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不同生长阶段中国花鲈肠道和环境微生物群落分析

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大连海洋大学学报 2024年第2期39卷 215-224页

作者：梁祖銮赵吉臣廖敏泽孙成波广东海洋大学水产学院广东湛江524088 广东省农业科学院动物科学研究所广东省畜禽育种与营养研究重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东广州510640 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东湛江524088

为探究中国花鲈(Lateolabrax maculatus)不同生长阶段肠道和养殖环境微生物组成,选择3月龄(小规格组,体质量为79.89 g±14.97 g)、6月龄(中规格组,体质量为212.67 g±30.32 g)和9月龄(大规格组,体质量为427.56 g±69.56 g)3个不同生长... 详细信息

为探究中国花鲈(Lateolabrax maculatus)不同生长阶段肠道和养殖环境微生物组成,选择3月龄(小规格组,体质量为79.89 g±14.97 g)、6月龄(中规格组,体质量为212.67 g±30.32 g)和9月龄(大规格组,体质量为427.56 g±69.56 g)3个不同生长阶段的中国花鲈,采集其肠道微生物和环境微生物(养殖水和池塘底泥)进行16S rDNA基因测序数据分析。结果表明:不同月龄的中国花鲈肠道微生物与环境微生物群落结构有较大差异,而不同生长阶段的环境微生物群落结构则无显著性差异(P>0.05);环境微生物中双色藻属(Cyanobium_PCC-6307)作为差异物种,表现出与硝酸盐氮呈负相关;肠道微生物分析显示,门水平上,3月龄和6月龄中国花鲈肠道中厚壁菌门(Firmicutes)丰度低于9月龄中国花鲈,属水平上,3月龄和6月龄中国花鲈肠道中富集的可促进糖利用的鲸杆菌属(Cetobacterium)丰度高于9月龄中国花鲈,罗姆布茨菌属(Romboutsia)肠道微生物差异贡献度最高。研究表明,不同养殖阶段的环境微生物群落结构无显著性差异,不同月龄中国花鲈间的肠道微生物群落结构有显著性差异,中国花鲈肠道微生物群落结构受养殖环境的影响。

关键词：中国花鲈肠道微生物环境微生物池塘底泥

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十五烷酸对高脂日粮处理的妊娠期母鼠肠道形态的影响

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中国饲料 2024年

作者：郑世奇李梓莹何衍乐张妍璘苟钟勇张薇卢浩鹏杨梦林王玮黄燕华彭杰仲恺农业工程学院健康养殖创新研究院广东省农业科学院动物科学研究所广东省畜禽育种与营养研究重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室

为探究高脂日粮(HFD)和十五烷酸(C15:0)对妊娠期母体肠道形态结构的影响,试验选取32只10周龄C57BL/6J雌性小鼠进行交配,观察到阴道栓后记为0.5 d,并将妊娠母鼠随机分为4组,每组8只,分别饲喂低脂日粮(LFD)、低脂日粮+十五烷酸(LFD+1%C15... 详细信息

为探究高脂日粮(HFD)和十五烷酸(C15:0)对妊娠期母体肠道形态结构的影响,试验选取32只10周龄C57BL/6J雌性小鼠进行交配,观察到阴道栓后记为0.5 d,并将妊娠母鼠随机分为4组,每组8只,分别饲喂低脂日粮(LFD)、低脂日粮+十五烷酸(LFD+1%C15:0)、高脂日粮(HFD)、高脂日粮+十五烷酸(HFD+1%C15:0),饲养期18 d。当母鼠妊娠日龄达到18.5 d时收集母鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠并进行HE染色,观察肠道形态结构。结果显示:饲喂HFD显著降低了十二指肠的隐窝深度,并提高了十二指肠绒隐比,添加C15:0显著提高了十二指肠上皮细胞厚度。在十二指肠形态学指标上,HFD饮食与C15:0无交互作用。饲喂HFD显著提高了空肠隐窝深度,并降低空肠绒隐比,添加C15:0对空肠形态结构无显著影响。在空肠形态学指标上,HFD饮食与C15:0无交互作用。饲喂HFD显著增加了回肠绒毛宽度和绒毛表面积,添加C15:0对其无显著影响。在回肠肠上皮细胞厚度指标上,HFD饮食与C15:0产生了交互作用,其中HFD组显著高于LFD组。饲喂HFD和添加C15:0分别对结肠形态无显著影响,但在结肠肠上皮细胞厚度上,HFD饮食和C15:0产生了交互作用,其中HFD组显著高于LFD组和HFD+1%C15:0组。综上所述,饲喂HFD未对妊娠期母体十二指肠和结肠形态结构产生不利影响,但有损害空肠和回肠形态结构趋势,而C15:0不能缓解HFD引起的空肠和回肠损伤趋势,但有改善十二指肠上皮屏障功能的作用,具有一定的应用价值。

关键词：十五烷酸高脂妊娠肠道

饲粮纤维结构及其发酵产物对单胃动物肠道健康的调控机制和应用现状

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2057-2066页

作者：李敬高歌李平李习龙中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点开放实验室北京100081 广东省农业科学院动物科学研究所广州510640 张家口市畜牧技术推广站张家口075000

饲粮纤维作为动物后段肠道微生物群最重要的食物来源,维护着微生物群的平衡和稳态,其代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)对改善动物能量代谢、肠道屏障功能、免疫系统、炎症反应和肠激素分泌等都具有非常重要的调控作用。然而,饲粮中纤维的结构... 详细信息

饲粮纤维作为动物后段肠道微生物群最重要的食物来源,维护着微生物群的平衡和稳态,其代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)对改善动物能量代谢、肠道屏障功能、免疫系统、炎症反应和肠激素分泌等都具有非常重要的调控作用。然而,饲粮中纤维的结构特点以及不同饲料原料中纤维的组成和发酵特性差异较大,也导致纤维性饲粮原料在动物生产中的应用存在巨大的变异性。因此,本文对饲粮纤维结构及其发酵特性进行了深入探讨,并综述了饲料纤维组分在动物肠道的消化过程,发酵产物对动物肠道健康的调控机制,以及饲粮纤维在单胃动物中的应用现状,以期为重新审视纤维结构及其转运机制、探索饲粮纤维的潜在营养价值和制定单胃动物纤维营养的应用措施提供参考。

关键词：饲粮纤维微生物群纤维结构短链脂肪酸代谢机制

N^(+)和Ar^(+)注入红三叶种子的诱变效应研究

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草业学报 2024年第7期33卷 160-171页

作者：张鹤山陆姣云朱伟田宏熊军波吴新江刘洋湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省动物胚胎及分子育种重点实验室湖北武汉430064 咸宁市农业科学院湖北咸宁437100

离子注入技术是创制植物新种质的有效手段。为探究离子注入红三叶的诱变效应,以不同注入能量和剂量的N^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10^(14)或5×10^(15)ions·cm^(-2),分别记为N3014、N3015、N5014、N5015)和Ar^(+)(能量30或50 keV,剂量... 详细信息

离子注入技术是创制植物新种质的有效手段。为探究离子注入红三叶的诱变效应,以不同注入能量和剂量的N^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10^(14)或5×10^(15)ions·cm^(-2),分别记为N3014、N3015、N5014、N5015)和Ar^(+)(能量30或50 keV,剂量5×10_(14)ions·cm^(-2),分别记为Ar3014和Ar5014)注入“鄂牧5号”红三叶种子,研究种子诱变后的萌发特征和生物学特性,并通过株高、单株分枝数、单株花序数、花序小花数、叶片长度、叶片宽度、花序长度以及花序宽度等农艺性状对诱变单株进行变异分析。结果表明,离子注入后红三叶种子表皮具有明显的“灼伤”现象,种皮颜色变成黑褐色。相比于对照,Ar3014处理下发芽率指标值略有提高,处理N3014和N3015的发芽率指标值略有降低,但与对照均差异不显著。N5014处理显著降低了种子发芽率(P<0.05),比对照低约10%,处理N5015和Ar5014发芽率更是降低超过30%(P<0.05)。注入能量为30 keV的2个N^(+)处理显著增加了胚根体积和胚根长度(P<0.05)。经离子诱变的种子(M_(1)代)种植后生产M_(2)代种子,依次生产M_(3)和M_(4)代种子。M_(2)代植株各性状平均值显著低于对照(P<0.05),但表现出更大的性状变异特征,为进一步筛选突变材料奠定基础。50 keV的N^(+)和Ar^(+)诱变处理具有更大的诱变效应,但主要是不利突变。红三叶适宜的N^(+)诱变能量为30 keV,剂量为5×10^(14)~5×10^(15)ions·cm^(-2)。经过4个世代选育,获得8个性状稳定并具有潜在利用价值的M_(4)代突变体材料,为红三叶诱变育种提供基础资料。

关键词：红三叶氮离子氩离子诱变生物学效应

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利巴韦林单克隆抗体的制备及免疫学性能鉴定

中国兽医学报 2024年第9期 2025-2030页

作者：胡骁飞魏凤仙邢云瑞王琳孙亚宁河南省农业科学院动物免疫学重点实验室河南省农业科学院畜牧研究所

为了获得敏感性高、特异性强的利巴韦林鼠源单克隆抗体。采用戊二醛法将利巴韦林载体蛋白偶联，合成人工完全抗原；紫外扫描、凝胶电泳及动物免疫对人工抗原质量进行鉴定。通过细胞融合、阳性杂交瘤筛选、体内诱生腹水制备单克隆抗体，... 详细信息

为了获得敏感性高、特异性强的利巴韦林鼠源单克隆抗体。采用戊二醛法将利巴韦林载体蛋白偶联，合成人工完全抗原；紫外扫描、凝胶电泳及动物免疫对人工抗原质量进行鉴定。通过细胞融合、阳性杂交瘤筛选、体内诱生腹水制备单克隆抗体，并对制备的单克隆抗体进行免疫学性能鉴定。结果显示，利巴韦林与载体成功结合在一起，人工抗原制备成功。得到1株可稳定分泌利巴韦林单克隆抗体的细胞株，细胞株分泌的单抗效价在1∶512 000以上，对利巴韦林的IC50分别为4.74μg/L,且与金刚烷胺等其他抗病毒类药物及载体蛋白均无交叉反应性。本研究成功制备出灵敏度高、特异性强的利巴韦林单克隆抗体，为利巴韦林免疫学检测方法的建立奠定了坚实的基础。

关键词：利巴韦林戊二醛法人工完全抗原细胞融合单克隆抗体

白花鬼针草复方提取物对生长猪生长性能和血液生化指标的影响

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家畜生态学报 2024年第2期45卷 33-38页

作者：袁明贵徐志宏彭新宇唐兴刚八晓敏田雅向蓉杨希广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000 广东省农业科学院动物科学研究所广东广州510640

为了促进入侵植物白花鬼针草(Bidens alba(L.)DC,BD)的资源化利用,将4.00 kg白花鬼针草、1.20 kg车前草、0.10 kg生姜、0.25 kg大蒜组成复方,用水提取,然后用乙醇沉淀,经工艺处理后获得白花鬼针草复方提取物(BD formulation extracts,BD... 详细信息

为了促进入侵植物白花鬼针草(Bidens alba(L.)DC,BD)的资源化利用,将4.00 kg白花鬼针草、1.20 kg车前草、0.10 kg生姜、0.25 kg大蒜组成复方,用水提取,然后用乙醇沉淀,经工艺处理后获得白花鬼针草复方提取物(BD formulation extracts,BDFE)成品0.15 kg。将提取物成品按照0 mg/kg(对照组),125 mg/kg(低剂量组),250 mg/kg(中剂量组),500 mg/kg(高剂量组)比例添加到配合饲料中,饲喂杜长大生长猪。结果表明,饲喂20 d后,与对照组相比,高、中剂量组的料重比(F/G)分别降低4.52%和2.08%。饲喂10 d后,高剂量组胆固醇(CHOL)浓度和碱性磷酸酶(ALKP)活性极显著高于中剂量组(P猪无肝脏毒性,无肾脏毒性,无胰腺毒性,可以促进生长猪对脂肪、能量、蛋白质的新陈代谢,可以促进对钙磷矿物质的吸收,从而提高生长猪的生长性能。

关键词：白花鬼针草杜长大生长猪生长性能血液生化

花鲈虹彩病毒交叉引物恒温扩增检测方法的建立

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广东农业科学 2024年第3期51卷 148-156页

作者：马艳平覃宝田梁曦王刚郝乐周东来刘振兴广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640 汕尾市农业科学院广东汕尾516600 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所广东广州510640

【目的】花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV)严重威胁花鲈养殖业安全,无特效防控药物,早期诊断在LMIV防控中发挥极其重要的作用。建立一种简便、快捷、准确的现场快速诊断方法,可为LMIV的基层诊断提供技术支撑。【方... 详细信息

【目的】花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV)严重威胁花鲈养殖业安全,无特效防控药物,早期诊断在LMIV防控中发挥极其重要的作用。建立一种简便、快捷、准确的现场快速诊断方法,可为LMIV的基层诊断提供技术支撑。【方法】利用交叉引物恒温扩增技术(Cross priming amplification,CPA),针对LMIV ATPase基因高保守区设计1套单交叉引物。以构建的ATPase重组质粒作为阳性模板,对反应体系中的引物浓度比,Bst DNA聚合酶、Betaine、MgSO_(4)、dNTP浓度,以及反应温度和反应时间进行优化;结合一次性核酸试纸条,建立可视化检测LMIV-CPA的方法。【结果】最优引物浓度比组合为交叉引物CPF1.0μmol/L,引物F3和B3均为0.4μmol/L,探针引物B1(FAM)和B2(Biotin)均为0.8μmol/L;MgSO4浓度为6 mmol/L、Betaine浓度为0.4 mol/L、dNTP浓度为0.6 mmol/L、Bst DNA聚合酶浓度为0.256 U/μL;最佳反应温度为62℃,最佳反应时间为45 min。扩增产物经凝胶电泳检测呈梯形条带,带有探针的反应产物采用一次性核酸试纸条检测装置进行检测,在3~5 min内即可通过是否出现特征性条带而使反应结果可视化。该方法可特异性地检测出LMIV,不与其他水生常见病毒和常见细菌发生交叉反应。使用LMIV-CPA方法和常规PCR方法共同检测156份临床样品,LMIV-CPA的阳性检出率为93.30%,常规PCR方法的阳性检出率为85.83%;在比较二者的灵敏度差异时,LMIV-CPA的检测限为102 copies/μL,灵敏度为常规PCR的10倍,综合结果显示LMIV-CPA优于PCR。【结论】LMIV-CPA检测方法不依赖昂贵的仪器设备与专业技术人员,可应用于LMIV的现场快速检测,为花鲈LMIV的准确快速诊断和有效防控提供技术支撑。

关键词：花鲈虹彩病毒交叉引物恒温扩增特异性灵敏度核酸试纸条可视化

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猪催乳素的真核表达与生物活性验证

华南农业大学学报 2024年第2期45卷 179-189页

作者：谢社风韩贝贝高凤磊马莹李莉张守全邹娴卫恒习国家生猪种业工程技术研究中心/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室/华南农业大学动物科学学院广东广州510642 广东农工商职业技术学院热带农林学院广东广州510507 广东省农业科学院动物科学研究所广东广州510640 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000

【目的】催乳素(Prolactin,PRL)具有广泛的生理调节作用,但其多效性机制仍不清楚。为了更好地研究猪PRL的多效性,本研究制备猪源PRL真核重组蛋白并验证其生物活性。【方法】利用分子克隆技术将猪PRL基因克隆到慢病毒表达载体pCDH-CMV-MC... 详细信息

【目的】催乳素(Prolactin,PRL)具有广泛的生理调节作用,但其多效性机制仍不清楚。为了更好地研究猪PRL的多效性,本研究制备猪源PRL真核重组蛋白并验证其生物活性。【方法】利用分子克隆技术将猪PRL基因克隆到慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro中,经慢病毒包装获得携带猪PRL基因的PRL-慢病毒;用浓缩的PRL-慢病毒感染CHO-K1细胞,经嘌呤霉素筛选后,获得能够分泌PRL重组蛋白的阳性细胞系CHO-K1-PRL;利用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化并进行LC-MS/MS质谱鉴定,利用HC11细胞体外培养体系验证PRL重组蛋白的生物活性。【结果】成功构建了携带猪PRL基因的pCDH-CMV-6His-PRL-6HisEF1-GFP+Puro慢病毒表达载体;包装及浓缩后的PRL-慢病毒滴度为9.9×10^(8) TU/mL,其感染的CHO-K1细胞经嘌呤霉素筛选后得到阳性细胞系CHO-K1-PRL;从CHO-K1-PRL细胞培养液中成功纯化出重组蛋白,质量浓度为50μg/mL,LC-MS/MS质谱分析的覆盖率达94%,鉴定为猪PRL重组蛋白;重组PRL具有促进HC11细胞增殖及酪蛋白表达的生物活性。【结论】构建的细胞系CHO-K1-PRL可稳定表达具有生物活性的猪重组PRL,为猪PRL功能的研究和生产应用奠定了基础。

关键词：猪催乳素 CHO-K1细胞真核表达慢病毒载体重组蛋白

胍基乙酸对育肥猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响

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中国畜牧兽医 2024年第8期51卷 3311-3319页

作者：李贞明马现永容庭崔艺燕宋敏刘志昌邓盾田志梅余苗广东省农业科学院动物科学研究所猪禽种业全国重点实验室农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东省畜禽肉品质量安全控制与评定工程技术研究中心广州510640 清远市龙发种猪有限公司清远511500 岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心河源517000 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心茂名525032

[目的]研究饲粮中添加胍基乙酸对育肥猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响,为胍基乙酸在生猪养殖业中的应用提供参考。[方法]选取36头体重相近且健康的杜×长×大三元杂交母猪,随机分为3组,每组6个重复,每个重复2头... 详细信息

[目的]研究饲粮中添加胍基乙酸对育肥猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响,为胍基乙酸在生猪养殖业中的应用提供参考。[方法]选取36头体重相近且健康的杜×长×大三元杂交母猪,随机分为3组,每组6个重复,每个重复2头。对照组猪饲喂基础饲粮;试验组猪分别在基础饲粮中添加0.1%胍基乙酸(GAA组)和0.1%胍基乙酸+0.04%甜菜碱(GAA+BT组),试验期50 d。试验结束时,以重复为单位称育肥猪空腹重,计算育肥猪的生长性能;每个重复挑选1头猪进行前腔静脉采血,测定血清生化指标、抗氧化能力和免疫功能。[结果]①饲粮中添加胍基乙酸对育肥猪的生长性能无显著影响(P>0.05)。②与对照组相比,GAA和GAA+BT组育肥猪血清中总蛋白、球蛋白、白细胞介素-2、白细胞介素-10、γ-干扰素和免疫球蛋白A含量均显著升高,GAA组育肥猪血清中免疫球蛋白G含量显著升高(P猪血清中肌酐、尿酸和乳酸脱氢酶水平均显著降低,GAA+BT组育肥猪血清中丙二醛含量显著降低(P猪血清中总抗氧化能力显著升高(P猪血清中肿瘤坏死因子-α含量显著升高(P猪的生长性能,但可改善育肥猪机体代谢水平,增强抗氧化能力和免疫功能,且单独使用和联合添加甜菜碱均具有效果。

关键词：胍基乙酸育肥猪生长性能血清生化指标抗氧化能力免疫功能

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