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骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎小鼠干预效果研究

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中国实验动物学报 2023年第1期31卷 27-34页

作者：吴玉娥曾业文罗挺凌雪荧梁十李航贾欢欢广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室广州510663

目的利用自发类风湿关节炎小鼠模型(Tg-huTNFα小鼠),探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对类风湿关节炎及其继发骨量丢失的影响。方法3周龄Tg-huTNFα小鼠分为3组:(1)模型组(Model),每周腹腔注射1次0.1 mL/10 g的生理盐水;(2)huTNFα抗体干预... 详细信息

目的利用自发类风湿关节炎小鼠模型(Tg-huTNFα小鼠),探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对类风湿关节炎及其继发骨量丢失的影响。方法3周龄Tg-huTNFα小鼠分为3组:(1)模型组(Model),每周腹腔注射1次0.1 mL/10 g的生理盐水;(2)huTNFα抗体干预组(Anti-huTNFα),每周腹腔注射1次10 mg/kg的huTNFα抗体;(3)BMSCs干预组(BMSCs),每周双侧膝关节腔各注射1次5×10^(6) Cells的BMSCs。干预期间每周称量1次动物体重,同时对踝关节进行临床评分,各组动物干预10周后处死取材。利用流式细胞仪分析外周血T细胞、B细胞、CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比例,液相芯片法检测血清中huTNFα、IL-4及IL-1β含量,HE染色后评价左侧膝关节和踝关节病理改变,骨形态计量学方法分析右侧股骨骨结构变化。结果与模型组比较,BMSCs和Anti-huTNFα干预均可缓解Tg-huTNFα小鼠体重的下降,抑制小鼠关节肿大变形,下调外周血huTNFα含量,降低Tg-huTNFα小鼠的关节病理评分,减少关节滑膜和软骨损伤面积。此外,骨形态计量学分析发现,BMSCs干预可提高骨小梁数量和骨小梁面积百分数等,改善Tg-huTNFα小鼠股骨骨结构。结论关节腔注射BMSCs可以显著缓解Tg-huTNFα小鼠类风湿关节炎症状,改善股骨骨结构,缓解RA继发的骨量丢失。

关键词：类风湿关节炎骨髓间充质干细胞 Tg-huTNFα小鼠骨量丢失

中国实验动物许可证管理现状比对分析及对策建议

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中国比较医学杂志 2023年第10期33卷 81-90页

作者：李会萍陈梅丽赵维波广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室广州510663

目的归纳和梳理2018年~2022年来中国的实验动物许可证情况,分析当前中国的实验动物许可证管理现状以及发展趋势,为我国的实验动物管理工作提供依据。方法将实验动物许可证数据按被许可总体情况、被许可的四大区域、被许可省(市)、被... 详细信息

目的归纳和梳理2018年~2022年来中国的实验动物许可证情况,分析当前中国的实验动物许可证管理现状以及发展趋势,为我国的实验动物管理工作提供依据。方法将实验动物许可证数据按被许可总体情况、被许可的四大区域、被许可省(市)、被许可动物种类、被许可环境设施的不同维度进行数据整理和数据预处理,通过数据统计、图表化比对和相关文献查阅比对研究相结合的方法进行分析、总结。结果中国的实验动物许可证数量总体呈上升趋势,充分体现中国实验动物行政许可管理逐步实现法制化与科学监管,行政许可管理效能和服务不断提升。结论文章阐述和分析了中国实验动物许可证发展趋势和存在问题并提出对策和建议,建议完善实验动物法规制度,加强实验动物行政许可监管力度,提升实验动物增量资源标准化程度,对推动中国实验动物行业的健康发展具有重要作用。

关键词：实验动物行政许可许可证对策

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动物实验的人道干预点

中国比较医学杂志 2023年第4期33卷 128-132页

作者：邓少嫦杨锦淳林丹荣丛锋赵维波广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室广州510663

随着动物福利研究的深入,作为3R优化原则的重要组成部分,动物实验过程中的人道干预点日益受到国际关注,人道干预点的确定和干预措施的选择是保障动物福利的关键。人道干预点是指动物实验过程中动物出现应该被干预状态的时间点,人道终点... 详细信息

随着动物福利研究的深入,作为3R优化原则的重要组成部分,动物实验过程中的人道干预点日益受到国际关注,人道干预点的确定和干预措施的选择是保障动物福利的关键。人道干预点是指动物实验过程中动物出现应该被干预状态的时间点,人道终点属于人道干预点的一种特殊表现形式,安乐死是人道干预点的一种实施方式。目前为保护实验动物福利,我国已出台多项标准和规范,而针对人道干预点的确定原则和干预措施仍没有系统要求,也缺乏相关的研究报道。本文拟综合国内外指导性文件及文献报道,系统描述动物实验过程中的人道干预点,以期为实验动物从业人员提供科学参考,最大程度减轻实验过程中动物所承受的疼痛和痛苦。

关键词：实验动物动物福利人道干预点干预措施

注射用头孢曲松钠溶血性、局部刺激性和过敏反应一致性评价

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药物评价研究 2022年第6期45卷 1113-1118页

作者：李航曾业文刘晓霖黄仨刘婵梁金强关业枝广东省实验动物监测所广东广州510663 广东省实验动物重点实验室广东广州510663

目的采用溶血性、血管刺激性试验、肌肉刺激性试验和全身主动过敏试验(ASA)检测受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品(罗氏芬)局部毒性和过敏性,进行一致性评价。方法分别采用肉眼观察法和分光光度法进行体外溶血性试验;以受试物或市售... 详细信息

目的采用溶血性、血管刺激性试验、肌肉刺激性试验和全身主动过敏试验(ASA)检测受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品(罗氏芬)局部毒性和过敏性,进行一致性评价。方法分别采用肉眼观察法和分光光度法进行体外溶血性试验;以受试物或市售对照品临床iv最高浓度(93 mg·mL^(−1))连续4 d耳缘静脉推注给药进行新西兰兔血管刺激性试验;以临床im最高浓度(238 mg·mL^(−1),给药体积1 mL)连续4 d右后肢股四头肌im给药进行新西兰兔肌肉刺激性试验;采用传统豚鼠ASA进行过敏性试验,致敏剂量分别0.5、1.5 mg·kg^(−1),激发剂量分别为1.0、3.0 mg·kg^(−1)。结果肉眼观察法和分光光度法均显示受试物及市售对照品无体外溶血和红细胞凝聚作用;临床等效剂量的受试物及市售对照品均无血管刺激性;最大给药浓度的受试物及市售对照品在末次给药后72 h均有重度肌肉刺激性,恢复期结束时受试物组与市售对照品组动物注射部位肌肉均见纤维化等正常修复现象;受试物及市售对照品均可见弱阳性全身致敏作用,结果具有一致性。结论受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品局部毒性反应和过敏反应情况基本一致,可用于临床。

关键词：注射用头孢曲松钠溶血性刺激性全身主动过敏试验一致性

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广东省实验动物病理监测实施概况

实验动物科学与管理 2003年第4期20卷 25-27页

作者：程树军黄韧秦瑶广东省实验动物监测所广州510260

对广东省实验动物监测所从 1988年成立到 2 0 0 2年 14年间实验动物病理监测工作的发展和取得的成绩进行了总结 ,并对今后病理监测任务的实施和发展进行了展望。常规病理监测和相关研究工作促进了我省实验动物质量的全面提高 ,也为实验... 详细信息

对广东省实验动物监测所从 1988年成立到 2 0 0 2年 14年间实验动物病理监测工作的发展和取得的成绩进行了总结 ,并对今后病理监测任务的实施和发展进行了展望。常规病理监测和相关研究工作促进了我省实验动物质量的全面提高 ,也为实验动物做为科研支撑条件提供了基本的数据保障。

关键词：实验动物病理监测疾病监控广东

MPTP诱导帕金森病小鼠亚急性与慢性模型的比较及评价

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中国组织工程研究 2022年第8期26卷 1247-1252页

作者：陈世坚李舸张钰关雅伦李雪娇刘书华李永超李韵峰高金风魏小月赵宇红广东药科大学广东省广州市510006 广东省实验动物重点实验室广东省实验动物监测所广东省广州市510663

背景:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型是较为广泛使用的帕金森病动物模型之一,可以部分反映帕金森病的发病过程和病理特征。目的:利用MPTP诱导建立小鼠亚急... 详细信息

背景:1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠模型是较为广泛使用的帕金森病动物模型之一,可以部分反映帕金森病的发病过程和病理特征。目的:利用MPTP诱导建立小鼠亚急性和慢性帕金森病模型,观察两种动物模型在行为学、组织病理学及相关蛋白水平变化上的异同及其与疾病临床症状的差异性。方法:C57BL/6J雄性小鼠40只随机分为4组:亚急性模型组小鼠腹腔注射MPTP,25 mg/kg,1次/d,连续注射7 d诱导亚急性模型;对照1组腹腔注射生理盐水;慢性模型组小鼠皮下注射MPTP(25 mg/kg)并腹腔注射丙磺舒(Probenecid,250 mg/kg),每间隔3.5 d注射1次,共10次诱导慢性模型;对照2组腹腔注射Probenecid溶剂。通过疲劳转棒实验与爬杆实验测试小鼠行为变化;利用免疫荧光染色检测脑黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞分布;采用免疫印迹法检测脑组织中酪氨酸羟化酶蛋白表达水平。研究所涉及的动物实验获得广东省实验动物监测所AAALAC认证机构动物实验动物使用与管理委员会(IACUC)批准[IACUC2020137]。结果与结论:①在亚急性小鼠模型中,疲劳转棒实验结果显示小鼠在加速转动的转棒上停留时间较对照1组显著降低(P实验中,小鼠从杆顶部运动到底部的时间较对照1组显著增加(P实验总时间与对照2组相比均无显著差异,但黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数量及酪氨酸羟化酶蛋白表达水平显著低于对照2组(P实验目的选择适当的动物模型开展。

关键词：帕金森病 MPTP 亚急性模型慢性模型酪氨酸羟化酶

非人灵长类单侧脑损伤模型运动感知行为的评价研究

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中国实验动物学报 2019年第5期27卷 577-582页

作者：黄忠强刘书华关雅伦李韵峰李雪娇黄韧张钰李舸广东省实验动物重点实验室广东省实验动物监测所

目的通过评价大脑感知和运动行为反应相关脑区功能改变,是脑科学研究中基于非人灵长类开展脑重大疾病临床转化研究的重要策略,对解析病生理情况下大脑功能环路调控机制具有重要的意义。方法选取7 ~ 9岁雄性食蟹猴,通过构建右侧颈内动脉... 详细信息

目的通过评价大脑感知和运动行为反应相关脑区功能改变,是脑科学研究中基于非人灵长类开展脑重大疾病临床转化研究的重要策略,对解析病生理情况下大脑功能环路调控机制具有重要的意义。方法选取7 ~ 9岁雄性食蟹猴,通过构建右侧颈内动脉注射MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导帕金森模型和左侧大脑中动脉闭塞所致缺血性脑卒中模型,利用自制的山和谷阶梯任务装置,评价大脑单侧脑区损伤对对侧感知和运动功能的影响。结果正常猴在连续10 d的山阶梯任务和谷阶梯任务中,左右手均能够达到满分;通过右侧颈内动脉注射MPTP构建猴帕金森模型后,PET-CT影像分析表明,3只实验猴均出现右侧大脑黑质区多巴胺能神经元受损,在山阶梯任务和谷阶梯任务中,2只实验猴出现左手运动功能显著损伤,空间识别能力基本正常,而1只实验猴不仅出现左手运动能力损伤,可能也存在空间识别能力异常或右手运动能力损伤;通过电凝法构建左侧大脑中动脉闭塞所致缺血性脑卒模型猴,MRI影响分析表明,实验猴右侧大脑出现典型的缺血梗死灶,在山阶梯任务和谷阶梯任务中,实验猴出现右手运动功能损伤,但空间识别能力基本正常。结论山和谷阶梯任务实验能有效地应用于实验猴单侧脑损伤动物模型的运动感知行为评价。

关键词：非人灵长类单侧脑损伤行为评价

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常用小鼠、大鼠肠道菌群比较研究

中国实验动物学报 2021年第6期29卷 777-784页

作者：黄树武闵凡贵王静罗银珠何丽芳陈梅玲潘金春广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室广州510663

目的对6种常用品系小鼠和大鼠肠道菌群进行比较研究。方法采集3家实验动物生产单位150只SPF级小鼠和大鼠的210份粪便或肠道内容物样本,依据细菌16S rDNA V3-V4区域通用引物对样本进行PCR扩增,并采用Illumina Hiseq 2500高通量测序平台... 详细信息

目的对6种常用品系小鼠和大鼠肠道菌群进行比较研究。方法采集3家实验动物生产单位150只SPF级小鼠和大鼠的210份粪便或肠道内容物样本,依据细菌16S rDNA V3-V4区域通用引物对样本进行PCR扩增,并采用Illumina Hiseq 2500高通量测序平台进行测序。基于动物来源、品种品系、性别、年龄和肠道分段(十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠)等因素,运用生物信息学分析方法对小鼠和大鼠肠道菌群结构组成多样性及差异性进行聚类分析。结果来源相同的实验小鼠或大鼠的肠道菌群间相似性最高,而实验小鼠与大鼠的肠道菌群因品种不同存在差异性。实验小鼠不同肠段的肠道菌群有一定差异性,其粪便样本与其结肠肠道菌群的相似性较高。相同饲养生存环境条件下,实验小鼠的年龄和肠道肠段是决定动物肠道菌群结构的主要内源性因素,而品系、性别对其肠道菌群的影响作用较小。结论本研究揭示了常用品系小鼠和大鼠肠道菌群的多样性与差异性,探讨宿主肠道菌群的相关影响因素,为肠道菌群与疾病关系的相关研究提供更多基础数据。

关键词：小鼠大鼠肠道菌群

一株小鼠诺如病毒的分离和鉴定及全基因组序列分析

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病毒学报 2014年第4期30卷 359-368页

作者：袁文张钰王静刘香梅赵维波黄韧广东省实验动物重点实验室广东省实验动物监测所广州510663

小鼠诺如病毒（Murine norovirus,MNV）属于杯状病毒科诺如病毒属成员,是2003年新发现的感染实验小鼠的病毒,也是目前已知的小鼠病毒中感染率最高的一种病毒。本研究利用RAW264.7细胞从MNV感染小鼠的盲肠内容物中进行病毒分离,采用逆转... 详细信息

小鼠诺如病毒（Murine norovirus,MNV）属于杯状病毒科诺如病毒属成员,是2003年新发现的感染实验小鼠的病毒,也是目前已知的小鼠病毒中感染率最高的一种病毒。本研究利用RAW264.7细胞从MNV感染小鼠的盲肠内容物中进行病毒分离,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法、病毒空斑试验、TCID50试验、电镜观察、间接免疫荧光试验和测序分析等方法对分离到的病毒进行鉴定,结果显示RAW264.7细胞接毒24~48h后出现明显的细胞病变,表现为细胞圆缩、变亮、聚集,最后大部分细胞死亡脱落。分离株在RAW264.7细胞上传代至第2~3代时可出现稳定的细胞病变。经病毒空斑试验获得一株纯化病毒,病毒滴度TCID50为105.25/0.1mL。电镜观察可见明显的病毒颗粒,颗粒呈球形,无囊膜,直径约30~35nm。分离株经鉴定后命名为MNV Guangzhou/K162/09/CHN。采用RT-PCR技术分段扩增基因组开放阅读框（ORF）,同时应用3′-RACE和5′-RACE技术扩增基因组的3′-UTR和5′-UTR,分别对扩增片段进行克隆和测序,经拼接后获得分离株全基因组序列。结果显示分离株基因组序列全长7 380个核苷酸（GenBank登录号：HQ317203）,将分离株全基因组序列与GenBank登录的国外参考毒株进行同源性比较,结果表明该毒株与其他MNV分离株核苷酸同源性为87.4%~89.7%。基于VP1蛋白核苷酸序列绘制MNV毒株系统发生进化树,结果表明该分离株与来自日本（S7-P2和S7-PP3）、美国（CR3和CR18）、韩国（K4）和德国（Berlin/04/06/DE和Berlin/05/06/DE）的毒株进化距离较近,同属一个进化分支。本研究是国内首次对MNV病毒进行分离鉴定和全基因组序列分析的报道。

关键词：小鼠诺如病毒(MNV) 病毒分离和鉴定遗传进化分析