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三种腰椎间盘突出症大鼠模型制备方法的比较与评价

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2930-2936页

作者：尹浩吉美奇胡志祥吴涵吕恒李圣云李蕾翟春涛吕玉娥山西中医药大学第二临床学院山西省晋中市030619 山西省针灸医院山西省太原市030006

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特... 详细信息

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特点。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为假手术组、棘突组、侧突组及纤维环穿刺组,其中假手术组大鼠仅切开皮肤,暴露棘突后并缝合;棘突组大鼠剪除L5棘突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;侧突组大鼠剪除L5侧突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;纤维环穿刺组大鼠剪除乳突后,进行纤维环穿刺术,并行椎间盘注射白细胞介素1β。分别在造模前和造模后检测大鼠热缩足潜伏期,造模结束后2周进行腰椎MRI检测;苏木精-伊红染色和番红-固绿染色观察椎间盘病理改变;免疫荧光观察CD68阳性表达。结果与结论:①热痛阈检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠在造模后痛觉敏感均降低,耐受时间均降低(P<0.05);②腰椎MRI影像显示:棘突组和纤维环穿刺组髓核组织突出明显,更符合常见腰椎间盘突出患者MRI影像;③苏木精-伊红染色观察:与假手术组比较,各模型组髓核组织存在不同程度退变,炎性细胞浸润和脊索细胞降解,出现空洞样改变,其中纤维环穿刺组病理改变最严重;④番红-固绿染色显示:与假手术组比较,3组模型的髓核组织边界模糊,存在广泛炎性反应,纤维环存在不同程度退变;⑤CD68+免疫荧光阳性结果显示:与假手术组相比,3组模型的CD68+表达更高、范围更广,其中纤维环穿刺组表达最高。结果说明3种方法均能有效建立腰椎间盘突出大鼠模型,其中剪除乳突后建立纤维环穿刺模型优于剪除棘突+乳突组自体髓核移植模型,前2种模型优于剪除侧突+乳突组自体髓核移植模型。

关键词：自体髓核移植纤维环穿刺腰椎间盘突出症 MRI CD68+ 动物模型

基于TRM细胞探讨刺络放血对咪喹莫特诱导的复发型银屑病小鼠的影响及作用机制

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中国中医药科技 2025年第1期 5-10+53页

作者：吴明明问雅琦王建青郭士洋山西省中医院山西省中医药研究院山西中医药大学

目的:基于组织常驻记忆性T细胞(tissue resident memory T cells, TRM)探讨刺络放血对咪喹莫特诱导的复发型银屑病小鼠的影响及作用机制。方法:采用背部涂抹咪喹莫特乳膏（Imiquimod, IMQ）二次诱导的方法建立复发型银屑病模型。将实验... 详细信息

目的:基于组织常驻记忆性T细胞(tissue resident memory T cells, TRM)探讨刺络放血对咪喹莫特诱导的复发型银屑病小鼠的影响及作用机制。方法:采用背部涂抹咪喹莫特乳膏（Imiquimod, IMQ）二次诱导的方法建立复发型银屑病模型。将实验随机分为分为正常对照组、模型组、刺络放血组、阳性对照组4组，每组6只C57BL/6小鼠，造模后刺络放血组小鼠在背部皮损夹脊穴区域进行刺络放血，阳性对照组小鼠在背部皮损区域均匀涂抹卡泊三醇软膏，正常对照组、模型组小鼠只抓取，不治疗，共治疗6 d。记录各组小鼠背部皮肤表现并进行银屑病面积与严重程度指数（PASI）评分；取各组小鼠背部皮肤HE染色法观察皮肤组织形态表现并行表皮厚度测量，免疫组化及流式细胞术检测各组小鼠背部皮肤组织CD+8TRM与CD69表达。结果:与正常对照组相比，模型组小鼠明显可见红斑、鳞屑、皮肤增厚等表现，PASI评分显著升高，病理切片可见角化过度、炎性细胞浸润、局部出血及表皮层明显增厚（P0.05）。与正常对照组相比，模型组小鼠背部皮肤组织CD+8TRM及CD69阳性细胞数显著增多（P0.05）。结论:刺络放血可能通过抑制机体TRM细胞的表达起到改善银屑病的作用。

关键词：复发型银屑病刺络放血病理学组织常驻记忆性T细胞小鼠

肉苁蓉苷A通过JNK/MAPK通路抑制破骨细胞活性

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中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1144-1151页

作者：李岳尧张民杨家驹山西中医药大学山西省晋中市030619 山西医科大学第二医院山西省太原市030001

背景:研究证实肉苁蓉苷A具有抗炎、抗氧化和抗骨质疏松的作用,但其对破骨细胞分化和功能的影响及潜在的机制尚缺少研究。目的:探讨肉苁蓉苷A对核因子κB受体活化因子配体诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能的影响及作用机制。方法:提... 详细信息

背景:研究证实肉苁蓉苷A具有抗炎、抗氧化和抗骨质疏松的作用,但其对破骨细胞分化和功能的影响及潜在的机制尚缺少研究。目的:探讨肉苁蓉苷A对核因子κB受体活化因子配体诱导的体外破骨细胞分化和骨吸收功能的影响及作用机制。方法:提取与培养4-6周龄C57BL/6小鼠股骨和胫骨中的骨髓巨噬细胞,采用CCK-8毒性实验检验不同浓度的肉苁蓉苷A(5,10,20,40,80,160μmol/L)对骨髓巨噬细胞的毒性,抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察不同浓度的肉苁蓉苷A干预破骨细胞的分化情况,确定药物的有效干预浓度。将实验分为阳性对照组、肉苁蓉苷A低、中、高剂量组(40,80,160μmol/L),细胞贴壁后各组均加入50 ng/mL的核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞分化,肉苁蓉苷A低、中、高剂量组分别加入相应剂量的肉苁蓉苷A进行干预。采用肌动蛋白环鬼笔环肽染色和DAPI染色检测肉苁蓉苷A对破骨细胞形成的影响;骨磨片甲苯胺蓝染色观察肉苁蓉苷A对破骨细胞骨吸收功能的影响;Western blot检测JNK/MAPK通路上下游蛋白的表达情况;RT-qPCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk和c-Fos等破骨细胞分化和骨吸收功能相关基因的表达情况。结果与结论:①抗酒石酸酸性磷酸酶染色、肌动蛋白环染色和骨陷窝甲苯胺蓝染色结果表明,与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A对核因子κB受体活化因子配体诱导的体外破骨细胞的分化和骨吸收功能具有呈剂量依赖性的显著抑制作用;②RT-qPCR结果表明,与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A高剂量组和低剂量组的抗酒石酸酸性磷酸酶、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk和c-Fos等的mRNA表达量均显著降低,且肉苁蓉苷A高剂量组的降低效果更加显著;③Western blot结果显示,高剂量肉苁蓉苷A干预10,20,30和60 min时显著抑制p-JNK蛋白的表达;与阳性对照组相比,肉苁蓉苷A低、中、高剂量组显著抑制Nfatc1和c-Fos蛋白的表达,且呈剂量依赖性;④结果说明,肉苁蓉苷A能够通过降低p-JNK蛋白水平,抑制MAPK通路的激活和破骨细胞关键基因的表达,进而抑制破骨细胞的形成和骨吸收功能。

关键词：肉苁蓉苷A 破骨细胞 MAPK JNK RANKL RANK 骨质疏松苯乙醇苷

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中医药基于铁死亡防治骨性关节炎研究进展

中国骨质疏松杂志 2025年第1期 118-123页

作者：杨昊飞柳海平张旭升李金生元宝华刘晓婷甘肃中医药大学甘肃省中医院

骨性关节炎(osteoarthritis, OA)是一种多见于中老年人群的退行性骨关节疾病，其病理主要是软骨损伤、炎症反应，表现为关节疼痛、肿胀、活动受限等，严重可导致患者畸形。OA的发病与炎症、软骨细胞的代谢密切相关，铁死亡参与炎症因子... 详细信息

骨性关节炎(osteoarthritis, OA)是一种多见于中老年人群的退行性骨关节疾病，其病理主要是软骨损伤、炎症反应，表现为关节疼痛、肿胀、活动受限等，严重可导致患者畸形。OA的发病与炎症、软骨细胞的代谢密切相关，铁死亡参与炎症因子、软骨细胞的代谢过程，通过下调铁沉积、脂质过氧化来延缓炎症反应与软骨损伤进而防治OA。研究发现，中药可以通过调节铁死亡抑制OA发病机制进而达到治疗OA的目的。笔者简要叙述铁死亡的作用机制与OA的关系，对中药基于铁死亡治疗OA的作用作一综述，为未来研究中医药治疗OA提供新的治疗策略。

关键词：铁死亡骨性关节炎铁蓄积脂质过氧化炎症因子

汉黄芩素对胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症影响的内质网应激途径

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 1026-1035页

作者：王瑜茹李思源徐烨张雨蒙刘杨郝慧琴山西医科大学第三医院(山西白求恩医院山西医学科学院同济山西医院)山西省太原市030032 山西中医药大学中西医结合基础实验室山西省晋中市030619

背景:类风湿关节炎是一种炎性疾病,已有多项研究表明汉黄芩素具有较好的抗炎作用,但其对类风湿关节炎的确切疗效和具体作用机制尚待阐明。目的:探讨汉黄芩素通过调节内质网应激途径改善胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症的作用机制。方法:... 详细信息

背景:类风湿关节炎是一种炎性疾病,已有多项研究表明汉黄芩素具有较好的抗炎作用,但其对类风湿关节炎的确切疗效和具体作用机制尚待阐明。目的:探讨汉黄芩素通过调节内质网应激途径改善胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症的作用机制。方法:①动物水平:雌性Wistar大鼠分为健康对照组、关节炎模型组、汉黄芩素治疗组,通过皮下注射牛Ⅱ型胶原与弗式佐剂构建胶原诱导性关节炎大鼠模型,治疗组在成功造模后给予连续28 d汉黄芩素灌胃治疗;在此期间,每隔7 d对各组大鼠进行体质量、关节炎评分和踝关节肿胀度测量;实验结束后,观察关节病理变化,qRT-PCR和Western Blot、免疫组化检测关节中内质网应激通路GRP78、CHOP mRNA和蛋白表达水平。②细胞水平:CCK-8检测汉黄芩素对胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞的细胞毒作用;不同浓度汉黄芩素处理毒胡萝卜素诱导的成纤维样滑膜细胞,ELISA检测细胞上清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平,DCFH-DA探针法测定各组细胞内活性氧簇,qRT-PCR和Western Blot检测GRP78、IRE1α、XBP1s、CHOP mRNA和蛋白水平。结果与结论:①与健康对照组相比,关节炎模型组关节炎指数评分、踝关节肿胀度升高(P0.05)。②细胞实验中,200μmol/L汉黄芩素组可明显降低成纤维样滑膜细胞存活率(P<0.01);与空白对照组相比,毒胡萝卜素组细胞上清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平、活性氧含量、GRP78、IRE1α、XBP1s、CHOP mRNA及蛋白表达显著增多(P<0.05);与毒胡萝卜素组相比,50μmol/L和100μmol/L汉黄芩素组可降低细胞上清白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平(P<0.05,P<0.01),100μmol/L汉黄芩素组可明显减少活性氧含量(P<0.01)、下调GRP78、IRE1α、XBP1s、CHOP mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)。③结果提示汉黄芩素可以有效改善胶原诱导性关节炎大鼠的关节炎症反应,且内质网应激途径可能是其干预的关键靶点。

关键词：汉黄芩素内质网应激类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞炎症反应

基于DCE-MRI评价协定方通脑饮改善急性缺血性脑卒中患者血脑屏障损伤的疗效

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期 140-146页

作者：夏杨静怡李姗珊厉励唐晓刚王欣彤朱清蒋辉袁翠平刘永康陈兆耀李文磊朱元吴明华南京中医药大学附属医院/江苏省中医院

目的：运用动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）技术评估协定方通脑饮对痰瘀阻络型急性缺血性脑卒中患者血脑屏障状况和神经功能缺损的改善作用。方法：纳入2022年10月至2023年12月在江苏省中医院神经内科住院的中风痰瘀阻络证的患者共6... 详细信息

目的：运用动态对比增强磁共振成像（DCE-MRI）技术评估协定方通脑饮对痰瘀阻络型急性缺血性脑卒中患者血脑屏障状况和神经功能缺损的改善作用。方法：纳入2022年10月至2023年12月在江苏省中医院神经内科住院的中风痰瘀阻络证的患者共63例。根据随机数字表法将患者分为两组，对照组32例，观察组31例。对照组予符合指南的基础西医治疗，观察组在对照组基础上加用协定方通脑饮水煎剂，早晚饭后温服200 mL，每日2次，入院第2天起连续服用7 d后行DCE-MRI检查。对两组患者治疗前的基线资料进行比较；对两组患者治疗前及治疗90 d后美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、改良Rankin量表（mRS）评分进行比较；通过梗死区感兴趣区（ROI）/镜面区ROI得出r参数（r）容积转运常数（Ktrans）、r返流速率常数（Kep）及r血管外容积分数（Ve）值，并对两组患者的r Ktrans、r Kep和r Ve行比较。结果：治疗前两组患者NIHSS评分、mRS评分差异无统计学意义。与本组治疗前比较，治疗90 d后，观察组及对照组患者治疗前后NIHSS评分、mRS评分均明显降低（P<0.05）。与对照组治疗后比较，观察组患者NIHSS评分、mRS评分降低更明显（P<0.05）。观察组患者治疗后rKtrans和rVe均显著低于对照组（P<0.01）。结论：通脑饮联合西医基础治疗相较于西医基础治疗更有助于加快AIS患者卒中后血脑屏障的修复，显著减轻急性缺血性脑卒中患者神经功能缺损症状，从而改善功能结局。

关键词：急性缺血性卒中通脑饮痰瘀阻络证血脑屏障动态对比增强磁共振成像(DCE-MRI)

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试论头针流派的共同性和头针方案统一的可能性

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中国针灸 2025年第01期 110-122页

作者：胡效萌孙畅李妍莫溪桐颜芃陈思璇范刚启南京中医药大学附属南京中医院脑病科

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头... 详细信息

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头针方案统一所面临的主要问题及对策，为头针方案的标准化和统一提供参考。

关键词：头针疗法流派穴穴线穴区针数颅脑解剖学头针共同性统一

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二仙丸加减方含药血清抑制巨噬细胞焦亡的物质基础和作用机制

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4029-4037页

作者：李思源王瑜茹徐烨郭地南楠刘杨赵杰郝慧琴山西中医药大学第三临床学院山西省晋中市030619 山西中医药大学中西医结合基础实验室山西省晋中市030619 经方扶阳山西省重点实验室山西省太原市030013

背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:... 详细信息

背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)对二仙丸加减方及入血成分进行检测和鉴定。②二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响:采用分子对接技术对二仙丸加减方入血成分倍半萜类化合物与NLRP3进行初步验证。将J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组、脂多糖+三磷酸腺苷组及脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清低(2.5%)、中(5%)、高(10%)剂量组。根据试剂盒说明书检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶释放情况;ELISA检测各组细胞上清液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平;Hoechst/PI染色法检测各组细胞膜受损情况;Western blot检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达水平。结果与结论:①共鉴定出二仙丸加减方药效成分32个,入血成分21个,其中入血成分主要包括多种倍半萜类化合物;②分子对接结果显示3-O-Acetyl-13-deoxyphomenone、Incensol oxide、Atractylenolide Ⅲ、Rupestonic acid、3,7-Dihydroxy-9,11-eremophiladien-8-one与NLRP3之间结合活性较好;③与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组细胞上清中乳酸脱氢酶活性及白细胞介素1β、白细胞介素18水平均显著升高(P<0.001),Hoechst/PI染色可见PI阳性细胞数量显著增加。脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组上述指标均显示不同程度降低;④与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05);与脂多糖+三磷酸腺苷组相比,脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性。结果表明:二仙丸加减方含药血清可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制J774A.1巨噬细胞焦亡。

关键词：二仙丸加减方含药血清细胞焦亡 J774A.1巨噬细胞倍半萜类

中药调控线粒体质量控制防治骨质疏松研究进展

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中国骨质疏松杂志 2025年第1期 112-117+141页

作者：张循儒李红专梁家齐刘跃振张效收李晶李中锋甘肃中医药大学甘肃省中医院

骨质疏松症是一种慢性代谢性骨病，主要由成骨细胞和破骨细胞之间的失衡引起。发生骨质疏松后若不及时治疗，则会引发反复骨折的恶性循环，最终导致患者残疾和过早死亡。目前治疗骨质疏松症的方法以抑制骨吸收和促进骨形成药物为主，缺... 详细信息

骨质疏松症是一种慢性代谢性骨病，主要由成骨细胞和破骨细胞之间的失衡引起。发生骨质疏松后若不及时治疗，则会引发反复骨折的恶性循环，最终导致患者残疾和过早死亡。目前治疗骨质疏松症的方法以抑制骨吸收和促进骨形成药物为主，缺少较好的治疗手段。既往国内外学者研究发现，线粒体质量控制可以通过调节成骨细胞和破骨细胞活性之间的平衡来维持骨稳态。中医通过辨证论治依据患者个人的体质进行综合调理，起到了延缓和治疗骨质疏松进展的作用。同时，研究表明中药通过靶向线粒体质量控制可以调控成骨细胞和破骨细胞以及骨髓间充质干细胞的活性，进而防止骨质疏松的发生，但相关研究缺乏系统阐述。因此，笔者将从中药调控线粒体质量控制防治骨质疏松展开研究，旨在为中药治疗骨质疏松症的新药研发和治疗方式提供新的思路和方法。

关键词：骨质疏松中医中药骨稳态线粒体质量控制