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豚鼠耳蜗外毛细胞Prestin互作蛋白的识别与分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第1期53卷 34-38页

作者：罗璇王军义张菲玲夏云广东药科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广州510310

目的识别可与耳蜗外毛细胞Prestin互作的蛋白并分析其生物学功能，为探究Prestin蛋白的调控及作用机制提供线索。方法以豚鼠耳蜗为实验对象进行免疫共沉淀联合质谱技术鉴定可与Prestin相互作用的蛋白谱，使用生物信息学方法构建Prestin... 详细信息

目的识别可与耳蜗外毛细胞Prestin互作的蛋白并分析其生物学功能，为探究Prestin蛋白的调控及作用机制提供线索。方法以豚鼠耳蜗为实验对象进行免疫共沉淀联合质谱技术鉴定可与Prestin相互作用的蛋白谱，使用生物信息学方法构建Prestin蛋白互作网络，通过交叉比对一级互作质谱蛋白谱与蛋白互作网络，确定豚鼠耳蜗外毛细胞Prestin的互作蛋白并进行功能注释。结果免疫共沉淀联合质谱分析结果显示可与Prestin蛋白相互作用的可信蛋白有116种，通过构建Prestin互作蛋白网络并与质谱结果进行匹配，经亚细胞定位后确定与Prestin具有直接互作关系的蛋白有8种：EEF2、HSP90AB1、FN1、FLNA、EEF1A1、HSP90B1、ATP5A1、ERH，其主要参与Prestin蛋白的合成转运、跨膜折叠与定位、维持蛋白的结构稳定、信号转导等方面。结论EEF2、HSP90AB1、FN1、FLNA、EEF1A1、HSP90B1、ATP5A1、ERH通过参与Prestin蛋白的合成转运、跨膜折叠与定位、信号转导等生物学过程构建Prestin蛋白在外毛细胞特殊的跨膜结构，为实现耳蜗外毛细胞的感音放大功能提供分子基础。

关键词： Prestin 毛细胞,听觉,外蛋白互作计算生物学豚鼠

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绿地暴露与中国人群健康关联的研究进展

环境与职业医学 2022年第1期39卷 30-35页

作者：杨博逸张一丹黄文忠董光辉中山大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广东广州510080

绿地暴露可给人类健康带来益处,该方面研究在欧美发达国家已开展较多,并已有综述。我国近年来亦开展了一些研究,但尚未见相关综述对此证据进行总结和梳理。本文对中国人群绿地健康效应的流行病学研究进行了综述,以期提供该方面较为全面... 详细信息

绿地暴露可给人类健康带来益处,该方面研究在欧美发达国家已开展较多,并已有综述。我国近年来亦开展了一些研究,但尚未见相关综述对此证据进行总结和梳理。本文对中国人群绿地健康效应的流行病学研究进行了综述,以期提供该方面较为全面的证据。综述结果显示:我国在绿地对健康的影响方面已开展了一定数量的研究。研究证据总体支持绿地暴露可降低心血管疾病、精神心理疾病和不良出生结局的患病风险以及降低死亡率。但是,目前的研究以横断面研究和研究短期效应的随机对照试验研究为主,前瞻性队列研究较少。此外,在绿地暴露评估方面,绝大多数研究采用归一化植被指数(NDVI)等进行评估,难以辨别不同绿地的种类和结构,且不能实现绿地暴露的动态评估。未来需要进一步开展能够精准评估绿地暴露的前瞻性队列研究来对已有证据进行验证和拓展。

关键词：绿地中国人群健康效应

氧化损伤对耳蜗毛细胞Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平的影响

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环境与健康杂志 2017年第4期34卷 353-355,F0003页

作者：黎静张菲玲夏云杨翠婵广东药科大学公共卫生学院预防医学系广州510310 广东药科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系

为研究氧化应激损伤耳蜗毛细胞Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达水平,以探讨氧化应激诱发毛细胞凋亡的机制,将处于对数生长期的耳蜗毛细胞(HEI-OC1细胞)分别暴露于含终浓度为0(对照)、50、100、200μmol/L过氧化氢的DMEM高糖培养基24 h,... 详细信息

为研究氧化应激损伤耳蜗毛细胞Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达水平,以探讨氧化应激诱发毛细胞凋亡的机制,将处于对数生长期的耳蜗毛细胞(HEI-OC1细胞)分别暴露于含终浓度为0(对照)、50、100、200μmol/L过氧化氢的DMEM高糖培养基24 h,以构建毛细胞氧化应激损伤模型。检测毛细胞内丙二醛(MDA)含量及Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达水平。结果显示,与对照组比较,各浓度过氧化氢染毒组HEI-OC1细胞内MDA的含量均增高,差异有统计学意义(P<0.01);且随着过氧化氢染毒浓度的升高,HEI-OC1细胞内MDA的含量呈上升趋势。与对照组比较,各浓度过氧化氢染毒组HEI-OC1细胞内Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05);且随着过氧化氢染毒浓度的升高,HEI-OC1细胞内Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达水平均呈先上升后下降的趋势。提示氧化应激损伤可诱导耳蜗毛细胞的凋亡,但凋亡水平随氧化应激损伤程度的加重而呈先升高后下降的趋势。

关键词：氧化应激毛细胞细胞凋亡

脐带血元素水平对早产和足月婴幼儿神经行为发育影响的队列研究

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环境与职业医学 2022年第7期39卷 723-729页

作者：王兆坤张文楼曾晓雯楚楚李青青崔鑫鑫吴奇桢董光辉黄金波孔敏莉邓芙蓉北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系北京100191 中山大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广东广州510080 茂名市妇幼保健院妇产科广东茂名525000

[背景]在胎儿发育进程中,必需和非必需元素对中枢神经系统发育有重要影响。早产儿由于大脑发育的不完善,对元素暴露更加敏感,是神经行为发育异常的高危人群。然而,宫内元素暴露水平对胎儿出生后神经行为发育的影响在足月儿和早产儿中是... 详细信息

[背景]在胎儿发育进程中,必需和非必需元素对中枢神经系统发育有重要影响。早产儿由于大脑发育的不完善,对元素暴露更加敏感,是神经行为发育异常的高危人群。然而,宫内元素暴露水平对胎儿出生后神经行为发育的影响在足月儿和早产儿中是否有差异尚不明确。[目的]评估脐带血元素水平与6~24(校正)月龄婴幼儿神经行为发育的纵向关联,并比较其在早产儿和足月儿中的差异。[方法]依托2015年10月至2018年12月在广东省茂名市开展的茂名市出生队列研究(MBCS),采用前瞻性研究设计,测定197例早产儿和297例足月儿脐带血中20种元素,包括11种必需微量元素:钒(V)、铬(Cr)、锰(Mn)、钴(Co)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、硒(Se)、锶(Sr)、锡(Sn)、铁(Fe),以及9种非必需微量元素:铝(Al)、砷(As)、铊(Tl)、铅(Pb)、铀(U)、铈(Ce)、锑(Sb)、镉(Cd)、钇(Y)。分别在胎儿出生后6、12、24月龄时采用年龄与发育进程问卷第三版(ASQ-3)评估婴幼儿神经行为发育状况。采用广义估计方程(GEE)模型评估足月儿和早产儿脐带血元素与ASQ-3问卷各能区发育异常的纵向关联。[结果]脐带血中10种元素(Mn、Cu、Zn、Se、Sr、Fe、Sb、Tl、Pb和As)的检出率大于80%。GEE结果显示,校正协变量后,在早产儿中,脐带血元素自然对数浓度每增加1个四分位距(IQR),As与沟通和解决问题能区发育异常风险的调整后比值比(OR)及其95%置信区间(CI)分别为1.36(1.03~1.80)和1.55(1.10~2.20);Sb与精细动作和解决问题能区发育异常风险的调整后OR及其95%CI分别为1.44(1.00~2.07)和1.76(1.09~2.84);Se与沟通能区发育异常风险的调整后OR及其95%CI为1.37(1.09~1.74)。未观察到脐带血元素水平与足月儿神经行为发育异常的关联有统计学意义。按照性别进行分层分析,结果显示脐带血元素(As、Se、Sb)水平与婴幼儿神经行为发育异常风险的关联仅在女性早产儿中有统计学意义。[结论]孕期As、Se和Sb暴露可能增加6~24月龄早产儿神经行为发育异常风险,且女性早产儿更易受到影响。

关键词：脐带血微量元素早产婴幼儿神经行为发育

体外培养耳蜗毛细胞氧化应激损伤的微小RNA调控网络分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2016年第10期51卷 751-755页

作者：王军义夏源杨翠婵王致广东药科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广州510310 广州市第十二人民医院职业卫生检测中心 510620

目的通过体外培养耳蜗毛细胞氧化应激损伤的差异性微小RNA（microRNA,miRNA）构建的基因调控网络,分析耳蜗毛细胞氧化应激损伤的重要基因及功能,探讨以氧化损伤为基础的多种感音性聋的分子机制.方法以200 μmol/L叔丁基双氧气水（tert... 详细信息

目的通过体外培养耳蜗毛细胞氧化应激损伤的差异性微小RNA（microRNA,miRNA）构建的基因调控网络,分析耳蜗毛细胞氧化应激损伤的重要基因及功能,探讨以氧化损伤为基础的多种感音性聋的分子机制.方法以200 μmol/L叔丁基双氧气水（tert butyl hydrogen peroxide,t-BHP）染毒培养的小鼠HEI-OC1细胞系构建氧化应激损伤耳蜗毛细胞模型,高通量sRNA测序筛选差异性miRNA,以6个差异性表达最显著的miRNA进行调控网络构建,分析miRNA调控网络互作关系里面的重要基因,并通过Gene Cards数据库对重要基因进行功能注释.结果高通量sRNA测序发现氧化应激损伤毛细胞出现24个差异性miRNA,其中mir-1934（logFC=2.367 947,P=2.35×10^-7）、mir-411（logFC=2.093 687,P=3.13×10^-6）、mir-717（logFC=1.927 67,P=3.24×10^-5）、mir-503 （logFC=-2.021 45,P =3.07×10^-6）、mir-467e（logFC=-1.953 28,P =0.000 137）、mir-699o（logFC=-1.950 06,P=0.000517）差异最显著;构建的miRNA调控网络中相连基因个数超过50节点的重要基因共有11个：Akt1、Src、Ctnnb1、Creb1、Ccnd1、Egfr、Gsk3b、Pten、Cdh1、Fras1、Ccnd2,其主要功能体现在参与多种细胞内信号传导通路调控细胞的凋亡和增殖.结论氧化应激损伤毛细胞有多种信号传导通路（PI3 K-AKT/PKB通路、AKT/PKB通路、Wnt通路、ERK通路、Ras通路）参与调控细胞增殖和凋亡过程,这些信号通路互相交联形成网络调控,其中PI3K-AKT/PKB信号通路最为重要.

关键词：氧化性应激毛细胞,听觉高通量核苷酸测序 MicroRNA调控网络

铅锰联合暴露致斑马鱼发育神经毒性及JNK表达变化

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环境与职业医学 2023年第5期40卷 583-588页

作者：夏源王春瑜李姿毅周芹朱嘉伟孟晓静黄伟婵王军义陈青松广东药科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广东广州510310 南方医科大学公共卫生学院职业卫生与职业医学系广东广州510515 广东省职业病防治院职业卫生评价所广东广州510300

[背景]铅和锰是环境中广泛存在的重金属污染物,可通过食物链在人体内蓄积,产生神经毒性,并促进神经退行性疾病的发生。特别是在儿童早期,发育中的血脑屏障和神经系统对环境污染物高度敏感。以往的研究大多集中于铅和锰等重金属的单一毒... 详细信息

[背景]铅和锰是环境中广泛存在的重金属污染物,可通过食物链在人体内蓄积,产生神经毒性,并促进神经退行性疾病的发生。特别是在儿童早期,发育中的血脑屏障和神经系统对环境污染物高度敏感。以往的研究大多集中于铅和锰等重金属的单一毒性效应,而联合毒性效应的研究仍然匮乏,涉及的机制也尚未明确。c-Jun氨基末端激酶(JNK)与神经元的发育和再生有关,一些研究发现JNK参与铅和锰所致的神经毒性,但其在铅锰联合毒性中的作用未知。[目的]初步探讨环境低剂量重金属铅锰联合暴露所致斑马鱼神经发育毒性的机制和JNK的表达变化。[方法]将受精后(hour post fertilization,hpf)2 h斑马鱼胚胎分为对照组、铅暴露组(0.1 mg·L^(−1)醋酸铅)、锰暴露组(0.3 mg·L^(−1)氯化锰)、铅锰联合暴露组(0.1 mg·L^(−1)醋酸铅+0.3 mg·L^(−1)氯化锰),暴露7 d。观察斑马鱼自主抽动、死亡率和运动行为,检测斑马鱼体内JNK mRNA表达变化。[结果]实验结果显示环境剂量重金属铅锰单独及联合暴露后斑马鱼死亡率和自主抽动没有显著变化(P>0.05)。运动分析结果显示,与对照组比较,锰暴露组斑马鱼运动次数和运动距离轻微升高,差异有统计学意义(P环境低剂量铅锰联合暴露对斑马鱼的发育神经毒性具有协同作用,JNK可能参与铅锰联合暴露致斑马鱼神经发育毒性。

关键词：铅锰神经发育联合毒性斑马鱼 c-Jun氨基末端激酶

硒镁联合作用对SiO2致肺泡巨噬细胞NO、NOS水平变化的影响

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现代预防医学 2008年第2期35卷 235-237页

作者：谈伟君李伯灵何整陈国银广东药学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系东南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系

[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),... 详细信息

[目的]观察亚硒酸钠(Na2SeO3)与硫酸镁(MgSO4)单独及联合作用对二氧化硅(SiO2)致肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平变化的影响,寻找二者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得肺泡巨噬细胞(1×109个/L),同时加入SiO2及不同浓度的MgSO4溶液、Na2SeO3溶液、Na2SeO3+MgSO4溶液,37℃,5%CO2条件下培养18h后,检测NO含量与NOS活性。[结果]与SiO2组比较,Na2SeO3与MgSO4单独及联合使用在体外均可以降低巨噬细胞NO水平及NOS活性(P﹤0.05),Na2SeO3与MgSO4的交互作用具有统计学意义,且以1.0μmol/LNa2SeO3与1.0μmol/LMgSO4联合作用效果最好。[结论]Na2SeO3与MgSO4二者联合应用在体外可明显降低SiO2粉尘所致AM的NO水平和NOS的活性。

关键词：二氧化硅硫酸镁亚硒酸钠大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮一氧化氮合酶

硒和砷对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的作用

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卫生研究 2008年第6期37卷 645-648页

作者：来瑞平王艺陪李晓暖余日安杨成峰鲁文清华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系教育部环境与健康重点实验室武汉430030 广东药学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系

目的研究硒和砷单独及联合作用对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的影响。方法采用不同浓度的硒(2.5、5.0和10.0μmol/L亚硒酸钠)和砷(1.56、3.13、6.25、12.5和25.0μmol/L亚砷酸)为受试物单独或联合处理HepG2细胞。荧光法测定... 详细信息

目的研究硒和砷单独及联合作用对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的影响。方法采用不同浓度的硒(2.5、5.0和10.0μmol/L亚硒酸钠)和砷(1.56、3.13、6.25、12.5和25.0μmol/L亚砷酸)为受试物单独或联合处理HepG2细胞。荧光法测定丙二醛(MDA)作为氧化应激的指标,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)测定8-羟基鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的指标,Western Blot检测hOGG1表达作为DNA氧化损伤修复的指标。结果在硒和砷单独作用的条件下,可观察到:(1)5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均引起HepG2细胞MDA含量增加、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降(P0.05)。在硒和砷联合作用的条件下,可观察到:(1)2.5μmol/L的亚硒酸钠和6.25μmol/L的亚砷酸同时染毒使MDA含量和8-OHdG的生成均较相应砷剂量组下降(P0.05)。结论5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均可引起HepG2细胞氧化应激增强、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降;一定剂量的硒(2.5μmol/L的亚硒酸钠)对砷诱导的HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤具有抑制作用,但对砷所致的DNA氧化损伤修复不产生明显影响。

关键词：硒丙二醛 8-羟基鸟苷 hOGG1 基因表达氧化损伤砷中毒

生命早期1000天绿地暴露与幼儿睡眠关系队列研究

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中华疾病控制杂志 2022年第2期26卷 200-205页

作者：吴输谢路勤陈宇靖吴生池静进董光辉林力孜蔡莉中山大学公共卫生学院妇幼卫生学系广州510080 中山大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系广州510080

目的探究生命早期1 000 d绿地暴露与2岁幼儿睡眠之间的关联性。方法采用前瞻性队列研究设计,抽取在广州市某区妇幼保健院产检的孕妇,在妊娠20~28周时收集有关的基线信息,并且在生命早期1 000 d,从基于母亲居住地的遥感卫星数据中提取具... 详细信息

目的探究生命早期1 000 d绿地暴露与2岁幼儿睡眠之间的关联性。方法采用前瞻性队列研究设计,抽取在广州市某区妇幼保健院产检的孕妇,在妊娠20~28周时收集有关的基线信息,并且在生命早期1 000 d,从基于母亲居住地的遥感卫星数据中提取具有不同半径区域(250 m和500 m)的归一化植被指数(normalized difference vegetation index, NDVI)评估生命早期的绿地暴露水平。在幼儿2岁时随访,使用简明婴幼儿睡眠问卷评估其过去1个月的睡眠情况。采用Logistic回归分析模型和多重线性回归模型分别对绿地暴露水平和2岁幼儿睡眠质量、睡眠时间进行关联性分析。结果本研究共纳入410对母子,2岁幼儿每日平均睡眠时间为12.27 h;发生任一睡眠质量问题的比例为39.27%,其中夜醒最高(16.83%),其次是入睡困难(15.61%)和睡眠不规律(13.41%)。Logistic回归分析模型结果显示,未发现生命早期1 000 d的绿地暴露水平与2岁幼儿发生入睡困难、夜醒、睡眠不规律以及以上任一睡眠质量问题有统计学关联(OR=0.77, 95%CI:0.39~1.54,P=0.465;OR=1.30, 95%CI:0.66~2.55,P=0.453;OR=0.87, 95%CI=0.40~1.88,P=0.714;OR=1.21, 95%CI=0.72~2.03,P=0.464)。多重线性回归分析结果显示,未发现生命早期的绿地暴露与2岁幼儿的夜间、日间以及总睡眠时间具有统计学关联(β±s;=-0.04±0.11,P=0.715;β±s;=-0.01±0.08,P=0.957;β±s;=-0.04±0.12,P=0.726)。结论未能发现生命早期1 000 d的绿地暴露和2岁幼儿睡眠质量问题以及睡眠时间有关。

关键词：幼儿睡眠绿地暴露生命早期