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禽腺病毒DAdV-3和FAdV-4双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 66-73页

作者：周珈羽朱春华陈珍程龙飞陈翠腾傅光华万春和施少华梁齐章陈红梅傅秋玲刘荣昌黄小红黄瑜福建农林大学动物科学学院福建省兽医中药与动物保健重点实验室福建福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013

禽腺病毒属成员鸭腺病毒3型(duck adenovirus type 3,DAdV-3)和禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype-4,FAdV-4)是养殖场主要流行的病原,对养禽业造成巨大的经济损失。目前尚未见可同时快速检测这2种病原的双重荧光定量PCR检测方法,本... 详细信息

禽腺病毒属成员鸭腺病毒3型(duck adenovirus type 3,DAdV-3)和禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype-4,FAdV-4)是养殖场主要流行的病原,对养禽业造成巨大的经济损失。目前尚未见可同时快速检测这2种病原的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于DAdV-3 GDMM10毒株和FAdV-4 GDMZ毒株Fiber2基因序列比对及遗传进化分析,分别在Fiber2基因保守区设计特异性引物,建立了能同时鉴别临床上常见的DAdV-3和FAdV-4双重荧光定量PCR检测方法。结果表明,DAdV-3 GDMM10和FAdV-4 GDMZ Fiber2基因处于两个不同进化分支上,同源性为46.10%。建立的检测DAdV-3和FAdV-4双重荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,最低可检出45拷贝/μL的DAdV-3样品和17拷贝/μL的FAdV-4样品;且检测结果可直接通过Tm值差异进行判定,简化操作时间。利用该双重荧光定量PCR方法对2022年度临床上采集的34份肝炎-心包积液疑似样品进行检测,DAdV-3和FAdV-4检出率分别为17.65%和2.94%。为进一步开展禽源DAdV-3和FAdV-4的分子流行病学及共感染致病机制奠定了基础。

关键词：鸭腺病毒3型禽腺病毒4型 Fiber2基因实时定量PCR 临床检测

中国荷斯坦奶牛CSN3基因多态性检测及其与产奶性状的关联分析

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畜牧与兽医 2024年第8期56卷 15-20页

作者：吴涛齐云霞朱洪龙黄冬维赵辉玲程广龙赵小伟安徽省农业科学院畜牧兽医研究所/畜禽产品安全工程安徽省重点实验室安徽合肥230031

旨在研究安徽省中国荷斯坦奶牛群体κ-酪蛋白(CSN3)基因的多态性及其对奶牛生产性状及奶品质的影响。通过PCR克隆CSN3基因cDNA,使用DNA测序法检测402头中国荷斯坦奶牛CSN3基因的单核苷酸多态性(SNPs)位点,进行群体遗传信息分析并将检测... 详细信息

旨在研究安徽省中国荷斯坦奶牛群体κ-酪蛋白(CSN3)基因的多态性及其对奶牛生产性状及奶品质的影响。通过PCR克隆CSN3基因cDNA,使用DNA测序法检测402头中国荷斯坦奶牛CSN3基因的单核苷酸多态性(SNPs)位点,进行群体遗传信息分析并将检测出的SNPs位点基因型与奶牛产奶性能进行关联分析。结果显示:在中国荷斯坦奶牛CSN3基因CDs区序列中发现2个突变位点,即13068 bp处C/T替换,13124 bp处A/G替换。g.13068C>T位点CC型奶牛的基因型频率为0.52,日均产奶量比CT型奶牛高且差异极显著(PG位点AA型奶牛乳蛋白率比AG型奶牛高且差异显著(PT位点可作为中国荷斯坦奶牛产奶量及乳脂率的分子标记,g.13124A>G位点可作为中国荷斯坦奶牛乳蛋白率的分子标记,CSN3基因可能是影响中国荷斯坦奶牛产奶性能的主效或候选基因。

关键词：中国荷斯坦奶牛 CSN3基因单核苷酸突变分子标记

乳化植物甾醇对福建白兔生长性能、肠道形态及盲肠菌群与代谢物的影响

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动物营养学报 2024年第5期36卷 3231-3246页

作者：何玉琴陈冬金姚浪群许卫华曹翀林标声龙岩学院生命科学学院龙岩364012 预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室龙岩364012 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州350013 北京爱绿生物科技有限公司北京100094

本试验旨在研究乳化植物甾醇对福建白兔生长性能、肠道形态及盲肠菌群与代谢物的影响。选取健康、体重相近的40日龄福建白兔150只,随机分为5组,每组30只(公母各占/1/2),单笼饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组A在基础饲粮中添加20 mg/kg... 详细信息

本试验旨在研究乳化植物甾醇对福建白兔生长性能、肠道形态及盲肠菌群与代谢物的影响。选取健康、体重相近的40日龄福建白兔150只,随机分为5组,每组30只(公母各占/1/2),单笼饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组A在基础饲粮中添加20 mg/kg的普通植物甾醇,试验组B、C、D在基础饲粮中分别添加10、20和40 mg/kg的乳化植物甾醇,试验期为60 d。饲养试验结束后采样,测定各组的生长性能和肠道形态、盲肠菌群组成与代谢物组成及相对含量。结果显示:1)与对照组和试验组A相比,试验组B、C、D福建白兔的腹泻率和死亡率明显下降,平均日采食量、平均日增重、料重比等各项生长性能指标均有一定程度的改善,其中试验组C的平均日增重、料重比与其他各组的差异达到显著水平(P所述,饲粮中添加乳化植物甾醇可降低福建白兔的腹泻率和死亡率,提高平均日采食量和平均日增重,降低料重比,有利于改善肠道形态和盲肠菌群组成,增加盲肠中代谢物的相对含量,特别是短链脂肪酸;乳化植物甾醇添加剂量为20 mg/kg时对福建白兔生长性能和肠道黏膜形态完整性的改善效果最好,此剂量为福建白兔饲粮中的乳化植物甾醇的最佳添加剂量。

关键词：乳化植物甾醇福建白兔生长性能肠道形态菌群组成代谢物

基因1型鹅星状病毒VP27蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2576-2584页

作者：向勇李林林张俊勤董嘉文黄允真翟颀徐志宏廖明孙敏华广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广州510640 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225

【目的】制备可特异性识别基因1型鹅星状病毒(Goose astrovirus genotype 1,GAstV-1)且与GAstV-2不发生交叉反应的多克隆抗体,以期为后续GAstV-1免疫检测技术的建立提供材料。【方法】通过比对GAstV-1与GAstV-2衣壳蛋白的氨基酸序列以... 详细信息

【目的】制备可特异性识别基因1型鹅星状病毒(Goose astrovirus genotype 1,GAstV-1)且与GAstV-2不发生交叉反应的多克隆抗体,以期为后续GAstV-1免疫检测技术的建立提供材料。【方法】通过比对GAstV-1与GAstV-2衣壳蛋白的氨基酸序列以寻找其差异较大的区域作为靶基因。对GAstV-1 GDYJ-21-01株VP27基因密码子进行偏嗜性优化合成,构建原核表达质粒pCZN1-GAstV-1 VP27,转化大肠杆菌Top10感受态细胞以诱导表达VP27蛋白;将纯化后的VP27蛋白免疫新西兰白兔后收获抗血清以制备GAstV-1 VP27多克隆抗体,通过间接ELISA和SDS-PAGE分析该纯化抗体的效价和纯度,并利用间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体的特异性。【结果】试验成功构建重组质粒pCZN1-GAstV-1 VP27;SDS-PAGE显示其表达的重组蛋白分子质量约为35 ku,主要以包涵体形式存在。间接ELISA试验结果显示,纯化后的GAstV-1 VP27多克隆抗体效价高达1∶9 841 500,纯度高于85%。IFA结果显示,GAstV-1 VP27多克隆抗体可特异性识别GAstV-1,且与GAstV-2无交叉反应。临床病料组织检测结果显示,GAstV-1核酸阳性的病料组织均可出现特异性荧光,而GAstV-2核酸阳性且GAstV-1核酸阴性的病料组织未出现荧光。【结论】本研究获得了高效价且可特异性识别GAstV-1(与GAstV-2无交叉反应)的VP27多克隆抗体,为建立鉴别诊断GAstV-1的抗原免疫检测技术奠定了基础。

关键词： 1型鹅星状病毒(GAstV-1) VP27 原核表达多克隆抗体

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艾美耳球虫的遗传操作:平台建立、应用与展望

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3362-3373页

作者：梁瑞英索静霞梁琳刘贤勇丁家波索勋汤新明中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室北京100193 中国农业大学动物医学院、兽医公共卫生安全全国重点实验室、农业农村部国家动物寄生原虫实验室北京100193

艾美耳属球虫是畜牧生产中最常见的寄生虫,引起鸡、兔、羊、牛等养殖动物严重消化系统疾病,影响动物健康和养殖效益。随着分子生物学技术的飞速发展,研究者们先后建立了艾美耳球虫的瞬时转染、稳定筛选和基因编辑等遗传操作平台,实现了... 详细信息

艾美耳属球虫是畜牧生产中最常见的寄生虫,引起鸡、兔、羊、牛等养殖动物严重消化系统疾病,影响动物健康和养殖效益。随着分子生物学技术的飞速发展,研究者们先后建立了艾美耳球虫的瞬时转染、稳定筛选和基因编辑等遗传操作平台,实现了艾美耳球虫的基因过表达、基因敲除和基因编辑等操作,极大推进了艾美耳球虫基础生物学和作为新型真核载体疫苗的研究进展,但仍面临一些挑战。本文围绕艾美耳球虫遗传操作平台建立的关键技术、创新性设计、存在的技术瓶颈以及应用前景进行系统梳理和总结,为其他畜禽寄生虫遗传操作平台的构建提供参考,也为球虫病新型防控制剂的研制提供新的思路。

关键词：艾美耳球虫遗传操作基因编辑技术瓶颈疫苗载体

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茶黄素体外抑菌作用研究

动物医学进展 2024年第8期45卷 135-139页

作者：卢琴郭云清张腾飞张蓉蓉胡巧张文婷温国元罗青平湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北洪山实验室湖北武汉430070

通过体外试验研究茶黄素对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、肠球菌、禽肺炎克雷伯、鸭源鸡杆菌、禽肠炎沙门氏菌、野鸟黏质沙雷氏菌、禽巴氏杆菌的抑菌作用。采用最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定法研究茶黄素的... 详细信息

通过体外试验研究茶黄素对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、肠球菌、禽肺炎克雷伯、鸭源鸡杆菌、禽肠炎沙门氏菌、野鸟黏质沙雷氏菌、禽巴氏杆菌的抑菌作用。采用最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)测定法研究茶黄素的抑菌作用及杀菌作用。结果显示,茶黄素对禽巴氏杆菌、鸭源鸡杆菌等具有抑菌作用,并与其浓度呈正相关,而对大肠埃希氏菌、禽肠炎沙门氏菌、黏质沙雷氏菌等无作用;茶黄素浓度为128μg/mL时,其对鸭源鸡杆菌生长具有抑制作用,当茶黄素浓度为512μg/mL时,其对禽巴氏杆菌C48-1生长具有抑制作用;当茶黄素浓度为512μg/mL时,其对禽巴氏杆菌和鸭源鸡杆菌具有杀菌作用。茶黄素在MBC浓度时能抑制生物被膜的形成能力。结果表明,茶黄素是一种天然抗菌剂,具有优良的替抗前景,促进绿色健康养殖。

关键词：茶黄素禽致病菌抑菌作用

饲粮锌缺乏对22~42日龄肉仔鸡生长性能、小肠形态、屏障功能及空肠中紧密连接蛋白mRNA表达的影响

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动物营养学报 2024年第1期36卷 235-244页

作者：吴伟胡阳阳高飞宇张卫云吴炳鑫张丽阳崔小燕李婷婷汪圣晨胡云罗绪刚扬州大学动物科学与技术学院家禽矿物元素营养实验室扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所矿物元素营养研究室北京100193

本试验旨在研究饲粮锌缺乏对22~42日龄肉仔鸡生长性能、小肠形态、屏障功能及空肠中紧密连接蛋白mRNA表达的影响。试验选用140只1日龄爱拔益加肉仔鸡公雏,1~21日龄统一饲喂正常添加七水合硫酸锌(ZnSO 4·7H 2O)的试验饲粮(实测锌含量为8... 详细信息

本试验旨在研究饲粮锌缺乏对22~42日龄肉仔鸡生长性能、小肠形态、屏障功能及空肠中紧密连接蛋白mRNA表达的影响。试验选用140只1日龄爱拔益加肉仔鸡公雏,1~21日龄统一饲喂正常添加七水合硫酸锌(ZnSO 4·7H 2O)的试验饲粮(实测锌含量为84.40 mg/kg);22日龄时,从中选取体重接近的112只肉仔鸡,采用单因子完全随机试验设计,随机分为2组(每组7个重复,每个重复8只鸡),对照组饲喂满足肉仔鸡锌需要量的试验饲粮(基础饲粮中添加40 mg/kg锌,实测锌含量为64.36 mg/kg),锌缺乏组饲喂不添加锌的试验饲粮(基础饲粮中不添加锌,实测锌含量为22.23 mg/kg)。试验期42 d。结果表明,与对照组相比:1)锌缺乏组22~42日龄肉仔鸡料重比显著增加(P所述,饲粮锌缺乏可能通过降低紧密连接蛋白Claudin-1的mRNA表达而损伤肉仔鸡小肠黏膜完整性和屏障功能,进而降低其饲料转化效率。

关键词：锌缺乏肉仔鸡生长性能肠道屏障功能紧密连接蛋白

饲粮添加不同形态锌对肉仔鸡血浆生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响

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动物营养学报 2024年第5期36卷 2982-2991页

作者：薛萌晓王传龙张卫云张丽阳崔小燕李婷婷胡云罗绪刚扬州大学动物科学与技术学院家禽矿物元素营养实验室扬州225009 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所矿物元素营养研究室北京100193

本试验旨在研究饲粮添加不同形态锌[无机硫酸锌(ZnSO4)和中等螯合强度蛋白锌(Zn-Prot M)]对肉仔鸡血浆生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验选用300只1日龄爱拔益加肉仔鸡公雏,1~13日龄统一饲喂不添加锌的半纯合饲粮,于14日龄从... 详细信息

本试验旨在研究饲粮添加不同形态锌[无机硫酸锌(ZnSO4)和中等螯合强度蛋白锌(Zn-Prot M)]对肉仔鸡血浆生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验选用300只1日龄爱拔益加肉仔鸡公雏,1~13日龄统一饲喂不添加锌的半纯合饲粮,于14日龄从中选取体重接近的240只鸡,采用单因子完全随机试验设计,随机分成3组,每组8个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂不添加锌的基础饲粮,试验组分别饲喂基础饲粮中添加60 mg/kg ZnSO_(4)和Zn-Prot M(以锌计)的试验饲粮。试验期26 d。结果表明:1)饲粮添加不同形态锌对血浆白蛋白、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇含量以及谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,饲粮添加ZnSO_(4)和Zn-Prot M均显著降低了血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量(P0.05)。与对照组相比,饲粮添加ZnSO_(4)和Zn-Prot M均显著降低了血浆中白细胞介素-1β含量(P所述,饲粮添加ZnSO_(4)和Zn-Prot M显著影响了肉仔鸡血浆中总蛋白、球蛋白、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量以及乳酸脱氢酶活性等生化指标,提高了其抗氧化能力和免疫功能,且Zn-Prot M的效果优于ZnSO_(4)。

关键词：锌源肉仔鸡血浆生化指标抗氧化功能免疫功能

广东地方畜禽种质资源保护与创新开发利用现状

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广东畜牧兽医科技 2024年第2期49卷 75-80页

作者：吴林瑛梅瑰吕晓慧张洁华罗成龙广东省农业科学院动物科学研究所/猪禽种业全国重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室广东广州510640

畜禽种质资源是畜牧业原始创新、产业发展的物质基础,是提升畜禽种业竞争力的核心抓手。广东省地方畜禽遗传资源丰富,畜禽种业综合实力强,近年来保种与管理工作也日益受到重视。该文对目前广东畜禽遗传资源规模、现行的保种技术和方法... 详细信息

畜禽种质资源是畜牧业原始创新、产业发展的物质基础,是提升畜禽种业竞争力的核心抓手。广东省地方畜禽遗传资源丰富,畜禽种业综合实力强,近年来保种与管理工作也日益受到重视。该文对目前广东畜禽遗传资源规模、现行的保种技术和方法、保护体系建设情况及创新开发利用取得的成效进行介绍,详细分析现阶段存在的问题,并就解决路径提出建设性建议。以期为建立地方种质资源保护与创新开发利用良性循环模式提供参考。

关键词：畜禽种质资源保护开发利用