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补肾活血方促进BMSCs的成骨及其防治大鼠骨质疏松症的机制研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：许旻鸣楼红侃高麟超金甬方剑利浙江省宁波市中医院骨伤科

目的研究表明微核糖核酸(microRNA，MiRNA)和Kruppel样因子10(Kruppel-likefactor10，KLF10)调控骨质疏松症的进程。本研究旨在探讨补肾活血方/miR-26b/KLF10信号调控骨髓间充质干细(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells，BMSCs)胞分化的机制。方法流失鉴定分离的大鼠BMSCs，不同剂量的补肾活血方处理BMSCs，检测其[1，2]增殖能力，碱性磷酸酶活性和茜素红染色检测BMSCs的成骨分化潜能。qPCR检测不同剂量的补肾活血方处理BMSCs后，miR-26b和KLF10的表达水平。mirtarBase数据库检测KLF10mRNA的3’非翻译区(3’UTRuntranslatedregions，)上是否有miR-26b的结合位点，双荧光素酶报告实验检测miR-26b对KLF10启动子活性的影响。qPCR检测miR-26b/KLF10信号对BMSCs增殖和成骨分化标志物的表达的影响。Westernblot检查Wnt/β-catenin信号是否被激活。结果流式分析显示分离的原代细胞大部分是BMSCs。补肾活血方显著促进骨髓间充质干细胞的增殖，补肾活血方显著提高了BMSCs中碱性磷酸酶的水平和成骨分化的潜能。补肾活血方促进BMSCs中miR-26b和KLF10的表达。在KLF10mRNA的3’UTR上有miR-26b的结合位点。在BMSCs中，miR-26b抑制KLF10的3’UTR荧光素酶活性。此外，miR-26b也抑制了KLF10的表达水平。CCK8(CellCountingKit-8)显示KLF10促进BMSCs增殖，qPCR显示miR-26b显著抑制成骨分化标志物的表达。而KLF10能够逆转miR-26b的抑制效应，提示miR-26b/KLF10信号介导了补肾活血方在BMSCs增殖和成骨分化中的效应，且补肾活血方通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进成骨。结论补肾活血方促进BMSCs的成骨由miR-26b/KLF10/Wnt/β-Catenin信号轴调控。

关键词：补肾活血方骨质疏松症骨髓间充质干细胞增殖成骨

基于步态分析探究骨补丸干预老年膝骨关节炎患者炎症因子表达

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中国老年学杂志 2024年第2期44卷 331-334页

作者：包杭生冯宗权邹勇根佛山市中医院骨伤科广东佛山528000

目的基于步态分析技术探究骨补丸干预老年膝骨关节炎患者炎症因子的表达。方法采用前瞻随机对照临床试验,将106例肝肾不足型老年膝骨关节炎患者按照随机数字表法分成骨补丸组、安慰剂组各53例。比较两组临床表现(疼痛视觉模拟评分、膝... 详细信息

目的基于步态分析技术探究骨补丸干预老年膝骨关节炎患者炎症因子的表达。方法采用前瞻随机对照临床试验,将106例肝肾不足型老年膝骨关节炎患者按照随机数字表法分成骨补丸组、安慰剂组各53例。比较两组临床表现(疼痛视觉模拟评分、膝关节主动伸屈活动度、美国特种外科医院膝关节评分)、步态分析参数(步幅、步速、步频、步态周期)和关节液炎症因子(白细胞介素-1β、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α)。结果试验前,两组临床表现、步态分析参数和关节液炎症因子差异均无统计学意义(P>0.05);试验后,两组上述指标与试验前比较差异均有统计学意义,且骨补丸组指标改善明显优于安慰剂组(均P<0.05)。结论骨补丸治疗肝肾不足型老年膝骨关节炎疗效确切,可能通过改善关节步态分析参数,干预关节液炎症因子表达发挥作用。

关键词：骨补丸膝骨关节炎步态分析炎症因子

银耳多糖对力竭运动小鼠氧化性损伤所致疲劳的缓解作用

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食品工业科技 2024年第4期45卷 328-335页

作者：黄小兰黄少波邵丽重庆对外经贸学院重庆401520 重庆市开州区中医院骨伤科重庆405400 重庆市开州区中医院儿科重庆405400

目的:探讨银耳多糖(Tremella fuciformis polysaccharides,TFP)对小鼠力竭运动性氧化损伤的影响,并分析其机制。方法:采用TFP处理L6细胞48 h,CCK-8法检测L6的活力;L6细胞设置3组,包括对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+TFP组,孵育48 h,生化分析仪检测乳酸(Lactic Acid,LA)水平,Western blot实验检测Nrf2、NQO1和HO-1蛋白水平;将C57BL/6小鼠随机分为4组(每组n=10),包括模型组、模型+TFP组(50、100、200 mg/kg),模型+TFP组连续灌胃TFP,模型组灌胃相同剂量的蒸馏水,每天1次,连续2周。末次给药30 min后进行力竭运动,记录力竭游泳运动时间,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝糖原(LG)、骨骼肌糖原(MG);ELISA法检测血尿素氮(BUN)、LA、ROS、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、TNF-α、IL-6、NF-κBp65水平。Western blot实验检测Nrf2、NQO1、HO-1蛋白水平。结果:H_(2)O_(2)组L6细胞的LA水平极显著(P<0.01)高于对照组,Nrf2、NQO1、HO-1蛋白水平极显著(P<0.01)低于对照组,TFP极显著(P<0.01)降低培养基中LA水平,极显著(P<0.01)上调L6细胞中Nrf2、NQO1、HO-1表达。TFP显著延长力竭游泳时间(P<0.05,P<0.01),极显著降低LA(P<0.01)、BUN(P<0.05,P<0.01)水平,显著增加肝糖原(P<0.05,P<0.01)和肌糖原(P<0.05,P<0.01)水平,极显著上调SOD(P<0.01)、GSH-Px(P<0.01),显著下调MDA(P<0.05,P<0.01)、ROS(P<0.01)水平,极显著(P<0.01)降低血清中TNF-α、IL-6、NF-κBp65的水平;与模型组比较,TFP显著增加Nrf2(P<0.05,P<0.01)、HO-1(P<0.05,P<0.01)、NQO-1(P<0.05,P<0.01)蛋白表达水平。结论:TFP通过抑制氧化应激、炎症改善力竭游泳运动引起的氧化损伤,其机制与调节Nrf2/HO-1信号通路相关。

关键词：银耳多糖游泳力竭运动 Nrf2/HO-1信号通路氧化应激炎症

临床护理教师教学能力与护理信息能力及循证实践能力关系模型的研究

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中国护理管理 2024年第7期24卷 1019-1022页

作者：黄少娟黄素珍周建仪张改佛山市中医院护理部广东省佛山市528000 佛山市中医院手术室广东省佛山市528000 佛山市中医院急诊科广东省佛山市528000 佛山市中医院骨伤科广东省佛山市528000

目的:分析临床护理教师的教学能力、护理信息能力及循证实践能力的现状,明确三者的关系,为提高临床护理教师教学能力提供参考。方法:采用方便抽样法,于2022年10月至2024年3月在广东省5个城市15家三级医院选取具有本科生带教经验的740名... 详细信息

目的:分析临床护理教师的教学能力、护理信息能力及循证实践能力的现状,明确三者的关系,为提高临床护理教师教学能力提供参考。方法:采用方便抽样法,于2022年10月至2024年3月在广东省5个城市15家三级医院选取具有本科生带教经验的740名临床护理教师作为研究对象。用一般资料调查表、护理信息能力量表、中文版循证实践能力评估量表及护理本科生临床带教老师教学能力问卷进行调查,运用Person相关分析和结构方程模型进行数据分析。结果:临床护理教师护理信息能力、循证实践能力及教学能力条目均分分别为(3.60±0.55)分、(3.16±0.74)分、(3.05±0.58)分,护理信息能力对教学能力具有直接效应(β=0.368,P<0.05);循证实践能力对教学能力有直接效应(β=0.590,P<0.05);护理信息能力可以通过循证实践能力间接影响教学能力(β=0.238,P<0.05)。结论:临床护理教师护理信息能力、循证实践能力处于中等水平,护理管理者应采取多项措施提升临床护理教师护理信息能力、循证实践能力,进而提高临床护理教师教学能力。

关键词：临床护理教师教学能力循证实践能力护理信息能力

血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

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补肾活血方通过调控circ_0036763/miR-583轴对髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响

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中国医师杂志 2024年第1期26卷 63-69页

作者：梁灿荣何俊杰褚学远冯浩坚郭伟俊蔡东岭祝诚华陈晓峰广州市番禺区中医院骨伤科广州511400 广州市番禺区中医院影像科广州511400

目的探究补肾活血方可能通过调控circ_0036763/miR-583轴对髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常及椎间盘退变(IDD)髓核细胞中circ_0036763、miR-583表达水平;将IDD髓核细胞分为pcDNA组、pcDNA ... 详细信息

目的探究补肾活血方可能通过调控circ_0036763/miR-583轴对髓核细胞增殖和胞外基质合成的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常及椎间盘退变(IDD)髓核细胞中circ_0036763、miR-583表达水平;将IDD髓核细胞分为pcDNA组、pcDNA circ_0036763组、pcDNA circ_0036763+mimic NC组、pcDNA circ_0036763+miR-583 mimic组,采用qRT-PCR检测各组髓核细胞circ_0036763、miR-583表达水平,MTT检测细胞增殖(A值),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测髓核细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、collagen Ⅰ、collagen Ⅱ蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证circ_0036763与miR-583靶向关系。将27只小鼠分为假手术组、IDD组、补肾活血方组,除假手术组外均建立IDD模型。建模成功后,假手术组、IDD灌胃生理盐水,补肾活血方组灌胃1.5 g/ml补肾活血方,连续灌胃3周。采用qRT-PCR检测各组小鼠髓核细胞circ_0036763、miR-583表达水平,MTT检测细胞增殖,Western blot检测PCNA、collagen Ⅰ、collagen Ⅱ蛋白表达。结果IDD髓核细胞中circ_0036763表达水平降低,miR-583表达水平升高(均P<0.05);过表达circ_0036763可促进髓核细胞增殖和胞外基质合成(均P<0.05);circ_0036763靶向调控miR-583,上调miR-583可逆转过表达circ_0036763对IDD髓核细胞增殖和胞外基质合成能力。与假手术组相比,IDD组collagen Ⅰ蛋白表达、miR-583表达水平增加(均P<0.05),细胞A值、PCNA及collagen Ⅱ蛋白表达、circ_0036763表达水平降低(均P<0.05);与IDD组相比,补肾活血方组collagen Ⅰ蛋白表达、miR-583表达水平降低(均P<0.05),细胞A值、PCNA及collagenⅡ蛋白表达、circ_0036763表达水增加(均P<0.05)。结论补肾活血方可能通过调控circ_0036763/miR-583轴诱导髓核细胞增殖和胞外基质合成。

关键词：椎间盘退行性变髓核 RNA,环状 miRNA-583 细胞增殖

贝母素乙调节RhoA/ROCK信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

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中国骨质疏松杂志 2024年第7期30卷 980-984页

作者：彭博文冯立覃剑武汉市中医医院骨伤科湖北武汉430014

目的探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组... 详细信息

目的探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组、贝母素乙(3.5 mg/kg)+LPA(RhoA激活剂,1 mg/kg)组,每组10只,另选10只大鼠为对照组。机械刺激法和热辐射法检测大鼠膝关节疼痛症状;检测大鼠关节肿胀度、膝关节宽度并以步态评分评测其关节功能;透射电镜检测大鼠膝关节软骨细胞超微结构;TUNEL染色检测大鼠关节软骨细胞凋亡比;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清和关节液促炎因子白细胞介素(IL)-18、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;免疫印迹检测各组大鼠关节软骨组织凋亡(Cleaved caspase-3、Bax)和RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果贝母素乙可降低KOA大鼠关节肿胀度、膝关节宽度、步态评分、软骨细胞凋亡比、血清及关节液IL-18、MCP-1水平、软骨组织Cleaved caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK1蛋白表达,升高机械痛阈值、热痛阈值(P<0.05);LPA可减弱贝母素乙对KOA大鼠关节软骨损伤的改善作用。结论贝母素乙可通过抑制RhoA/ROCK信号激活而抑制KOA大鼠关节炎症反应和关节软骨细胞凋亡,减轻软骨损伤。

关键词：贝母素乙 RhoA/ROCK 膝骨关节炎软骨损伤信号通路

桃红四物汤联合针灸对膝关节骨性关节炎患者炎症反应及血液流变学的影响

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反射疗法与康复医学 2024年第5期5卷 25-28页

作者：杨波王宏谭翊能苏博源铜仁市中医医院骨伤科贵州铜仁554300 广东省东莞市中医院骨伤科广东东莞523127

目的探讨桃红四物汤联合针灸在治疗膝关节骨性关节炎(KOA)患者中的应用效果.方法选取2021年6月—2023年6月铜仁市中医医院收治的110例KOA患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,各55例.对照组采用针灸治疗,观察组在对照... 详细信息

目的探讨桃红四物汤联合针灸在治疗膝关节骨性关节炎(KOA)患者中的应用效果.方法选取2021年6月—2023年6月铜仁市中医医院收治的110例KOA患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,各55例.对照组采用针灸治疗,观察组在对照组基础上加用桃红四物汤治疗.比较两组临床疗效、膝关节功能、炎症反应、血液流变学指标及安全性.结果观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组骨关节炎指数量表评分各个维度及总分分别为(16.49±1.85)分、(2.68±0.46)分、(0.67±0.13)分、(19.84±1.58)分,均低于对照组的(22.63±2.89)分、(3.71±0.53)分、(1.04±0.22)分、(27.38±2.68)分,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β分别为(48.13±4.35)ng/L、(17.25±1.45)pg/mL、(9.21±1.15)pg/mL,均低于对照组的(55.35±5.24)ng/L、(21.43±2.58)pg/mL、(11.73±1.29)pg/mL,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,观察组全血高切黏度、血浆黏度、全血低切黏度、红细胞沉降率分别为(3.54±0.56)mPa·s、(1.41±0.23)mPa·s、(8.19±1.22)mPa·s、(6.82±1.13)mm/h,均低于对照组的(4.68±0.75)mPa·s、(1.65±0.31)mPa·s、(10.34±1.39)mPa·s、(8.41±1.18)mm/h,组间差异有统计学意义(P<0.05).两组均无不良事件发生.结论桃红四物汤联合针灸可提高治疗KOA的效果,减轻局部炎症反应,纠正血液流变学异常,加快膝关节功能恢复.

关键词：膝关节骨性关节炎桃红四物汤针灸炎症反应血液流变学

独活寄生汤联合针灸治疗对髋关节骨折术后患者下肢微循环及髋关节功能恢复的影响

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反射疗法与康复医学 2024年第6期5卷 19-22页

作者：杨波王宏谭翊能苏博源铜仁市中医医院骨伤科贵州铜仁554300 广东省东莞市中医院骨伤科广东东莞523127

目的分析独活寄生汤联合针灸治疗髋关节术后骨折患者的效果.方法选取2022年1月—2023年10月该院收治的90例髋关节骨折患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,各45例.对照组术后行常规西医联合针灸治疗,观察组在对照组基... 详细信息

目的分析独活寄生汤联合针灸治疗髋关节术后骨折患者的效果.方法选取2022年1月—2023年10月该院收治的90例髋关节骨折患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,各45例.对照组术后行常规西医联合针灸治疗,观察组在对照组基础上加用独活寄生汤治疗,持续治疗4周.对比两组下肢微循环指标、髋关节功能恢复情况、不良反应发生情况.结果治疗后,观察组血液流态积分为(0.50±0.11)分、管襻形态积分(0.31±0.02)分、襻周状态积分(0.16±0.01)分,均低于对照组的(0.63±0.19)分、(0.50±0.06)分、(0.28±0.05)分,白微栓数量为(1.01±0.12)个/min少于对照组的(1.32±0.25)个/min,毛细血管流速为(706.87±41.56)μm/s,快于对照组的(615.97±38.75)μm/s,管襻数目为(6.98±1.84)条/mm,多于对照组的(6.13±1.69)条/mm,髋关节功能评定量表各维度评分分别为(4.01±0.27)分、(34.48±4.21)分、(30.47±4.15)分、(2.49±0.35)分,均高于对照组的(3.42±0.35)分、(27.56±3.89)分、(26.95±3.58)分、(1.68±0.23)分,组间差异有统计学意义(P<0.05).两组均无不良反应发生.结论独活寄生汤结合针灸可调节髋关节骨折患者下肢微循环,促进髋关节功能恢复.

关键词：髋关节骨折微循环独活寄生汤针灸