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P450基因在氯虫苯甲酰胺不同抗性品系小菜蛾中的表达及功能分析

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中国农业科学 2022年第13期55卷 2562-2571页

作者：尹飞李振宇 SAMINA Shabbir 林庆胜广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】以十字花科蔬菜害虫小菜蛾（Plutella xylostella）为研究对象，筛选参与小菜蛾代谢氯虫苯甲酰胺的主要细胞色素P450解毒基因，为阐明不同抗性水平小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性机理提供依据。【方法】利用叶片药膜法测定不同小... 详细信息

【目的】以十字花科蔬菜害虫小菜蛾（Plutella xylostella）为研究对象，筛选参与小菜蛾代谢氯虫苯甲酰胺的主要细胞色素P450解毒基因，为阐明不同抗性水平小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性机理提供依据。【方法】利用叶片药膜法测定不同小菜蛾种群3龄幼虫对氯虫苯甲酰的抗性水平，通过转录组测序、insectbase数据库和小菜蛾基因组数据库筛选得到52个细胞色素P450基因。应用MEGA5.10软件对52个细胞色素P450基因进行进化分析，获得与抗药性密切相关的CYP3和CYP4家族P450基因。利用实时荧光定量PCR方法分析目的基因在小菜蛾室内筛选种群（HZY）和田间抗性种群惠州种群（HZ）、连州种群（LZ）、东升种群（DS）、钟落潭种群（ZLT）中的表达量，选用RNA干扰技术，采用注射法，验证在抗性种群中显著上调表达的CYP6BF1V4在小菜蛾抗氯虫苯甲酰胺中的功能。【结果】抗药性测定结果表明，LZ和HZ小菜蛾种群为中等水平抗性，ZLT、DS和HZY小菜蛾种群为高水平抗性。对52个细胞色素P450基因的系统发育树分析发现，小菜蛾拥有10个CYP4家族基因，28个CYP3家族基因，其中2个CYP4家族基因在HZ和HZY种群中的表达量显著高于敏感种群，4个CYP3家族基因表达量与小菜蛾抗性呈正相关，8个基因在中等水平抗性小菜蛾体内的表达量高于在高水平抗性小菜蛾体内的表达量。对田间种群进一步筛选得到6个与小菜蛾抗氯虫苯甲酰胺密切相关，在不同抗性种群中均上调表达的细胞色素P450基因，其中4个为CYP6家族基因（CYP6BF1V4、CYP6BF1V3、CYP6f1和CYP6B6）,2个为CYP9家族基因（CYP9G2.1和CYP9G2.2），以CYP6BF1V4的表达量最高，其在抗性种群中的表达量是在敏感种群中表达量的3.5—6.3倍。RNA干扰结果显示，沉默CYP6BF1V4能够显著提高小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感性。【结论】CYP6BF1V4、CYP6BF1V3、CYP6f1、CYP6B6、CYP9G2.1和CYP9G2.2可能在小菜蛾体内协同调控多功能氧化酶的表达，从而加快小菜蛾代谢氯虫苯甲酰胺的速度，提高小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性。

关键词：小菜蛾抗药性氯虫苯甲酰胺 CYP6 CYP9 代谢活性 RNA干扰

广东省侵染美香占2号的稻瘟病菌致病性及无毒基因变异分析

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中国农业科学 2022年第7期55卷 1346-1358页

作者：汪文娟苏菁陈深杨健源陈凯玲冯爱卿汪聪颖封金奇陈炳朱小源广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】分析侵染广东稻区优质品种美香占2号稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）的致病性及无毒基因变异特征，为美香占2号在不同稻区的合理布局提供参考依据。【方法】利用9个抗稻瘟病单基因系，对稻瘟病菌单孢分离菌株进行致病性测定；... 详细信息

【目的】分析侵染广东稻区优质品种美香占2号稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）的致病性及无毒基因变异特征，为美香占2号在不同稻区的合理布局提供参考依据。【方法】利用9个抗稻瘟病单基因系，对稻瘟病菌单孢分离菌株进行致病性测定；并利用8个稻瘟病菌已克隆无毒基因的功能性分子标记对2013—2018年不同年份、不同稻区采集的稻瘟病菌单孢分离菌株的DNA进行PCR扩增，通过琼脂糖凝胶电泳检测分析，选取不同带型和不同年份代表性菌株的相应无毒基因全长或CDS区域的PCR片段进行测序。测序结果与相应无毒基因的参考序列进行碱基序列的比较分析；并利用相应的水稻抗稻瘟病单基因系，对无毒基因不同变异类型的稻瘟病菌菌株进行致病性测定。根据稻瘟病菌两种交配型MAT1-1和MAT1-2型分子标记，检测侵染美香占2号的稻瘟病菌可能存在的交配型。【结果】致病性分析结果显示，2013—2018年采集自美香占2号品种的52个稻瘟病菌菌株对其中的4个单基因系IRBL9-W(Pi9)、IRBLzt-T(Piz-t)、NIL-e1(Pi50)和IRBLkh-K3(Pikh)均表现无毒；然而，侵染单基因系IRBLz-Fu(Piz)、IRBLkp-K60(Pikp)和IRBLi-F5(Pii)的有毒菌株频率维持在57%以上，且侵染单基因系IRBLz-Fu(Piz)的有毒菌株频率在不同年份间呈现显著性差异，表明美香占2号种植区田间稻瘟病菌群体中存在较高频率的avrPiz、avrPikp和avrPii毒性菌株。根据8个已克隆无毒基因的功能性分子标记检测，在52个供试菌株中均可检测到无毒基因AvrPiz-t、AvrPi9和AvrPik-CDE，但扩增不到Avr1-CO39、AvrPia和AvrPii，仅有4个菌株可检测到无毒基因AvrPita，有3个菌株可检测到无毒基因AvrPik-ABF。所测序7个菌株的AvrPi9编码区序列和AvrPiz-t包含启动子及编码区的序列与其各自无毒基因的序列完全一致；所测序7个菌株的AvrPik-CDE包含启动子及编码区的序列中，有4个菌株的序列与AvrPik无毒基因序列完全一致，有3个菌株在编码区存在CTTT连续4个碱基的插入。在来自广东不同稻区美香占2号的分离菌株群体中，共发现了4种不同的AvrPib无毒基因扩增模式（扩增预期大小的条带、有转座子Pot3插入的条带、有转座子Mg-SINE插入的条带和无扩增条带），共呈现5种不同的单倍型（AvrPib-AP1-1、AvrPib-AP1-2、avrPib-AP2、avrPib-AP3和avrPib-AP2+avrPib-AP3）,AvrPib-AP1-1和AvrPib-AP1-2是无毒型，而avrPib-AP2和avrPib-AP3则在基因的启动子区域分别存在Pot3或Mg-SINE的插入而呈现毒性型，在1个菌株中检测到avrPib-AP2+avrPib-AP3双单倍型。交配型分子标记分析结果表明，检测的52个稻瘟病菌菌株均为MAT1-2交配型，其中有2个菌株GD18-009和GD18-185采集于广东韶关稻区，同时可检测到MAT1-1交配型，具有双交配型。【结论】在广东美香占2号品种上分离的稻瘟病菌普遍含有无毒基因AvrPiz-t、AvrPi9、AvrPi50和AvrPikh,AvrPib的变异类型丰富多样，该研究结果可为优质品种美香占2号的科学布局及其种植区域其他不同抗病基因型品种的合理选择提供参考。

关键词：美香占2号稻瘟病菌无毒基因型交配型

中国水稻主产区白叶枯病菌致病型分析及近等基因系鉴别寄主的构建

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中国农业科学 2022年第21期55卷 4175-4195页

作者：冯爱卿汪聪颖张梅英陈炳封金奇陈凯玲汪文娟杨健源苏菁曾列先陈深朱小源广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】分析中国不同稻区白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）致病型，建立近等基因系鉴别寄主，为白叶枯病菌群体结构田间实时准确监测、抗性品种应用以及抗病育种提供科学依据。【方法】利用中国鉴别寄主、IR24以及15个抗... 详细信息

【目的】分析中国不同稻区白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）致病型，建立近等基因系鉴别寄主，为白叶枯病菌群体结构田间实时准确监测、抗性品种应用以及抗病育种提供科学依据。【方法】利用中国鉴别寄主、IR24以及15个抗白叶枯病近等基因系等共21个鉴别寄主，采用人工剪叶接种方法，对2018—2021年采自广东、广西、海南、浙江、湖南、辽宁、云南共7个省（自治区）的954个单菌落分离菌株进行致病型测定，探明白叶枯病菌致病型种类、分布及毒性分化；基于测试菌株与15个近等基因系及IR24的抗感互作，应用主成分因子分析法，开展近等基因系与病菌互作的变量因子分析，构建白叶枯病菌致病型近等基因系鉴别寄主；基于抗病基因与测试菌株的抗感反应，分析抗病基因聚合效应。【结果】954个测试菌株在中国鉴别寄主上鉴定出11个致病型，包括SRRRR（Ⅰ）、SSRRR（Ⅱ）、SSSRR（Ⅲ）、SSSSR（Ⅳ）、SSRRS（V）、SRSRR（Ⅵ）、SSSSS（Ⅸ）、SSSRS（新型1）、SRSRS（新型2）、SRSSS（新型3）以及SSRSS（新型4），占测试菌株的比率分别为11.53%、4.82%、7.34%、6.18%、7.23%、1.05%、59.96%、1.57%、0.10%、0.10%、0.10%。Ⅸ型菌作为致病性最广的强毒菌系已上升为华南和长江中下游湖南和浙江稻区的优势致病型，西南稻区的云南以Ⅳ型菌为主，东北稻区的辽宁以I型菌为主。15个水稻抗白叶枯病近等基因系对954个菌株的抗感性分析结果表明，测试的15个近等基因系可分为5种类型，第Ⅰ类为高感基因系，包括IRBB1、IRBB2、IRBB10、IRBB11、IRBB4；第Ⅱ类为中感基因系，包括IRBB3、IRBB203、IRBB14；第Ⅲ类为中抗基因系，包括IRBB8、IRBB13；第Ⅳ类为抗病基因系，有IRBB21；第Ⅴ类为高抗基因系，包括IRBB5、IRBB7、CBB23、GDBB23；测试菌株中，出现可侵染抗病基因xa5的有42个、Xa7的有34个、Xa23的有31个。对以白叶枯病近等基因系为主的16个品种（系）与954个菌株组成的抗感互作变量数据矩阵进行因子分析，以解释总变量>85.0%为界，提取出8个主成分因子，组建了以近等基因系为主的10个品种(系)组成白叶枯病菌近等基因系鉴别寄主，按其对变量方差贡献大小，这些寄主分别为IRBB10(Xa10)、IRBB4(Xa4)、GDBB23(Xa23)、IRBB5(xa5)、IRBB7(Xa7)、IRBB21(Xa21)、IR24(Xa18)、IRBB13(xa13)、IRBB3(Xa3)、金刚30；新鉴别寄主可将954个测试菌株划分为55个致病型，对测试稻区的白叶枯病菌菌株表现出较好的鉴别力。基因聚合联合抗性分析表明，不同抗病基因聚合对病菌的抗性频率有一定的提升，不同抗病基因对测试菌株的抗性具有一定的互补性。【结论】监测稻区的白叶枯病菌系趋向多样化，毒性分化明显，强毒菌系Ⅸ型菌在部分稻区已上升为优势致病型，侵染xa5、Xa7及Xa23等广谱抗性基因的菌株有上升趋势；抗病基因聚合可拓宽品种对病原菌系的抗性谱，是培育广谱抗性品种的有效途径；近等基因系鉴别寄主的建立与应用可为白叶枯病发生流行的精准监测以及田间实时预警提供技术支撑。

关键词：水稻白叶枯病菌致病型近等基因系鉴别寄主抗性

侵染萝卜的油菜花叶病毒广东分离物分子特征及其致病性分析

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中国农业科学 2022年第14期55卷 2752-2761页

作者：李正刚汤亚飞佘小漫于琳蓝国兵何自福广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】病毒病是萝卜（Raphanus sativus）生产上的主要病害之一，严重危害萝卜生产安全及产业发展。本研究旨在鉴定侵染广东萝卜的病毒种类，探究侵染萝卜的油菜花叶病毒（youcai mosaic virus,YoMV）分子特征及致病性，为萝卜病毒病... 详细信息

【目的】病毒病是萝卜（Raphanus sativus）生产上的主要病害之一，严重危害萝卜生产安全及产业发展。本研究旨在鉴定侵染广东萝卜的病毒种类，探究侵染萝卜的油菜花叶病毒（youcai mosaic virus,YoMV）分子特征及致病性，为萝卜病毒病的防控提供科学依据。【方法】从广东省惠州市萝卜种植基地采集了3个疑似病毒病侵染的萝卜病样及1个无症状样品，提取样品总RNA，利用小RNA深度测序初步探明病毒种类，然后根据测序结果设计病毒特异引物进行RT-PCR验证。应用分段克隆方法扩增病原病毒YoMV基因组1—3 405 nt片段和3 194—6 304 nt片段，然后通过同源重组克隆到p CB301双元载体上，得到YoMV-GD分离物基因组全长序列，同时构建该病毒分离物的侵染性克隆。利用MEGA7软件对YoMV-GD及其他分离物全长核苷酸序列进行系统进化分析。通过侵染性克隆人工注射接种本生烟和普通烟，检验pCB301-YoMV-GD的侵染性，然后再注射接种萝卜和菜心，测定YoMV-GD分离物的致病性。【结果】侵染广东萝卜的病毒包含萝卜隐状病毒3(Raphanus sativus cryptic virus 3,RsCV3)、萝卜黄病毒1(Raphanus sativus chrysovirus 1,RasCV1)、芜菁花叶病毒（turnip mosaic virus,TuMV）、YoMV 4种；YoMV-GD分离物全长序列为6 304 nt，编码4个蛋白，分别为124.7 kD复制相关蛋白、183 kD复制酶、30 kD运动蛋白MP、17.7 kD外壳蛋白CP，与YoMV英国分离物（GenBank登录号：AY318866）核苷酸相似性最高，为99.18%;YoMV-GD分离物与英国、德国及我国上海、重庆分离物的亲缘关系较近；构建的侵染性克隆pCB301-YoMV-GD可以系统侵染本生烟和普通烟，引起严重的坏死、枯斑等症状，具有较强的侵染性；YoMV-GD可以系统侵染萝卜和菜心，引起轻微的黄化和花叶等症状，致病力较弱。【结论】侵染广东萝卜的病毒包含RsCV3、RasCV1、TuMV和YoMV，且以复合侵染形式存在；YoMV遗传进化并没有明显的地域性；YoMV-GD对烟草致病力较强，而对萝卜和菜心致病力较弱。

关键词：萝卜病毒病油菜花叶病毒分子特征侵染性克隆致病性

MBF2转录调控小菜蛾谷胱甘肽S-转移酶代谢氯虫苯甲酰胺的功能

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中国农业科学 2023年第4期56卷 665-673页

作者：葛天成尹飞胡琼波彭争科李振宇广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室华南农业大学植物保护学院

【目的】探究转录调控因子MBF2 (multiprotein bridging factor 2)调控小菜蛾（Plutella xylostella）体内谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase,GST）的功能，及其在小菜蛾抗氯虫苯甲酰胺中的作用，为阐明小菜蛾对氯虫苯甲酰... 详细信息

【目的】探究转录调控因子MBF2 (multiprotein bridging factor 2)调控小菜蛾（Plutella xylostella）体内谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase,GST）的功能，及其在小菜蛾抗氯虫苯甲酰胺中的作用，为阐明小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的解毒代谢机制提供理论依据。【方法】采用浸叶法测定敏感（SS）、广东连州（LZ）、云南通海（TH）3个小菜蛾种群对氯虫苯甲酰胺的抗性水平，酶动力学法测定3个种群的GST活性；使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析MBF2在不同抗性种群小菜蛾中的表达差异；采用氯虫苯甲酰胺LC50诱导12 h，分析其对小菜蛾MBF2的诱导表达作用；应用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术研究MBF2对GST基因的调控作用，并测定沉默MBF2后小菜蛾的GST活性；结合沉默后小菜蛾对药剂的敏感性变化，验证MBF2在小菜蛾抗氯虫苯甲酰胺中的作用。【结果】两个抗性种群（TH和LZ）相较SS种群分别达到了中抗及高抗的水平，TH和LZ抗性倍数分别为54.27和289.58;TH和LZ小菜蛾种群体内GST活性均显著高于SS种群；与SS种群相比，MBF2在抗性种群小菜蛾体内显著上调表达，在中抗和高抗种群中的表达量分别为敏感种群4.6和9.4倍。小菜蛾短期暴露于LC50浓度氯虫苯甲酰胺中，敏感、中抗及高抗种群均在8 h内MBF2表达量显著上调，最高表达量升至对照的10倍。沉默MBF2 24 h，小菜蛾9个GST基因表达量显著降低，其中GSTZ1及GSTU1的下调量均达90%以上；处理组（ds MBF2）GST活性相较于阴性对照（ds GFP）降低57.76%;75 mg·L-1氯虫苯甲酰胺处理后，处理组较对照组死亡率提升23.34%。【结论】MBF2可能通过调控GST的转录表达，提高小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的代谢能力，从而参与小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的解毒作用。研究结果可为小菜蛾抗药性机理的深入解析及新型药剂的研发提供依据。

关键词：小菜蛾转录调控谷胱甘肽S-转移酶氯虫苯甲酰胺抗药性 MBF2

水稻细菌性条斑病抗性新品系的创制及其农艺性状分析

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中国水稻科学 2023年第6期37卷 587-596页

作者：冯爱卿汪聪颖苏菁封金奇陈凯玲林晓鹏陈炳梁美玲杨健源朱小源陈深广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

【目的】创制水稻细菌性条斑病抗性新品系,为进一步培育抗细菌性条斑病水稻新品种提供核心种质材料。【方法】通过多代回交、自交,结合分子标辅助选择技术和GSR40K芯片检测,以来自孟加拉国含抗细菌性条斑病Xo2基因的稻种资源BHADOIA 30... 详细信息

【目的】创制水稻细菌性条斑病抗性新品系,为进一步培育抗细菌性条斑病水稻新品种提供核心种质材料。【方法】通过多代回交、自交,结合分子标辅助选择技术和GSR40K芯片检测,以来自孟加拉国含抗细菌性条斑病Xo2基因的稻种资源BHADOIA 303为供体,以优良籼稻品种五山丝苗为受体,培育抗水稻细菌性条斑病株系,并分别通过田间成株期人工喷雾法和浸入法接种鉴定这些株系的抗病性,评价其农艺性状。【结果】分子标记和GSR40K芯片检测表明最终获得稳定携带Xo2基因片段的10个新品系(BC4F5);无论是喷雾法接种还是渗入法接种,导入抗病基因的株系和五山丝苗对细菌性条斑病的抗性均差异显著,10个测定株系均表现抗水稻细菌性条斑病,其平均病情指数为5.00~10.37,病斑长度为0.70~0.99 cm,其中以株系1~3抗性表现最好。这3个抗性较好的株系的农艺性状及产量性状指标有些与五山丝苗相似,其中株系1的千粒重、谷粒长、宽与五山丝苗相似,结实率优于五山丝苗;株系2每穗总粒数与五山丝苗相似,谷粒比五山丝苗长些、宽些,千粒重优于五山丝苗;株系3千粒重、结实率与五山丝苗相似,单株穗数优于五山丝苗。【结论】获得水稻细菌性条斑病抗性显著增强且农艺性状较优良的3个株系,为细菌性条斑病抗病育种提供了抗性新材料,有利于加快水稻细菌性条斑病抗性分子育种进程。

关键词：水稻细菌性条斑病 Xo2 抗性改良分子标记辅助选择农艺性状

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苏门白酒草对草甘膦和百草枯的多抗性检测及替代药剂筛选

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农药学学报 2022年

作者：郭文磊于超杰张纯张泰劼田兴山广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

苏门白酒草是一种华南地区常见阔叶杂草，在果园和非耕地常造成严重危害。本研究采用整株剂量反应法明确了GZ-R种群对草甘膦、百草枯和敌草快的抗性水平，比对了GZ-R种群和敏感对照种群QY-S的草甘膦靶标酶基因EPSPS2片段的差异，并测定... 详细信息

苏门白酒草是一种华南地区常见阔叶杂草，在果园和非耕地常造成严重危害。本研究采用整株剂量反应法明确了GZ-R种群对草甘膦、百草枯和敌草快的抗性水平，比对了GZ-R种群和敏感对照种群QY-S的草甘膦靶标酶基因EPSPS2片段的差异，并测定了5种茎叶处理剂对不同叶龄苏门白酒草的防除效果。结果表明，GZ-R种群对草甘膦和百草枯分别产生了中等水平和高水平抗性，并对敌草快产生交互抗性，其LD;值分别是QY-S种群的7.2倍、72.3倍和6.6倍。与QY-S种群相比，GZ-R种群的EPSPS2基因106位由脯氨酸突变为苏氨酸。在灭草松、氯氟吡氧乙酸或2甲4氯钠推荐剂量下，4～5叶期苏门白酒草死亡率均为100%，但6～7叶期和10～12叶期苏门白酒草死亡率显著下降至44.4%～91.7%；不同叶龄的苏门白酒草在草铵膦或苯嘧磺草胺推荐剂量下均死亡，因此植株生长早期使用草铵膦和苯嘧磺草胺可用于防除草甘膦和百草枯抗性苏门白酒草。

关键词：苏门白酒草草甘膦百草枯交互抗性替代药剂

广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立

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中国农业科学 2023年第23期56卷 4684-4695页

作者：苏琦汤亚飞佘小漫蓝国兵于琳吴正伟李正刚何自福广东海洋大学滨海农业学院广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室

【目的】探明侵染广东省蒲瓜的病毒种类，建立一种可以同时检测多种蒲瓜病毒的RT-PCR检测方法，提高蒲瓜病毒种类鉴定效率，为蒲瓜病毒病的精准监测与防控提供依据。【方法】2018—2022年间，从广东省广州市、惠州市、清远市、汕头市和... 详细信息

【目的】探明侵染广东省蒲瓜的病毒种类，建立一种可以同时检测多种蒲瓜病毒的RT-PCR检测方法，提高蒲瓜病毒种类鉴定效率，为蒲瓜病毒病的精准监测与防控提供依据。【方法】2018—2022年间，从广东省广州市、惠州市、清远市、汕头市和湛江市的蒲瓜主要种植区采集蒲瓜病毒病疑似样品78份，对采集的样品按照地区和症状进行分类，提取每份样品的总RNA，将一个地区具有相同症状样品的RNA等量混合后进行小RNA深度测序分析。根据小RNA深度测序分析结果，设计特异引物进行RT-PCR验证，从而明确侵染广东省蒲瓜的病毒种类。挑选6种检出率高、危害严重的蒲瓜病毒，根据GenBank数据库设计多重PCR检测引物，通过优化反应体系和反应条件，建立同时检测6种蒲瓜病毒的多重RT-PCR方法。【结果】从采集的78份蒲瓜疑似病毒病样品中，共检测到12种病毒，按照检出率从高到低分别为葫芦内源RNA病毒（Lagenaria siceraria alphaendornavirus,LSEV）(64.1%)、黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）(62.8%)、小西葫芦虎纹花叶病毒（zucchini tigre mosaic virus,ZTMV）(51.3%)、西瓜绿斑驳花叶病毒（watermelon green mottle mosaic virus,WGMMV）(43.6%)、西瓜病毒A(watermelon virus A,WVA)(32.1%)、番木瓜环斑病毒（papaya ringspot virus,PRSV）(19.2%)、小西葫芦黄花叶病毒（zucchini yellow mosaic virus,ZYMV）(9.0%)、瓜类蚜传黄化病毒（cucurbit aphid-borne yellows virus,CABYV）(7.7%)、中国南瓜曲叶病毒（squash leaf curl China virus,SLCCNV）(7.7%)、瓜类褪绿黄化病毒（cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）(5.1%)、瓜类黄矮失调病毒（cucurbit yellow stunting disorder virus,CYSDV）(3.8%)、甜瓜黄斑病毒（melon yellow spot virus,MYSV）(1.3%)。78份样品中，复合侵染率高达80.8%，其中2、3、4、5、6和7种病毒复合侵染的检出率分别为14.1%、16.7%、23.1%、17.9%、7.7%和1.3%。在多重RT-PCR体系中先加入WVA+CCYV+ZTMV+PRSV引物，12个反应后再加入CGMMV+WGMMV引物，引物体积依次为WVA 0.5μL、CCYV 0.5μL、CGMMV 0.4μL、WGMMV 0.4μL、ZTMV 0.6μL、PRSV 0.6μL，从而确立了一种同时扩增6种病毒的多重RT-PCR检测方法。【结论】危害广东省蒲瓜的主要病毒有12种，其中CGMMV、ZTMV、WGMMV、WVA为优势病毒；复合侵染现象较普遍，以3、4和5种病毒的复合侵染形式占比较高；研发出一种同时检测蒲瓜上6种病毒的多重RT-PCR检测技术，提高了蒲瓜病毒种类鉴定效率。

关键词：蒲瓜病毒病小RNA深度测序 RT-PCR检测多重PCR方法

非编码RNA调控真社会性昆虫品级分化和个体分工的研究进展

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环境昆虫学报 2024年第3期46卷 551-560页

作者：陈洁关子盈陈婷石庆型吕利华齐国君广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

真社会性昆虫是最具代表性的表型可塑性的研究对象之一,其个体之间分工协作的社会性生活方式增强了整个群体的环境适应性和繁殖力。真社会性昆虫虽然具有相同的遗传背景,个体之间却表现出明显的品级分化和个体分工,这是由环境和遗传共... 详细信息

真社会性昆虫是最具代表性的表型可塑性的研究对象之一,其个体之间分工协作的社会性生活方式增强了整个群体的环境适应性和繁殖力。真社会性昆虫虽然具有相同的遗传背景,个体之间却表现出明显的品级分化和个体分工,这是由环境和遗传共同影响的。表观遗传被认为是应对环境条件下重塑基因表达的主要机制,非编码RNA作为一类广泛参与机体生命活动的不编码蛋白的功能性RNA,在真社会性昆虫的品级分化、个体分工等方面起着重要的调控作用。本文从微小RNA、长链非编码RNA、环状RNA、与PIWI蛋白相作用的RNA等非编码RNA,对蜜蜂、蚂蚁及白蚁等真社会性昆虫的非编码RNA调控机制研究进展进行了综述,以加深对真社会性昆虫内在遗传分子基础的理解和认识,也为害虫防治领域提供新的研发视角。

关键词：非编码RNA 真社会性昆虫品级分工

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