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动物肠类器官应用进展

畜牧兽医学报 2024年

作者：黄德如常宜睿丁梓妍张雅珊陈奡蕾华南农业大学兽医学院广东省宠物工程技术研究中心

近年来，多种家畜和伴侣动物的肠类器官培养方法已被建立。肠类器官具有肠道上皮的结构和功能，是介于稳定细胞系和动物模型之间的一种体外模型。目前，动物肠类器官可用于研究肠道疾病发病机制与治疗方法，还能用于探究宿主-病原体的... 详细信息

近年来，多种家畜和伴侣动物的肠类器官培养方法已被建立。肠类器官具有肠道上皮的结构和功能，是介于稳定细胞系和动物模型之间的一种体外模型。目前，动物肠类器官可用于研究肠道疾病发病机制与治疗方法，还能用于探究宿主-病原体的相互作用。在肠道营养学与肠道免疫学的研究中，肠类器官可用于提高饲料利用率、寻找适合添加剂，提高动物性能。此外，动物肠类器官在人转化医学与再生医学领域具有巨大发展潜力。本文综述了近5年来动物肠类器官的主要应用，并对其未来的研究方向进行了展望。

关键词：动物肠类器官应用

基孔肯雅病毒IgG抗体ELISA快检试剂盒的研制与应用

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中国热带医学 2024年

作者：徐晓立胡潇予李春缘曹孟涛刘纪茹刘炅任瑞文广东省虫媒病毒性传染疾病应急技术研究中心华南农业大学测试中心南部战区疾病预防控制中心

目的研制检测基孔肯雅热IgG抗体的ELISA快检试剂盒，为流行病学调查及实验室诊断提供新的工具。方法以基孔肯雅病毒特异性原核表达抗原pMal-chik23为诊断抗原，以HRP标记抗IgG二抗为显色抗体，正交实验对诊断抗原、待检血清、二抗工作... 详细信息

目的研制检测基孔肯雅热IgG抗体的ELISA快检试剂盒，为流行病学调查及实验室诊断提供新的工具。方法以基孔肯雅病毒特异性原核表达抗原pMal-chik23为诊断抗原，以HRP标记抗IgG二抗为显色抗体，正交实验对诊断抗原、待检血清、二抗工作浓度进行优化，并对包被、封闭、孵育及显色等反应条件进行系统优化，在临床大样品评估的基础上，确定ELISA检测的cut-off值。在此基础上，对ELISA反应的特异性、敏感性及稳定性进行评估，研制组装检测基孔肯雅热IgG抗体的ELISA快检试剂盒。结果经系统优化，研制、组装了检测基孔肯雅热IgG抗体的间接ELISA快检试剂盒，其最佳反应条件为：1.0μg/mL包被抗原经碳酸盐缓冲液4℃包被24h，HBV封闭液37℃封闭4h，待检样品1∶101稀释后，100μL/孔，37℃反应40min，PBST洗涤4次，HRP标记兔抗人IgG1∶20000、HRP标记羊抗鼠IgG1∶10000稀释后，100μL/孔，37℃反应30min，PBST洗涤5次，TMB显色液100μL，37℃显色10min，50μL20%H2SO4终止反应，双波长450/630nm测定A450值。试剂盒性能评估结果表明，所研制试剂盒与所试阳性样品检测A450值>0.43，阴性样品检测A450值10，与辛德毕斯、盖塔、罗斯河、登革等9种其它相近虫媒病毒均无交叉反应，并具较高稳定性，板内变异系数(CV)介于0.76%～2.12%之间，板间变异系数介于0.64%～1.85%之间，批间变异系数介于0.83%～2.31%之间，均小于3%，4℃保存1年性能无明显下降。结论研制了检测基孔肯雅热IgG抗体的间接ELISA快检试剂盒，具备良好的敏感性、特异性与稳定性。

关键词：基孔肯雅热快速检测间接ELISA

DNA碱基编辑技术的研究进展及在猪基因修饰中的应用

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生物技术通报 2024年第1期40卷 127-144页

作者：杨帅朋屈子啸朱向星唐冬生佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东省动物分子设计与精准育种重点实验室佛山528225 佛山科学技术学院医学院广东省基因编辑工程技术研究中心佛山528225

碱基编辑技术起源于CRISPR/Cas系统,是目前最新的基因定点修饰技术。根据碱基编辑器的功能特点,可将碱基编辑器分为胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editor,CBE)、腺嘌呤碱基编辑器(adenine base editor,ABE)、糖基化酶碱基编辑器(glyco... 详细信息

碱基编辑技术起源于CRISPR/Cas系统,是目前最新的基因定点修饰技术。根据碱基编辑器的功能特点,可将碱基编辑器分为胞嘧啶碱基编辑器(cytosine base editor,CBE)、腺嘌呤碱基编辑器(adenine base editor,ABE)、糖基化酶碱基编辑器(glycosylase base editor,GBE)、腺嘌呤碱基颠换编辑器(adenine transversion base editor,AYBE)、双碱基编辑器(dual base editor,DBE)和引导编辑器(prime editor,PE)。自碱基编辑系统诞生以来,已经广泛运用于动植物的研究中,并且已经证明了它在动植物遗传改良和疾病治疗中具有巨大应用价值。猪作为一种重要的农业经济动物和优良的动物疾病模型,对其进行遗传改良则变得十分重要。碱基编辑技术因其操作便利、高效、副产物少以及性价比高等特点,被迅速应用于动植物的遗传改良,并为人类的基因治疗提供技术支持。本文着重介绍了碱基编辑技术的开发、优化、应用特点、存在的问题以及对未来的展望,并总结了其在猪中的应用。以期为相关科研工作者了解碱基编辑技术提供参考。

关键词：基因编辑单碱基编辑猪遗传改良疾病模型

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黄鹂无齿鲹胚胎及胚后发育特征

水产学报 2024年第4期48卷 73-85页

作者：黄炜坪甘松永王庆杨少森黄锦雄赵艳飞邹翠云黄培卫张潇潇陈永南秦真东吴锦辉林蠡广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心广州市水产病害与水禽养殖重点实验室仲恺农业工程学院动物科技学院广东省农业技术推广中心华南农业大学海洋学院

黄鹂无齿鲹是一种兼具观赏与食用价值的名贵海水鱼类。本文通过人工催产方法，获取黄鹂无齿鲹受精卵并追踪观察，旨在对其胚胎及胚后发育特征进行观察记录。结果显示，受精卵孵化条件为盐度30.26±0.67、温度(24.72±0.32)°C、 pH值(7... 详细信息

黄鹂无齿鲹是一种兼具观赏与食用价值的名贵海水鱼类。本文通过人工催产方法，获取黄鹂无齿鲹受精卵并追踪观察，旨在对其胚胎及胚后发育特征进行观察记录。结果显示，受精卵孵化条件为盐度30.26±0.67、温度(24.72±0.32)°C、 pH值(7.46±0.12)、溶解氧(5.13±0.33) mg/L、光照强度约3 000 lx。黄鹂无齿鲹受精卵为透明浮性圆球形，平均卵径(764.29±14.74)μm；含单油球，油球平均直径(166.32±18.28)μm。胚胎发育历经受精卵期、胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期与孵化出膜期8个阶段，再进一步细分成24个时期。受精后18 h 30 min孵化出膜，进入仔鱼阶段(含前仔鱼期和后仔鱼期)。前仔鱼期为孵化后0～3 d，卵黄囊没有完全吸收；后仔鱼期为孵化后4～20 d，卵黄囊完全吸收。初孵仔鱼全长(1 520±19)μm，出膜后第6天油球储备耗尽并形成鳔。孵化后第20天，鱼体后脊索完全弯曲，各鳍和消化系统发育完善，体表大量色素沉淀且具有独立生活的能力，仔鱼进入稚鱼阶段。研究表明，黄鹂无齿鲹的发育模式符合典型硬骨鱼类的规律，发育周期较其他鲹科鱼类更短，其胚胎及胚后发育特征与卵形鲳鲹比较接近。本研究为黄鹂无齿鲹苗种培育提供了重要参考。

关键词：黄鹂无齿鲹受精卵胚胎发育胚后发育

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奶牛乳源外泌体提取方法的优化及效果评价

动物营养学报 2024年第2期36卷 1265-1276页

作者：赵莹王靖雷王萌王立斌张倩李志杰马鑫余四九潘阳阳甘肃农业大学动物医学院兰州730070 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心兰州730070

乳源外泌体在疾病治疗及载体效应等领域应用颇为广泛,但目前乳源外泌体的提取方法仍步骤繁琐,耗时长,难以推广应用。为建立省时、高效和稳定的乳源外泌体提取方法,本试验在前期已建立的差速超速离心法、凝乳酶法、乙酸法及蔗糖密度梯度... 详细信息

乳源外泌体在疾病治疗及载体效应等领域应用颇为广泛,但目前乳源外泌体的提取方法仍步骤繁琐,耗时长,难以推广应用。为建立省时、高效和稳定的乳源外泌体提取方法,本试验在前期已建立的差速超速离心法、凝乳酶法、乙酸法及蔗糖密度梯度离心法的基础上,通过增加离心速度、改变乙酸或凝乳酶用量、调整蔗糖密度梯度、减少离心步骤进行逐一优化。通过透射电子显微镜、纳米粒子跟踪分析、蛋白浓度检测、免疫印迹鉴定比较乳源外泌体形态结构、粒径大小、蛋白浓度、粒子浓度、特异性标记蛋白的差异,筛选出最优提取方法。结果显示:4种优化后提取方法均可分离获得具有典型“茶托”形状,介于30~200 nm的细胞外囊泡,但优化后的乙酸法提取乳源外泌体最多,视野密度高达80%以上,粒径大小为(151.0±47.2)nm,粒子浓度为6.2×10^(12)个/mL,均高于其他优化方法;优化后的乙酸法提取乳源外泌体的特异性标记蛋白[肿瘤易感基因101(TSG101)、热休克蛋白70(HSP70)、CD81和CD9]均表达量较高,其他3种优化方法提取到的乳源外泌体特异性标记蛋白发生不同程度降解,且提取乳源外泌体所得样品蛋白浓度均显著高于优化的乙酸法(P<0.05)。结果表明,优化后奶牛乳源外泌体乙酸提取法具有方法简单、耗时短、纯度高、特异性标记蛋白稳定等优点,该方法为外泌体需求量大的试验、医疗、工业生产等奠定一定基础。

关键词：乳源外泌体差速超速离心法乙酸凝乳酶提取鉴定

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甘露寡糖的生物学功能及在动物生产中的应用

饲料工业 2024年第18期 41-48页

作者：李敏陈冰曹俊明赵红霞广东省农业科学院动物科学研究所广东省农业科学院水产研究中心广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东海洋大学水产学院

目前，动物生产中仍面临由病毒、细菌和寄生虫引起的疾病问题，然而抗生素的频繁使用对环境造成恶劣影响，同时养殖动物耐药性逐渐增强。全面禁抗以来，寻找抗生素的替代品受到越来越多的关注，绿色无污染的抗生素替代品对畜牧业和饲料... 详细信息

目前，动物生产中仍面临由病毒、细菌和寄生虫引起的疾病问题，然而抗生素的频繁使用对环境造成恶劣影响，同时养殖动物耐药性逐渐增强。全面禁抗以来，寻找抗生素的替代品受到越来越多的关注，绿色无污染的抗生素替代品对畜牧业和饲料产业的发展至关重要。甘露寡糖（manno oligosaccharides,MOS）作为从酵母培养细胞中获取的绿色饲料添加剂，其对环境友好无污染、添加剂量小、天然无残留且稳定性强，具有调节肠道菌群环境、提高动物机体免疫力、增强动物抗氧化能力、缓解炎症反应、调节脂质代谢和促进动物生长性能的作用。增强全身和局部免疫系统、强化肠道完整性和功能以及刺激先天免疫系统都是MOS在动物体内的作用模式。然而MOS在实际生产中作用效果并不完全一致，MOS的结构、正确剂量、添加方式和持续时间以及养殖动物的种类、生长阶段和养殖条件等都是影响MOS作用效果的因素。另外，MOS与其他功能性添加剂的组合以及结合益生菌使用能发挥出更显著的效果。文章总结了MOS的理化性质、化学结构、生物学功能及其在家禽、猪、反刍、水产动物生产中的应用，为进一步促进MOS在动物生产中的应用提供理论依据。

关键词：甘露寡糖肠道菌群生物学功能动物生产生长性能

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非洲猪瘟下猪新育种规划的研究

中国畜牧杂志 2024年第1期60卷 161-167页

作者：魏趁林清张哲李加琪华南农业大学动物科学学院广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室国家生猪种业工程技术研究中心广东广州510642

在非洲猪瘟疫情背景下,由于种猪交流中止等原因,延缓了核心群优质基因传递到商品群的速度,影响商品群生产效益。然而,猪新育种模式的育种方案还需要进一步研究。本研究调研了我国杜洛克猪、长白猪和大白猪的育种目标、群体结构和育种技... 详细信息

在非洲猪瘟疫情背景下,由于种猪交流中止等原因,延缓了核心群优质基因传递到商品群的速度,影响商品群生产效益。然而,猪新育种模式的育种方案还需要进一步研究。本研究调研了我国杜洛克猪、长白猪和大白猪的育种目标、群体结构和育种技术等参数,基于基因组数据利用MoBPS软件和随机模拟的方法模拟了传统繁育体系下传统模式和新模式的育种方案,并比较了各育种方案的育种效果。结果表明:短期(3世代)和长期(10世代)育种方案中,传统模式和封闭模式下扩繁群拥有独立的大白母猪策略中,扩繁群和商品猪窝产仔数、100 kg体重日龄、100 kg体重背膘厚、饲料转化率和断配间隔的遗传进展最大,经济效益也最大。因此,在受到非洲猪瘟的影响下,封闭模式下扩繁群拥有独立的大白母猪策略可以替代传统模式进一步提高商品群的经济效益。

关键词：猪新模式基因组育种方案遗传进展

IL-33/ST2信号通路影响干细胞功能的研究进展

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农业生物技术学报 2024年第4期32卷 892-902页

作者：徐文杰华进联西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心

白细胞介素-33(interleucin 33, IL-33)是一种兼有促炎与抑炎功能的细胞因子，通过其特异性受体—肿瘤抑制因子2(suppressor of tumorigenicity 2, ST2)实现信号传导。IL-33/ST2信号通路的激活根据细胞类型的差异，调控NF-κb、TNFα、... 详细信息

白细胞介素-33(interleucin 33, IL-33)是一种兼有促炎与抑炎功能的细胞因子，通过其特异性受体—肿瘤抑制因子2(suppressor of tumorigenicity 2, ST2)实现信号传导。IL-33/ST2信号通路的激活根据细胞类型的差异，调控NF-κb、TNFα、Wnt等信号通路，进而引发炎症反应以及影响干细胞的干性与分化能力。本文综述了IL-33/ST2信号通路的基本结构与组成，并且概括与之相关的干细胞功能研究的最新进展。本文通过作用机理的阐明为干细胞治疗炎症性疾病与免疫性疾病提供新思路。

关键词： IL-33/ST2信号通路干细胞癌症干细胞细胞治疗炎症

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城市河流低水位运行生态修复机制与实践效果

水资源保护 2024年第2期40卷 16-22页

作者：陈文龙吴琼李一平珠江水利委员会珠江水利科学研究院广东广州510611 水利部珠江河口治理与保护重点实验室广东广州510611 广东省河湖生命健康工程技术研究中心广东广州510611 河海大学环境学院江苏南京210098

为厘清城市河流低水位运行的水生态修复机制,开展了垂向监测水和底泥理化指标、定量监测微生物功能基因、测定微生物活性等室内模拟试验,分析了泥-水界面环境因子及底泥溶解氧的变化特征,研究了底泥主要污染物和功能微生物的变化特征,... 详细信息

为厘清城市河流低水位运行的水生态修复机制,开展了垂向监测水和底泥理化指标、定量监测微生物功能基因、测定微生物活性等室内模拟试验,分析了泥-水界面环境因子及底泥溶解氧的变化特征,研究了底泥主要污染物和功能微生物的变化特征,揭示了低水位运行下污染底泥上层硝化和下层反硝化的协同耦合过程。结果表明:低水位运行可改变底泥的“源-汇”属性,高水位时的“源”转变成低水位的“汇”,继而实现水质的提升;伴随着污染底泥的修复,可逐步形成“底栖动物-沉水植物-挺水植物-昆虫-鸟类”的多营养级完整水生态系统;污染底泥治理是生态修复的关键,城市河流在低水位运行模式下可实现底泥自修复和生态系统构建。

关键词：城市河流低水位运行底泥污染生态修复