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针刺治疗腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜差异蛋白质组学分析

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中国组织工程研究 2024年第26期28卷 4129-4136页

作者：刘婧梁芳园李佳王华湖北中医药大学针灸骨伤学院湖北省武汉市430061

背景:肠易激综合征作为临床常见的消化功能紊乱性疾病,已成为针灸治疗的优势病种,但其作用机制尚未明确。组学技术的方法学特点与针灸作用多靶点、多层次的特点不谋而合,为揭示针灸治疗疾病的作用原理提供可能。目的:基于蛋白质组学研... 详细信息

背景:肠易激综合征作为临床常见的消化功能紊乱性疾病,已成为针灸治疗的优势病种,但其作用机制尚未明确。组学技术的方法学特点与针灸作用多靶点、多层次的特点不谋而合,为揭示针灸治疗疾病的作用原理提供可能。目的:基于蛋白质组学研究腹泻型肠易激综合征(diarrhea-irritable bowel syndrome,IBS-D)的发病机制及“标本配穴”针刺对其的治疗作用机制。方法:12只3月龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、“标本配穴”针刺组,后2组采用急性应激与慢性应激相结合的方法制备IBS-D大鼠模型;造模成功后针刺组选取双侧足三里穴、双侧内关穴及关元穴进行针刺治疗,频率为120次/min,每隔4 min行针1 min,留针15 min,每隔6 d休息1 d,共持续28 d。正常对照组和模型组大鼠不给予任何干预。通过检测大鼠腹部回撤反射(AWR)压力阈值评价大鼠内脏敏感性;使用基于高效液相色谱-串联质谱联用平台(LC-MS/MS)的非标记蛋白质组学方法进行大鼠结肠黏膜蛋白质组的测定分析;运用MaxQuant、Perseus软件和DAVID、KOBAS、VENNY、STRING在线分析工具进行蛋白质搜库、差异蛋白搜索及其他生物信息学分析;采用网络可视化软件Cytoscape3.7.1构建关联网络图。结果与结论:①IBS-D组与正常组相比有47个差异表达蛋白;差异蛋白功能分析显示,IBS-D的致病机制与能量代谢的异常加剧、结肠运动功能失衡、内脏敏感性的增加等有关;与IBS-D疾病相关的重要靶标蛋白包括:Atp5a1、Atp5c1、Idh3b、Atp2a3、Pdhb、Ppp1ca及Mapk3。②“标本配穴”针刺组与模型组相比较有61个差异表达蛋白,其中针刺逆转了IBS-D 9个差异表达蛋白的上调和9个差异表达蛋白的下调。③生物信息学分析结果表明“标本配穴”针刺对IBS-D的干预效应具有多靶点、多途径、多通路的特点,能够逆转IBS-D对正常能量代谢的损伤,同时能发挥抗氧化应激保护及抗炎的作用而达到缓痛、调节肠道失衡及肠屏障功能的治疗效果;与“标本配穴”针刺干预机制相关的重要靶点为Atp5a1、Atp5c1、Pdhb、Sars、Uqcrc2、Prdx2、Prdx4、Ppp1ca、Manf和Tmsb4x3。④该研究从整体蛋白质表达的角度初步明确了IBS-D致病的分子机制及“标本配穴”针刺对IBS-D的潜在作用机制,为“标本配穴”选穴配伍奠定了基础。

关键词：腹泻型肠易激综合征 IBS-D 标本配穴针刺蛋白质组学生物信息学分析

化瘀祛湿方对miR-21靶向Skp2介导早期膝骨关节炎软骨细胞自噬的影响

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海南医学院学报 2024年

作者：袁长深李彦宏刘晋邑袁景钊梅其杰徐文飞段戡广西中医药大学第一附属医院四肢骨伤科广西中医药大学研究生院

目的：研究miR-21-5p介导Skp2对膝OA软骨细胞自噬影响，探讨化瘀祛湿方对膝OA软骨细胞的保护作用。方法：(1)取全膝关节置换术的人体膝OA软骨组织，采用FISH单染试验检测miR-21-5p表达和定位，免疫荧光检测Skp2表达，TUNEL染色试验检测... 详细信息

目的：研究miR-21-5p介导Skp2对膝OA软骨细胞自噬影响，探讨化瘀祛湿方对膝OA软骨细胞的保护作用。方法：(1)取全膝关节置换术的人体膝OA软骨组织，采用FISH单染试验检测miR-21-5p表达和定位，免疫荧光检测Skp2表达，TUNEL染色试验检测膝OA细胞凋亡，Western blot法检测Bax、Bcl-2、Beclin1、CARM1、LC3Ⅱ/Ⅰ和Skp2相对表达量；(2)取SD大鼠36只，按随机数字法分为正常对照组、假手术组、模型组、模型+空载组、模型+miR-21-5p干扰组、模型+化瘀祛湿方组6组，每组6只；采用石蜡切片阿利新蓝染色观察软骨形态结构，qPCR、Western blot法检测各组软骨组织Beclin1、CARM1、LC3Ⅱ/Ⅰ、Skp2相对表达量，免疫组化检测Skp2的IOD/Area值。结果：FISH检测显示miR-21-5p在人体膝OA软骨组织中高表达，免疫荧光检测表明Skp2在人体膝OA软骨组织中低表达；TUNEL检测发现，人体膝OA软骨组织凋亡显著增加；Western blot法检测显示，与正常对照组相比，人体膝OA软骨组织中Bax、CARM1相对表达量较正常组显著升高，而Bcl-2、LC3II/I、Skp2相对表达量明显降低，Beclin1相对表达量稍降低(P＜0.05)。动物实验显示，采用miR-21-5p干扰处理后，Beclin1、CARM1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著下降，Skp2稍降低；免疫组化检测发现Skp2 IOD/Area值与正常对照组相比，模型组IOD/Area值显著降低(P<0.05)；与模型组相比，模型+化瘀祛湿方组IOD/Area值显著升高(P<0.05)；石蜡切片阿利新蓝染色显示与假手术照组相比，模型+空载组、模型+miR-21-5p干扰组蓝色变浅，但模型组蓝色变深，模型+化瘀祛湿组蓝色较为明显。结论：miR-21-5p可负向调控Skp2，介导膝OA软骨细胞自噬，加速OA发展；化瘀祛湿方可能通过抑制miR-21-5p，提高Skp2表达，起到延缓膝OA退变的作用。

关键词：骨关节炎 miR-21 泛素连接酶S期激酶相关蛋白2 化瘀祛湿方自噬

青少年特发性脊柱侧凸研究热点及趋势的可视化分析

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中国组织工程研究 2024年第21期28卷 3424-3430页

作者：侯召猛苏少亭陈龙豪韦贵康周红海南京中医药大学附属盐城市中医院骨伤科江苏省盐城市224000 广西中医药大学骨伤学院广西壮族自治区南宁市530000

背景:青少年特发性脊柱侧凸是最常见的脊柱侧凸畸形,占所有脊柱侧凸的80%左右,其发病机制不明,近年来发病率呈明显上升趋势,严重威胁着青少年的身心健康。目的:通过文献计量学方法对近20年来青少年特发性脊柱侧凸的相关文献进行可视化分... 详细信息

背景:青少年特发性脊柱侧凸是最常见的脊柱侧凸畸形,占所有脊柱侧凸的80%左右,其发病机制不明,近年来发病率呈明显上升趋势,严重威胁着青少年的身心健康。目的:通过文献计量学方法对近20年来青少年特发性脊柱侧凸的相关文献进行可视化分析,探索该领域的研究热点与趋势,以期为进一步研究提供参考。方法:计算机检索Web of Science核心合集数据库2002-01-01/2021-12-31收录的相关文献,采用CiteSpace 5.8.R3软件绘制科学知识图谱,对合作网络、共被引网络、关键词共现、突现、聚类及时间线图谱进行可视化分析。结果与结论:共纳入文献5245篇,近20年该领域年发文量总体呈波动上升趋势。对合作网络分析可知,发文量最多的作者是邱勇、机构是南京大学、国家是美国,而中介中心性最高的作者是Lowe TG、机构是费城儿童医院、国家是瑞士。共被引网络分析可知,被引频次最高的作者是Lenke LG、文献是Weinstein SL(2013,《N Engl J Med》)、期刊是《Spine》,而中介中心性最高的被引作者是Suk SI、被引文献是Danielsson AJ(2001,《Eur Spine J》)、被引期刊是《Spine》。关键词分析可知研究热点主要集中在保守治疗方式,影像学参数,发病机制和全基因组关联等方面的研究。通过对青少年特发性脊柱侧凸研究领域的文献进行可视化分析,为该领域的研究理清了脉络,并揭示了该领域的研究热点和趋势,给众多学者提供了研究思路和方法。

关键词：青少年特发性脊柱侧凸 CiteSpace 知识图谱可视化分析文献计量学

基于多成分定量及化学计量学的4种郁金特征性成分识别与质量评价

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中草药 2024年第2期55卷 622-629页

作者：蓝振威杨小露孟江季德陆兔林王淑美广东药科大学中药学院国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室广东高校(省)中药质量工程技术研究中心广东广州510006 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的测定分别来自四川、浙江、广西3个产地的4种郁金共20批中的12种成分含量,并评价其质量。方法采用HPLC法测定4种郁金的化学成分谱,并通过主成分分析法(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘分析法(orthogonal partial ... 详细信息

目的测定分别来自四川、浙江、广西3个产地的4种郁金共20批中的12种成分含量,并评价其质量。方法采用HPLC法测定4种郁金的化学成分谱,并通过主成分分析法(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘分析法(orthogonal partial least squares-discriminate analysis,OPLS-DA)进行分析,识别4种郁金的特征成分,建立综合评价模式。结果4种郁金的化学成分谱各具特征,通过PCA得到3个新变量累计方差贡献率达90.476%,在组间差异成份的基础上采用因子得分表达式综合评价郁金质量:黄丝郁金>温郁金>绿丝郁金>桂郁金,并根据郁金主要药理作用相关的化合物评价4种郁金,验证了评价模型的有效性。通过OPLS-DA模型的变量重要性投影(variable importance projection,VIP)值确定莪术二酮、吉马酮为种间差异的关键化合物,并应用模型的回归系数识别了4种郁金各自的特征性成分。结论建立的郁金多成分测定方法线性关系良好、稳定可靠,通过化学计量学方法可以更全面、准确地评价郁金种间的优劣,识别各自的特征性成分,为郁金资源的合理应用和质量评价提供了理论与方向。

关键词：化学计量学郁金主成分分析正交偏最小二乘分析法质量评价莪术二酮吉马酮

基于超声剪切波弹性成像与红热外成像技术探讨浮针治疗子宫腺肌病痛经的研究

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中国当代医药 2024年第9期31卷 69-74页

作者：黄辉霞贾节刘津广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院针灸推拿康复中心广东广州510000 广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院医技科广东广州510000 广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院治未病科广东广州510000

目的基于超声剪切波弹性成像与红热外成像技术探讨浮针治疗子宫腺肌病痛经的效果。方法选取2021年1月至2022年12月广州中医药大学第一附属医院收治的84例子宫腺肌病痛经患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组42例... 详细信息

目的基于超声剪切波弹性成像与红热外成像技术探讨浮针治疗子宫腺肌病痛经的效果。方法选取2021年1月至2022年12月广州中医药大学第一附属医院收治的84例子宫腺肌病痛经患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组42例。对照组予以常规药物治疗,观察组在此基础上予以浮针治疗。比较两组患者临床疗效、视觉模拟评分法(VAS)评分、COX痛经症状量表(CMSS)评分、弹性特征量测值及红外线热成像分布图。结果观察组患者总有效率(95.24%)高于对照组(78.57%),差异有统计学意义(P0.05);治疗第1个月经周期,观察组VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗第1个月经周期,观察组痛经症状持续时间、严重程度评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组标准偏差、应变均值、均等性、对比度低于对照组,观察组复杂度、蓝色区域所占百分比、峰度、偏度、杂乱性、相关性、一致性高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。红外线热成像分布图显示,观察组高温区及分布减少程度优于对照组。结论浮针可以有效缓解子宫腺肌病痛经时间及严重程度,减轻患者疼痛,临床疗效及安全性较高。

关键词：浮针子宫腺肌病痛经超声剪切波弹性成像红热外成像技术

基于灶点理论的弧刃针疗法治疗顽固性网球肘的临床疗效

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实用医学杂志 2024年第15期40卷 2161-2165页

作者：马雪建张董喆牛朝阳都帅刚王武洋程世龙肖盈沅王学昌河南中医药大学骨伤学院郑州450046 河南省中医院郑州450002 河南中医药大学弧刃针疗法研究所郑州450002

目的探讨基于灶点理论的弧刃针疗法治疗顽固性网球肘的临床疗效。方法收集64例顽固性网球肘患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组。其中对照组32例,采用局部痛点注射治疗。观察组32例,采用弧刃针疗法治疗,每周治疗1次,均治疗2次,分... 详细信息

目的探讨基于灶点理论的弧刃针疗法治疗顽固性网球肘的临床疗效。方法收集64例顽固性网球肘患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组。其中对照组32例,采用局部痛点注射治疗。观察组32例,采用弧刃针疗法治疗,每周治疗1次,均治疗2次,分别记录并比较两组患者治疗前、治疗后1、2、4及24周随访的疼痛数字评分(numberal rating scale,NRS)、肘关节功能评分(Mayo elbow perfor⁃mance score,MEPS)、肩臂手残障(disabilities of the arm,shoulder and hand,DASH)评分以及24周随访时的疾病的疗效评分(Wangxuechang diease efficacy score,WDES)。结果治疗过程中两组患者均未见不良事件发生。两组患者治疗前的NRS、MEPS及DASH差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后各时期,两组NRS、MEPS、DASH及24周随访时的WDES较治疗前均改善,治疗1周后,两组NRS差异无统计学意义(P>0.05),治疗2、4及24周随访时的NRS观察组低于对照组;治疗后1、2、4及24周随访时,观察组DASH评分低于对照组,MEPS评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗24周后随访时的WDES,观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论局部痛点注射及弧刃针灶点松解治疗顽固性网球肘早期均能缓解疼痛,改善肘关节功能,而局部痛点注射治疗后远期效果欠佳,观察组治疗效果逐渐提升。

关键词：弧刃针灶点理论肱骨外上髁炎压痛点

白藜芦醇对膝骨关节炎模型大鼠关节液中氧化应激和炎症因子的调控作用

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中国组织工程研究 2024年第32期28卷 5154-5158页

作者：任伟亮焦永伟张健杨立英杨琦河北中医学院第一附属医院(河北省中医院)骨伤三科河北省石家庄市050000

背景:膝骨关节炎是临床常见退行性关节疾病,主要表现为慢性炎症和氧化应激反应。白藜芦醇具有抗炎和抗氧化应激的生物作用,因此可对症进行治疗,有望为膝骨关节炎治疗提供新的策略。目的:探讨白藜芦醇通过沉默信息调节因子1(silence info... 详细信息

背景:膝骨关节炎是临床常见退行性关节疾病,主要表现为慢性炎症和氧化应激反应。白藜芦醇具有抗炎和抗氧化应激的生物作用,因此可对症进行治疗,有望为膝骨关节炎治疗提供新的策略。目的:探讨白藜芦醇通过沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)/叉头框转录因子O1(forkhead transcription factor O1,FOXO1)通路对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组,每组10只,除对照组外均建立膝骨关节炎模型,分别在造模的第1,4,7天注射4%木瓜蛋白酶溶液与0.3 mol/L半胱氨酸溶液(1∶1混置0.5 h)的混合液20μL。造模成功后1 d开始给药,白藜芦醇低剂量组和白藜芦醇高剂量组大鼠经关节腔注射白藜芦醇25 mg/kg或100 mg/kg,对照组和模型组经关节腔注射等体积生理盐水。治疗28 d后,测定4组大鼠膝关节最大活动度;应用放射免疫法和ELISA法检测膝关节液中氧化应激指标和炎症因子水平;番红O-固绿染色分析膝关节中胶原纤维含量;采用Mankin组织学评分分析关节炎病变程度;蛋白质免疫印迹法检测膝关节SIRT1和FOXO1水平。结果与结论:①与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节最大屈伸角度明显增加,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.05);②与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节液中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著增加;而丙二醛水平显著下降,且高剂量组明显优于低剂量组(P<0.05);③与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节液炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平明显下降,且高剂量组明显低于低剂量组(P<0.05);④与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节胶原纤维含量增加,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.05);⑤与模型组比较,白藜芦醇低剂量组和高剂量组大鼠膝关节SIRT1表达水平显著增加,乙酰化FOXO1水平显著下调,且高剂量组变化幅度明显优于低剂量组(P<0.05);⑥提示白藜芦醇可显著改善膝骨关节炎大鼠关节液中的氧化应激和炎症因子水平,缓解关节炎症状,且呈剂量依赖性,可能是通过SIRT1/FOXO1通路实现的。

关键词：膝骨关节炎白藜芦醇 SIRT1/FOXO1通路炎症水平氧化应激

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顺行和逆行髓内钉治疗不同部位股骨干骨折的有限元分析

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中国组织工程研究 2024年第6期28卷 868-872页

作者：黄培镇董航蔡群斌林梓凌黄枫广州中医药大学第一附属医院创伤骨科广东省广州市510405 广州中医药大学岭南医学研究中心数字骨科与生物力学实验室广东省广州市510405

背景:髓内钉治疗股骨干骨折取得了较好的临床疗效,但仍有部分患者并发无菌性骨不连,其原因为机械性不稳定。股骨作为人体最长最大的骨骼,不同部位骨折是否具有不同的生物力学特征,及不同进钉方式对于不同部位骨折端稳定性存在何种影响... 详细信息

背景:髓内钉治疗股骨干骨折取得了较好的临床疗效,但仍有部分患者并发无菌性骨不连,其原因为机械性不稳定。股骨作为人体最长最大的骨骼,不同部位骨折是否具有不同的生物力学特征,及不同进钉方式对于不同部位骨折端稳定性存在何种影响均研究甚少。目的:分析顺行和逆行髓内钉治疗不同部位股骨干骨折的生物力学特点,评估最佳进钉方式,减少骨不连发生率。方法:选取一名志愿者CT资料导入Mimics 19.0和Geomagic studio 2017软件中进行提取、优化得到右侧股骨三维模型;运用Solidworks 2017软件画出顺行和逆行髓内钉模型并与不同骨折部位股骨干骨折模型按照标准手术技术装配,以STEP格式导入Abaqus 2017软件中设置材料属性参数、边界条件、施加载荷、提交运算,于可视化模块中查看结果。其中上段股骨干骨折顺行和逆行髓内钉分别为A1、A2模型,中段为B1、B2模型,下段为C1、C2模型。结果与结论:(1)A1、B1、C2模型股骨整体应力分布更为均匀,位移、骨折端间隙与成角、股骨近折端骨块内翻均更小;(2)对于上段和中段股骨干骨折,顺行髓内钉具有更好的生物力学效果;对于下段股骨干骨折,逆行髓内钉效果更优。

关键词：顺行髓内钉逆行髓内钉股骨干骨折有限元分析生物力学骨不连

基于TLR-4/MyD88/NF-κB通路探讨针刺改善血管性痴呆大鼠认知功能的机制

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世界科学技术-中医药现代化 2024年 1-7页

作者：毕天威徐子绚宋杰王平王非湖北中医药大学老年医学研究所武汉市中医医院湖北中医药大学针灸骨伤学院

目的研究针刺通过调控Toll样受体4(TLR-4)/髓样分化因子88(My D88)/核因子κB(NF-κB)信号通路改善血管性痴呆大鼠认知功能的机制。方法将36只SPF级SD雄性大鼠采用随机数表法分成假手术组（A组）、模型组（B组）和针刺组（C组），每... 详细信息

目的研究针刺通过调控Toll样受体4(TLR-4)/髓样分化因子88(My D88)/核因子κB(NF-κB)信号通路改善血管性痴呆大鼠认知功能的机制。方法将36只SPF级SD雄性大鼠采用随机数表法分成假手术组（A组）、模型组（B组）和针刺组（C组），每组12只。B组和C组采用改良两血管结扎法制备血管性痴呆模型，A组仅手术分离双侧颈总动脉、不结扎。C组采用针刺“百会“”肾俞“”丰隆”穴进行干预，每个疗程6天，共2个疗程；A组、B组正常喂养，不进行干预。每组大鼠进行Morris水迷宫实验，评估其学习记忆能力；ELISA测定大鼠血清IL-1β、TNF-α水平；Real-time PCR测定海马TLR-4、My D88、NF-κB mRNA的表达；免疫组化测定大脑Iba1、NF-κB蛋白的阳性表达；Western blot测定海马IL-1β、TNF-α相对表达水平。结果与B组相比，C组大鼠逃避潜伏期缩短（P<0.01），穿越平台次数增多（P<0.05）；血清中TNF-α、IL-1β浓度明显降低（P<0.01）；海马中TLR-4、My D88、NF-κB mRNA的表达量明显减少（P<0.01）；大脑的Iba1、NF-κB蛋白的阳性表达明显减少（P<0.01）；海马中的TNF-α、IL-1β相对表达量明显减少（P<0.01）。结论针刺“百会“”肾俞“”丰隆”穴可以改善血管性痴呆大鼠的认知功能障碍，其机制可能与通过抑制TLR-4/My D88/NF-κB信号通路活性，从而抑制神经炎性反应有关。

关键词：针刺血管性痴呆认知功能海马 TLR-4/MyD88/NF-κB通路