48首含有海洋中药的中成药处方,这些处方包含183味中药,其中13种海洋中药用药频次共574次,单首专利组方中用药味数2-41种不等;②牡蛎是最常用的海洋中药,续断、淫羊藿、地黄、杜仲是最常用的非海洋中药;关联规则分析确定了牡蛎、续断和淫羊藿为核心药物群;网络药理学分析显示该核心药组治疗骨质疏松的核心靶点包括ALB、AKT1、TP53、PPARG和SRC;核心药组发挥疗效的核心成分为谷甾醇、甘草素、臭山羊碱、木犀草素、山奈酚;③GO与KEGG富集分析显示,Rap1/丝裂原活化蛋白激酶信号通路在核心药物组的骨质疏松作用机制中起着重要作用;④分子对接结果显示核心成分与核心靶点之间存在良好的相互作用;⑤超高效液相色谱串联质谱检测复方药组核心成分为木犀草素、谷甾醇、山奈酚等,与网络药理学鉴定的药物成分相符合;对复方药组成分进行定量分析得出,黄酮类化合物、萜类化合物以及生物碱这3类物质在药物成分占比中较大。

关键词：骨质疏松海洋中药数据挖掘网络药理学分子对接

小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B通过调控PI3K/Akt通路诱导胃癌细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2023年第10期39卷 1806-1813页

作者：敖嘉怡叶连宝马宇昕褚夫江周畅广东药科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系广东广州510006 广东药科大学药学院药物化学系广东广州510006 广东药科大学基础医学院/广东省生物活性药物研究重点实验室广东广州510006

目的:探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的分子机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞并加入2.5~160μmol/L梯度浓度的A2B分别干预24、48和72 h,利用CCK-8法检测细胞活力的半数抑制浓度(IC50),筛选出药物最适... 详细信息

目的:探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的分子机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞并加入2.5~160μmol/L梯度浓度的A2B分别干预24、48和72 h,利用CCK-8法检测细胞活力的半数抑制浓度(IC50),筛选出药物最适浓度。后续实验将SGC-7901细胞随机分为对照组(正常培养组)、溶剂组(含0.08%DMSO培养液处理)、A2B 10μmol/L实验组和A2B 20μmol/L实验组,每组每项实验均重复3次。利用EdU细胞染色实验和平板集落形成实验检测各组细胞增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1染色法)检测各组细胞线粒体膜电位变化;Western blot检测各组细胞中表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞间充质-表皮转化因子(c-Met)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、cleaved caspase-3、蛋白激酶B(PKB/Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达情况。结果:(1)A2B作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48和72 h的IC50值分别为26.85、19.58和12.24μmol/L;(2)20μmol/L A2B能够同时下调EGFR、HER2和c-Met蛋白水平(P<0.01);(3)10和20μmol/L A2B作用于SGC-7901细胞后,EdU+细胞数和集落数均显著减少(P<0.01);(4)经A2B处理后SGC-7901细胞凋亡率增加(P<0.05),JC-1绿色荧光比例增加(P<0.01),同时Bax/Bcl-2比值和cleaved caspase-3蛋白表达水平上调(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平下调(P<0.05);(5)A2B还下调了SGC-7901细胞中p-Akt/Akt比值(P<0.05)。结论:A2B能够靶向作用于EGFR、HER2和c-Met,并通过抑制PI3K/Akt信号通路激活,诱导人胃癌SGC-7901细胞发生凋亡。

关键词：酪氨酸激酶抑制剂胃癌表皮生长因子受体人表皮生长因子受体2 细胞间充质-表皮转化因子

D-serine对阿尔茨海默病模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化的影响

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神经解剖学杂志 2019年第4期35卷 418-424页

作者：刘鸿庆贾会涂幸古梓婷田素民刘靖李国营马宇昕广东药科大学生命科学与生物制药学院人体解剖与组织胚胎学系

目的:探讨D-丝氨酸(D-serine)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:42只SPF级昆明小鼠随机分为6组:Control组、Saline组、Aβ组、Aβ+D-serine组、Aβ+DAAO组、Aβ+BE组;每组7只动物。AD模型组小鼠双侧海马... 详细信息

目的:探讨D-丝氨酸(D-serine)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:42只SPF级昆明小鼠随机分为6组:Control组、Saline组、Aβ组、Aβ+D-serine组、Aβ+DAAO组、Aβ+BE组;每组7只动物。AD模型组小鼠双侧海马CA1区微量注射Aβ1-42造模,之后连续10 d分别腹腔注射生理盐水,D-serine(30 mg/kg),D-氨基酸氧化酶(DAAO)(30 mg/kg),苯甲酸钠(BE)(30 mg/kg)。采用免疫组织化学以及Western Blot方法检测各组小鼠海马区IL-1β、p-MAPT(S404)、p-GSK3β以及DCX表达的具体变化。结果:与Control组相比,Aβ组小鼠海马区IL-1β以及p-MAPT(S404)蛋白表达明显增多(P<0.01),而p-GSK3β以及DCX蛋白表达明显减少(P<0.01);而与Aβ组相比,Aβ+D-serine组IL-1β以及p-MAPT(S404)蛋白表达明显减少(P<0.01);p-GSK3β以及DCX蛋白表达明显增多(P<0.01)。结论:D-serine可以改善Aβ1-42诱导的AD模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化以及神经损伤。

关键词：淀粉样蛋白 D-serine Tau蛋白海马过度磷酸化小鼠

紫云英苷诱导自噬减轻APP/PS1转基因小鼠皮质内神经元损伤及老年斑沉积

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中山大学学报（医学科学版） 2022年第2期43卷 238-246页

作者：杨翠珠张润恒王姝涵蒋裕芸刘靖李国营马宇昕广东药科大学生命科学与生物制药学院人体解剖与组织胚胎学系广东广州510006

【目的】探讨紫云英苷(AST)对APP/PS1转基因小鼠脑皮质神经元及Aβ斑块的影响。【方法】将24只8月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为APP/PS1组、10 mg/kg AST(APP/PS1+AST 10)组、20 mg/kg AST(APP/PS1+AST 20)组、40 mg/kg AST(APP/PS1+AST 40)组,每组各6只。6只同月龄C57BL/6雄性小鼠作为对照组(WT组)。AST药物连续腹腔注射一个月后,采用免疫荧光染色法观察小鼠脑皮质内Aβ斑块沉积情况,尼氏染色法观察皮质内神经元数量及形态变化,免疫荧光多重染色法观察小鼠脑皮质内LC3B、p62分别与NeuN共表达情况。Western blot法检测皮质中NeuN、LC3B及p62蛋白表达情况。【结果】免疫荧光染色法表明,20、40 mg/kg AST均可减少APP/PS1转基因小鼠脑皮质内Aβ斑块沉积(P<0.0001;P<0.0001)。Western blot结果表明,20、40 mg/kg AST均可增加APP/PS1转基因小鼠脑皮质内NeuN蛋白表达量(P=0.0121;P<0.0001)。免疫荧光多重染色结果揭示APP/PS1转基因小鼠脑皮质内LC3B、p62与NeuN均存在共表达现象。Western blot结果表明,AST增加APP/PS1转基因小鼠脑皮质内LC3B表达量(P=0.007,P<0.0001),减少p62表达量(P<0.0001,P<0.0001)。【结论】AST通过激活自噬减轻APP/PS1转基因小鼠脑皮质内神经元损伤及Aβ斑块沉积。

关键词：紫云英苷 APP/PS1转基因小鼠自噬神经元损伤 Aβ斑块沉积

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苦参总黄酮改善非酒精性脂肪肝的作用机制及斑马鱼实验验证

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2969-2978页

作者：古玉凤邓丙英李倪仁曾译萱鲁思凡朱晨陈磊刘怡南方医科大学中医药学院广东省广州市510510 广州中医药大学第二附属医院药学部广东省广州市510120 广东药科大学中药学院广东省广州市510006 广东省中药制剂重点实验室广东省广州市510515 广东省中西医结合防治情志病基础研究卓越中心广东省广州市510515

背景:苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用,其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的:利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:构建非... 详细信息

背景:苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用,其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的:利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:构建非酒精性脂肪肝斑马鱼模型,观察苦参总黄酮治疗后斑马鱼肝脏脂质累积情况、病理形态改变,以及脂质累积、炎症基因的表达变化。通过TCMSP、Swiss Target Prediction、Bat-man数据库获取苦参总黄酮活性成分与非酒精性脂肪肝相关靶点;利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析,GO功能富集和KEGG通路富集分析。基于GSE33814数据集,筛选出“苦参总黄酮-非酒精性脂肪肝”交集靶点的差异表达基因并运用R4.3.2软件进行相关性分析、受试者操作特征曲线分析,通过验证集GSE89632验证核心基因;RT-qPCR和Western blot实验验证核心通路相关基因和蛋白表达。结果与结论:①苦参总黄酮能够改善非酒精性脂肪肝斑马鱼肝脏脂质累积,显著抑制斑马鱼脂质和转氨酶水平的升高(P<0.05);调节炎症和脂代谢相关基因的表达;②网络药理学中获得168个共同靶点,Cytoscape拓扑分析综合筛选出排名前10的核心基因分别为HSP90AA1、STAT3、PIK3R1、MAPK1、AKT1、RXRA、PIK3CA、EGFR、JAK2、ESR1;GO和KEGG分析通路主要集中在胰岛素抵抗、脂质与动脉粥样硬化方面;生物信息分析共获得59个“苦参总黄酮-非酒精性脂肪肝”差异表达基因,受试者操作特征曲线分析及验证集验证得到6个核心靶点在健康人与非酒精性脂肪肝患者间有显著差异(P<0.01);③RT-qPCR和Western blot实验结果表明苦参总黄酮能够抑制非酒精性脂肪肝斑马鱼JAK2/STAT3信号通路的激活。以上结果表明,苦参总黄酮通过调节JAK2/STAT3信号通路减轻炎性反应,抑制脂质累积从而改善非酒精性脂肪肝。

关键词：苦参总黄酮非酒精性脂肪肝斑马鱼网络药理学生物信息学 JAK2 STAT3

松针提取物α-蒎烯对肝癌HepG2细胞miR-221及其下游靶基因表达的影响

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中国中药杂志 2016年第21期41卷 3996-3999页

作者：杨杰波李明谢菁菁杨梦蝶卢昕烁王芳陈伟强广东药科大学基础医学院广东广州510006

为探讨松针提取物α-蒎烯的抗肝癌作用及机制,该实验首先使用流式细胞技术检测α-蒎烯对HepG2细胞周期的影响,然后选取与G2/M期调控相关的miR-221,采用荧光定量PCR技术检测α-蒎烯干预对其表达的影响,同时通过Target Scan等在线生物信... 详细信息

为探讨松针提取物α-蒎烯的抗肝癌作用及机制,该实验首先使用流式细胞技术检测α-蒎烯对HepG2细胞周期的影响,然后选取与G2/M期调控相关的miR-221,采用荧光定量PCR技术检测α-蒎烯干预对其表达的影响,同时通过Target Scan等在线生物信息学软件分析miR-221的靶基因,最后对相关靶基因的表达用定量PCR进行检测。结果显示,α-蒎烯呈剂量依赖性抑制HepG2细胞增殖,可阻滞细胞于G2/M期(P<0.05),显著下调HepG2细胞内miR-221的表达(P<0.05),生物信息学分析显示CDKN1B/P27和CDKN1C/P57可能是miR-221的下游靶基因,荧光定量PCR显示α-蒎烯处理后二者的表达显著上调(P<0.001,P<0.05)。上述结果表明,α-蒎烯可能通过阻滞细胞周期于G2/M期从而发挥抗肝癌作用,其对G2/M期的调控可能与下调miR-221表达和上调其靶基因CDKN1B/P27和CDKN1C/P57的表达有关。

关键词： α-蒎烯 G2/M期 miR-221

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脑卒中中西医结合防治指南(2023版)

中国全科医学 2025年第5期28卷 521-533页

作者：倪小佳林浩罗旭飞邝卓然刘云兰郭建文陈耀龙蔡业峰脑卒中中西医结合防治指南工作组广东省中医院、广东省中医药科学院、广州中医药大学第二临床医学院广东省广州市510120 广东省中医急症研究重点实验室广东省广州市510120 省部共建中医湿证国家重点实验室广东省广州市510120 兰州大学基础医学院循证医学中心甘肃省兰州市730000 兰州大学GRADE中心甘肃省兰州市730000 世界卫生组织指南实施与知识转化合作中心甘肃省兰州市730000 兰州大学公共卫生学院甘肃省兰州市730000 不详

近年来我国脑卒中疾病负担仍持续增长,同时目前中西医结合治疗脑卒中领域涌现出许多新的临床证据。为更好地指导中西医结合防治脑卒中的临床实践,本工作组在《中西医结合脑卒中循证实践指南(2019)》的基础上,开展指南更新必要性评估与... 详细信息

近年来我国脑卒中疾病负担仍持续增长,同时目前中西医结合治疗脑卒中领域涌现出许多新的临床证据。为更好地指导中西医结合防治脑卒中的临床实践,本工作组在《中西医结合脑卒中循证实践指南(2019)》的基础上,开展指南更新必要性评估与临床问题遴选,确定了需要更新的12个临床问题,并以《脑卒中中西医结合防治指南》在中华中医药学会申请立项。参考最新的国内外临床实践指南,基于研究证据的系统检索与客观评价,结合我国中西医临床专家的经验,经过工作组的充分讨论及广泛征求意见,最终形成18条推荐意见,以期为各级医疗机构的医务工作者提供科学、具体的指导,促进中西医结合治疗脑卒中的规范应用,从而降低脑卒中的死亡率、复发率、残疾率。

关键词：脑卒中中西医结合循证实践指南

石菖蒲挥发油对炎症痛大鼠基底外侧杏仁核中胶质纤维酸性蛋白和即刻早期基因表达的影响

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解剖学报 2021年第2期52卷 189-195页

作者：李诗琪杨翠珠刘鸿庆张春梅田素民刘靖马宇昕李国营广东药科大学生命科学与生物制药学院人体解剖学与组织学胚胎学系广州510006

目的通过注射完全弗氏佐剂(CFA)构建炎症痛大鼠模型,探讨石菖蒲挥发油对炎症痛大鼠基底外侧杏仁核(BLA)中神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和即刻早期基因(c-fos)表达的影响。方法成年SD雄性大鼠36只,随机分为6组:对照(control)组、假手术(sh... 详细信息

目的通过注射完全弗氏佐剂(CFA)构建炎症痛大鼠模型,探讨石菖蒲挥发油对炎症痛大鼠基底外侧杏仁核(BLA)中神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和即刻早期基因(c-fos)表达的影响。方法成年SD雄性大鼠36只,随机分为6组:对照(control)组、假手术(sham)组、CFA组、CFA+5 g/(kg·d)石菖蒲挥发油组、CFA+10 g/(kg·d)石菖蒲挥发油组、CFA+20 g/(kg·d)石菖蒲挥发油组,每组各6只动物,于灌胃21 d后取材。采用免疫荧光及Western blotting技术检测各组大鼠BLA中GFAP和c-fos表达量的变化。结果免疫荧光及Western blotting结果均显示,与control组相比,CFA组大鼠BLA中GFAP及c-fos阳性表达均显著增多(P<0.01);与CFA组相比,石菖蒲挥发油处理组GFAP和c-fos阳性表达均降低,且表达量呈剂量依赖性递减(P<0.01);其中,高剂量组GFAP和c-fos阳性表达的下降趋势较低剂量组相比更为显著(P<0.01)。结论石菖蒲挥发油可减少CFA诱导的炎症性疼痛大鼠BLA中星形胶质细胞表达,并进一步抑制c-fos的表达。

关键词：石菖蒲挥发油基底外侧杏仁核炎症痛胶质纤维酸性蛋白即刻早期基因免疫荧光染色免疫印迹法大鼠