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白细胞介素-22通过调节菌群和E-钙黏蛋白表达保护牙龈上皮屏障的研究

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中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 653-662页

作者：张驰张璐任俊贤李金雨谭灵屏高雳赵川江中山大学附属口腔医院牙周病科·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州510055 中山大学附属第三医院口腔科广州510630

目的研究白细胞介素-22(IL-22)在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法构建IL-22敲除小鼠,采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠(每组7只)口腔菌斑并提取DNA,... 详细信息

目的研究白细胞介素-22(IL-22)在牙周炎症环境下对牙龈上皮屏障的调控作用及其可能机制。方法构建IL-22敲除小鼠,采用混合菌液口腔灌洗法构建牙周炎模型。收集同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠(每组7只)口腔菌斑并提取DNA,建立牙周炎相关风险微生物数据库"PD-RiskMicroDB"并结合16S rRNA测序结果,测定两组小鼠口腔菌群变化和微生物功能的关系。通过改良胰酶消化法培养牙龈上皮细胞(GEC),以100μg/L IL-22、感染复数为的100牙龈卟啉单胞菌(Pg)分别或联合刺激GEC,实验分组为:对照组(细胞未加刺激)、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组,处理时间为3和12 h;采用细胞免疫荧光、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测各组细胞3 h后上皮屏障蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;通过异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)介导的上皮细胞通透性实验明确各组GEC 3和12 h细胞通透性的变化。RT-qPCR检测同窝生野生型牙周炎组及IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin表达水平。将15只C57BL/6野生型小鼠按随机数字表法随机分为对照组、牙周炎组和牙周炎+IL-22处理组,每组5只。RT-qPCR及免疫组织化学(IHC)染色法检测各组小鼠牙龈上皮E-cadherin的表达水平。结果16S rRNA测序结果显示,与同窝生野生型牙周炎组小鼠相比,IL-22敲除牙周炎组小鼠口腔菌群组成发生改变,其中与牙周组织侵袭相关的菌属丰度显著增高(线性判别分析得分为2.22,P=0.009)。体外细胞实验显示,Pg感染GEC 3 h后,Pg组GEC的细胞连接中断,Pg组E-cadherin荧光强度较对照组减弱,E-cadherin的mRNA(0.69±0.12)和蛋白(0.60±0.12)表达水平均显著低于对照组(分别为1.00±0.00、1.04±0.08)(P=0.043,P=0.003);而Pg+IL-22组的E-cadherin荧光强度较Pg组稍增强,Pg+IL-22组E-cadherin的mRNA(1.16±0.10)和蛋白(0.98±0.07)表达水平均显著高于Pg组(分别为0.69±0.12、0.60±0.12)(P=0.005,P=0.007);上皮通透性实验结果显示,Pg处理GEC 3 h后,对照组、IL-22组、Pg组及Pg+IL-22组各组间总体比较上皮屏障通透性差异无统计学意义(F=0.20,P=0.893);处理12 h后,相较于对照组(1.00±0.00),Pg组GEC上皮屏障通透性(1.39±0.15)显著增加(P=0.027),而Pg+IL-22组上皮屏障通透性(1.02±0.18)显著低于Pg组(P=0.034);体内RT-qPCR结果显示,IL-22敲除牙周炎组小鼠牙龈上皮E-cadherin的mRNA表达水平(0.32±0.21)显著低于同窝生野生型牙周炎组(1.01±0.01)(t=5.70,P=0.005)。RT-qPCR及IHC染色结果显示,牙周炎组小鼠牙龈上皮组织E-cadherin的mRNA表达水平(0.40±0.07)和E-cadherin阳性表达吸光度值(0.02±0.00)均显著低于对照组(分别为1.00±0.00、0.04±0.01)(P=0.005,P=0.006);牙周炎+IL-22处理组E-cadherin的mRNA表达水平(1.06±0.24)和E-cadherin阳性表达吸光度值(0.03±0.01)均显著高于牙周炎组(P=0.003,P=0.039)。结论IL-22可能通过调节口腔菌群的侵袭性以及宿主屏障蛋白表达,发挥其对炎症环境下牙龈上皮屏障的保护作用。

关键词：牙周炎白细胞介素22 菌群调控牙龈上皮屏障 E-钙黏蛋白

牙周炎对雌激素缺乏小鼠骨组织及肠道色氨酸代谢影响的研究

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中华口腔医学杂志 2024年第4期59卷 354-363页

作者：魏媛王南南王敏钱俊聂华葛叡扬廖文正闫福华南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院牙周病科南京大学口腔医学研究所南京210008

目的研究雌激素缺乏背景下,牙周炎对骨组织和肠道色氨酸代谢的影响。方法将32只雌性C57BL6/J小鼠根据随机数字表法随机分为4组(每组8只):假手术组(Sham组);假手术牙周炎组(Sham_Lig组);去卵巢组(Ovx组);去卵巢牙周炎组(Ovx_Lig组)。Sham... 详细信息

目的研究雌激素缺乏背景下,牙周炎对骨组织和肠道色氨酸代谢的影响。方法将32只雌性C57BL6/J小鼠根据随机数字表法随机分为4组(每组8只):假手术组(Sham组);假手术牙周炎组(Sham_Lig组);去卵巢组(Ovx组);去卵巢牙周炎组(Ovx_Lig组)。Sham_Lig组与Ovx_Lig组小鼠术后4周,以5-0号丝线结扎双侧上颌第二磨牙诱导牙周炎。丝线结扎8周后对4组小鼠实施安乐死,取材小鼠股骨、胫骨、下颌骨及颅骨样本行显微CT(micro-CT)扫描,并检测样本骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(***)和骨小梁分离度(***)。收集4组小鼠盲肠内容物,利用16S rRNA基因测序检测肠道菌群的组成,通过液相色谱-质谱法检测肠道中的色氨酸及其代谢物的含量,并对肠道菌群相对丰度水平与色氨酸代谢物含量行相关性分析。结果Ovx_Lig组小鼠股骨骨密度[(82.23±3.97)mg/cm^(3)]、BV/TV[(9.25±1.37)%]和***[(70.95±5.70)μm]均显著低于Ovx组[分别为(96.30±3.76)mg/cm^(3)(P=0.004)、(14.45±1.55)%(P=0.022)和(87.58±8.02)μm(P<0.001)]。肠道菌群基于Bray-Curtis距离的β多样性分析显示,Ovx_Lig组小鼠肠道菌群与Ovx组分群明显。线性判别分析效应量显示,另枝菌属为Ovx_Lig组显著差异菌属。Ovx_Lig组另枝菌属的相对丰度[(0.42±0.14)%]显著高于Ovx组[(0.17±0.05)%](t=4.45,P<0.001)。色氨酸代谢分析显示,Ovx_Lig组小鼠肠道内犬尿酸的含量[(531.12±158.60)ng/g]显著高于Ovx组[(400.42±57.96)ng/g](t=2.19,P=0.046),吲哚-3-甲醛的含量[(383.37±144.06)ng/g]显著低于Ovx组[(701.72±141.93)ng/g](t=4.45,P<0.001)。相关性分析显示另枝菌属的相对丰度与犬尿酸呈正相关(r=0.32,P=0.088),与吲哚-3-甲醛呈负相关(r=-0.32,P=0.088)。结论小鼠雌激素缺乏背景下,牙周炎可导致小鼠股骨骨质破坏,其机制可能与肠道另枝菌属及色氨酸代谢物犬尿酸和吲哚-3-甲醛有关。

关键词：牙周炎骨质疏松,绝经后肠道菌群骨代谢色氨酸代谢

生物钟蛋白Bmal1对实验性牙周炎相关肾损伤的影响

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华西口腔医学杂志 2024年第2期42卷 163-171页

作者：马浩楠李琼商雅琦辛禧瑞刘歆婵武洲于维先吉林大学口腔医院牙周病科长春130021 吉林大学口腔医院种植科长春130021 日本九州大学齿学研究院日本福冈812-8582 吉林大学口腔医院老年口腔科长春130021 吉林省口腔生物医学国际联合研究中心长春130021

目的通过建立大鼠牙周炎模型,探讨生物钟蛋白Bmal1对慢性牙周炎相关肾损伤的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和牙周炎组,每组6只。采用正畸结扎丝对牙周炎组大鼠双侧上颌第一磨牙进行结扎处理,对照组大鼠不进行任何干预... 详细信息

目的通过建立大鼠牙周炎模型,探讨生物钟蛋白Bmal1对慢性牙周炎相关肾损伤的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和牙周炎组,每组6只。采用正畸结扎丝对牙周炎组大鼠双侧上颌第一磨牙进行结扎处理,对照组大鼠不进行任何干预措施。8周后,检测2组大鼠的牙周临床指标,包括牙周探诊深度、牙龈出血指数和牙齿松动度。采用Micro-CT对大鼠上颌骨进行扫描和三维图像重建,评估牙槽骨吸收情况。采用苏木精-伊红(HE)和过碘酸雪夫(PAS)染色对牙周组织和肾组织进行病理学观察。采用生化试剂盒检测肾脏功能指标肌酐、白蛋白、血尿素氮的水平,以及氧化应激指标超氧化物歧化酶、谷胱甘肽和丙二醛的水平。MitoSOX red染色检测肾组织内活性氧(ROS)含量。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫组织化学染色检测大鼠肾组织中Bmal1、核因子-E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的基因及蛋白表达水平。结果与对照组相比,牙周组织Micro-CT及HE染色结果显示,牙周炎组上颌第一磨牙区出现明显的骨吸收和附着丧失;肾组织HE及PAS染色结果表明,牙周炎组大鼠肾组织有显著的组织病理损伤;肾功能和氧化应激指标结果显示,牙周炎组的氧化应激水平出现异常而肾功能指标无明显异常;MitoSOX red结果显示,牙周炎组肾组织内ROS含量升高;RT-qPCR和免疫组织化学结果显示,牙周炎组肾组织内Bmal1、Nrf2和HO-1表达水平降低。结论生物钟蛋白Bmal1在牙周炎大鼠肾脏的氧化损伤过程中发挥重要作用。

关键词：牙周炎肾损伤昼夜节律氧化应激生物钟蛋白Bmal1

重度牙周炎患者种植体与天然牙相互影响的回顾性研究

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中华口腔医学杂志 2024年第4期59卷 336-343页

作者：杨泽邓禹苗磊李俊歌李琛潘亚萍中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙周病科、辽宁省口腔疾病重点实验室沈阳110002

目的从改善天然牙牙周健康的角度,评价规律复查的重度牙周炎患者后牙区种植修复治疗对天然牙的影响,以及天然牙牙周状态对种植体的影响,为临床提供参考。方法收集2014年6月至2023年6月于中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙周病科就... 详细信息

目的从改善天然牙牙周健康的角度,评价规律复查的重度牙周炎患者后牙区种植修复治疗对天然牙的影响,以及天然牙牙周状态对种植体的影响,为临床提供参考。方法收集2014年6月至2023年6月于中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙周病科就诊,并完成后牙单冠种植修复治疗的重度牙周炎者53例,其中男性16例,女性37例,年龄(52.2±8.0)岁,种植体共136枚,缺牙区相邻天然牙135颗。回顾性比较种植前后口内余留天然牙的探诊深度(PD)、探诊出血(BOP)和松动度变化,并通过单因素和多因素分析探讨天然牙对种植体PD、BOP和末次复查时边缘骨丧失(MBL)的可能影响因素。结果53例患者的随访时间为(44.5±14.1)个月,最长复查间隔为(8.3±2.7)个月。缺牙区相邻天然牙PD由种植前的4.3(3.6,4.6)mm显著改善至末次复查时的3.6(3.2,4.0)mm(P0.05),松动度≥Ⅱ度的牙齿数量由1.0(0.0,1.8)颗显著降为1.0(0.0,1.0)颗(P<0.05)。结论规律复查的前提下,重度牙周炎患者后牙区种植修复治疗有助于改善余留天然牙的PD、BOP和松动度,同时初诊牙周炎分期分级可影响种植体的PD和BOP。

关键词：牙周炎牙种植牙周基础治疗支持性牙周照护口腔健康牙列缺损

线粒体解偶联蛋白2在大鼠实验性牙周炎相关肾损伤中的作用研究

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华西口腔医学杂志 2024年第4期42卷 502-511页

作者：李琼马浩楠商雅琦辛禧瑞刘歆婵武洲于维先吉林大学口腔医院牙周病科长春130021 吉林大学口腔医院种植科长春130021 日本九州大学齿学研究院日本福冈812-8582 吉林大学口腔医院老年口腔科长春130021 吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室长春130021

目的探索线粒体解偶联蛋白2(UCP2)在结扎诱导的实验性牙周炎相关肾损伤中的变化,研究UCP2对牙周炎诱导肾损伤的影响。方法选取12只Wistar雄性大鼠随机分为2组:对照组和牙周炎组。使用0.2 mm正畸结扎丝结扎在大鼠上颌第一磨牙的牙颈部,... 详细信息

目的探索线粒体解偶联蛋白2(UCP2)在结扎诱导的实验性牙周炎相关肾损伤中的变化,研究UCP2对牙周炎诱导肾损伤的影响。方法选取12只Wistar雄性大鼠随机分为2组:对照组和牙周炎组。使用0.2 mm正畸结扎丝结扎在大鼠上颌第一磨牙的牙颈部,建立牙周炎模型。8周后观察2组大鼠口内情况,检测牙周临床指标牙龈出血指数(BI)、牙周探诊深度(PD)、牙齿松动度(TM)。收集大鼠上颌骨并扫描Micro CT,观察牙槽骨吸收情况,记录组织矿物质密度(TMD)、骨矿物质密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(***)、骨小梁骨分离度(***)等参数,测量上颌第一磨牙釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离(CEJ-ABC)。冻存大鼠肾组织以检测氧化应激指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD),并进行实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)观察UCP2、核因子红系2相关因子2(Nrf2)抗体、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)基因表达情况。使用大鼠牙龈组织进行免疫组织化学染色,观察牙龈组织UCP2表达情况。使用大鼠固定的肾组织进行苏木精-伊红(HE)、过碘酸雪夫(PAS)、MitoSOX Red、JC-1、免疫组织化学染色,观察大鼠肾组织病理学表现、活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位水平及UCP2、Nrf2、PGC-1α蛋白表达情况。收集大鼠血清检测肾脏功能指标血尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、白蛋白(Alb)的表达。结果相较于对照组,牙周炎组大鼠第一磨牙周围的牙龈组织发红肿胀,质地松软,临床检查探诊出血且PD增加,牙齿松动,牙槽骨吸收,TMD、BMD、BV/TV、***指数降低,***指数及CEJ-ABC增加,牙龈UCP2蛋白表达升高。相较于对照组,牙周炎组大鼠肾组织内MDA、ROS水平上升,MMP、GSH和SOD水平下降,UCP2基因及蛋白表达升高,Nrf2、PGC-1α基因及蛋白表达下降。肾脏功能指标BUN、Cre、Alb两组差异无统计学意义。结论UCP2可通过氧化应激在牙周炎诱导的肾损伤中发挥作用。

关键词：牙周炎肾损伤线粒体解偶联蛋白2

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改良膜龈手术在牙龈退缩治疗中的应用

口腔疾病防治 2024年第1期32卷 2-11页

作者：谭葆春李凌俊闫福华南京大学医学院附属口腔医院·南京市口腔医院牙周病科江苏南京210008

随着人们对美观需求的日益提升,治疗牙龈退缩已经成为牙周科临床常见的患者诉求。临床上主要通过手术的方式治疗牙龈退缩,常见的手术包括游离龈移植术、带蒂瓣技术和双层瓣技术,适应证选择恰当时,通常可以获得满意的效果,但上述术式仍... 详细信息

随着人们对美观需求的日益提升,治疗牙龈退缩已经成为牙周科临床常见的患者诉求。临床上主要通过手术的方式治疗牙龈退缩,常见的手术包括游离龈移植术、带蒂瓣技术和双层瓣技术,适应证选择恰当时,通常可以获得满意的效果,但上述术式仍存在一定的不足,如根面覆盖效果不理想等。近年来,学者们针对这些不足陆续提出了一些改良方案来治疗不同程度的牙龈退缩,如改良游离龈移植术,即包含龈乳头及游离龈的牙龈单元移植,可改善受体区血供,提高根面覆盖效果,其针对轻度退缩的部位可获得良好的根面覆盖,同时可增宽角化龈和加深前庭沟,但应用于上颌美学区时可能存在术后牙龈颜色、形态不协调,美学效果欠佳的问题。牙龈瓣采用半厚-全厚-半厚的技术进行制备的改良冠向复位瓣,用于多颗牙牙龈退缩时,以退缩最严重牙为中心的改良切口设计的冠向复位信封瓣技术,可提高根面覆盖效果。不离断龈乳头,使龈瓣形成隧道,以容纳移植物的隧道技术及各种改良的隧道技术,可以有效减少术区的组织损伤,并促进创面愈合。本文通过对各类术式的阐述和文献回顾,总结改良膜龈手术治疗牙龈退缩的临床应用及注意事项,并提出牙龈退缩的治疗方案建议,同时强调牙龈退缩的对因治疗,以达到稳定的根面覆盖效果。创伤小、疗效稳定的手术方式和治疗方法是今后膜龈手术的发展方向。

关键词：牙龈退缩膜龈手术牙龈单元移植改良冠向复位瓣冠向复位信封瓣改良冠向复位隧道技术前庭切口骨膜下隧道入路技术改良微创隧道技术根面覆盖疗效观察

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非综合征型多数恒牙先天缺失的临床表型研究

华西口腔医学杂志 2024年第1期42卷 89-96页

作者：束丽红唐子春汪海霞曹立李虎苏州口腔医院儿童口腔科苏州215000

目的研究和分析非综合征型多数恒牙先天缺失患者的牙齿缺失特征,为该类患者的临床诊断、治疗设计提供参考。方法收集178例非综合征型多数恒牙先天缺失病例,根据病史、口腔检查和曲面体层片等资料,研究分析牙齿缺失特征,应用SPSS 24.0... 详细信息

目的研究和分析非综合征型多数恒牙先天缺失患者的牙齿缺失特征,为该类患者的临床诊断、治疗设计提供参考。方法收集178例非综合征型多数恒牙先天缺失病例,根据病史、口腔检查和曲面体层片等资料,研究分析牙齿缺失特征,应用SPSS 24.0统计软件对所得数据进行统计学分析。结果缺牙数目在性别、左右侧间无明显差异,上颌缺牙数明显高于下颌(P科合作的治疗方案。

关键词：非综合征型多数恒牙先天缺失牙齿发育异常牙齿缺失模式曲面体层片统计分析

瓷材料种类及厚度对椅旁可切削全瓷冠遮色能力的影响

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华西口腔医学杂志 2024年第1期42卷 56-61页

作者：李思诺张璐瑶梁珊珊刘玉强邢文忠湖北省妇幼保健院口腔科武汉430070 大连市口腔医院·口腔修复科大连116021 武汉大学口腔医院口腔修复科武汉430070 大连市口腔医院·修复工艺科大连116021

目的分析瓷材料种类及厚度对椅旁可切削全瓷冠透光性和遮色能力的影响。方法选择3类6种A2色调椅旁可切削陶瓷材料(IPS *** CAD的HT型、MT型、LT型,IPS Empress的LT型和VITA Suprinity的HT型、T型),制备1.0、1.5、2.0 mm厚度的片状试样(n... 详细信息

目的分析瓷材料种类及厚度对椅旁可切削全瓷冠透光性和遮色能力的影响。方法选择3类6种A2色调椅旁可切削陶瓷材料(IPS *** CAD的HT型、MT型、LT型,IPS Empress的LT型和VITA Suprinity的HT型、T型),制备1.0、1.5、2.0 mm厚度的片状试样(n=10)。测色仪分别测量试样在黑、白瓷板和4种色调树脂基底(A2、A4、B3和C4色调)下的色度参数,计算试样的透光度(TP)值以及试样在A4、B3和C4色调基底与A2色调基底(对照组)之间的色差(ΔE)值。双因素方差分析评价瓷材料种类及厚度对试样TP值的影响,三因素方差分析评价瓷材料种类、试样厚度和基底色调对试样ΔE值的影响,Tukey HSD检验多重比较组间差异(α=0.05)。结果瓷材料TP值在不同材料和厚度之间的差异有统计学意义(P3.3)。结论椅旁可切削全瓷冠遮色能力受到瓷材料种类和厚度的影响,小于2.0 mm厚度的瓷材料不能遮盖灰色基牙颜色。

关键词：椅旁可切削陶瓷全瓷冠遮色能力树脂背景色差

碱热处理纯钛表面纳米改性后对成骨细胞早期黏附生长的影响

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中国组织工程研究 2024年第15期28卷 2302-2306页

作者：高岩林曦刘影南方医科大学口腔医院(口腔医学院) 种植中心广东省广州市510280 南方医科大学口腔医院(口腔医学院)牙体牙髓科广东省广州市510280

背景:纯钛表面纳米结构改性是钛种植体表面处理研究的热点领域。目的:评价碱热处理纯钛表面纳米改性后对成骨细胞早期黏附生长的影响。方法:取直径15 mm、厚度1.5 mm的四级纯钛片,分3组处理:光滑处理组经250目、800目、1500目碳化硅砂... 详细信息

背景:纯钛表面纳米结构改性是钛种植体表面处理研究的热点领域。目的:评价碱热处理纯钛表面纳米改性后对成骨细胞早期黏附生长的影响。方法:取直径15 mm、厚度1.5 mm的四级纯钛片,分3组处理:光滑处理组经250目、800目、1500目碳化硅砂纸逐级打磨抛光;喷砂酸蚀处理组在0.45 MPa气压下用100μm的Al2O3颗粒对光滑处理后的钛片进行喷砂处理,然后进行酸蚀处理;碱热处理组将经过光滑处理的钛片置于反应釜内,加入10 mol/L NaOH溶液浸没钛片,置于100℃烘箱中加热12 h。检测3组钛片的表面形貌、粗糙度及亲水性。将成骨细胞MG63分别接种于3组钛片表面,免疫荧光染色观察细胞黏附情况。结果与结论:①扫描电镜显示,光滑处理组钛片表面带有均匀的划痕,喷砂酸蚀处理组钛片表面凹凸不平,碱热处理组钛片表面形成均匀一致的纳米级三维孔洞形貌;喷砂酸蚀处理组、碱热处理组钛片的粗糙度值大于光滑组(P<0.05),水接触角低于光滑处理组(P<0.05);②MG63细胞接种3,6 h后的免疫荧光染色显示,喷砂酸蚀处理组、碱热处理组钛片表面的黏附细胞数量高于光滑处理组(P<0.05);接种12 h后的免疫荧光染色显示,相对于光滑处理组,喷砂酸蚀处理组和碱热处理组钛片表面的细胞肌动蛋白骨架更加伸展,大部分细胞伸出较粗壮的伪足,利于后续细胞间信号传导和细胞间相互作用;③结果表明,碱热处理可在钛片表面制备出具有一定生物活性的纳米结构,有利于成骨细胞的早期黏附。

关键词：钛片纳米结构碱热处理喷砂酸蚀成骨细胞生物材料