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基于网络药理学及实验验证探讨萆苓止带方治疗外阴阴道假丝酵母菌病的作用机制

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中草药 2024年第20期55卷 6995-7005页

作者：陈志霞陈思琪冯淑仪广州中医药大学第二临床医学院广东省中医院广东省中医证候临床研究重点实验室

目的采用网络药理学方法探究萆苓止带方治疗外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC)的作用机制,并进行体内实验验证。方法运用TCMSID数据库获取萆苓止带方中活性成分,并预测药物作用靶点;运用GEO、MelaCards和CTD数据库获... 详细信息

目的采用网络药理学方法探究萆苓止带方治疗外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC)的作用机制,并进行体内实验验证。方法运用TCMSID数据库获取萆苓止带方中活性成分,并预测药物作用靶点;运用GEO、MelaCards和CTD数据库获取VVC疾病基因,将萆苓止带方作用靶点与VVC疾病相关基因取交集。运用STRING在线工具构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-proteininteraction,PPI)网络,使用Cytoscape软件进行可视化处理;使用WebGestalt工具进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;运用MCODE插件筛选关键基因,运用CB-DOCK2对关键靶点和成分进行分子对接。采用雌激素注射联合阴道接种白色念珠菌法制备VVC小鼠模型,给予萆苓止带方干预后,对阴道灌洗液进行涂片染色,观察阴道真菌载量;采用苏木素-伊红(hemato xylin-eo sin,HE)染色观察阴道组织病理观变化;采用免疫组化法检测阴道组织雄激素受体(androgen receptor,AR)表达。结果萆苓止带方与VVC疾病的共有靶点共43个,涉及代谢、炎症调节、激素等相关生物过程,富集于氮代谢、雌激素信号传导通路、卵巢类固醇生成、缺氧诱导因子-1 (hypoxia-induciblefactor-1,HIF-1)信号通路、内分泌抵抗等信号转导通路。共有靶点网络的核心基因为AR、基质金属蛋白酶1 (matrixmetallopeptidase 1,MMP1)、聚二磷酸腺苷-核糖聚合酶1 [poly (adenosine diphosphate-ribose)polymerase 1,PARP1]和一氧化氮合酶3 (nitric oxide synthase 3,NOS3),核心子网络共3个,均与多种卵巢类固醇激素相关蛋白及其合成代谢、细胞炎症调控等密切相关。动物实验结果显示,萆苓止带方能够有效降低VCC小鼠阴道灌洗液中真菌载量,改善阴道黏膜病理,并下调阴道组织AR表达(P<0.001)。结论萆苓止带方治疗VVC的机制是多靶点、多通路的复杂过程,其机制可能与调节氮代谢、雌激素和缺氧等通路密切相关,核心靶点可能是AR。

关键词：萆苓止带方外阴阴道假丝酵母菌病网络药理学雄激素受体落新妇苷京尼平苷酸毛蕊花糖苷 23-乙酰泽泻醇B 23-乙酰泽泻醇C 芍药苷白术内酯Ⅰ 白术内酯Ⅱ 白术内酯Ⅲ 绿原酸槲皮苷

基于“筋、节、骨”分型探讨手法治疗膝关节病的生物力学评价方法

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中华中医药杂志 2024年第8期39卷 4206-4212页

作者：林方政祁冀曾小龙侯宇陈树东叶思婷詹吉恒李永津郭达林定坤刘军广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院广州510120 广东省中医药科学院骨与关节退变及损伤研究团队广州510120 广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院) 广州510095

手法治疗作为中医骨伤科治疗膝关节病筋骨失衡的重要方法,探究其生物力学机制以及对其疗效进行定量化、客观化分析,有助于提高中医骨伤科膝关节病非手术疗法领域地位。目前传统的筋骨辨证分型无法很好与现代解剖、生物力学接轨,导致手... 详细信息

手法治疗作为中医骨伤科治疗膝关节病筋骨失衡的重要方法,探究其生物力学机制以及对其疗效进行定量化、客观化分析,有助于提高中医骨伤科膝关节病非手术疗法领域地位。目前传统的筋骨辨证分型无法很好与现代解剖、生物力学接轨,导致手法疗效机制阐释不清、筋骨辨证思想无法体现等问题。文章从膝关节的“筋、节、骨”分型入手,整合手法治疗靶点与膝关节的生物力学参数,探讨手法治疗膝关节病的生物力学评价方法。

关键词：生物力学膝关节病手法中医骨伤科筋骨辨证

全转录组学关联分析研究开心散缓解乳腺癌化疗性认知障碍的作用机制

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中国中药杂志 2024年第17期49卷 4711-4722页

作者：吴迎朝吴芃田欢崔佳琦左谦皮大锦陈利国罗雪花陈前军欧阳明子广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 暨南大学中医学院广东广州510632 广州中医药大学第二附属医院中医证候全国重点实验室广东广州510120 广东省中医院乳腺科广东广州510120 广东省中医药科学院广东广州510120 广州中医药大学东莞医院广东东莞523000 暨南大学附属第一医院广东广州510630

研究开心散对化疗小鼠行为学和脑组织的影响,以探究开心散治疗荷瘤小鼠化疗性认知障碍的作用机制。将30只雌性BALB/c小鼠通过乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,并随机均分为肿瘤组、阿霉素组和开心散组。通过旷场实验、高... 详细信息

研究开心散对化疗小鼠行为学和脑组织的影响,以探究开心散治疗荷瘤小鼠化疗性认知障碍的作用机制。将30只雌性BALB/c小鼠通过乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,并随机均分为肿瘤组、阿霉素组和开心散组。通过旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验、悬尾实验、Morris水迷宫、新物体识别实验等行为学检测,苏木素-伊红染色、尼氏染色、固蓝染色、Fluoro-Jade B染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记、免疫荧光染色、透射电子显微镜等病理检测,运用网络药理学和全转录组学测序等方法分析化疗性认知障碍产生的机制以及开心散的作用靶点。结果显示,开心散可以防止化疗引起的行为学改变(P研究表明,开心散可能通过重塑化疗过程中前额叶皮质组织的RNA表达谱,减轻神经元组织损伤,最终缓解荷瘤小鼠的化疗性认知障碍。

关键词：开心散转录组学网络药理学化疗性认知障碍乳腺癌

肩袖损伤辨证分型及中医证候规范化研究的思路与方法

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中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1153-1157页

作者：张献泉曾令烽周光辉古卓栩罗明辉窦耀星梁桂洪刘军中医证候全国重点实验室/广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医药防治难治性慢病重点实验室/广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院) 广州510120 广东省中医药科学院骨与关节退变及损伤研究团队广州510120 广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院) 广州510095

中医证候规范化是中医实现现代化及顺应社会发展的必然趋势。肩袖损伤在临床中发病率较高,中医药疗法在治疗肩袖损伤方面具有独特的优势。然而迄今肩袖损伤的辨证分型及中医证候仍不规范,使临床医生在诊治过程中产生了一定的困扰,不利... 详细信息

中医证候规范化是中医实现现代化及顺应社会发展的必然趋势。肩袖损伤在临床中发病率较高,中医药疗法在治疗肩袖损伤方面具有独特的优势。然而迄今肩袖损伤的辨证分型及中医证候仍不规范,使临床医生在诊治过程中产生了一定的困扰,不利于实现中医现代化。因此,为了推动中医在肩袖损伤领域的规范化和标准化,有必要对现有的辨证分型和证候进行规范化的研究和探讨。文章主要阐述肩袖损伤辨证分型及中医证候规范化研究现状及问题,提出肩袖损伤辨证分型及中医证候规范化研究的思路与方法,以期为后续的研究提供参考。

关键词：肩袖损伤辨证论治证候规范述评

中风醒脑液对胶原酶诱导脑出血模型小鼠的线粒体自噬机制研究

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 584-588页

作者：钟晓琴王宇胡达峰宁振求邓敏贞中医证候全国重点实验室广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院/广东省中医药科学院广东广州510120 广州中医药大学广东广州510006

目的研究中风醒脑液(ZFXN)对胶原酶诱导脑出血(ICH)模型小鼠的线粒体自噬机制。方法采用胶原酶注入尾状核制备ICH小鼠模型。将C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、ZFXN低剂量组(13g/kg)和ZFXN高剂量组(26g/kg),假手术组和模型... 详细信息

目的研究中风醒脑液(ZFXN)对胶原酶诱导脑出血(ICH)模型小鼠的线粒体自噬机制。方法采用胶原酶注入尾状核制备ICH小鼠模型。将C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、ZFXN低剂量组(13g/kg)和ZFXN高剂量组(26g/kg),假手术组和模型组给予等体积生理盐水,给药组给予对应药物,连续灌胃给药30 d,每天一次。采用改良神经功能评分(mNSS)评价小鼠的神经功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平;实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、白介素-1β(IL-1β)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、转录激活因子6(ATF6)、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、帕金森氏病蛋白2(PARKIN)、肌细胞特异性增强因子2D(MEF2D)、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)和p62 mRNA的表达;尼氏体染色观察神经元情况;免疫组化检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;蛋白印迹法(WB)检测PINK1、PARKIN、MEF2D、Beclin-1、LC3和p62蛋白表达。结果与假手术组相比较,模型组的mNSS评分、ROS、NSE、NOX4、HIF-1α、IL-1β、NLRP3、ATF6、PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B和GFAP表达显著增加(P<0.01),而GPX4、MEF2D和p62水平显著减少(P<0.01)。与模型组相比较,ZFXN各剂量组mNSS评分、ROS、NSE、NOX4、HIF-1α、IL-1β、NLRP3、ATF6、PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B和GFAP表达显著减少(P<0.05),而GPX4、MEF2D和p62水平显著增加(P<0.05)。结论 ZFXN可能通过调节PINK1/PARKIN/MEF2D线粒体自噬通路来减少神经元氧化应激和神经炎症的ICH病理损伤。

关键词：中风醒脑液脑出血线粒体自噬机制胶原酶

基于单细胞转录组探讨新型冠状病毒感染后慢性疲劳综合征与炎症反应、氧化应激、细胞凋亡之间分子机制及其潜在干预中药预测

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中草药 2024年第11期55卷 3774-3788页

作者：黎祖鸣封杰妮陈雪如卢月黄涛亮李际强杨荣源陈剑坤刘云涛广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治... 详细信息

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治疗新冠后CFS提供理论支持。方法使用R语言4.2.1中的“Seurat”包处理新冠后CFS患者与正常受试者的外周血单细胞测序数据,“CellChat”包进行细胞通讯分析,“scMetabolism”包评估细胞代谢特征,综合5种算法(AddModuleScore、AUCell、UCell、singscore和ssGSEA)计算新冠后CFS患者与正常受试者中5种免疫细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分,并比较两者间的差异。使用“scCODE”包鉴定各类免疫细胞在正常受试者与新冠后CFS患者之间的差异表达(differential expression,DE)基因。Upset图分析得到新冠后CFS炎症反应相关基因(inflammatory response related genes,IRGs)、氧化应激相关基因(oxidative stress related genes,OSRGs)和细胞凋亡相关基因(apoptosis related genes,ARGs)。使用“ClusterProfiler”包分别对IRGs、OSRGs、ARGs进行基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)富集分析。基于STRING数据库及Cytoscape软件构建“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互复杂网络,使用cytoHubba插件筛选关键基因。利用COREMINE数据库预测调控关键基因的中药,并通过古今医案云平台统计中药的性味归经、药物功效分类。结果共鉴定出5种免疫细胞,分别为B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞和单核细胞。相比于正常受试者,新冠后CFS患者的细胞通讯更为丰富且强度更大,两者之间并无明显差异的细胞代谢特征。新冠后CFS患者中各类免疫细胞的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分普遍高于正常受试者。共得到33个IRGs、17个OSRGs和54个ARGs。“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互网络显示,IRGs、OSRGs和ARGs之间存在密切联系,最后鉴定出8个关键基因。干预中药药性以寒为主,温、平次之;药味以苦、辛、甘为主;归经以肝、脾、肺为主;功效分类以补虚药(甘草、人参等)、清热药(黄芩、鱼腥草等)、活血化瘀药(郁金、丹参等)为主。结论新冠后CFS患者存在异常的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡状态,且三者之间密切关联。8个关键基因(TNF、BCL2、CTNNB1、CXCL8、IFNG、HIF1A、MCL1、CYCS)可能是新冠后CFS的潜在治疗靶标。临床治疗新冠后CFS应注重补虚药、清热药及活血化瘀等药物的配伍使用。

关键词：新型冠状病毒感染慢性疲劳综合征单细胞转录组炎症反应氧化应激细胞凋亡甘草人参黄芩鱼腥草郁金丹参

小柴胡颗粒的化学成分及大鼠口服后的入血成分分析

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4078-4090页

作者：刘晓丽欧沛思林爱华刘奕明广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院珠海医院广东珠海519000 广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm×10... 详细信息

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据后与对照品比较保留时间、精确相对分子质量、二级离子碎片以及参照相关文献进行化学成分鉴别;通过皮下注射干酵母建立大鼠发热模型后,灌胃给予正常组及模型组大鼠小柴胡颗粒,给药后于不同时间点眼眶静脉取血,分离血浆,在多反应监测模式(MRM)下进行扫描鉴定入血成分。从小柴胡颗粒中共初步鉴定出112种化学成分,包括63种黄酮类、31种皂苷类、6种有机酸类、4种苯丙素类、3种氨基酸类以及5种其他类化合物;从血浆中鉴定得到18个入血原型成分。该研究鉴定了小柴胡颗粒化学成分及入血成分,为进一步的药效物质基础及质量控制研究奠定了基础。

关键词：小柴胡颗粒化学成分入血成分 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS UPLC-MS/MS

外周血单核细胞预测老年重症流感风险模型的建立及靶向中药预测

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中草药 2024年第10期55卷 3420-3432页

作者：黎祖鸣封杰妮符珊珊陈俊旭甘考卢月陈剑坤刘云涛杨荣源李际强黄涛亮广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的... 详细信息

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的性味归经、药物分类,为中医药治疗老年流感提供理论支持。方法通过scRNA-seq和RNA-seq数据集得到具有较高预测能力的老年流感相关免疫细胞群及其关键基因。基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)、标志性基因集(Hallmark gene set)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和Reactome生物通路知识库富集分析揭示关键基因参与的生物过程及通路。循环算法用于构建老年重症流感风险预测模型。CTD和COREMINE数据库查找对关键基因有调控作用的化学成分及中药,并通过古今医案云平台统计高频中药的性味归经、药物分类。结果单核细胞及其相关基因对于老年流感具有较高的预测能力。老年流感单核细胞相关基因显著富集在感染、代谢和炎症免疫等生物过程及信号通路。5个基因(BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9)的组合可较为准确预测老年重症流感。根据参考文献筛选出42种化学成分,得到高频中药石斛、灵芝、地骨皮、人参、桑叶等;药性以平、寒、温为主;药味以甘、苦、辛为主;归经以肝、脾、肺经居多;以补虚药、清热药、利水渗湿药、解表药、活血化瘀药、消食药、止咳平喘药为主。结论单核细胞可能在老年流感中发挥重要作用。BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9可能是老年重症流感的潜在诊断及治疗靶标。通过生物信息学分析得出老年流感单核细胞相关基因及对应的高频中药,为治疗老年流感的中药新药开发及临床应用提供了新思路。

关键词：老年重症流感单细胞转录组转录组风险预测模型单核细胞石斛灵芝地骨皮人参桑叶

机器人辅助椎弓根置钉临床疗效的系统评价再评价

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中国循证医学杂志 2024年第5期24卷 584-590页

作者：孙文熙高泽辉丘明旺林锐王洪伸陈博来林涌鹏广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院广州510120 广州中医药大学第二附属医院/中医证候全国重点实验室广州510120

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时... 详细信息

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时限均为建库至2023年4月28日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后,分别使用PRISMA、AMSTAR-Ⅱ、ROBIS和GRADE工具评价纳入研究的报告质量、方法学质量、偏倚风险以及证据质量强度。结果共纳入20篇SR/MA。纳入研究结论显示机器人辅助椎弓根置钉准确性相比徒手置钉可能更高,并发症数量更少。所有SR/MA的报告质量、方法学及置钉疗效的证据质量均为低或极低,偏倚风险为高风险。其主要原因包括纳入研究的异质性偏高,研究方法和选择标准模糊、关键报告流程缺失等。结论机器人辅助椎弓根置钉相比传统徒手置钉可能具有更好的临床疗效,但相关SR/MA的质量较低。

关键词：骨科手术机器人椎弓根螺钉系统评价再评价