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METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 442-449页

作者：余玲张自力曾蓉张节王鹏潘万龙川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100 川北医学院附属医院老年科四川南充637100

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。

关键词：甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2 N6-甲基腺苷乙型肝炎病毒

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免疫检查点抑制剂相关心肌炎诊疗进展

临床心血管病杂志 2024年第3期40卷 182-187页

作者：李泞甫李智可陈旭澜皈燕川北医学院附属医院肿瘤科四川南充637000 川北医学院临床医学系

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)是肿瘤治疗的一大突破,在临床应用日益广泛。ICI相关心肌炎是ICI药物的罕见不良反应之一,病死率较高。尽管国内外均报道了该不良反应的治疗经验和指南,但部分医生在临床工作中仍存在... 详细信息

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)是肿瘤治疗的一大突破,在临床应用日益广泛。ICI相关心肌炎是ICI药物的罕见不良反应之一,病死率较高。尽管国内外均报道了该不良反应的治疗经验和指南,但部分医生在临床工作中仍存在认知不足、监管评估方案缺乏等问题。故本文对ICI相关心肌炎发病机制、诊断、治疗策略进行综述,以提高肿瘤科及心脏科医师的认识。

关键词：心肌炎免疫检查点抑制剂

基于网络药理学和分子对接的白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌的机制研究

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口腔疾病防治 2024年第3期32卷 178-187页

作者：陈虹君雷奇王治林钟晓武邱亚李丽华川北医学院附属医院口腔科四川南充637000 川北医学院口腔医学系四川南充637000 川北医学院附属医院检验科四川南充637000 川北医学院附属医院医学研究中心四川南充637000

目的通过网络药理学及分子对接等生物学信息方法,探讨白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的分子机制,为白藜芦醇治疗OSCC的临床应用提供参考。方法利用Swiss Target Prediction(http://***)、SEA数据库(htt... 详细信息

目的通过网络药理学及分子对接等生物学信息方法,探讨白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的分子机制,为白藜芦醇治疗OSCC的临床应用提供参考。方法利用Swiss Target Prediction(http://***)、SEA数据库(http://***)、Pharm mapper数据库(http://***)检索获得白藜芦醇的相关靶点,以DISGENET(***)、OMIM(https://***)、GeneCards(https://***)数据库筛选OSCC疾病靶点,取药物与疾病靶点的交集,再采用Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-疾病-靶点-通路”网络,String数据库构建靶蛋白相互作用网络,采用DAVID数据库对关键蛋白进行富集分析,最后通过AutoDock及PyMOL对关键蛋白进行分子对接验证,结合富集分析和分子对接结果预测白藜芦醇治疗OSCC可能的分子作用机制;细胞水平采用Western blot检测不同浓度(50、100μmol/L)白藜芦醇对OSCC细胞株HSC-3细胞Src酪氨酸激酶(Src tyro-sine kinase,SRC)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、雌激素受体基因1(estrogen receptor gene 1,ESR1)及磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果数据库得到白藜芦醇药物靶点243个,OSCC疾病靶点6094个,将药物与疾病的靶点进行交集获得116个潜在靶点,潜在靶点主要集中参与体内蛋白质自磷酸化、肽基酪氨酸磷酸化、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等生物过程,干预PI3K/AKT信号通路发挥抗OSCC的作用。分子对接结果表明白藜芦醇与EGFR、ESR1、SRC等OSCC关键靶点具有较好的结合活性。细胞实验结果表明,白藜芦醇药物干预以剂量依赖的方式抑制了HSC-3细胞中SRC、EGFR、ESR1及p-PI3K和p-AKT的蛋白表达。结论白藜芦醇对OSCC细胞SRC、EGFR、ESR1、p-PI3K、p-AKT靶点具有抑制作用。

关键词：白藜芦醇口腔鳞状细胞癌网络药理学分子对接 Src酪氨酸激酶表皮生长因子受体雌激素受体基因1 磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B信号通路

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局部晚期食管鳞状细胞癌患者新辅助免疫治疗联合化疗后行根治性手术的术后病理学缓解程度及影响因素分析

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中国癌症杂志 2024年第7期34卷 669-679页

作者：廖梓伊彭杨曾蓓蕾马影颖曾丽甘科论马代远川北医学院附属医院肿瘤内科四川南充637000

背景与目的:局部晚期食管鳞状细胞癌(locally advanced esophageal squamous cell carcinoma,LAESCC)患者新辅助免疫治疗联合化疗(neoadjuvant immunotherapy combined with chemotherapy,nICT)后行根治性手术治疗具有较好的有效性和安全性,能够提高患者的病理学完全缓解(pathological complete remission,pCR)率、主要病理学缓解(main pathologic response,MPR)率及R0切除率。新辅助治疗后达到pCR/MPR的患者预后明显优于未达到pCR/MPR的患者,因此寻找pCR/MPR的预测因素有助于筛选联合治疗的优势人群。本研究旨在探讨nICT前后的临床资料对LAESCC患者nICT后行根治性手术的不同病理学缓解程度的预测价值并观察其安全性。方法:收集2019年1月—2023年6月于川北医学院附属医院在nICT后行根治性手术的LAESCC患者。收集所有患者的临床资料以及新辅助治疗前后患者的部分血液、炎症和营养学指标,根据新辅助治疗后的不同病理学缓解程度进行分组,通过多组比较方差分析及LSD-t事后检验探索对不同病理学缓解程度具有影响的因素,收集并记录患者新辅助治疗期间的不良反应及最终的手术情况。本研究已获得川北医学院附属医院医学伦理委员会批准(伦理审查编号:2024009)。结果:共收集到62例nICT后行根治性手术的LAESCC患者,新辅助治疗期间只有1例患者出现了4级的骨髓抑制表现,其余患者的不良反应均≤2级;手术的R0切除率为98.39%。本研究与川北医学院附属医院既往LAESCC新辅助化疗后行根治性手术治疗的研究相比,在手术时间、术中出血量、术后住院时间及手术并发症等方面未见明显差异。术后的病理学检查结果显示,pCR率为22.58%(14/62),MPR率为40.32%(25/62)。根据术后不同的肿瘤退缩分级(tumor regression grade,TRG),分为TRG1、TRG2和TRG3~4组,3组患者在新辅助治疗前的血小板分布宽度(platelet distribution width,PDW)及新辅助治疗后术前的中性粒细胞-淋巴细胞比值(neutrophil-tolymphocyte ratio,NLR)差异有统计学意义(P<0.05)。进一步对3组患者在新辅助治疗前的PDW及新辅助治疗后术前的NLR分别进行组内两两比较,发现TRG2组的PDW及NLR均低于TRG3~4组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LAESCC患者nICT后行根治性手术可以获得较高的R0切除率、pCR率及MPR率且安全性可靠,新辅助治疗前患者的PDW越低、新辅助治疗后术前患者的NLR越低预示着越好的病理学缓解效果。

关键词：食管鳞状细胞癌新辅助免疫治疗联合化疗根治性手术病理学缓解程度安全性

粪便微生物移植与免疫检查点抑制剂联合治疗实体瘤的应用研究进展

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中国肿瘤 2024年第5期33卷 414-419页

作者：廖梓伊彭杨马影颖马代远川北医学院附属医院四川南充637000

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗作为免疫治疗的一项重大临床进步,已被证明可以提高多种类型癌症患者的总生存期。肠道菌群及其代谢产物在调节局部和全身免疫反应中发挥重要功能,因此研究肠道菌群对ICIs治疗... 详细信息

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗作为免疫治疗的一项重大临床进步,已被证明可以提高多种类型癌症患者的总生存期。肠道菌群及其代谢产物在调节局部和全身免疫反应中发挥重要功能,因此研究肠道菌群对ICIs治疗的影响显得尤为重要。粪便微生物移植(fecal microbial transplantation,FMT)是从健康人捐献的粪便中分离出粪便菌群,以细菌液或胶囊的形式灌注或者口服移植到患者的肠道中,以取代患者体内不健康的肠道菌群。越来越多的证据证明,FMT在肿瘤治疗领域特别是提高肿瘤免疫治疗效果方面取得了许多进展。全文主要综述FMT与ICIs在治疗实体瘤中的研究进展,并对未来的研究方向进行了展望。

关键词：粪便微生物移植免疫检查点抑制剂肠道微生物

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机会性输卵管切除术对卵巢储备的短期影响:基于GRADE证据分级系统的随机对照试验荟萃分析

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中国全科医学 2024年第9期27卷 1142-1148页

作者：赵丽杨春艳左漫云杨红梅川北医学院附属南充市中心医院肿瘤科四川省南允市637000

背景机会性输卵管切除术(OS)可以作为卵巢癌(OC)的一级预防手段,但由于卵巢与输卵管拥有同源血供系统,OS可能会引起卵巢功能的损害,从而增加卵巢老化和更年期提前的风险。目的基于GRADE证据分级系统,评价OS对卵巢储备的短期影响。方法于... 详细信息

背景机会性输卵管切除术(OS)可以作为卵巢癌(OC)的一级预防手段,但由于卵巢与输卵管拥有同源血供系统,OS可能会引起卵巢功能的损害,从而增加卵巢老化和更年期提前的风险。目的基于GRADE证据分级系统,评价OS对卵巢储备的短期影响。方法于2022年9月,检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、PubMed、Web of Science、Scopus,获取评估OS对卵巢储备短期影响的文献,检索时限均为建库至2022-09-10。由2名研究者独立筛选文献并提取数据,使用Jadad量表评价文献质量,Stata 17.0软件用于数据处理与荟萃分析,GRADEpro 3.2软件用于评估荟萃分析结果的证据质量。结果共纳入9项随机对照试验(RCT),包含482例患者,其中OS组238例、non-OS组244例。Jadad风险评估量表结果显示所纳入的RCT均为高质量文献。荟萃分析结果表明:相对于non-OS组,OS组抗苗勒氏激素(AMH)(WMD=-0.07,95%CI=-0.28~0.13,P=0.13)、卵泡刺激素(FSH)(WMD=-0.03,95%CI=-1.65~1.59,P=0.24)、黄体生成素(LH)(WMD=-0.39,95%CI=-1.62~0.83,P=0.08)、雌二醇(E2)(WMD=3.08,95%CI=-4.26~10.43,P=0.35)手术前后的变化差异无统计学意义(P>0.05)。GRADEpro软件对荟萃分析的结果显示,AMH的研究为高质量证据,FSH的研究为中等质量证据,E2和LH的研究为低质量证据。结论在短期内因良性疾病接受OS的未绝经女性的卵巢储备功能指标与未接受OS的女性无明显差异。已完成生育的绝经前女性通过OS来预防OC是合理的,但是这个结论仍有待于更长随访时间、设计更严谨且样本量更大的RCT来验证。

关键词：输卵管切除术机会性输卵管切除术卵巢肿瘤卵巢储备功能荟萃分析

冷循环液温度对微波消融离体猪肝消融灶形态的影响

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中国介入影像与治疗学 2024年第5期21卷 294-297页

作者：罗霞何萍杨鑫张菊英蒋琼冯琳莉李韩梅唐小清杨友余进洪川北医学院附属医院超声科四川南充637000

目的观察冷循环液温度对微波消融(MWA)离体猪肝消融灶形态的影响。方法将20块新鲜离体猪肝组织随机分为冰水冷循环组(A组)及常温冷循环组(B组),分别以不同消融功率(50、60、70 W)及消融时间(1、5 min)于各亚组,即A1与B1(50 W,1 min)、A2... 详细信息

目的观察冷循环液温度对微波消融(MWA)离体猪肝消融灶形态的影响。方法将20块新鲜离体猪肝组织随机分为冰水冷循环组(A组)及常温冷循环组(B组),分别以不同消融功率(50、60、70 W)及消融时间(1、5 min)于各亚组,即A1与B1(50 W,1 min)、A2与B2(50 W,5 min)、A3与B3(60 W,1 min)、A4与B4(60 W,5 min)、A5与B5(70 W,1 min)及A6与B6(70 W,5 min)亚组内各消融10个靶区。对比A、B组相同条件亚组间及组内消融灶形态,包括消融灶纵向直径(LD)、横向直径(TD)、球形指数(RI)及体积(V)。结果相同消融功率及时间下,A组各亚组消融灶LD均小于B组(P均0.05)。冷循环液温度对2组消融灶TD(F=1.125)和V(F=3.332)的主效应均不显著(P均≥0.05)。相同冷循环液温度条件下,A1与A2、A3与A4、A5与A6各亚组间消融灶形态各参数差异均有统计学意义(P均<0.05),B组各亚组间亦然。结论以恒定消融功率及时间行MWA消融离体猪肝时,采用冰水冷循环可使消融灶形态更接近于球形;且随消融时间延长,消融灶范围越大,则RI越高。

关键词：消融技术动物实验猪肝

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对比冷冻消融与微波消融治疗兔VX2椎旁肿瘤的有效性及安全性

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中国介入影像与治疗学 2024年第4期21卷 237-241页

作者：宋珍珍赵艳芬刘祝李兵川北医学院附属医院放射介入科四川南充637000

目的对比冷冻消融(CA)与微波消融(MWA)治疗兔VX2椎旁肿瘤的有效性及安全性。方法选取48只新西兰大白兔建立VX2椎旁肿瘤模型并随机分为CA组(n=24)及MWA组(n=24),比较组间完全消融率、生存率、布里斯托尔兔疼痛量表(BRPS)评分及并发症发... 详细信息

目的对比冷冻消融(CA)与微波消融(MWA)治疗兔VX2椎旁肿瘤的有效性及安全性。方法选取48只新西兰大白兔建立VX2椎旁肿瘤模型并随机分为CA组(n=24)及MWA组(n=24),比较组间完全消融率、生存率、布里斯托尔兔疼痛量表(BRPS)评分及并发症发生率。结果CA组完全消融率及治疗后21天生存率分别为91.67%(22/24)及33.33%(8/24),均高于MWA组[66.67%(16/24)及16.67%(4/24)](P均肿瘤的安全性及有效性均优于MWA。

关键词：消融技术兔动物实验椎旁肿瘤

LSAMP-AS1/LSAMP通过PI3K/Akt/MDM2/p53信号通路调控胃癌作用研究

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中华肿瘤防治杂志 2024年第12期31卷 738-745页

作者：向万平唐翎瀚谢杰斌叶鹏程肖江卫川北医学院附属医院胸外科四川南充637000 川北医学院附属医院胃肠外科四川南充637000 川北医学院肝胆胰肠疾病研究所四川南充637000 成都医学院第一附属医院胃肠外科四川成都610500

目的探索长链非编码RNA边缘系统相关膜蛋白反义RNA(LSAMP-AS1)和边缘系统相关膜蛋白(LSAMP)基因在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集川北医学院附属医院胃肠外科2016-01-04-2018-06-20手术治疗的60例胃癌患者癌组织和癌旁组织标... 详细信息

目的探索长链非编码RNA边缘系统相关膜蛋白反义RNA(LSAMP-AS1)和边缘系统相关膜蛋白(LSAMP)基因在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集川北医学院附属医院胃肠外科2016-01-04-2018-06-20手术治疗的60例胃癌患者癌组织和癌旁组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测胃癌组织LSAMP-AS1、LSAMP、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、鼠双微基因2(MDM2)和p53的表达水平并分析其关系,采用蛋白质印迹法检测LSAMP的表达。胃癌组织和癌旁组织之间LSAMP、LSAMP-AS1表达量符合正态分布,选用配对t检验;不符合正态分布的信号通路分子的表达比较选择Wilcoxon符号秩检验。结果 (1)在胃癌和癌旁组织中,LSAMP-AS1的表达量分别为1.18±1.39和2.21±2.60,差异有统计学意义,配对t=3.169,P=0.002;LSAMP的表达量分别为1.90±2.78和2.76±3.55,差异有统计学意义,配对t=2.591,P=0.012。(2)LSAMP-AS1表达与LSAMP呈正相关,r=0.740,P<0.001。(3)LSAMP-AS1低表达癌组织中,PI3K表达高于癌旁组织(Z=-1.586,P=0.063),MDM2低于癌旁组织(Z=-2.749,P=0.007),p53低于癌旁组织,Z=-2.372,P=0.018。(4)LSAMP低表达癌组织中,PI3K表达高于癌旁组织(Z=-4.240,P<0.001)、MDM2低于癌旁组织(Z=-2.749,P=0.006),p53低于癌旁组织,Z=-2.482,P=0.013。结论 (1)LSAMP-AS1和LSAMP可能作为抑癌基因参与胃癌的发生发展;(2)低表达LSAMP-AS1和LSAMP可作为不良预后指标,为胃癌诊断、预后判断提供重要参考依据;(3)LSAMP-AS1和LSAMP可能通过PI3K/Akt/MDM2/p53信号通路调控胃癌的发生发展。

关键词：胃癌长链非编码RNA 边缘系统相关膜蛋白反义RNA 边缘系统相关膜蛋白基因磷脂酰肌醇3-激酶 p53