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基于纳米抗体的靶向Trop2 CAR-T细胞的制备及其抗非小细胞肺癌的研究

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四川大学学报(医学版) 2025年第1期56卷 198-205页

作者：温静李鑫川北医学院附属医院肿瘤科南充637000 川北医学院校医院南充637100 川北医学院第二附属医院泌尿外科南充637100

目的研究使用基于滋养层细胞表面抗原2(trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)纳米抗体构建的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T(CAR-T)细胞是否可用于治疗Trop2阳性的非小细胞肺癌。方法构建Trop2特异性噬菌体展示纳... 详细信息

目的研究使用基于滋养层细胞表面抗原2(trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)纳米抗体构建的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T(CAR-T)细胞是否可用于治疗Trop2阳性的非小细胞肺癌。方法构建Trop2特异性噬菌体展示纳米抗体文库,用于筛选Trop2特异性纳米抗体。利用间接ELISA检测Trop2的3种(8#、14#和48#)纳米抗体结合抗原的能力,并通过表面等离子共振测定纳米抗体的亲和力。基于Trop2特异性纳米抗体构建CAR-T,将其与表达萤光素酶的Trop2阳性细胞系NCI-H292以及Trop2阴性细胞系A549细胞共培养,通过多功能酶标仪读取效靶比分别为4∶1、2∶1、1∶1、1∶2的萤光素酶值以测定杀伤效率,利用ELISA方法检测效靶比为4∶1的上清中白细胞介素(interleukin,IL)-2、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)细胞因子的水平。本研究还在NCG免疫缺陷小鼠中建立NCI-H292异种移植模型,分为空白组(PBS组)、Mock-T组和Trop2 CAR-T组(n=5),通过尾静脉输注1×10^(7)个Trop2 CAR-T细胞。实验期间每日观察小鼠生长状态和存活情况,每3 d测量一次肿瘤大小并分析生存期。结果通过纳米抗体文库成功筛选到Trop2特异性纳米抗体,利用间接ELISA初步测定48#纳米抗体的亲和力最强。随后,通过表面等离子共振测定48#纳米抗体的亲和力在2.49×10^(-8)M数量级,属于高亲和力抗体,并基于该纳米抗体成功制备Trop2 CART细胞。体外实验结果表明,Trop2 CAR-T细胞以剂量依赖性方式杀死Trop2阳性的NCI-H292非小细胞肺癌细胞。通过ELISA检测发现,共培养体系中的细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-α)分泌明显增加,进一步验证了其抗肿瘤活性。在NCIH292异种移植小鼠模型中,与PBS组和Mock-T组相比,Trop2 CAR-T组肿瘤体积缩小(P<0.001),荷瘤小鼠生存期延长(P<0.05)。结论本研究结果证实基于Trop2纳米抗体构建的CAR-T细胞可有效治疗Trop2阳性的非小细胞肺癌。

关键词：滋养层细胞表面抗原2 非小细胞肺癌嵌合抗原受体

m5C阅读器YBX1通过调节铁死亡抑制因子MS4A15的稳定性促进结直肠癌生长

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重庆医科大学学报 2025年

作者：夏术森朱彦斌刘礼鑫蒙长远彭洪成都医学院第一附属医院胃肠外科川北医学院附属医院血管外科川北医学院附属医院胃肠外科二川北医学院第二临床医学院肛肠外科

目的：探讨5-甲基胞嘧啶（5-methylcytosine,m5C）阅读器Y-框结合蛋白1 (Y-box binding protein1,YBX1)通过调节铁死亡抑制因子人跨膜结构域4亚家族成员15(Membrane-spanning 4-domains subfamily A 15,MS4A15)的稳定性参与结直肠癌发生发展的分子机制。方法：通过生物信息学数据库分析YBX1 mRNA和蛋白在结肠癌中的表达。RT-qPCR法检测结直肠癌细胞中YBX1的表达水平。LC-MS法检测结直肠癌细胞和正常结直肠粘膜细胞中m5C修饰水平。CCK8法检测YBX1对结直肠癌细胞增殖的影响，Transwell法检测对结直肠癌细胞迁移能力的影响，流式细胞仪检测对结直肠癌细胞凋亡的影响。通过生物信息学方法分析可与YBX1相互作用的铁死亡抑制因子MS4A15和潜在m5C修饰位点。通过GEPIA2分析YBX1表达与MS4A15的相关性。抑制YBX1表达并分析MS4A15 mRNA的表达水平及MS4A15的m5C修饰水平。通过catRAPID数据库寻找YBX1蛋白和MS4A15 mRNA的结合位点。抑制YBX1表达并用放线菌素D(actinomycinD)处理结直肠癌细胞，RT-qPCR法检测MS4A15 mRNA的稳定性。抑制MS4A15表达并检测细胞增殖活性，细胞迁移能力和细胞凋亡率，抑制MS4A15表达，检测铁死亡关键指标MDA、ROS和Fe2+的表达水平。结果：YBX1 mRNA和蛋白在结直肠癌中高表达并且YBX1在结直肠癌细胞中高表达。结直肠癌细胞的m5C修饰水平明显高于正常结直肠粘膜细胞。YBX1可促进结直肠癌细胞增殖，迁移及抑制细胞凋亡。生物信息学分析证实YBX1与铁死亡抑制因子MS4A15表达水平呈正相关，并且MS4A15上存在多个潜在m5C修饰位点。抑制YBX1表达可降低MS4A15 mRNA表达水平及MS4A15基因的m5C修饰水平，并可降低MS4A15 mRNA的稳定性。抑制MS4A15表达后细胞增殖活性和细胞迁移能力明显降低，细胞凋亡率增高，MDA、ROS和Fe2+含量均明显增高。结论：上述结果表明YBX1通过m5C修饰稳定MS4A15促进结直肠癌的发生和发展，为结直肠癌患者提供有前景的靶向治疗策略。

关键词：结直肠癌 5-甲基胞嘧啶 Y-框结合蛋白1 铁死亡人跨膜结构域4亚家族成员15

青少年抑郁症大脑前额颞叶功能连接改变：一项近红外脑成像研究

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重庆医科大学学报 2025年

作者：史紫娟丁祥洪崔丽君杜姣陈茂青龙晴文李芋均川北医学院护理学院川北医学院附属医院心理卫生中心川北医学院附属医院护理部

目的：利用功能性近红外光谱技术（functional near-infrared spectroscopy,fNIRS）探究青少年抑郁症患者和健康对照组在静息状态下大脑前额叶和颞叶功能连接的特征。方法：纳入13～18岁36例青少年抑郁症患者和36例健康对照被试，选取... 详细信息

目的：利用功能性近红外光谱技术（functional near-infrared spectroscopy,fNIRS）探究青少年抑郁症患者和健康对照组在静息状态下大脑前额叶和颞叶功能连接的特征。方法：纳入13～18岁36例青少年抑郁症患者和36例健康对照被试，选取前额叶（prefrontal cortex,PFC），背外侧前额叶（dorsolateral prefrontal cortex,dlPFC）、双侧颞上回（superior temporal gyrus,STG）及颞中回（middle temporal gyrus,MTG）脑区为感兴趣区域（regions of interest,ROI），使用fNIRS采集2组被试者前额颞叶8 min的静息态数据。基于氧合血红蛋白（oxyhemoglobin,HBO2）在时间序列上的浓度，采用相关系数分析，计算两组受试者静息态下的功能连接强度，并比较2组人群功能连接强度及同源、异源脑网络的组间差异。结果：基于HBO2的功能连接分析，抑郁症组前额颞叶整体脑区平均功能连接强度为0.40±0.14，健康对照组为0.44±0.17。健康对照组整体脑功能连接强度高于抑郁症组（t=-3.938,P=0.000）。基于同源脑网络方面：MTG-L-MTG-L（t=-3.233,P=0.015）、PFC-L-PFC-L（t=-2.576,P=0.032）、PFCR-PFC-R（t=-2.677,P=0.032）。异源脑网路方面：连接STG-R-PFC-L（t=-2.824,P=0.035）、STG-R-PFC-R（t=-2.867,P=0.035）、PFC-L-PFC-R（t=-3.034,P=0.035）、PFC-L-dlPFC-L（t=-2.988,P=0.035）、PFC-R-dlPFC-L（t=-2.987,P=0.035）的连接显示出明显减少（以上P值均为FDR校正后）。结论：静息状态下，青少年抑郁症患者的大脑前额叶及颞叶功能连接存在异常。这种功能连接改变可能与抑郁症的病理机制有关。进一步研究这种功能连接改变的神经机制将有助于深入理解抑郁症的病理生理过程，并为抑郁症的早期诊断和干预治疗提供线索。

关键词：功能近红外光谱技术青少年抑郁症脑功能连接前额叶颞叶静息态

揿针疗法防治妇科腹腔镜术后患者恶心呕吐的疗效观察

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复旦学报(医学版) 2025年第1期52卷 114-118页

作者：马苗苗戴黎珺徐婷刘丹陈静雯复旦大学附属妇产科医院中西医结合科上海200011

目的观察揿针预防及减轻妇科腹腔镜手术患者术后恶心呕吐的临床疗效。方法将2023年5—11月于复旦大学附属妇产科医院行妇科腹腔镜手术的199例患者随机分为实验组(n=99)和对照组(n=100)。两组均采用术后常规护理方法,实验组在对照组的基... 详细信息

目的观察揿针预防及减轻妇科腹腔镜手术患者术后恶心呕吐的临床疗效。方法将2023年5—11月于复旦大学附属妇产科医院行妇科腹腔镜手术的199例患者随机分为实验组(n=99)和对照组(n=100)。两组均采用术后常规护理方法,实验组在对照组的基础上给予膻中、攒竹、太冲穴揿针疗法。观察两组术后发生恶心呕吐的情况。结果两组术后恶心的发生率、持续时间和呕吐发生率差异均有统计学意义(P科腹腔镜术后恶心呕吐的发生及减轻术后恶心呕吐的发生程度,还可减少术后恶心的持续时间。

关键词：揿针妇科腹腔镜手术恶心呕吐

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柿叶提取物对H_(2)O_(2)诱导IEC-6细胞铁死亡的影响及机制研究

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中国药房 2025年第1期36卷 64-70页

作者：张雪侠周敏周红艳王莉飞李华妮刘长河徐洪德张明利河南省中西医结合医院中药研究所郑州450004 郑州大学药学院郑州450001 河南中西医结合医院检验科郑州450004 郑州大学第二附属医院肾病科郑州450014 河南省中西医结合医院肺病科郑州450004

目的探讨柿叶(PL)提取物对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导IEC-6细胞铁死亡的影响及潜在机制。方法以IEC-6细胞为对象,考察铁死亡抑制剂ferrostatin-1对H_(2)O_(2)诱导IEC-6细胞活力的影响;将IEC-6细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+PL 25μg/mL组、H_(2)O_(2)+PL 50μg/mL组,检测其氧化应激指标[丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和活性氧(ROS)水平]、线粒体膜电位(MMP)以及核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸/醌氧化还原酶1(NQO-1)、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(xCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链(FTH)mRNA及蛋白的表达情况。结果铁死亡抑制剂ferrostatin-1可显著升高H_(2)O_(2)诱导细胞的存活率(P<0.01)。与对照组比较,H_(2)O_(2)组细胞MDA含量和ROS水平,Nrf2、NQO-1 mRNA及Nrf2、HO-1蛋白的表达均显著升高或上调;SOD活性和MMP,xCT、GPX4、FTH mRNA及GPX4、FTH蛋白的表达均显著降低或下调(P<0.01或P<0.05)。与H_(2)O_(2)组比较,H_(2)O_(2)+PL 25、50μg/mL组细胞的氧化应激指标均有不同程度回调,MMP均显著升高,Nrf2、HO-1、NQO-1,xCT、GPX4、FTH mRNA及蛋白的表达均有不同程度上调,部分指标组间比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论PL提取物能减轻H_(2)O_(2)所导致的细胞线粒体膜损伤、ROS异常堆积,上述作用可能与激活Nrf2/HO-1信号通路从而抑制铁死亡有关。

关键词：柿叶提取物溃疡性结肠炎铁死亡 Nrf2/HO-1信号通路

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肿瘤相关中性粒细胞在胃癌中的作用及机制研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2025年第02期 172-177页

作者：袁茵茵李放放李东芳湖南中医药大学中西医结合学院湖南省肿瘤医院中医/中西医结合科

胃癌(GC)是消化系统的高发恶性肿瘤，全球发病率与致死率均居高不下，对人类健康构成严重威胁。研究表明，肿瘤相关中性粒细胞(TAN)与GC起始、侵袭转移、免疫逃逸、耐药等不良生物学行为密切相关，在GC病理进程中发挥关键作用。本文通... 详细信息

胃癌(GC)是消化系统的高发恶性肿瘤，全球发病率与致死率均居高不下，对人类健康构成严重威胁。研究表明，肿瘤相关中性粒细胞(TAN)与GC起始、侵袭转移、免疫逃逸、耐药等不良生物学行为密切相关，在GC病理进程中发挥关键作用。本文通过梳理近年来的相关文献，总结中性粒细胞在GC发生发展中的作用并探讨其在GC治疗中的应用，以期为临床和基础研究提供参考。

关键词：胃癌(GC) 肿瘤相关中性粒细胞(TAN) 中性粒细胞免疫综述

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加味芍药甘草汤对慢传输型便秘大鼠肠道传输功能、肠道菌群及代谢产物含量的影响

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中国药房 2025年第2期36卷 154-159页

作者：张紫麒周鸿雲赵琼邓媛占煜成都中医药大学附属医院/临床医学院儿科成都610075 成都市中西医结合医院/成都市第一人民医院肛肠科成都610095

目的观察加味芍药甘草汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道传输功能、肠道菌群及共代谢产物γ氨基丁酸(GABA)和5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(30只),雌雄各半。造模组大鼠以复方地芬诺酯灌胃法构建ST... 详细信息

目的观察加味芍药甘草汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道传输功能、肠道菌群及共代谢产物γ氨基丁酸(GABA)和5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(30只),雌雄各半。造模组大鼠以复方地芬诺酯灌胃法构建STC模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、加味芍药甘草汤组[56 g/(kg·d),以生药量计]、阳性对照药组[乳果糖2.09g/(kg·d)],每组10只。各药物组大鼠灌胃相应药液,空白组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续14 d。实验期间,观察各组大鼠的一般情况;末次给药后,称定其体重并对粪便性状进行Bristol评分,检测粪便含水率、肠道推进率和肠内容物中GABA、5-HT含量,考察肠内容物中肠道菌群的多样性,并分析GABA、5-HT含量与菌群相对丰度的关联性。结果与模型组比较,加味芍药甘草汤组大鼠体形瘦小、皮毛稀疏粗糙、行动迟缓等一般情况均有所改善,体重、Bristol评分、粪便含水率、肠道推进率、5-HT含量、Chao1和Shannon指数均显著升高,GABA含量、Simpson指数均显著降低(P0.05);脱硫杆菌门是组间差异因素(P<0.05)。GABA含量与拟杆菌门、蓝菌门、髌骨菌门、放线菌门的相对丰度呈负相关(P<0.01或P<0.05),5-HT含量与弯曲杆菌门的相对丰度呈正相关(P<0.05)。结论加味芍药甘草汤可改善STC模型大鼠粪便性状和肠道动力,上述作用可能与改善肠道菌群,进而影响肠内容物中GABA、5-HT含量有关;此外,GABA、5-HT含量可能与拟杆菌门、弯曲杆菌门等特定菌门的相对丰度显著相关。

关键词：加味芍药甘草汤慢传输型便秘肠道菌群 γ氨基丁酸 5-羟色胺

基于态靶医学运用当红祛斑精华液治疗黄褐斑的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期31卷 111-119页

作者：陈柏林杨皓瑜蔡锐白彦萍陈媛媛中日友好医院国家中西医结合医学中心北京100029 北京中医药大学北京100029 北京中医医院北京100010 北京中西医结合医院北京100039

目的:评价态靶结合方当红祛斑精华液治疗黄褐斑的临床疗效及安全性。方法:采用随机、双盲、安慰剂平行对照试验方法,选择2022年9月至2023年2月北京中西医结合医院皮肤科门诊就诊的气滞血瘀型黄褐斑患者,按照双盲原则,生成随机数字表,随... 详细信息

目的:评价态靶结合方当红祛斑精华液治疗黄褐斑的临床疗效及安全性。方法:采用随机、双盲、安慰剂平行对照试验方法,选择2022年9月至2023年2月北京中西医结合医院皮肤科门诊就诊的气滞血瘀型黄褐斑患者,按照双盲原则,生成随机数字表,随机分成观察组(50例)和对照组(50例),观察组使用当红祛斑精华液外用,对照组使用安慰剂外用,连续治疗8周,随访1月。患者用药前、停药后第1天进行黄褐斑面积和严重指数(MASI)评分、医师整体评估(PGA)评分、患者满意度评价、VISIA图像分析,记录所有不良事件。结果:100例患者中87例纳入分析集进行疗效分析(观察组脱落5例,最终纳入45例;对照组脱落8例,最终纳入42例)。两组患者基线资料一致,差异无统计学意义。治疗后,观察组总有效率为75.56%(34/45),显著高于对照组的2.38%(1/42),差异具有统计学意义(χ^(2)=48.38,P结合方当红祛斑精华液治疗黄褐斑临床疗效肯定,安全性好。

关键词：中医态靶医学当红祛斑精华液黄褐斑随机对照试验

2型糖尿病患者血尿酸、总胆红素、单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值与颈动脉内膜中层厚度相关性的研究

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中国糖尿病杂志 2025年第02期 114-118页

作者：赵海燕蔡长霞赵文玲青海大学附属医院内分泌与代谢病科青海大学附属医院重症医学科青海大学附属医院中西医结合科

目的探讨T2DM患者血尿酸（SUA）、总胆红素（TBil）、单核细胞/HDL-C比值（MHR与颈动脉内膜中层厚度（CIMT）的相关性。方法选取2020年5月至2023年6月我院收治的T2DM患者212例，分为CIMT≥0.9 mm的增厚（Thic,n=98）组与CIMT<0.9 mm... 详细信息

目的探讨T2DM患者血尿酸（SUA）、总胆红素（TBil）、单核细胞/HDL-C比值（MHR与颈动脉内膜中层厚度（CIMT）的相关性。方法选取2020年5月至2023年6月我院收治的T2DM患者212例，分为CIMT≥0.9 mm的增厚（Thic,n=98）组与CIMT<0.9 mm的单纯T2DM(T2DM,n=114)组，比较两组一般资料与临床资料。Logistic回归分析CIMT增厚的影响因素，受试者工作特征（ROC）曲线分析SUA、TBil、MHR诊断CIMT的效能。结果 Thic组年龄、DM病程、SBP、DBP、FPG、Hb A1c、HOMA-IR、TG、LDL-C、血肌酐、血尿酸（SUA）、单核细胞计数（M）、MHR高于T2DM组（P<0.05）,FIns、TBil低于T2DM组（P<0.05）。Pearson相关分析显示，CIMT与年龄、DM病程、SBP、DBP、FPG、Hb A1c、HOMA-IR、LDL-C、SUA、M、MHR呈正相关（P<0.05），与FIns、TBil呈负相关（P<0.05）。Logistic回归分析显示，年龄、DM病程、SBP、Hb A1c、SUA、TBil、MHR是CIMT增厚的影响因素。ROC曲线分析显示，SUA、TBil、MHR单独及联合预测CIMT增厚的曲线下面积分别为0.684、0.674、0.741、0.846。结论 SUA、TBil、MHR是T2DM患者CIMT增厚的独立危险因素，三者联合检测对T2DM患者CIMT增厚具有良好的预测价值。

关键词：糖尿病血尿酸总胆红素炎症单核细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值颈动脉内膜中层厚度