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高校生化教学实验室开放管理模式探索

实验室研究与探索 2024年第9期 229-232+257页

作者：许洁贾松李艳娜浦浒徐磊李姣同济大学医学院实验教学中心同济大学医学院实验动物中心

实验室全面开放是当下高校实验室发展的总体趋势。教学实验室具有仪器数量多、场地面积大、非教学时段闲置等优势却因管理中的诸多问题而无法发挥其重要作用。通过分析目前高校教学实验室开放管理中的具体问题，利用便捷的移动端应用，... 详细信息

实验室全面开放是当下高校实验室发展的总体趋势。教学实验室具有仪器数量多、场地面积大、非教学时段闲置等优势却因管理中的诸多问题而无法发挥其重要作用。通过分析目前高校教学实验室开放管理中的具体问题，利用便捷的移动端应用，提出了一种低成本、高效率、信息化的开放管理模式。该模式实践后，仪器使用率和实验室利用率得到了显著提升，自助式管理也减轻了日常管理压力，大大提高了共享效益，为医学拔尖创新人才培养提供了优质平台，可望为高校教学实验室的开放管理工作提供新的思路。

关键词：实验室开放实验室管理教学实验室信息化

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高硼暴露通过诱导细胞焦亡加剧鸡肝细胞损伤

畜牧兽医学报 2024年

作者：何婷刘思颖全锦雯苏伟谦黄江利李玙萌刘忠华余文兰华南农业大学兽医学院华南农业大学实验动物中心

旨在探索硼暴露诱导鸡肝细胞损伤的作用机制。试验选取30只AA肉品鸡随机分为对照组（CG）、低硼组（LBG）和高硼组（HBG），在基础日粮中分别添加不同剂量硼进行饲喂：基础日粮(硼 0 mg · kg-1)，低硼日粮(硼 120 mg · kg-1)、高硼日... 详细信息

旨在探索硼暴露诱导鸡肝细胞损伤的作用机制。试验选取30只AA肉品鸡随机分为对照组（CG）、低硼组（LBG）和高硼组（HBG），在基础日粮中分别添加不同剂量硼进行饲喂：基础日粮(硼 0 mg · kg-1)，低硼日粮(硼 120 mg · kg-1)、高硼日粮(硼 240 mg · kg-1)，处理7 d及14 d后采集肝组织。使用ICP-MS测定肝组织中的硼含量，全自动血生化分析仪检测ASL及ALT水平，HE染色观察肝组织病理变化，透射电镜观察肝细胞超微结构变化，免疫组化和免疫荧光检测肝细胞焦亡相关蛋白NLRP3及IL-1β定位表达情况，RT-qPCR和Western blot 检测NLRP3、Casapse-1、IL-1β、IL-18和GSDMD的mRNA和蛋白表达水平。结果显示，蓄积于肝组织中的硼含量随着硼暴露时间和剂量的增加而增加。此外，14 d-低硼组（14 d-LBG）和高硼组（14 d-HBG）的肝组织结构明显破坏，并且细胞焦亡水平随硼剂量的增加而加剧；与同时间的CG相比，14 d-LBG中NLRP3、Caspase-1、IL-18的mRNA表达水平显著上升（P<0.05），14 d-HBG的NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18及GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著上升（P<0.05）。高硼暴露可通过诱导细胞焦亡进而造成鸡肝细胞损伤。

关键词：硼细胞焦亡鸡肝细胞

IL-23、VEGFA和TGF-β对小鼠肿瘤免疫微环境的影响

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中国兽医科学 2024年

作者：苏伟谦刘泳琪刘思颖何婷全锦雯黄江利李玙萌刘忠华华南农业大学兽医学院华南农业大学实验动物中心

为探究白介素-23（IL-23）、血管内皮生长因子（VEGFA）、转录生长因子β（TGF-β）过表达对于肿瘤生长以及肿瘤免疫微环境的影响，采用慢病毒转染构建稳定过表达IL-23、VEGFA、TGF-β的B16小鼠黑色素瘤和MC38小鼠结肠癌细胞株，建立小... 详细信息

为探究白介素-23（IL-23）、血管内皮生长因子（VEGFA）、转录生长因子β（TGF-β）过表达对于肿瘤生长以及肿瘤免疫微环境的影响，采用慢病毒转染构建稳定过表达IL-23、VEGFA、TGF-β的B16小鼠黑色素瘤和MC38小鼠结肠癌细胞株，建立小鼠皮下移植瘤模型，定期记录肿瘤生长情况，流式细胞仪检测肿瘤中免疫细胞浸润水平；HE染色检测肿瘤组织结构及病理；RT-qPCR法检测肿瘤中相关炎症因子的表达。结果显示，与对照组相比，IL-23过表达后，B16和MC38肿瘤生长速度下降并且CD8+T细胞与DC细胞浸润比例均显著上升；VEGFA过表达后，B16肿瘤生长速度显著下降，部分抗肿瘤作用的免疫细胞比例显著上升，微血管数量显著多于对照组；TGF-β过表达后，MC38肿瘤生长速度显著下降，CD8+T细胞及DC细胞的浸润比例显著上升，TNF-α表达水平与对照组相比显著下降。以上结果表明，IL-23、VEGFA和TGF-β过表达对B16肿瘤和MC38肿瘤的抑制程度有差异，VEGFA可能通过改变微血管数量的方式改变B16肿瘤免疫微环境从而显著抑制肿瘤生长，TGF-β可能通过直接作用于肿瘤免疫细胞改变免疫微环境与抑制TNF-α表达显著抑制MC38肿瘤生长，IL-23可能通过增加免疫微环境中部分免疫细胞浸润从而一定程度抑制B16和MC38肿瘤的生长。本研究为细胞因子免疫治疗提供了新的实验依据，同时也为不同恶性程度的肿瘤提供免疫治疗参考。

关键词：肿瘤肿瘤免疫微环境细胞因子肿瘤模型基因过表达

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国内实验动物福利伦理研究的现状与建议

中国比较医学杂志 2024年

作者：李会萍杨锦淳温金银赵维波广东省实验动物监测所

目的探究国内实验动物福利伦理的研究现状、研究脉络、演进历程和未来研究方向。方法以2001年～2023年间CNKI数据库中来源期刊收录的实验动物福利与伦理相关的文献为数据源，运用文献研读的定性描述和CiteSpace可视化文献计量分析相结... 详细信息

目的探究国内实验动物福利伦理的研究现状、研究脉络、演进历程和未来研究方向。方法以2001年～2023年间CNKI数据库中来源期刊收录的实验动物福利与伦理相关的文献为数据源，运用文献研读的定性描述和CiteSpace可视化文献计量分析相结合的方法，梳理和归纳实验动物福利伦理领域已查询到文章的概况、热点主题和研究方向。结果研究表明国内实验动物福利伦理研究热度总体上呈上升趋势。研究热点主题包括实验动物福利伦理的基本理论、实验动物福利伦理立法、实验动物福利伦理技术标准、实验动物福利伦理审查、实验动物福利伦理教学研究等方面，并且针对新兴交叉学科引发的伦理问题，在研究内容上不断创新。结论从实验动物福利伦理法律制度、伦理审查机制、教育与培训、创新研究等层面提出了相关建议，以期为实验动物福利伦理工作提供参考借鉴。

关键词：实验动物动物福利伦理审查 CiteSpace

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慢性束缚肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

中国实验动物学报 2024年第2期32卷 190-201页

作者：郑建华陈菁青董巧燕法云智邱业峰军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的结合社会心理应激导致炎症性肠病、肠易激综合征等一系列疾病的特点,建立实验性慢性束缚小鼠肠道应激损伤模型,为探讨慢性束缚应激诱导胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法18只雄性SPF级BALB/c小鼠,适应7 d后,根据体重按随... 详细信息

目的结合社会心理应激导致炎症性肠病、肠易激综合征等一系列疾病的特点,建立实验性慢性束缚小鼠肠道应激损伤模型,为探讨慢性束缚应激诱导胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法18只雄性SPF级BALB/c小鼠,适应7 d后,根据体重按随机数字表法分为2组,对照组及慢性束缚应激组。对小鼠进行束缚应激,每天3 h,连续束缚14 d,建立肠道损伤模型。通过观察体重、肠道组织病理形态变化、检测紧密连接蛋白表达、肠上皮细胞凋亡以及炎症细胞因子mRNA表达水平等指标对模型进行评价。结果慢性束缚应激14 d,小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛高度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降;结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝结构不规则。蛋白免疫印迹、免疫组化和免疫荧光染色结果显示,慢性束缚应激后小鼠十二指肠和结肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1表达显著下降(P<0.05);肠上皮细胞凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3的表达显著增加(P<0.05)。此外,肠道炎症因子和趋化因子mRNA表达结果显示,慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠十二指肠IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α、IL-10基因的表达(P<0.05);慢性束缚应激14 d显著提高了小鼠结肠IL-1β、IL-6、MCP-1的表达(P<0.001)。结论利用小鼠行为限制装置对小鼠连续束缚14 d,导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍、肠上皮细胞凋亡,引发肠道炎症反应,表明慢性束缚应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

关键词：慢性束缚应激肠道应激损伤肠道屏障模型评价细胞凋亡炎症反应

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中华蜜蜂幼虫响应中蜂囊状幼虫病毒感染的MicroRNAs分析

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病毒学报 2024年

作者：李一肖宇婷马跃宇李明费东亮马鸣潇锦州医科大学畜牧兽医学院锦州医科大学实验动物中心

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量... 详细信息

为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序，通过生物信息学软件分析DEmiRNAs及其靶基因，并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过RT-qPCR对测序结果进行验证。结果显示：对CSBV感染前后中蜂幼虫测序共筛选出140个已知miRNAs和预测到5个新miRNAs。其中，L24I组（CSBV感染24h幼虫）和L24H组（健康幼虫）对比发现18个DEmiRNAs，其中有12个表达上调，有6个表达下调；L48I组（CSBV感染48h幼虫）和L48H组（健康幼虫）筛选到47个DEmiRNAs，其中有30个表达上调，有17个表达下调。GO分析表明，部分DEmiRNAs及相关靶基因参与免疫系统过程和刺激反应等功能；KEGG通路分析显示，除涉及物质和能量代谢通路外，主要的免疫通路包括MAPK、溶酶体、Hippo、凋亡信号通路等。选取对蜜蜂调控具有重要作用和将要研究的8个miRNAs进行RT-qPCR验证结果表明，结果表明其表达水平与测序结果高度一致，表明测序准确可靠。通过本研究，不仅有助于我们深入认识CSBV感染中蜂幼虫过程中宿主miRNA变化情况，也为探究中华蜜蜂和CSBV相互作用时miRNA发挥的功能提供帮助。

关键词： CSBV 中华蜜蜂幼虫 MicroRNA 测序

LRRC8A/VRAC离子通道抗肿瘤作用的研究进展

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中国比较医学杂志 2024年

作者：杨润泽胡耀华秦靖汪永锋师长宏甘肃中医药大学基础医学院延安大学医学院空军军医大学实验动物中心

体积调节阴离子通道（volume-regulated anion channels，VRAC）在脊椎动物细胞和各类型的肿瘤细胞中普遍表达。其由富含亮氨酸重复序列的8A（leucine-rich repeat containing 8A，LRRC8A）及其四个同源家族成员（LRRC8B-E）组成，其中L... 详细信息

体积调节阴离子通道（volume-regulated anion channels，VRAC）在脊椎动物细胞和各类型的肿瘤细胞中普遍表达。其由富含亮氨酸重复序列的8A（leucine-rich repeat containing 8A，LRRC8A）及其四个同源家族成员（LRRC8B-E）组成，其中LRRC8A为必需亚基。已证实LRRC8A/VRAC通过各种信号途径参与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及多药耐药，并调控免疫细胞功能。该离子转运蛋白在杀伤肿瘤细胞及预防肿瘤中显示出良好的应用潜力，可作为肿瘤治疗的新靶点。本文综述了LRRC8A/VRAC参与肿瘤发生发展的最新研究，包括LRRC8A/VRAC的分子结构、功能及其在肿瘤中的调控作用，重点总结了LRRC8A/VRAC在肿瘤诊断和免疫治疗中的应用，以期为探索LRRC8A/VRAC成为肿瘤治疗的新靶点提供借鉴。

关键词：体积调节阴离子通道富含亮氨酸重复序列8A 肿瘤增殖迁移和侵袭多药耐药肿瘤免疫

Adra1a调节LPS诱导的Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞炎症反应

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中国比较医学杂志 2024年第5期34卷 84-91页

作者：米传靓付彬李思迪陈志达郭中坤王可洲山东第一医科大学(山东省医学科学院)实验动物学院(省实验动物中心) 济南250117 济南朋悦实验动物繁育有限公司济南250000

目的探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-))原代肝细胞炎症反应。方法利用二步灌流法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞,构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型;采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细... 详细信息

目的探究Adra1a调节LPS诱导的LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-))原代肝细胞炎症反应。方法利用二步灌流法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞,构建由LPS诱发的原代肝细胞原发炎症模型;采用加入抑制剂哌唑嗪、转染siRNA来下调LBP敲除小鼠原代肝细胞Adra1a的表达;抑制剂法将原代肝细胞分为3组分别是对照组A、LPS组A、抑制剂哌唑嗪组,转染siRNA主要是对原代肝细胞进行分组,包括对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Adra1a组;将WT型小鼠的原代肝细胞分为两组分别为对照组(空白对照)、LPS组(LPS刺激12 h)。本研究以WT型、Lbp^(-/-)型小鼠原代肝细胞为研究对象利用Western blot方法验证Adra1a在LPS刺激下的变化情况,采用CCK-8、qRT-PCR、Western blot等实验方法验证哌唑嗪及si-Adra1a对Lbp^(-/-)小鼠的原代肝细胞的炎症及存活率的改善情况。结果在LPS刺激下Lbp^(-/-)小鼠的原代肝细胞Adra1a蛋白表达显著升高(P<0.01),而野生型没有显著变化;抑制剂哌唑嗪组及干扰组的细胞存活率显著升高(P<0.01,P<0.05);抑制剂哌唑嗪组及si-Adra1a组的TNF-α、IL-1β炎症因子表达情况显著降低(P<0.01),与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-p38、p-ERK、p-JNK的表达量也显著降低(P<0.01)。结论LPS刺激Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞后Adra1a表达上调、炎症信号因子上调,使用哌唑嗪与si-Adra1a特异性降低Adra1a表达后使LPS相关的Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞炎症因子明显下降,可验证敲除LBP导致Adra1a在LPS诱导的炎症调节中参与反应。

关键词：肾上腺素受体α1A型受体 Lbp^(-/-)小鼠原代肝细胞哌唑嗪干扰RNA MAPK信号通路

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丙硫氧嘧啶通过内质网应激损害大鼠生精功能和精子质量的机制及疏肝补肾毓麟汤的干预作用

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：孟宇豪江晓翠萧闵王朝阳湖北中医药大学基础医学院湖北时珍实验室湖北中医药大学实验动物中心

目的：基于内质网应激（ERS）通路探讨疏肝补肾毓麟汤改善丙硫氧嘧啶（PTU）导致大鼠睾丸生精功能障碍及精子质量下降的作用机制。方法：使用随机分组法将60只雄性大鼠分为空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤低、中、高剂量组以及左卡尼汀... 详细信息

目的：基于内质网应激（ERS）通路探讨疏肝补肾毓麟汤改善丙硫氧嘧啶（PTU）导致大鼠睾丸生精功能障碍及精子质量下降的作用机制。方法：使用随机分组法将60只雄性大鼠分为空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤低、中、高剂量组以及左卡尼汀组，每组10只。除空白组外，其余5组连续12 d灌胃给药PTU(10 mg·kg-1)。造模完成后，疏肝补肾毓麟汤低(8.1g·kg-1)、中(16.2g·kg-1)、高(32.4g·kg-1)剂量组分别给予疏肝补肾毓麟汤灌胃给药，左卡尼汀组给予左卡尼汀(0.27 g·kg-1)灌胃给药，空白组灌胃生理盐水，连续28 d。末次给药治疗24 h后取材，称体质量及睾丸、附睾、精囊腺质量，计算三者脏器指数；苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸和附睾的病理变化，并对大鼠的睾丸生精功能进行评分；酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清促甲状腺激素（TSH）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、四碘甲状腺原氨酸（T4）、促卵泡素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）、雌二醇(E2)、丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性；原位末端标记法（TUNEL）检测睾丸细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠睾丸组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、磷酸化真核翻译起始因子2α激酶（p-EIF2α）、真核翻译起始因子2α激酶（EIF2α）、激活转录因子4（ATF4）蛋白表达水平。结果：与空白组比较，模型组大鼠睾丸、附睾、精囊腺体积减小，且3个器官的脏器指数显著降低（P<0.01）；大鼠睾丸与附睾病理形态损害，生精功能显著下降（P<0.01）；精子密度及精子活动率明显降低（P<0.01）；大鼠血清TSH、MDA水平升高，T3、T4、FSH、LH、T、E2水平及SOD、GSH-Px活性显著降低（P<0.05，P<0.01）；大鼠睾丸细胞凋亡水平显著增加（P<0.01）；大鼠睾丸组织GRP78、CHOP、p-PERK/PERK、p-EIF2α/EIF2α、ATF4蛋白表达量显著增加（P<0.01）。与模型组比较，给药治疗四组大鼠睾丸、附睾、精囊腺大体形态改善、脏器指数上升（P<0.01）；大鼠睾丸生精功能改善（P<0.05，P<0.01）；精子密度及精子活动率上升（P<0.05，P<0.01）；大鼠睾丸细胞凋亡水平下降（P<0.05）；大鼠的血清中MDA水平出现了降低，大鼠血清FSH、LH、T、E2水平和SOD、GSH-Px活性上升（P<0.05，P<0.01）；大鼠的睾丸组织中GRP78、CHOP、p-PERK/PERK、p-EIF2α/EIF2α和ATF4蛋白的表达量有明显降低（P<0.05，P<0.01）。结论：疏肝补肾毓麟汤能够改善PTU所导致的甲减大鼠模型的睾丸生精功能障碍及精子质量，其内在机制可能是通过修复睾丸氧化损伤，调控内质网应激PERK/EIF2α/ATF4信号通路，缓解生精细胞凋亡。

关键词：疏肝补肾毓麟汤丙硫氧嘧啶内质网应激 PERK/EIF2α/ATF4信号通路精子质量