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非洲猪瘟病毒抗体化学发光检测法的建立

中国动物传染病学报 2024年

作者：张宝真陈卓凡田欣何嘉敏杨佳臻庞旋飞王贵平李中圣白挨泉佛山科学技术学院生命科学与工程学院广州市番禺区畜牧兽医站广东海大畜牧兽医研究院有限公司

非洲猪瘟（ASF）作为高致病性传染病，自从2018年在我国爆发，给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失。针对非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体，建立一种快速、灵敏的化学发光检测方法。以ASFV P30蛋白作为包被抗原，羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标... 详细信息

非洲猪瘟（ASF）作为高致病性传染病，自从2018年在我国爆发，给我国生猪养殖业造成了严重的经济损失。针对非洲猪瘟病毒（ASFV）抗体，建立一种快速、灵敏的化学发光检测方法。以ASFV P30蛋白作为包被抗原，羊抗猪IgG-HRP抗体作为酶标抗体，鲁米诺为底物溶液，优化检测方法，成功建立ASFV化学发光抗体检测方法。该方法能在室温30 min内完成对ASFV抗体血清特异性检测，灵敏度高于商品化ASFV抗体检测试剂盒，与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒的抗体阳性血清均无交叉反应；批内、批间变异系数均小于10%，重复性良好。通过对108份临床血清样品的检测并与商品化ASFV抗体检测试剂盒检测结果进行比较，符合率达93.5%。本研究建立的ASFV化学发光抗体检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好、简单快速，可应用于临床血清ASFV抗体的检测。

关键词：非洲猪瘟病毒真核表达化学发光抗体检测方法

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牛支原体疫苗研究进展

中国动物传染病学报 2024年第1期32卷 222-227页

作者：东笑陶攀王贵平贾爱卿广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东省养猪与猪病防控技术研究企业重点实验室广州511400 广东海大集团股份有限公司广州511400

牛支原体(***)是牛的重要病原体,能够引起牛的乳腺炎、关节炎和肺炎等疾病。牛支原体已在全世界传播,对全球范围内的养牛业产生了重大不利影响。目前,由于牛支原体的耐药性有增强的趋势,同时缺乏有效的疫苗和治疗方法,这严重阻碍了牛支... 详细信息

牛支原体(***)是牛的重要病原体,能够引起牛的乳腺炎、关节炎和肺炎等疾病。牛支原体已在全世界传播,对全球范围内的养牛业产生了重大不利影响。目前,由于牛支原体的耐药性有增强的趋势,同时缺乏有效的疫苗和治疗方法,这严重阻碍了牛支原体感染的控制。预防、控制甚至清除牛支原体最好的方法是使用有效的疫苗。虽然目前我国还没有获得新兽药证书的牛支原体疫苗,但相关的研究已取得了一定的进展。本文根据多年来牛支原体疫苗研究的相关资料,从牛支原体感染与免疫机制、灭活疫苗、弱毒活疫苗、基因工程疫苗四个方面进行综述,以期为今后牛支原体疫苗的研制提供思路及参考。

关键词：牛支原体感染与免疫灭活疫苗弱毒活疫苗基因工程疫苗

牛多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及致病力评估

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 80-87页

作者：朱杰赵旭东笑骆建铧席俊程王贵平贾爱卿广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心广东广州511400 广东海大畜牧兽医研究院广东广州511400 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是牛场中重要的疾病之一,给我国养牛业造成了严重的经济损失。多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)是与BRD相关的主要细菌性病原。为... 详细信息

牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)是牛场中重要的疾病之一,给我国养牛业造成了严重的经济损失。多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)是与BRD相关的主要细菌性病原。为分离纯化到目前Pm和Mh流行的优势毒株,建立合适的小动物攻毒模型,给BRD疫苗研制提供有效的疫苗候选株。本研究首先从患BRD牛的病料中进行Pm和Mh的检测、分离鉴定,确定基因型且评估分离株对小鼠的致病性,筛选合适的疫苗候选株。结果显示,本研究在2022年11-12月从我国3个省份的6个牛场采集到48份患有BRD的牛鼻拭子,PCR检测结果显示Pm的检出率为47.9%(95%CI:33.3~62.8),Mh的检出率为37.5%(95%CI:24.0~52.6),Pm/Mh共感染的检出率为18.8%(95%CI:8.9~32.6)。在阳性样本中分离纯化得到12株Pm,经血清型鉴定均为A型多杀性巴氏杆菌(PmA);分离到11株Mh,其中7株为A1型,4株为A6型,且在同一头牛的鼻拭子中同时分离到A1型和A6型的Mh。随后建立PmA和Mh的小鼠感染模型,筛选到PmA和Mh的强毒株分别是PmA GDP001株和Mh GDM019株,并且测定PmA GDP001株对小鼠的LD_(50)为10^(1.1) CFU,Mh GDM019株对小鼠的LD_(50)为10^(8.2) CFU。本研究揭示了我国部分地区牛场中BRD主要细菌性病原的流行病学,分离到了重要的病原(PmA和Mh),并且鉴定了分离株的血清型,且通过小鼠感染致病模型筛选到毒力强的PmA和Mh菌株,为BRD多联多价疫苗的研发提供了良好的疫苗候选株。

关键词：牛呼吸道疾病多杀性巴氏杆菌溶血性曼氏杆菌细菌分离血清型致病力

猪链球菌2、7、9型西藏小型猪感染模型的初步研究

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王娟张玮王星晨朱利塞王贵平孙明华贾爱卿广州市益豚猪业投资有限公司广东海大集团股份有限公司广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东省养猪与猪病防控技术研究企业重点实验室

为探索西藏小型猪作为猪链球菌2、7、9型感染模型的可行性，本研究用2型、7型、9型猪链球菌分别以2×108CFU、7×109CFU、2×109CFU的剂量颈部肌肉接种60日龄的西藏小型猪，对照组猪同样方式接种等体积生理盐水，每组5头仔猪。接种后定... 详细信息

为探索西藏小型猪作为猪链球菌2、7、9型感染模型的可行性，本研究用2型、7型、9型猪链球菌分别以2×108CFU、7×109CFU、2×109CFU的剂量颈部肌肉接种60日龄的西藏小型猪，对照组猪同样方式接种等体积生理盐水，每组5头仔猪。接种后定期监测仔猪的临床症状和血液中带菌情况，30d后安乐死全部组别仔猪，观察其组织病理学变化。结果显示，与对照组相比，攻毒组仔猪均表现出发热、食欲减退、精神沉郁等临床症状；攻毒后仔猪血液带菌的时间为3～6d，组织病理学变化结果显示2型猪链球菌对西藏小型猪的致病力最强，其次为7型，病变主要集中在肺，脑、肝或关节等部位也有不同程度的病变。本研究初步确定西藏小型猪可作为猪链球菌2型、7型、9型人工感染模型，为临床猪链球菌的致病机制研究和动物模型建立提供参考依据。

关键词：猪链球菌西藏小型猪感染模型致病性

发酵中草药对育肥猪生长性能、血液生化指标及免疫机能的影响

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中国饲料 2024年第3期 149-155页

作者：刘琳朱万江吴保庆朱明恩平李军何彦侠田浪广东海大集团股份有限公司广东广州511400 鹤壁市浚县畜牧局河南鹤壁456250 广东省养猪与猪病防控技术企业重点实验室广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东广州511400

为研究日粮中添加发酵中草药(黄芪、板蓝根、大枣、党参、石榴皮、连翘、黄芩)对育肥猪临床表现、生产性能、血液生化指标等的影响,试验将32头100日龄、体重为(48±1)kg的“杜×长×大”三元杂交育肥猪随机均分为4组,包括对照组(饲喂基... 详细信息

为研究日粮中添加发酵中草药(黄芪、板蓝根、大枣、党参、石榴皮、连翘、黄芩)对育肥猪临床表现、生产性能、血液生化指标等的影响,试验将32头100日龄、体重为(48±1)kg的“杜×长×大”三元杂交育肥猪随机均分为4组,包括对照组(饲喂基础日粮)、低剂量组(饲喂基础日粮+0.5%发酵中草药)、中剂量组(饲喂基础日粮+1%发酵中草药)和高剂量组(饲喂基础日粮+2%发酵中草药),试验周期为35 d,试验期间监测受试猪只精神状态、腹泻情况、体温、生产性能、栏舍氨气含量,试验后采集受试猪只血液用于测定血液常规和生化指标。结果表明:试验组猪只饲喂发酵中草药后精神状态、体温无明显异常(P>0.05),发酵中草药能够一定程度改善猪只腹泻和生产性能,尤其是中剂量组增重相比于对照组增加5.97 kg,提升26.49%(P0.05),试验组相比于对照组红细胞数有轻微提升(P>0.05),低、中、高试验组猪只血液中血红蛋白含量显著提高20.49 g/L(17.22%)、24.01 g/L(20.18%)、25.48 g/L(21.41%)(P0.05),而总蛋白和球蛋白含量相比于对照组呈现剂量依赖性增加,高剂量组相比于对照组分别提升5.11 g/L(9.94%)和5.56 g/L(17.14%),差异显著(P<0.05)。进一步ELISA检测结果显示,试验组IgA、IgG、IgM含量均显著上升(P<0.01),高剂量组相比于对照组分别增加248.50 mg/mL(38.37%)、7.25 mg/mL(105.99%)、146.29 mg/mL(24.68%),差异极显著(P<0.01),说明基础日粮中添加发酵中草药对猪只机体无明显不良影响,且能够提升猪只生产性能、降低栏舍氨气,同时改善机体免疫功能。

关键词：发酵中草药育肥猪生长性能血液生化指标免疫机能

猪用疫苗中牛病毒性腹泻病毒和非洲猪瘟病毒双重荧光PCR检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2024年第9期 1122-1126+1132页

作者：于新友李天芝张松林沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东绿都生物科技有限公司

目的建立同时检测猪用疫苗中牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）和非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）2种病原的双重荧光PCR方法，并进行验证及初步应用。方法根据NCBI中收录的BVDV5'UTR和ASFV VP72... 详细信息

目的建立同时检测猪用疫苗中牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）和非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）2种病原的双重荧光PCR方法，并进行验证及初步应用。方法根据NCBI中收录的BVDV5'UTR和ASFV VP72基因序列，分别设计1对特异性引物和1条TaqMan探针，建立一种能同时检测BVDV和ASFV的双重荧光PCR方法。对建立的方法进行灵敏度、特异性和精密性验证。采用建立的方法分别检测猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）活疫苗和猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）活疫苗（76批次）以及添加BVDV和重组质粒pMD-VP72的猪PRV活疫苗（各5瓶）中的BVDV和ASFV，并按照《中华人民共和国兽药典》三部（2020版）和中华人民共和国农业农村部公告第172号规定的方法分别对BVDV和ASFV进行复核检测。结果建立的双重荧光PCR法最低可检测浓度为4.2拷贝/μL的BVDV重组质粒和浓度为8.7拷贝/μL的ASFV重组质粒；不与其他常见病原体发生交叉反应；重复性和试验间精密性检测的变异系数（CV）均不高于2%。结论本实验建立的双重荧光PCR方法灵敏度高，特异性强，精密性好，可用于猪用疫苗中外源病毒的快速检测及猪用疫苗等生物制品的质量控制。

关键词：牛病毒性腹泻病毒非洲猪瘟病毒荧光PCR TaqMan探针

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不同谷物来源酶解蛋白对断奶仔猪生长性能、血清激素和免疫指标的影响

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饲料研究 2024年第4期47卷 23-28页

作者：申俊华赵小刚苏勇郭吉余广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心广东广州511400 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095 广东省养猪与猪病防控技术企业重点实验室、广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东广州511400

试验旨在研究不同谷物来源酶解蛋白对断奶仔猪生长性能、血清激素和免疫指标的影响。试验选用体重接近(13.08±0.14) kg的44日龄断奶仔猪120头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用不同谷物来源酶解... 详细信息

试验旨在研究不同谷物来源酶解蛋白对断奶仔猪生长性能、血清激素和免疫指标的影响。试验选用体重接近(13.08±0.14) kg的44日龄断奶仔猪120头,随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别用不同谷物来源酶解蛋白(大豆酶解蛋白、大米酶解蛋白和小麦酶解蛋白,等氮添加)替代基础饲粮中的发酵豆粕和部分豆粕。预试期5 d,正式试验期20 d。结果表明,与大米酶解蛋白和小麦酶解蛋白组相比,大豆酶解蛋白组仔猪前期(1~10 d)和全期(1~20 d)的平均日采食量(ADFI)显著升高(P大豆酶解蛋白组的平均日增重(ADG)显著高于大米酶解蛋白组(P大豆酶解蛋白组血清肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平显著低于对照组和大米酶解蛋白组(P大米酶解蛋白组血清胰岛素、生长激素、胰岛素样生长因子1、胃饥饿素和胃泌素水平均显著高于大豆酶解蛋白组和对照组(P研究表明,饲粮中添加大豆酶解蛋白可改善断奶仔猪生长性能,降低炎症因子水平,其效果优于大米酶解蛋白和小麦酶解蛋白。

关键词：酶解蛋白断奶仔猪生长性能血清激素免疫指标

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罗非鱼链球菌检测方法研究进展

中国动物检疫 2024年第1期41卷 80-86页

作者：胡毅军丁文桂黄洁莹罗律赖颖王自强李敏张险朋东莞市动物疫病预防控制中心广东东莞523086 广东海大畜牧兽医研究院有限公司广东广州511400

罗非鱼链球菌在世界范围内广泛分布,是威胁全球水产养殖业的重要病原体之一。无乳链球菌(Sreptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Sreptococcus iniae)是引起罗非鱼链球菌病的主要病原体,严重危害罗非鱼养殖业的健康发展。适合应用场景... 详细信息

罗非鱼链球菌在世界范围内广泛分布,是威胁全球水产养殖业的重要病原体之一。无乳链球菌(Sreptococcus agalactiae)和海豚链球菌(Sreptococcus iniae)是引起罗非鱼链球菌病的主要病原体,严重危害罗非鱼养殖业的健康发展。适合应用场景的快速、准确无乳链球菌和海豚链球菌检测技术,对于预防罗非鱼链球菌病的大规模暴发十分必要。本文总结了近年来罗非鱼链球菌检测方法研究状况,包括细菌分离培养鉴定、免疫学方法和分子生物学检测方法等,以期为罗非鱼链球菌病的诊断和预防提供技术支撑。

关键词：罗非鱼无乳链球菌海豚链球菌检测方法

枯草芽孢杆菌复合制剂对蛋鸡生产性能和肠道菌群的影响

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饲料研究 2024年第15期47卷 34-39页

作者：付强郭时金王建军程立坤赵修报姜忠兴付石军山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

试验旨在探究枯草芽孢杆菌复合制剂对蛋鸡生产性能和肠道菌群的影响。选取30只500日龄体重相近的蛋鸡随机分为2组,每组3个重复,每个重复5只蛋鸡。CK组(对照组)饲喂玉米-豆粕基础饲粮,T组在基础饲粮中添加1 g/kg枯草芽孢杆菌复合制剂。... 详细信息

试验旨在探究枯草芽孢杆菌复合制剂对蛋鸡生产性能和肠道菌群的影响。选取30只500日龄体重相近的蛋鸡随机分为2组,每组3个重复,每个重复5只蛋鸡。CK组(对照组)饲喂玉米-豆粕基础饲粮,T组在基础饲粮中添加1 g/kg枯草芽孢杆菌复合制剂。试验期70 d。结果显示,与CK组相比,T组料蛋比显著降低(P研究表明,添加枯草芽孢杆菌复合制剂可促进乳酸菌、Aeriscardovia生长,优化了肠道菌群结构,提高了饲料利用率。

关键词：枯草芽孢杆菌复合制剂蛋鸡生长性能肠道菌群高通量测序菌群多样性

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