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以9-蒽醛为荧光基团的吡唑啉衍生物荧光探针对Fe^(3+)和Cu^(2+)的检测

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无机化学学报 2021年第3期37卷 421-430页

作者：罗杰伟赵波张仕禄贾飞云刘军川北医学院基础医学院南充637000

以9-蒽醛为荧光基团,吗啉环和吡唑环为识别基团,合成了一种新型荧光探针1,5-二苯基-3-(10-(吗啉甲基)蒽-2-基)吡唑啉(PMAP),利用1H NMR、13C NMR和单晶衍射表征其结构,通过荧光发射光谱和紫外可见吸收光谱研究其离子识别性能。结果表明... 详细信息

以9-蒽醛为荧光基团,吗啉环和吡唑环为识别基团,合成了一种新型荧光探针1,5-二苯基-3-(10-(吗啉甲基)蒽-2-基)吡唑啉(PMAP),利用1H NMR、13C NMR和单晶衍射表征其结构,通过荧光发射光谱和紫外可见吸收光谱研究其离子识别性能。结果表明,探针PMAP对Fe^(3+)、Cu^(2+)具有良好的识别效果,荧光量子产率分别从0.14降到0.05和0.04,溶液颜色从淡黄色变为蓝色。PMAP与Fe^(3+)/Cu^(2+)以1∶1的化学计量比形成配合物,检测限约为1μmol·L^(-1)。同时,干扰实验表明PMAP具有良好的抗干扰性能。在实际样品中的应用表明,PMAP传感器能有效地检测实际水样中的Cu^(2+)和Fe^(3+)。另外,根据Fe^(3+)、Cu^(2+)和H+不同组合时PMAP的量子产率构建了分子水平上的三输入NOR逻辑门电路。

关键词：吡唑啉衍生物单晶铁离子铜离子

一种基于吗啉衍生物的Fe^3+/Cu^2+荧光探针

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无机化学学报 2020年第10期36卷 1845-1852页

作者：罗杰伟赵波张仕禄贾飞云刘军川北医学院基础医学院南充637000

以9-蒽醛为荧光基团,吡唑和吗啉为识别基团,合成了一种荧光分子探针4-((3-(1-苯基-5-吡啶基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)蒽-9-基)甲基)吗啉(L)。其结构经1H NMR、13C NMR表征,利用荧光发射光谱和紫外吸收光谱研究其离子识别性能。结果表明,... 详细信息

以9-蒽醛为荧光基团,吡唑和吗啉为识别基团,合成了一种荧光分子探针4-((3-(1-苯基-5-吡啶基-4,5-二氢-1H-吡唑-3-基)蒽-9-基)甲基)吗啉(L)。其结构经1H NMR、13C NMR表征,利用荧光发射光谱和紫外吸收光谱研究其离子识别性能。结果表明,探针L对Fe^3+和Cu^2+具有较强的选择性识别性能,荧光量子产率分别从0.47降到0.21和0.14;探针L的溶液颜色分别从淡黄色变为棕褐色和蓝色,裸眼可判断探针L选择性识别Fe^3+和Cu^2+。另外,根据Fe^3+、Cu^2+和H+不同组合时探针L的量子产率构建了分子水平上的三输入“NOR”逻辑门电路。

关键词：吗啉衍生物 “NOR”逻辑门 Fe3+ Cu2+

RUNX3调控胃癌细胞对曲妥珠单抗耐药的机制:基于超效高液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱的代谢组学分析

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南方医科大学学报 2022年第4期42卷 498-508页

作者：刘文虎汤建才常晋霞川北医学院药学院四川南充637100 川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100

目的探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)在胃癌曲妥珠耐药细胞中的代谢调控作用,阐释敲除RUNX3逆转耐药的代谢机制。方法基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术,对曲妥珠耐药胃癌细胞(NCI N87R)及RUNX3敲除细胞(NCI N87R/RUNX3... 详细信息

目的探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)在胃癌曲妥珠耐药细胞中的代谢调控作用,阐释敲除RUNX3逆转耐药的代谢机制。方法基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术,对曲妥珠耐药胃癌细胞(NCI N87R)及RUNX3敲除细胞(NCI N87R/RUNX3)进行代谢组分析;采用多变量结合单变量分析方法及二级质谱离子匹配打分筛选差异变量;使用MetaboAnalyst 5.0数据库进行通路富集分析;基于OmicsNet数据库构建差异代谢物-基因调控关系;通过试剂盒检测还原性/氧化性谷胱甘肽(GSH/GSSG)及还原性/氧化性辅酶II(NADPH/NADP)的比值。结果RUNX3敲除前后NCI N87R细胞的代谢特征显著改变,鉴定到81个对分类有显著贡献的差异代谢物,其中43个代谢物在NCI N87R/RUNX3细胞中增加,38个代谢物减少。RUNX3敲除导致耐药细胞8条通路显著改变(P<0.01),包括谷氨酰胺、糖酵解、甘油磷脂酸-烟酰胺及谷胱甘肽代谢等。试剂盒检测结果显示,NCI N87R/RUNX3胞内GSH/GSSG及NADPH/NADP降低(P<0.01);差异代谢物-基因网络揭示了代谢分子与基因之间的调控关系。结论RUNX3通过调控能量代谢及氧化-还原稳态逆转胃癌细胞对曲妥珠单抗耐药,提示RUNX3可能是胃癌曲妥珠单抗耐药的潜在治疗靶标。

关键词： Runt相关转录因子3 曲妥珠抗药性代谢组学谷氨酰胺代谢谷胱甘肽代谢超高效液相色谱

补体C1s对食管鳞状细胞癌生物学行为的影响

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中国免疫学杂志 2024年第1期40卷 127-133页

作者：任玲陈昱伶徐凤敏蒙春梅李倩倩胡为民川北医学院基础医学与法医学院南充637100

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1... 详细信息

目的:探究补体分子C1s对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、黏附以及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用NCBI-GEO数据库分析ESCC组织和癌旁正常组织(ANTs)中C1S mRNA的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测ESCC细胞系中C1s的表达;利用C1s小干扰RNA(siRNA)、C1s短发夹RNA(shRNA)或C1s过表达慢病毒对ESCC细胞进行C1s的敲低或过表达,CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,细胞-基质黏附实验检测细胞黏附能力;Western blot检测基质金属蛋白酶MMP1和MMP13表达;裸鼠皮下成瘤实验检测C1s对裸鼠移植瘤生长的影响,免疫组织化学法检测移植瘤中CD34表达,分析肿瘤微血管的形成。结果:ESCC组织中C1S mRNA表达明显高于ANTs,敲低C1s可明显抑制ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长,而过表达C1S则具有相反的效果;C1s敲低的ESCC细胞TE-1中MMP1和MMP13的表达降低;与对照组相比,C1s过表达组移植瘤中的微血管更加丰富。结论:C1s在ESCC组织中显著上调,并促进ESCC细胞的增殖、迁移、细胞-基质黏附以及裸鼠移植瘤的生长。C1s可能在ESCC发生发展中发挥重要作用。

关键词：补体C1s 食管鳞状细胞癌增殖迁移黏附

功能化聚乳酸-羟基乙酸共聚物基骨组织再生诱导膜的制备及其在大鼠颌骨缺损重建中的应用

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华西口腔医学杂志 2022年第5期40卷 522-531页

作者：刘一鸣赵云韩梅章雨秋米方林王冰川北医学院口腔医学系南充637000 川北医学院附属医院口腔科南充637000 川北医学院基础医学与法医学院化学教研室南充637000

目的制备具有抑制纤维化及抑菌作用的功能化复合静电纺丝纤维膜,初步探究其对大鼠颌骨缺损的修复作用。方法通过静电纺丝技术制备负载环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、奥硝唑及纳米羟磷灰石(n-HA)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维膜作为诱... 详细信息

目的制备具有抑制纤维化及抑菌作用的功能化复合静电纺丝纤维膜,初步探究其对大鼠颌骨缺损的修复作用。方法通过静电纺丝技术制备负载环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、奥硝唑及纳米羟磷灰石(n-HA)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维膜作为诱导骨组织再生作用的功能层(GBRL);通过流延法制备具有支撑作用及隔离不同功能层作用的致密膜层(BL);通过静电纺丝技术制备具有抑制纤维化作用的聚(对氧环己酮-L-苯丙氨酸)纤维膜作为抑制纤维化功能层(AFL)。应用扫描电子显微镜对复合膜形态进行表征观察,应用细胞计数盒(CCK)-8法研究不同功能层对MC3T3-E1及L929细胞增殖的影响;应用抑菌圈测试法研究复合膜对牙龈卟啉单胞菌增殖的抑制作用。构建大鼠下颌骨骨缺损模型,研究复合膜对骨缺损组织的修复作用,并与临床常用的胶原口腔修复膜的修复作用进行比较。结果成功制备具有多孔结构的纤维功能层,GBRL层可支持MC3T3-E1细胞增殖,AFL层可抑制L929细胞的增殖;负载奥硝唑的复合膜可抑制牙龈卟啉单胞菌的增殖;多种复合膜均可诱导大鼠缺损颌骨进行重建,其中同时负载奥硝唑及n-HA的复合膜具有最优异的修复效果,且效果优于胶原口腔修复膜。结论以同时负载奥硝唑及n-HA的静电纺丝膜作为GBRL层的复合膜,具有优异的抑菌及诱导骨组织再生的作用,且效果优于临床常用胶原口腔修复膜,是一种极有潜力应用于诱导牙周疾病所致缺损骨再生的材料。

关键词：静电纺丝抑制纤维化抑菌骨组织再生诱导膜

1,5-AG在高糖代谢兔尸体玻璃体液中的变化

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法医学杂志 2023年第1期39卷 13-17页

作者：刘芳芳吴慧王威谢英川北医学院基础医学与法医学院四川南充637000

目的了解1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-anhydroglucitol,1,5-AG)在高糖代谢兔尸体玻璃体液中的浓度水平及变化特点,探讨1,5-AG在高糖代谢紊乱所致死亡的法医病理学中的鉴定价值。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病高血糖兔模型,选取18只空腹血糖浓度... 详细信息

目的了解1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-anhydroglucitol,1,5-AG)在高糖代谢兔尸体玻璃体液中的浓度水平及变化特点,探讨1,5-AG在高糖代谢紊乱所致死亡的法医病理学中的鉴定价值。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病高血糖兔模型,选取18只空腹血糖浓度≥13.80 mmol/L的糖尿病高血糖兔(实验组)和18只空腹血糖浓度≤6.10 mmol/L的健康兔(对照组),采用空气栓塞处死,即刻采集血液,于死后0、12、24、36 h采集玻璃体液,检测兔血液及玻璃体液中1,5-AG的质量浓度。结果实验组血糖浓度为(25.10±3.14)mmol/L;1,5-AG质量浓度在死亡即刻血浆中[(0.94±0.20)μg/mL]与玻璃体液中[(0.99±0.05)μg/mL]差异无统计学意义(P>0.05)。实验组各时间点玻璃体液中1,5-AG质量浓度低于相应对照组(P0.05)。对照组和实验组兔血浆中1,5-AG质量浓度与血糖浓度均呈负相关(对照组r=-0.79,P<0.05;实验组r=-0.97,P<0.05)。结论玻璃体液可以替代血液作为检测1,5-AG的有效检材,兔玻璃体液中1,5-AG质量浓度在死后36 h内保持稳定,不受死后时间变化的影响。1,5-AG质量浓度明显下降,提示兔生前存在高血糖状态。

关键词：法医病理学 1 5-脱水葡萄糖醇高血糖玻璃体液糖尿病兔

乙型肝炎患者血清及外泌体内HBV-DNA提取及检测的方法学研究

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中国免疫学杂志 2023年第8期39卷 1736-1741页

作者：徐旭张丽孔祥鑫刘佳敏杨云川王浩张自力潘万龙(指导) 川北医学院基础医学与法医学院南充637100 川北医学院附属医院南充637000

目的:比较煮沸法与苯酚-氯仿法提取血清及外泌体内HBV-DNA,Taqman法与SYBR法qPCR检测HBV-DNA表达的优缺点,并寻找更为准确敏感的诊疗参考指标。方法:收集高病毒载量组与低病毒载量组的血清,提取血清外泌体并鉴定,分别提取血清与外泌体内... 详细信息

目的:比较煮沸法与苯酚-氯仿法提取血清及外泌体内HBV-DNA,Taqman法与SYBR法qPCR检测HBV-DNA表达的优缺点,并寻找更为准确敏感的诊疗参考指标。方法:收集高病毒载量组与低病毒载量组的血清,提取血清外泌体并鉴定,分别提取血清与外泌体内HBV-DNA,比较分析煮沸法与苯酚-氯仿法提取及qPCR Taqman法与SYBR法检测之间的表达差异。结果:高病毒载量组(HBV-DNA>5E+02 U/ml)中煮沸法提取血清HBV-DNA,Taqman法检测值高于SYBR法(P<0.05);Taqman测定血清HBV-DNA、SYBR测定外泌体HBV-DNA,煮沸法提取效率均高于苯酚-氯仿法(P<0.05);血清HBV-DNA表达高于外泌体(P<0.05)。低病毒载量组(HBV-DNA<5E+02 U/ml)中煮沸法与苯酚-氯仿法提取、Taqman法与SYBR法qPCR检测血清及外泌体HBV-DNA差异均无统计学意义。外泌体HBV-DNA表达高于血清(P<0.05)。结论:两种提取及检测方法均具有一致的灵敏度与特异度。外泌体包裹的HBV-DNA水平可能是临床诊断和治疗慢性乙肝中不可或缺的关键因素。

关键词：血清外泌体 HBV-DNA提取检测

基于血浆代谢组学探究三七总皂苷对2型糖尿病小鼠的降糖作用

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药学学报 2024年第4期59卷 1028-1039页

作者：张金花刘汉湘刘雨轩吴敏常晋霞刘文虎川北医学院药学院四川南充637100 川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100

基于血浆代谢组学结合实验验证研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠的降糖作用。将40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组,对照组常规饲养,实验组高脂饲料喂养12周后,经... 详细信息

基于血浆代谢组学结合实验验证研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠的降糖作用。将40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组,对照组常规饲养,实验组高脂饲料喂养12周后,经腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立T2DM模型,所有动物实验经川北医学院实验动物伦理委员会批准(批准号:NSMC2022023)。造模成功小鼠随机分为模型组(T2DM)、低剂量[200 mg·kg^(-1)·d^(-1)]和高剂量[300 mg·kg^(-1)·d^(-1)]三七总皂苷组,灌胃6周,每周监测小鼠体重、摄食量、进水量和空腹血糖值(fasting blood glucose,FBG),灌胃第5周进行口服糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT)。摘眼球采血检测肝脏功能及血脂;试剂盒检测血液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平及肝脏中抗氧化系统谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。基于代谢组学研究血浆中内源性代谢物变化;使用KEGG数据库通路富集分析;Western blot检测肝脏NF-κB通路及TNF-α和IL-6的表达。结果显示,T2DM小鼠构建成功;高剂量三七总皂苷(high Panax notoginseng saponins,HPNS)能够降低T2DM小鼠的空腹血糖,低剂量三七总皂苷(low Panax notoginseng saponins,LPNS)对空腹血糖无显著影响。HPNS能够改善T2DM小鼠肝脏功能,降低血脂及血液TNF-α和IL-6的水平,增加肝脏GSH-Px、CAT和SOD的活性。代谢组学结果显示,模型组血浆中45种代谢物变化显著,HPNS治疗后20种代谢物显著变化且向正常组转归。通路富集表明,花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、谷胱甘肽代谢及肉碱合成在T2DM小鼠血液中改变,HPNS可改善T2DM小鼠血液中花生四烯酸和亚油酸异常代谢。Western blot表明,HPNS能够抑制T2DM小鼠NF-κB通路,降低TNF-α和IL-6的表达,提示PNS可能通过抑制NF-κB通路;调节花生四烯酸和亚油酸代谢,降低炎性因子和氧化应激水平,改善肝脏功能发挥降低血糖的作用。

关键词：三七总皂苷降糖作用 NF-κB通路花生四烯酸代谢亚油酸代谢

METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 442-449页

作者：余玲张自力曾蓉张节王鹏潘万龙川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100 川北医学院附属医院老年科四川南充637100

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。

关键词：甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2 N6-甲基腺苷乙型肝炎病毒