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一测多评法测定美洲大蠊药材5种核苷类成分

中药新药与临床药理 2024年第7期35卷 1055-1060页

作者：陈慕媛冯思琪丘振文罗骞谢纯珠齐诗语黄月纯李辉标广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广东省中医临床研究院广东广州510405 广州中医药大学广东广州510006

目的建立高效液相色谱(HPLC)一测多评法同时测定美洲大蠊中尿嘧啶、尿苷、次黄嘌呤、肌苷及鸟苷5种成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.01 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相,梯度洗脱;流... 详细信息

目的建立高效液相色谱(HPLC)一测多评法同时测定美洲大蠊中尿嘧啶、尿苷、次黄嘌呤、肌苷及鸟苷5种成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.01 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:20℃;检测波长:260 nm;进样量:10μL。计算内参物尿苷与其他成分的相对校正因子(fa/b)。一测多评法测定10批美洲大蠊中5种成分含量,并与外标法比较。结果5种核苷类在各自范围内线性良好(r>0.9995),平均加样回收率97.0%~100.8%。尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷的fa/b分别是0.9080、1.0053、1.9695、1.3034。结论所建立的方法准确稳定,可为美洲大蠊药材及提取物的质量控制提供理论参考。

关键词：美洲大蠊核苷类成分尿苷高效液相色谱法一测多评法

中药多糖类成分促进慢性难愈创面修复机制的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 245-252页

作者：许东敏杜娟娇杨莹郭夏晴广西中医药大学南宁530000 广西中医药大学第一附属医院南宁530000 北京中医药大学深圳医院广东深圳518000

慢性难愈创面是皮肤连续性遭破坏,兼之可能由于反复感染、血管功能不全、糖尿病、肿瘤或慢性骨髓炎等因素影响造成创面愈合中断和康复延迟而形成慢性难治伤口,严重影响患者的生活质量及耗费大量医疗资源。中药多糖类成分是多数中药的有... 详细信息

慢性难愈创面是皮肤连续性遭破坏,兼之可能由于反复感染、血管功能不全、糖尿病、肿瘤或慢性骨髓炎等因素影响造成创面愈合中断和康复延迟而形成慢性难治伤口,严重影响患者的生活质量及耗费大量医疗资源。中药多糖类成分是多数中药的有效成分,在现代药理学研究中发现中药所含多糖成分具有抗炎、抗氧化、抗辐射、降血糖、抗病毒、抗肿瘤、降血脂、免疫调节等作用。通过对文献的归纳、分析、总结,发现中药多糖成分促进慢性难愈创面的修复的机制主要从以下几个方面实现:其一,通过调节白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子或与巨噬细胞相关的炎症蛋白、趋化蛋白如巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)缩短炎症期;其二,激活血小板源性生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、TGF-α、血管内皮生长因子(VEGF)等生长因子以募集内皮细胞和成纤维细胞进入组织增殖期;其三,激活VEGF及其下游受体血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1和VEGFR-2介导蛋白激酶C/细胞外调节蛋白激酶(PKC/ERK)信号通路,或通过血管紧张素(ANG)途径,促进血管新生,改善创面血流;其四,通过增强成纤维细胞(FB)分泌羟辅氨酸和透明质酸(HA)促进合成胶原蛋白的能力、以及调节相关基质金属酶及其酶抑制剂调整细胞外基质;其五,清除自由基减少氧化应激给组织带来的损伤;其六,加强机体巨噬细胞吞噬能力、自然杀伤细胞(NK细胞)的活性及T细胞的增殖,提高组织的防御能力。中药多糖对创面修复可同时从多方面进行,多靶点、多通路,这是其优势潜力所在,期待后续基础研究在增进慢性难愈创面治疗手段时更加注重对于中药多糖类成分对创面修复的机制研究。

关键词：中药多糖慢性难愈创面修复机制

扩张型心肌病相关信号通路及其中医药调控研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 256-264页

作者：邱月清王振涛河南中医药大学郑州450053 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院郑州450053

扩张型心肌病(DCM)主要病理改变为左心室扩大为主的全心扩大,临床表现为心功能下降、心律失常、血栓栓塞等,甚者可能发生猝死,是难治性心血管疾病之一。临床仍以保守药物治疗为主,但因其无法规避的血压过低等不良反应常难以达到满意预后... 详细信息

扩张型心肌病(DCM)主要病理改变为左心室扩大为主的全心扩大,临床表现为心功能下降、心律失常、血栓栓塞等,甚者可能发生猝死,是难治性心血管疾病之一。临床仍以保守药物治疗为主,但因其无法规避的血压过低等不良反应常难以达到满意预后,而中西医结合治疗可有效改善副作用、提高疗效。研究发现,核转录因子-κB(NF-κB)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β(TGF-β)/Smads、Toll样受体(TLR)4/c-Jun氨基末端激酶(JNK)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(Akt)等信号通路在DCM的发生发展中起到了关键的调控作用,且中医方药可通过调控上述信号通路起到改善心肌纤维化、逆转心室重构、减轻氧化应激、抗炎等多种作用改善DCM,并且因其多靶点、多机制的作用特点具有安全性高、耐受性良好的优势,已经成为当前临床治疗的重要内容。

关键词：扩张型心肌病中医药信号通路研究进展

基于《伤寒论》探讨半夏泻心汤类方治疗溃疡性结肠炎的机制及研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 279-288页

作者：张亚粉左振魁刘天瑞河南中医药大学郑州450046 河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院郑州450002

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的... 详细信息

溃疡性结肠炎(UC)是一种非特定性的炎性肠道问题,其主要症状包括腹痛、腹泻和黏液血便,有易复发,较难治的特点。该疾病的发病机制尚未完全明确,现代医学治疗手段效果欠佳,加之多年来,UC发病率呈逐年上升的趋势,故临床迫切需要寻找新的治疗方法。中医药防治此类病证由来已久,仲景曾在《伤寒论》原文中多次论及下利、泄利与久痢、肠风、脏毒等与UC相类似的症状,论述了相应病机与治法,并提出有效的治疗方剂,为后世运用经方辨治UC奠定了基础。近年来,研究发现中医药对防治UC具有独特的优势,不仅能够有效缓解UC患者的症状,还能在很大程度上改善患者的生活质量。研究还发现,无论是从网络药理学、临床观察亦是动物实验,半夏泻心汤类方作为一种中药复方,在治疗UC方面取得了显著的疗效。经过大量的实验探索,研究发现半夏泻心汤类方在治疗UC的原理上与细胞炎症因子、肠道微生物、免疫反应、相关的信号传导途径和细胞焦亡等因素有紧密的关联。本文将会对半夏泻心汤类方在治疗UC中的作用原理做一个全面的概括,包括其理论根源、药物组成和作用机制等各个方面的研究,旨在给临床实践提供更加稳固的理论支持。

关键词：伤寒论半夏泻心汤溃疡性结肠炎研究进展机制

黄芩清热除痹胶囊调控p53/p21信号通路延缓骨关节炎大鼠软骨细胞衰老的机制研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3330-3339页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍万磊黄旦郭锦晨齐亚军胡月迪安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学安徽合肥230012

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺... 详细信息

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺激,诱导OA大鼠风湿热痹模型,分为正常(Con)组,OA模型(MIA)组,OA模型+风湿热刺激模型(MIA-M)组,MIA-M+HQC低(MIA-M+HQC-L)、中(MIA-M+HQC-M)、高(MIA-M+HQC-H)剂量组,MIA-M+氨基葡萄糖(MIA-M+GS)组,模型制备后灌胃30 d,苏木素-伊红(HE)和番红O固绿(SO)染色观察软骨病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β和IL-6的表达,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和周期,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测基质降解酶13(MMP13)、聚蛋白多糖酶5(ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)和转化生长因子-β(TGF-β)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(WB)检测p53/p21通路、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)蛋白的表达。Con组大鼠关节软骨表面光滑平整,潮线光滑平整;MIA组和MIA-M组软骨层破坏明显,软骨基质减少,MIA-M组情况更严重。HQC高剂量组和MIA-M+GS组软骨表面基本完整,分层清晰。与MIA-M+HQC-H组相比,低、中剂量Mankin′s评分较高,MIA-M+GS组变化不明显。与Con组相比,MIA和MIA-M组软骨细胞G_1的比例升高,S期、G_2期比例下降,细胞凋亡率增加;与MIA-M组相比,HQC各剂量组以浓度依赖的方式抑制细胞凋亡,促进增殖;与MIA-M+HQC-H组相比,高剂量较中、低剂量作用更显著,与MIA-M+GS组相比差异无统计学意义。与Con组相比,MIA和MIA-M组IL-1β和IL-6升高,MMP13和ADAMTS-5 mRNA水平升高,p53、p21、p16和Bax蛋白升高,COLⅡ、TGF-β mRNA水平下降;与MIA-M组相比,HQC和GS药物干预后IL-1β和IL-6下降,MMP13和ADAMTS-5 mRNA、p53、p21、Bax和p16蛋白水平下降,Bcl-2升高;与MIA-M+HQC-H组相比,这些指标改善优于HQC低、中剂量组,与MIA-M+GS组差异不明显。HQC延缓MIA诱导的OA大鼠软骨细胞衰老,抑制炎症反应和细胞外基质(ECM)降解,其机制可能与抑制p53/p21通路有关。

关键词：黄芩清热除痹胶囊骨关节炎风湿热模型细胞衰老 p53/p21

基于生物信息学探讨复方丹参滴丸改善阿司匹林抵抗的潜在机制

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中草药 2024年第14期55卷 4824-4835页

作者：高晟玮贾福运谷旭放张露丹钟钰吕子琛张博文吕春晓王保和天津中医药大学第二附属医院天津300150 天津中医药大学天津301617 天津中医药大学第一附属医院天津300193

目的基于生物信息学技术构建阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)分子预测模型,探究复方丹参滴丸改善AR潜在机制。方法在基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中获取AR和阿司匹林敏感(aspirin sensitivity,AS)相关的芯片数据,... 详细信息

目的基于生物信息学技术构建阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)分子预测模型,探究复方丹参滴丸改善AR潜在机制。方法在基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中获取AR和阿司匹林敏感(aspirin sensitivity,AS)相关的芯片数据,筛选差异表达基因(diffially express genes,DEGs),对AR和AS的DEGs进行富集分析,注释其功能;采用机器学习算法构建AR分子预测模型;在中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science数据库中获取复方丹参滴丸指纹图谱,根据Lipinski规则预测药物活性成分,使用Swiss Target Prediction数据库预测活性成分作用靶点,将DEGs和药物靶点取交集,获得复方丹参滴丸改善AR的潜在靶点,在metascape平台中对靶点基因进行功能注释;使用Autodock软件对核心靶点与活性成分进行分子对接;应用单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)算法对复方丹参滴丸干预AR的每个靶点分别进行通路富集分析,最后构建复方丹参滴丸改善AR的“成分-靶点-通路-功能”桑基图。结果共得到AR相关DEGs 597个,其中上调基因292个,下调基因305个。DEGs富集结果提示,AR相关基因主要定位在血小板α颗粒、分泌颗粒腔、细胞质囊泡腔上,通过介导花生四烯酸代谢、氧化磷酸化、WNT信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、类固醇同源物生物合成等信号通路,参与血液凝固、血小板活化、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)转录因子活性、脂质代谢过程的负调控、白细胞活化相关炎症反应、肾上腺素受体信号通路、氧化应激反应等生物过程,发挥调控肝素结合、胰岛素受体结合、血小板衍生生长因子受体结合、肾上腺素受体活性、生长因子受体结合、磷脂酰肌醇激酶活性、主要组织相容性复合物Ⅱ(MHCⅡ)类受体活性等功能。基于机器学习算法获得9个AR的分子标志物,并构建了曲线下面积(area under curve,AUC)=1的精准预测模型。通过网络药理学的方法获得复方丹参滴丸改善AR的10个活性成分和14个作用靶点及3个核心靶点,分子对接结果表明核心靶点和所有活性成分均能自发结合,富集分析提示复方丹参滴丸能够通过调控血栓形成、糖脂代谢、炎症反应、氧化应激、激素水平改善AR。结论由9个AR的分子标志物组成的AR预测模型具有较为精准的预测性能;除血小板活化和聚集外,炎症反应、激素水平、氧化应激、糖脂代谢同样参与了AR的形成,复方丹参滴丸能够通过多靶点调控以上途径改善AR。

关键词：复方丹参滴丸阿司匹林抵抗活血化瘀生物信息学机器学习

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体表敏化点探查模式浅析

北京中医药大学学报 2024年

作者：潘威林力楠余笑帅王肖盈沈琼颖郑思懿聂娜梁宜方剑乔浙江中医药大学第三临床医学院浙江中医药大学附属第三医院

腧穴敏化作为近20年来针灸界突破性的新理论，其对经络腧穴理论的丰富及针灸临床诊治水平的提升具有重要价值。当前针对不同疾病的体表敏化点探查研究的数量呈不断上升趋势，但是体表敏化点探查模式尚缺乏系统性的梳理和总结。本文根据... 详细信息

腧穴敏化作为近20年来针灸界突破性的新理论，其对经络腧穴理论的丰富及针灸临床诊治水平的提升具有重要价值。当前针对不同疾病的体表敏化点探查研究的数量呈不断上升趋势，但是体表敏化点探查模式尚缺乏系统性的梳理和总结。本文根据体表敏化点探查过程中研究目的的开放度与目标范围的精准度、变动度等特征，将体表敏化点探查方式分为泛查模式与精查模式，两者在探查效率、结果呈现度上存在明显差异，前者又可细分为整体性泛查模式、定域性泛查模式，后者则细分为固定性精查模式、变化性精查模式。通过深入剖析各探查模式的适用场景、特色优势、存在问题并提出针对模式选择、模式创新、模式未来发展方向的若干意见，旨在为后续各类疾病体表敏化点探查研究提供有益的思考与启示。

关键词：穴位敏化体表敏化点探查模式精准探查粗泛探查

新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 108-118页

作者：周巧刘健万磊朱艳齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230012

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 详细信息

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。

关键词： miR-502-5p 骨关节炎新风胶囊炎症细胞外基质

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邵氏针灸学术流派五神针联合国医大师张磊教授眠安汤从“神”治疗复合证型不寐经验

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辽宁中医杂志 2024年

作者：游晓阳马巧琳李明哲庞宏捷王荣荣胡斌河南中医药大学第三附属医院河南中医药大学

复合证型不寐是指在临床上不寐长期持续，迁延不愈，形成的兼见两种及以上中医证型的不寐，本病是临床上常见的复杂的难治性疾病。五神针与眠安汤均为治疗不寐的经验处方，二者承载着针灸名家邵经明教授和国医大师张磊教授的学术思想。... 详细信息

复合证型不寐是指在临床上不寐长期持续，迁延不愈，形成的兼见两种及以上中医证型的不寐，本病是临床上常见的复杂的难治性疾病。五神针与眠安汤均为治疗不寐的经验处方，二者承载着针灸名家邵经明教授和国医大师张磊教授的学术思想。胡斌基于多年临床临证经验，提出了复合证型不寐的概念，认为本病病位在脑，是关于“神”的疾病，病机为阴阳失交、脏腑失调，而致神不守位。并通过深入研究名老中医学术思想，发现五神针与眠安汤均具有治神调神的共性。故将名老中医治疗不寐的经验技术加以创新应用，提出以五神针联合眠安汤从“神”治疗复合证型不寐的观点，并在临床上取得了较好的疗效。

关键词：复合证型不寐针药并用 “神” 五神针眠安汤