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DNA技术在检疫性白蚁种类鉴定中的应用进展

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DNA技术在检疫性白蚁种类鉴定中的应用进展

第一届全国生物入侵学术研讨会

作者：王建国平正明庞雄飞梁广文江西农业大学农学院华南农业大学昆虫生态研究室广东昆虫研究所

白蚁被人为传播到异地建群为害在美国等地已有惨痛教训,白蚁建群为害非常隐蔽、潜伏期长,一旦爆发则为害严重且无法根治。我国农业部2007年5月新公布的"中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录"将白蚁检疫性种类由过去一种曲颚乳白蚁... 详细信息

白蚁被人为传播到异地建群为害在美国等地已有惨痛教训,白蚁建群为害非常隐蔽、潜伏期长,一旦爆发则为害严重且无法根治。我国农业部2007年5月新公布的"中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录"将白蚁检疫性种类由过去一种曲颚乳白蚁Coptotermes curvignathus扩大为乳白蚁属Coptotermes spp.(乳白蚁非中国种)等。我国建立主要木材进口原产地重要危险性白蚁种类鉴定资料库非常必要,而且形势紧迫。因白蚁种类繁多,形态接近,种类识别难度为大家公认,加之在白蚁现场检疫时不易获得兵蚁品级,获得有翅成虫的机率更低,仅凭工蚁通过形态很难鉴定到种级水平,结果也不可靠,由于缺乏分类资料和对比标本,加上白蚁种类繁多,白蚁本身分类的难度等因素,检疫部门的技术人员要把白蚁鉴定到种级水平是相当困难的,故目前检疫部门的白蚁截获报道多数还依赖白蚁分类专家进行鉴定或核定,这势必对检疫效率造成较大的影响,检疫部门迫切希望寻找新的技术手段进行白蚁检疫对象的快速鉴定。利用DNA技术则无论白蚁何种生物型和虫态,均可用于鉴定,具有快速、准确等特点。通过形态特征和DNA分子标记相接合,建立数据库,为实现危险性检疫白蚁对象的快速分子鉴定打下基础。随着研究的深入,更多的截获白蚁种类基因序列、尤其是多基因序列将获得登记,将极大促进《进境原木上白蚁的快速分子鉴定技术规范》的制定,提高我国白蚁检疫水平。本论文从上述目的出发,利用线粒体16S、COⅡ两个DNA序列片段,对来自东南亚原木上截获的乳白蚁属一些种类和在我国及世界其他传入区广泛分布的台湾乳白蚁Coptotermes formosanus Shiraki不同地理种群进行了比较,为建立数据库,实现白蚁检疫对象分子快速鉴定打下了基础。从COⅡ构建的系统树可以看出,来自非洲莫桑比克的斯氏乳白蚁***(o|¨)stedi(Holmgren)与其他乳白蚁遗传距离最远。澳大利亚的一未定名乳白蚁Coptotermes sp.(AB005583)和短刀乳白蚁***(Froggatt)(AF262610)的COⅡ序列完全相同,推断为同一物种。巴布亚新几内亚的端明乳白蚁Coptotermeselisal(Desneux)和马来西亚的曲颚乳白蚁Coptotermes curvignathus Holmgren 3个样本聚合形成一个进化枝,4者间的遗传距离极近(0.000～0.005),支持端明乳白蚁和曲颚乳白蚁为相同物种。在16S序列推导的乳白蚁系统发育树中,共计19个样本的16S序列完全一致,包括16个广东样本,广西、海南和江西样本各1个。另有广东样本和江西吉安样本也和上述19样本序列几乎一样。台湾乳白蚁的美国2个种群、日本一个种群(冲绳)拥有相同的序列。巴布亚新几内亚的端明乳白蚁3个样本和曲颚乳白蚁马来西亚3样本聚合混杂在同一进化枝上,6个样本间遗传距离较小,为0.000～0.012,表明端明乳白蚁和曲颚乳白蚁为同一物种。印度尼西亚一未定名乳白蚁Coptotermes sp.3782Indonesia和上述端明乳白蚁和曲颚乳白蚁组成的进化枝聚合,遗传距离为0.012～0.025,大于上述曲颚乳白蚁6个样本间种间距离,说明这种乳白蚁和曲颚乳白蚁关系密切,形态上该种头部和前胸背板上的毛比曲颚乳白蚁的杂乱,有可能为曲颚乳白蚁的近缘种。澳洲乳白蚁*** Froggatt、爪泰乳白蚁*** Holmgren、非洲乳白蚁***(o|¨)stedi(Holmgren)、稀毛乳白蚁*** Silvestri在系统树中为独立的进化枝,显示为单独的种,但因构树样本偏少,各进化枝的Bootstrap检验支持率偏低(50～61%),各种类间的亲缘关系尚不明确。

关键词：白蚁分子鉴定 DNA技术检疫

来源： cnki会议评论

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动脉粥样硬化发病机制及其动物模型研究进展

实验动物科学 2015年第4期32卷 54-58页

作者：陈臻毅徐强梁自豪饶军华广东蓝岛生物技术有限公司广州510555 广东省昆虫研究所广东省野生动物保护与利用公共实验室广州510260

动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是一类高发性常见性疾病,研究其发病原因,阐明其发病机制,建立一种能较好模拟人类病变过程的As动物模型是目前国内外研究的重点和热点。本文就国内外报道的对动脉粥样硬化发生发展的病理机制,及其动物... 详细信息

动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是一类高发性常见性疾病,研究其发病原因,阐明其发病机制,建立一种能较好模拟人类病变过程的As动物模型是目前国内外研究的重点和热点。本文就国内外报道的对动脉粥样硬化发生发展的病理机制,及其动物模型的选择,造模方法及模型的评价方面的研究进行综述分析,以期为今后动脉粥样硬化的研究提供参考思路与线索。

关键词：动脉粥样硬化(As) 机制动物模型研究进展

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诱杀技术在害虫综合治理(IPM)中的应用

中国植保导刊 2016年第6期36卷 17-25页

作者：闫凯莉唐良德吴建辉毕志兼华南农业大学农学院广东广州510642 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 广东省广州市花都区农业技术管理中心广东广州510800

基于昆虫趋光性和趋化性的诱杀技术是害虫综合治理(IPM)中的一项重要措施,已被广泛应用于农林害虫的监测与防治。本文系统综述了诱虫灯、色板等趋光性诱杀技术和植物源挥发物、昆虫信息素等趋化性诱杀技术在害虫防治中的应用,并提出了... 详细信息

基于昆虫趋光性和趋化性的诱杀技术是害虫综合治理(IPM)中的一项重要措施,已被广泛应用于农林害虫的监测与防治。本文系统综述了诱虫灯、色板等趋光性诱杀技术和植物源挥发物、昆虫信息素等趋化性诱杀技术在害虫防治中的应用,并提出了将来诱杀技术的研发重点和应用前景,进一步探明昆虫趋光性机制和嗅觉通讯机制,开发适用于靶标害虫精准诱杀的特异性趋光谱,提高信息化合物引诱效果的田间应用技术等。

关键词：趋光性趋化性植物挥发信息物昆虫信息素

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诱饵诱集时间与红火蚁工蚁诱集量的关系研究

环境昆虫学报 2016年第5期38卷 1023-1027页

作者：刘杰齐国君何余容广州市越秀区疾病预防控制中心广州510055 广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640 华南农业大学农学院广州510642

为了明确诱饵诱集时间与红火蚁工蚁诱集量之间的关系,确定最佳的诱饵放置时间,本研究采用火腿肠诱饵诱集法,观察不同季节、不同时间段红火蚁诱集的个体数量,利用房室模型分析诱饵诱集时间与红火蚁工蚁诱集量之间的关系。结果表明,随着... 详细信息

为了明确诱饵诱集时间与红火蚁工蚁诱集量之间的关系,确定最佳的诱饵放置时间,本研究采用火腿肠诱饵诱集法,观察不同季节、不同时间段红火蚁诱集的个体数量,利用房室模型分析诱饵诱集时间与红火蚁工蚁诱集量之间的关系。结果表明,随着诱饵放置时间的增加,红火蚁工蚁的诱集数量会出现一个高峰,春季诱集高峰出现在诱饵放置后38-44 min,秋季出现在诱饵放置后24-29 min,并建立了不同季节、不同时间段红火蚁诱集量与时间的关系模型,分别为Y=12764.8807×e(-0.029102 X)"12820.4625×e(-0.030064 X)(春季上午)、Y=16166.6800×e(-0.023994 X)"16217.0808×e(-0.024866 X)(春季下午)、Y=12211.9095×e(-0.040576 X)"12275.2496×e(-0.041620 X)(秋季上午)、Y=12306.4111×e(-0.049724 X)"12383.6907×e(-0.051217 X)(秋季下午)。因此,在利用火腿肠诱饵监测红火蚁时,春季诱饵放置的最适时间约为40 min,秋季的最适时间约为30 min。

关键词：红火蚁诱饵诱集时间诱集量

猕猴SPF种群的建立及保持过程中B病毒抗体监测研究

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中国比较医学杂志 2003年第5期13卷 294-296页

作者：饶军华刘晓明田克恭遇秀玲金石军王海英华南濒危动物研究所灵长类研究开发中心广州510555 农业部兽医诊断中心军事医学科学院实验动物中心

目的　建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式。方法　采用BVEIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪。结果　从自繁自育猴中随机挑选 2 18只断奶食蟹猴 ,92只断奶猕猴 ,经过近两年反复... 详细信息

目的　建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式。方法　采用BVEIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪。结果　从自繁自育猴中随机挑选 2 18只断奶食蟹猴 ,92只断奶猕猴 ,经过近两年反复筛选得到 2 5只SPF食蟹猴 ,9只SPF猕猴 ,此结果经美国BioReliance公司检测得到确认。结论　该模式能有效监测猕猴BV抗体变化 ,为本中心在国内建立猕猴SPF种群提供了有力的技术保障。

关键词：猕猴 SPF种群 B病毒抗体监测 BV感染免疫缺陷病毒

3种拟除虫菊酯类农药对草地贪夜蛾的毒力测定及田间应用效果评价

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环境昆虫学报 2020年第2期42卷 335-341页

作者：马千里王勇庆谭煜婷王世英郑群吕怡颖徐汉虹张志祥广东省生物农药工程技术研究中心广州510642 华南农业大学农学院广州510642 湖南人文科技学院湖南娄底417000

评价使用氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯喷雾和喇叭口点施处理对草地贪夜蛾的活性与防效,为草地贪夜蛾综合防控提供技术支持。采用喷雾法测定了3种农药原药对草地贪夜蛾3龄幼虫毒力;采用喷雾和喇叭口点施2种方式田间施用5.7%氟... 详细信息

评价使用氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯喷雾和喇叭口点施处理对草地贪夜蛾的活性与防效,为草地贪夜蛾综合防控提供技术支持。采用喷雾法测定了3种农药原药对草地贪夜蛾3龄幼虫毒力;采用喷雾和喇叭口点施2种方式田间施用5.7%氟氯氰菊酯乳油、25 g/L溴氰菊酯乳油、5.0%高效氯氟氰菊酯乳油,药后第1天、第3天、第7天调查挂牌标记玉米上草地贪夜蛾活虫数,计算防治效果。3种拟除虫菊酯农药对草地贪夜蛾3龄幼虫LC 50值大小顺序依次为氟氯氰菊酯(29.80 mg/L)高效氯氟氰菊酯乳油>溴氰菊酯微乳剂。由于草地贪夜蛾低龄幼虫和高龄幼虫取食部位有差异,喷雾法防治低龄幼虫的效果好,喇叭口点施防治高龄幼虫的效果好。拟除虫菊酯类农药对草地贪夜蛾具有较好的防治效果,喇叭口点施方式节省药剂、提高对高龄幼虫的防效,在防治草地贪夜蛾等害虫方面具有广阔的应用前景。

关键词：拟除虫菊酯草地贪夜蛾喷雾喇叭口点施

马铃薯瓢虫与茄二十八星瓢虫SCAR标记的建立及应用

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环境昆虫学报 2020年第2期42卷 434-440页

作者：郭木娟陈诗敏庾家琪叶翠怡邱宝利李文香潘慧鹏华南农业大学农学院/广东省生物农药创制与应用重点实验室/广东省农业害虫生物防治工程技术研究中心广州510642 河北北方学院农林科技学院河北张家口075000

为了探索快速鉴定马铃薯瓢虫Henosepilachna vigintioctomaculata(Motschulsky)和茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata(Fabricius)的分子生物学方法,本研究在随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)的基础上,分别设计了可以鉴别两个物种的序列特征扩增区域(sequence characterized amplified regions,SCAR)标记。从随机合成的60条引物中筛选出来2条特异性引物(分别为OPI-6和OPJ-15),引物OPI-6在马铃薯瓢虫中扩增出约750 bp的特异性条带,引物OPJ-15在茄二十八星中扩增出约750 bp的特异性条带,根据测序结果设计了两对SCAR引物对筛选结果进行验证,发现根据OPI-6的测序结果所设计的SCAR引物(OPI-6 test)仅能在马铃薯瓢虫中扩增出645 bp的条带,而根据OPJ-15的测序结果所设计的SCAR引物(OPJ-15 test)仅能在茄二十八星瓢虫中扩增出436 bp的条带。这两对SCAR引物能够准确、稳定且快速地区分马铃薯瓢虫与茄二十八星瓢虫,对这两种害虫的精准防控具有重要意义。

关键词：马铃薯瓢虫茄二十八星瓢虫 RAPD标记 SCAR标记分子鉴定

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华南不同生境内红火蚁蚁群结构的变动规律

华南不同生境内红火蚁蚁群结构的变动规律

第二届全国生物入侵学术研讨会

作者：许益镌陆永跃曾玲梁广文华南农业大学昆虫学系/红火蚁研究中心

对广东省内的荔枝园、苗圃、路边和荒地等生境中的红火蚁蚁群结构的变动规律进行了调查研究,结果表明:试验区内绝大部分蚁巢内能发现2头或以上的蚁后存在,最多的高达93头,而红火蚁蚁巢体积大小与巢内的蚁后数量之间符合线性关系。红火... 详细信息

对广东省内的荔枝园、苗圃、路边和荒地等生境中的红火蚁蚁群结构的变动规律进行了调查研究,结果表明:试验区内绝大部分蚁巢内能发现2头或以上的蚁后存在,最多的高达93头,而红火蚁蚁巢体积大小与巢内的蚁后数量之间符合线性关系。红火蚁各品级数量的年变动呈现双峰型,在春秋季时期数量较大,而冬季蚁群数量明显减少。随着季节的变化,红火蚁蚁群中各品级的比例发生着不断的变化。在冬季,工蚁的数量在减少,但工蚁占整个蚁群数量的比例却增大,在1月份最高为98.24%;而在春季,蚁巢工蚁的比例开始减小,在5月份到达最低点为57.29%;工蚁的幼体(蛹和幼虫)比例的年变化则呈现与工蚁相反的趋势。另外,不同生境中红火蚁蚁群结构变动较为一致。

关键词：红火蚁蚁群结构动态

来源： cnki会议评论

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重金属污染影响植食性昆虫的研究进展

应用生态学报 2020年第5期31卷 1773-1782页

作者：陈瑾王建武舒迎花农业农村部华南热带农业环境重点实验室/广东省生态循环农业重点实验室/广东省现代生态循环农业工程中心/华南农业大学资源环境学院生态学系广州510642

重金属污染是世界各国面临的最为棘手的问题之一,对生态系统和食品安全构成了严重威胁。作为生态系统中食物链和食物网的重要环节,植食性昆虫是环境中重金属迁移、积累的重要媒介,其因重金属污染而受到的影响引起了大家的关注。本文综... 详细信息

重金属污染是世界各国面临的最为棘手的问题之一,对生态系统和食品安全构成了严重威胁。作为生态系统中食物链和食物网的重要环节,植食性昆虫是环境中重金属迁移、积累的重要媒介,其因重金属污染而受到的影响引起了大家的关注。本文综述了从2007至2018年重金属污染对植食性昆虫影响的研究进展。昆虫受重金属胁迫的研究途径有人工饲料添加、野外田间暴露、"土壤-植物-昆虫"食物链传递以及体外注射等。积累在植食性昆虫体内的过量重金属可导致其存活率、繁殖力和种群增长率降低,生长发育迟缓。重金属污染对植食性昆虫的生理生化毒性包括细胞超微结构破坏和DNA损伤,体内能量物质含量降低,酶活性、基因表达改变等。植食性昆虫会通过重金属硫蛋白、解毒酶活性的诱导等机制抵御重金属的毒害,从而对低浓度、长期重金属暴露产生生态适应性,甚至提高对其他逆境(如农药等)的耐受性。

关键词：植食性昆虫重金属环境污染生长发育生理毒性