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Eicosapentaenoic acid代谢产物促进胰岛α细胞转分化为胰岛β细胞的作用研究

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中国药理学通报 2024年第1期40卷 31-38页

作者：邢朝凤唐敏怡徐绮华王帅张宗猛赵子建穆云萍李芳红广东工业大学生物医药学院广东广州510006

目的探讨eicosapentaenoic acid(EPA)代谢产物促进胰岛α细胞向β细胞转分化的作用。方法雄性C57BL/6J小鼠连续5 d腹腔注射60 mg/kg链脲佐霉素(streptozocin, STZ)构建1型糖尿病(T1DM)小鼠模型,2周后随机分为模型组、97%EPA饮食干预组... 详细信息

目的探讨eicosapentaenoic acid(EPA)代谢产物促进胰岛α细胞向β细胞转分化的作用。方法雄性C57BL/6J小鼠连续5 d腹腔注射60 mg/kg链脲佐霉素(streptozocin, STZ)构建1型糖尿病(T1DM)小鼠模型,2周后随机分为模型组、97%EPA饮食干预组、75%鱼油(50%EPA+25%DHA)饮食干预组,每周检测随机血糖;模型到期后,通过免疫荧光染色观察小鼠胰腺中胰岛β细胞再生情况。提取tdTomato荧光蛋白特意标记α细胞的小鼠(GCGicre小鼠与Rosa26tdTomato小鼠杂交获得)胰岛,加入1 mmol·L^(-1)STZ诱导β细胞凋亡,添加EPA代谢产物,培养48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和tdTomato荧光的表达。在小鼠胰岛α细胞系αTC1培养基中添加EPA代谢产物,48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和胰高血糖素的表达。结果 EPA和鱼油饮食干预均可明显降低T1DM小鼠的血糖水平,改善葡萄糖稳态,且胰腺中出现胰岛素和胰高血糖素共定位细胞;EPA代谢产物引起已发生β细胞凋亡的小鼠胰岛中发生tdTomato荧光蛋白和胰岛素共定位;EPA代谢产物可促进胰岛αTC1细胞系细胞分泌胰岛素。结论 EPA及其代谢产物可通过促进胰岛α细胞转分化为β细胞,进而增加胰岛素的分泌,缓解T1DM小鼠的高血糖症状。

关键词： EPA 1型糖尿病胰岛α细胞胰岛β细胞转分化代谢产物

“能力本位、学生主体”的教学模式在诊断学教学中的探索

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中国继续医学教育 2024年第6期16卷 73-76页

作者：任红叶王翔宇王桂芬李若男赵亚男郝彩玲齐鲁医药学院临床医学院诊断学教研室山东淄博255300 齐鲁医药学院公共卫生与检验学院流行病与卫生统计学教研室山东淄博255300

诊断学是临床医学生从基础医学过渡到临床医学的一门十分重要的必修课程,扮演着桥梁课程的作用,对于培养学生的临床思维能力非常重要。基于诊断课程的特点,真实情境的临床教学对于充分发挥学生的主观能动性和提升其临床实操能力非常重... 详细信息

诊断学是临床医学生从基础医学过渡到临床医学的一门十分重要的必修课程,扮演着桥梁课程的作用,对于培养学生的临床思维能力非常重要。基于诊断课程的特点,真实情境的临床教学对于充分发挥学生的主观能动性和提升其临床实操能力非常重要。但由于教学资源缺乏、医患关系紧张,以及医院管理严格等原因,使学生接触真实患者开展实践并培养临床思维时面临诸多障碍。针对这些现实的困境,在教学中开展“能力本位、学生主体”的教学模式非常有必要。通过查阅以往研究人员在诊断学教学中开展的相关研究发现,在诊断学教学中开展此类教学模式,如以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)、翻转课堂、标准化病人(standardized patients,SP)能够显著提升学生的学习主观能动性和对于课程的兴趣,明显提高诊断学课程理论和实践考核成绩,并有效促进临床技能的训练和临床思维的培养。

关键词：能力本位学生主体教学模式诊断学临床思维探索

应用噬菌体展示随机12肽库筛选诺如病毒抗原模拟表位

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中国免疫学杂志 2024年第2期40卷 383-388页

作者：周飞园王璐梁芷妍林璧慧李佳恒王宇井多娜张绪富戴迎春南方医科大学公共卫生学院流行病学系广州510515 南方医科大学中医药学院广州510515

目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与... 详细信息

目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与scFv的结合活性及其与NoV P蛋白的竞争作用;阳性克隆测序后进行生物信息学分析,合成多肽鉴定其抗原性。结果:发现1段与GⅡ.6 VP1区同源性较高的氨基酸序列“MG-D-W”,综合分析提示其可能为GⅡ.6 NoV的抗原模拟表位,且合成的包含“MG-D-W”的多肽可竞争抑制P蛋白与人类组织血型抗原(HBGAs)受体的结合。结论:“MG-DW”是与NoV单链抗体高亲和力的肽段,可能模拟了GⅡ.6 NoV与scFv结合的抗原表位。

关键词：诺如病毒 12肽库抗原模拟表位单链可变片段抗体

柴胡桂枝汤治疗神经精神疾病的临床应用与药理作用研究进展

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中成药 2024年第8期46卷 2677-2684页

作者：李东刘桂余潘磊严铭德王妍谭成浩李伟鹏谢炜南方医科大学中医药学院广东广州510515

近年来,全球范围内神经精神疾病的患病率迅速增加,对人们的身心健康和社会经济发展构成了巨大威胁。柴胡桂枝汤为仲景名方,具有通利枢机、调和气血之效。经历代医家发挥及临床实践,本方在治疗神经精神疾病上具有独特优势。本文以中医理... 详细信息

近年来,全球范围内神经精神疾病的患病率迅速增加,对人们的身心健康和社会经济发展构成了巨大威胁。柴胡桂枝汤为仲景名方,具有通利枢机、调和气血之效。经历代医家发挥及临床实践,本方在治疗神经精神疾病上具有独特优势。本文以中医理论为基础,将柴胡桂枝汤在神经精神疾病中的临床应用及药理机制进行综述,以期为柴胡桂枝汤的临床推广和基础研究提供了参考,为神经精神疾病的治疗与新药研发提供了新思路。临床研究显示,柴胡桂枝汤目前广泛用于治疗癫痫、抑郁、失眠等神经精神疾病,西药联合柴胡桂枝汤的治疗效果普遍优于纯西药治疗。基础研究表明,柴胡桂枝汤可通过调节电离子活动、单胺类神经递质、雌孕激素、免疫炎症等途径,改善神经功能和精神状态,从而治疗神经精神疾病。然而,本方在现有的研究中,所涉及的疾病类型仍较为局限,临床研究的科学性和客观性不足,发生疗效的机制研究也相对薄弱,这需要临床与科研工作者在研究中不断开拓和深入。

关键词：柴胡桂枝汤神经精神疾病临床应用药理作用

基于外翻肠囊模型考察人参、生姜单煎及合煎液纳米相态的肠吸收特性差异

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：郭小萌王琪李美景张楠龚慕辛首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室

目的：比较人参、生姜单煎和配伍合煎形成的纳米相态(NP)在大鼠肠吸收差异，探讨人参生姜合煎后形成的新NP对人参、生姜主要成分吸收的影响。方法：采用差速离心和透析技术分别富集人参、生姜单煎与合煎液中的NP；采用透射电子显微镜、... 详细信息

目的：比较人参、生姜单煎和配伍合煎形成的纳米相态(NP)在大鼠肠吸收差异，探讨人参生姜合煎后形成的新NP对人参、生姜主要成分吸收的影响。方法：采用差速离心和透析技术分别富集人参、生姜单煎与合煎液中的NP；采用透射电子显微镜、粒度分析仪、纳米颗粒跟踪分析仪对其形态、粒径、Zeta电位、浓度等进行表征；采用外翻肠囊模型，以超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-QqQ-MS/MS)对人参、生姜单煎、合煎的NP肠吸收液中指标性成分进行分析，以单位面积实际累积吸收量(Q实际)、吸收速率常数(Ka)、表观渗透系数(Papp)为评价指标，考察上述NP在十二指肠、空肠、回肠、结肠中的吸收特性。结果：人参、生姜单煎液与合煎液中均存在不规则球形NP，且合煎形成的NP中成分含量多低于单煎NP。其中，10种成分可吸收进入肠囊，主要吸收部位在小肠，Papp均>1×10-5cm·min-1。与单煎液NP比较，人参皂苷Rb1、人参皂苷Rf、4-姜酚、6-姜烯酚等成分的Q实际及Ka在合煎液NP中显著升高，而人参皂苷Re、6-姜酚则显著降低；除人参皂苷Re、人参皂苷Rd外，其余成分的Papp在合煎液NP中均显著升高。此外，人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、人参皂苷Ro的Q实际最大肠段部位前移，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、8-姜酚后移；人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd、人参皂苷Ro的Ka最大肠段部位及Papp最大肠段部位前移，人参皂苷Re、4-姜酚则后移。结论：人参、生姜合煎有助于促进二者有效成分的吸收，同时改变部分肠段对有效成分的吸收行为，该研究为后续二药配伍机制研究提供参考。

关键词：人参生姜结构中药学外翻肠囊纳米相态表征肠吸收

硒蛋白基因在新型冠状病毒感染患者中的表达水平及调控作用

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中国医学科学院学报 2024年第3期46卷 316-323页

作者：李晶张荣强张灵芝戚燕郝洁何傲月赵旭李秀芹陕西中医药大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室陕西咸阳712046 安康市汉滨区第二医院检验科陕西安康725021 陕西中医药大学人文管理学院公共管理教研室陕西咸阳712046

目的探讨硒蛋白基因在新型冠状病毒感染(COVID-19)患者中的表达水平及其可能的调控机制。方法从基因表达综合数据库获取数据集GSE177477,样本由有症状组(n=11)、无症状组(n=18)和健康对照组(n=18)构成。对数据集进行预处理,筛选出与COVI... 详细信息

目的探讨硒蛋白基因在新型冠状病毒感染(COVID-19)患者中的表达水平及其可能的调控机制。方法从基因表达综合数据库获取数据集GSE177477,样本由有症状组(n=11)、无症状组(n=18)和健康对照组(n=18)构成。对数据集进行预处理,筛选出与COVID-19相关的差异表达基因,并进行基因本体功能注释和京都基因与基因组百科全书富集分析,建立差异表达硒蛋白基因的蛋白质-蛋白质相互作用网络,采用多因素Logistic回归分析硒蛋白基因对COVID-19患者是否出现症状的影响。结果与健康对照组比较,有症状的COVID-19患者中GPX1、GPX4、GPX6、DIO2、TXNRD1、SELENOF、SELENOK、SELENOS、SELENOT、SELENOW基因表达均升高,TXNRD2、SELENON基因表达均下降(P均病的发生发展,为COVID-19的预防和治疗提供新的参考依据。

关键词：新型冠状病毒感染硒蛋白表达及调控 Logistic回归

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流速对卵形鲳鲹游泳行为及运动生理的影响

中国水产科学 2024年第4期31卷 381-390页

作者：张静胡长圣刘前戴佳玥王学锋汤保贵广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是发展深远海养殖的重要可选品种之一。为了初步了解其游泳能力及其应对流速改变的生理生化调节机制,在(26.99±0.70)℃的条件下,采用泳道呼吸仪,选取了小[体长(4.06±0.43)cm,体重(2.61±0.79)g]、大[体长... 详细信息

卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)是发展深远海养殖的重要可选品种之一。为了初步了解其游泳能力及其应对流速改变的生理生化调节机制,在(26.99±0.70)℃的条件下,采用泳道呼吸仪,选取了小[体长(4.06±0.43)cm,体重(2.61±0.79)g]、大[体长(11.06±0.70)cm,体重(56.09±9.99)g]两种规格的卵形鲳鲹进行游泳能力测试实验,分别测定了其游泳行为、呼吸代谢、生理生化指标。结果表明:实验测得小、大规格卵形鲳鲹的感应流速分别为(3.90±0.64)和(0.96±0.13)BL/s;临界游泳速度分别为(91.83±10.97)和(99.78±12.66)cm/s,暴发游泳速度分别为112.20cm/s和114.25 cm/s,两种规格卵形鲳鲹的暴发能力相当。两种规格卵形鲳鲹的摆尾频率与流速均呈显著线性正相关关系。静止耗氧率分别为(899±111)mg/(kg·h)和(525±95)mg/(kg·h),均高于20%、40%和60%Ucrit流速组的运动耗氧率;最小COT均出现在60%Ucrit流速组;肌肉、肝脏和血液中乳酸含量的最低值也出现在60%Ucrit流速组。推荐卵形鲳鲹鱼苗深水网箱养殖的适应流速控制在1.0 BL/s以内;养殖流速不宜超过100 cm/s;最佳流速在54～60 cm/s。

关键词：卵形鲳鲹游泳行为流速耗氧率运动生理

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基于抗炎作用研究凉膈散及其清上、泄下拆方的配伍机制

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中药药理与临床 2024年

作者：姜丽邹丽芳郑晓婵郭新邓梁芷晴余林中刘俊珊南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室

目的: 基于网络药理学和斑马鱼炎症模型探讨凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用及配伍机制。方法: 通过三种斑马鱼炎症模型、生存曲线分析和组织病理切片实验，验证凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用。运用TCMSP数据库筛选出凉膈散... 详细信息

目的: 基于网络药理学和斑马鱼炎症模型探讨凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用及配伍机制。方法: 通过三种斑马鱼炎症模型、生存曲线分析和组织病理切片实验，验证凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用。运用TCMSP数据库筛选出凉膈散及其清上、泄下拆方的有效化学成分及对应靶点，通过GeneCards、DisGeNET等数据库检索炎症相关靶点，将凉膈散及其清上、泄下拆方的有效化学成分靶点与炎症靶点取交集，运用STRING数据库对交集靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction，PPI)网络，采用David数据库对潜在靶点进行基因本体论(Gene Ontology，GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG)通路富集分析。采用实时荧光定量PCR检测关键靶点的基因表达情况。结果: 斑马鱼炎症模型实验结果表明，与正常对照组比较，模型对照组斑马鱼中性粒细胞显著向损伤部位迁移聚集，卵黄囊显微注射LPS后存活时间缩短，死亡率显著升高(P＜0.01)；与模型对照组比较，地塞米松、不同浓度凉膈散、清上和泄下方均能显著抑制炎症反应，减少中性粒细胞的迁移，延长卵黄囊显微注射LPS后斑马鱼存活时间，提高其生存率(P＜0.05或P＜0.01)；与凉膈散全方相比，清上、泄下方抑制中性粒细胞迁移的作用减弱(P＜0.05或P＜0.01)，且两拆方表现出协同作用(CI＜1)，清上、泄下方对LPS注射斑马鱼卵黄囊后的生存保护作用减弱(P＜0.01)，凉膈散全方作用最佳。网络药理学分析结果显示，凉膈散全方有176个有效化学成分，如连翘苷、槲皮素、山柰酚、木犀草素等，对应266个靶点；清上方有74个有效化学成分，如栀子苷、槲皮素、汉黄芩素、刺槐素等，对应233个靶点；泄下方有109个有效化学成分，如大黄素、大黄酸、谷甾醇等，对应234个靶点。炎症性疾病相关靶点有10933个。两者交集靶点共168个。通过PPI网络图筛选出核心靶点有蛋白激酶B(AKT1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGFA)等。GO功能分析结果表明凉膈散及其清上、泄下拆方中的活性成分与RNA聚合酶Ⅱ转录正调节、调控基因表达和药物反应等生物过程，质膜、胞外区域、胞液等细胞组成，蛋白质结合、酶结合等分子功能密切相关。KEGG通路富集分析发现凉膈散及其清上、泄下拆方可通过癌症通路、AGE-RAGE通路、脂质与动脉粥样硬化、流体剪切应力与动脉粥样硬化、化学致癌-受体激活等通路发挥抗炎作用。实时荧光定量PCR结果表明，与正常对照组比较，模型对照组炎症因子Tnfα、Il6 mRNA表达显著上调(P＜0.01)，Akt mRNA表达显著下调(P＜0.01)；与模型对照组比较，凉膈散及其清上、泄下拆方均可显著降低炎症因子Tnfα、Il6 mRNA的表达(P＜0.01)，凉膈散能显著上调Akt mRNA表达(P＜0.05)。结论: 凉膈散及其清上、泄下拆方均具有显著抗炎作用且两拆方表现出协同作用，其作用机制与关键靶点TNF、IL-6、AKT相关。

关键词：凉膈散炎症治法网络药理学斑马鱼

见血清提取物对LPS诱导BV-2小胶质细胞介导神经炎症的作用及成分分析

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3050-3060页

作者：孔帅文张源曾炼陈曦荣王海靖蔡和伦郝新才张瑜湖北医药学院药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北十堰442000 湖北省帕金森病临床医学研究中心湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院药学部湖北襄阳441000 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科湖北武汉430000

探究见血清不同部位提取物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症反应的作用及潜在机制。见血清药材粉碎,提取浓缩得醇提物,经萃取得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相萃取物,进一步利用D101大孔树脂柱色谱对乙酸... 详细信息

探究见血清不同部位提取物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导BV-2小胶质细胞神经炎症反应的作用及潜在机制。见血清药材粉碎,提取浓缩得醇提物,经萃取得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相萃取物,进一步利用D101大孔树脂柱色谱对乙酸乙酯萃取物进行分离得流分①~⑥。实验分为对照组、模型组、见血清提取物单独处理组及LPS联合见血清提取物干预组。采用LPS诱导BV-2建立神经炎症细胞模型,Griess法检测细胞上清中一氧化氮(nitric oxide,NO)生成;MTT法检测细胞活力;ELISA法检测细胞上清中白细胞介素(interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的释放;RT-qPCR检测促炎细胞因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环加氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、IL-6、IL-1β和TNF-α的m RNA表达水平;Western blot检测i NOS、COX-2、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa-B p65,p65)、磷酸化核转录因子-κB p65(p-p65)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、c-jun N末端激酶(c-jun N-terminal kinease,JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38),磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)蛋白表达;UHPLC-Q-Exactive Orbitrap技术结合文献比对解析活性部位化学成分。结果表明见血清不同部位提取物均可以显著降低LPS诱导BV-2中一氧化氮(nitric oxide,NO)的释放,其中乙酸乙酯萃取物抑制作用最显著且无细胞毒性,该部位流分⑥还可以剂量依赖性降低i NOS、COX-2、IL-6、IL-1β和TNF-α的基因及蛋白表达水平,同时对LPS诱导BV-2中p-p65、p-ERK、p-p38和p-JNK蛋白表达具有显著抑制作用;质谱分析流分⑥共鉴定到79种化合物,含12种已被证实具有抗炎活性的化合物。该研究通过体外实验证实了见血清提取物在治疗神经炎症方面具有显著效果,并揭示了其抗炎作用可能通过抑制NF-κB及MAPK信号通路实现。

关键词：见血清神经炎症小胶质细胞 NF-κB信号通路 MAPK信号通路化学成分

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