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乳源凝固酶阴性葡萄球菌的PFGE分型及耐药性研究

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中国食品学报 2016年第9期16卷 33-41页

作者：许女史改玲陈旭峰李雅茹杜立红王俊东山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西农业大学山西太谷030801 山西农业大学食品科学与工程学院山西农业大学山西太谷030801

对分离自隐性乳房炎乳样中的25株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型，结果表明不同牛场流行的CNS种类和基因型有所不同，即使来自同一牛场的相同菌种也表现出完全不同的流行克隆型．证明了菌种基因型的多样性。... 详细信息

对分离自隐性乳房炎乳样中的25株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型，结果表明不同牛场流行的CNS种类和基因型有所不同，即使来自同一牛场的相同菌种也表现出完全不同的流行克隆型．证明了菌种基因型的多样性。MIC测定结果显示所有菌株都表现出三重以上耐药，且耐药程度高（36％～96％）。携带最多的耐药基因是ermC（96．55％）和tetK（89．66％）基因，然后是ermB（82．76％），tetM（82．76％），msrA（86．21％），msrB（82．76％）和lnuA（72．41％）基因，mph的基因含量最少，为41.38％。另外，本文还检测出4株恍cA基因阳性菌株，即超级耐药菌-***和刚果红试验结果显示88％的菌株都具有产生物被膜的能力。并且其多重耐药性显著高于不产生物被膜的菌株。综上所述，目前，乳源及食品动物源细菌耐药形式极其严峻，多重耐药菌及耐药基因的传播，给食品安全及公众健康造成了巨大风险，急需出台一系列的用药规定,加大科研力度，研究安全、绿色、高效新药物。

关键词：凝固酶阴性葡萄球菌 PFGE 耐药

植物乳杆菌KF1对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的抑菌机制

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中国食品学报 2016年第10期16卷 19-27页

作者：许女史改玲张浩杜立红王俊东山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西农业大学山西太谷030801 山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

从开菲尔奶中筛选出一株具有强抑菌活性的乳酸菌KF1,经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌。排除有机酸、过氧化氢的干扰试验,通过蛋白酶K和胰蛋白酶水解试验,证明该菌株产生的抑菌活性物质具有蛋白质性质,是一种细菌素。该细菌素在pH值2~4... 详细信息

从开菲尔奶中筛选出一株具有强抑菌活性的乳酸菌KF1,经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌。排除有机酸、过氧化氢的干扰试验,通过蛋白酶K和胰蛋白酶水解试验,证明该菌株产生的抑菌活性物质具有蛋白质性质,是一种细菌素。该细菌素在pH值2~4范围内抑菌效果稳定,当pH值达到8时,抑菌活性完全丧失;在121℃处理60 min后,仍保留约68%的活性,稳定性较好。抑菌谱试验表明,KF1细菌素对13株奶牛乳房炎病原菌都有不同程度的抑制作用,其中,对无乳链球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌等革兰氏阳性菌的抑菌作用最强,抑菌直径大于18 mm,抑制效果优于G―菌。通过研究KF1细菌素对菌体细胞壁、细胞膜通透性的影响,揭示其抑菌机制为膜孔道渗漏机制。另外,本文还发现KF1细菌素对多重耐药金黄色葡萄球菌生物被膜的形成―主要的毒力因子具有明显的抑制作用,显示其在奶牛乳房炎预防、治疗方面的应用前景。

关键词：植物乳杆菌KF1 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌抑菌

Nisin对奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成的影响及调节机制

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中国食品学报 2017年第10期17卷 8-15页

作者：许女史改玲张浩杜立红王俊东食品科学与工程学院山西农业大学山西太谷030801 山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西农业大学山西太谷030801

本文考察了nisinA对奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜的形成及相关基因表达的影响。结果表明,亚抑菌浓度的nisinA对金黄色葡萄球菌SMS10和表皮葡萄球菌SMSE169的生长和生物被膜的形成都起到明显的抑制作用;当nisinA的浓度为8×MIC和16MIC时,... 详细信息

本文考察了nisinA对奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜的形成及相关基因表达的影响。结果表明,亚抑菌浓度的nisinA对金黄色葡萄球菌SMS10和表皮葡萄球菌SMSE169的生长和生物被膜的形成都起到明显的抑制作用;当nisinA的浓度为8×MIC和16MIC时,其对菌株已形成的成熟生物被膜也具有良好的消除作用;采用电镜可以观察到经nisinA处理的生物被膜的密度和厚度显著降低,不仅出现了明显空隙,而且可见单个分散的菌体细胞。实时荧光定量PCR结果表明,相比于对照组,nisinA处理组的ica D,agr基因的表达显著提高,clfB基因的表达却显著下降,而关于RNAIII基因的表达情况,2株菌呈现出不同的变化趋势,显示出生物被膜基因调控的复杂性。nisinA天然、安全、高效等特点,将在奶牛乳房炎的预防和治疗上具有良好的开发前景。

关键词： nisin 奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜

牛源乳酸菌的粘附特性及对奶牛乳房炎大肠杆菌的粘附抑制研究

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中国食品学报 2017年第1期17卷 20-30页

作者：许女史改玲程宏乾张浩杜立红王俊东山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西农业大学山西太谷030801 山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801

本文主要研究4株乳酸菌的粘附特性及对奶牛乳房炎大肠杆菌的粘附抑制作用。结果显示,分离自健康牛乳管中的乳酸乳球菌CM2和来源于奶牛肠道中的干酪乳杆菌CI2两株菌对Caco-2细胞及大鼠小肠黏液的粘附特性最强;在粘附与菌体表面性质的相... 详细信息

本文主要研究4株乳酸菌的粘附特性及对奶牛乳房炎大肠杆菌的粘附抑制作用。结果显示,分离自健康牛乳管中的乳酸乳球菌CM2和来源于奶牛肠道中的干酪乳杆菌CI2两株菌对Caco-2细胞及大鼠小肠黏液的粘附特性最强;在粘附与菌体表面性质的相关性试验中,测试菌株的粘附能力和疏水性具有良好的相关性,即疏水作用参与了菌株与Caco-2细胞的粘附。糖类抑制试验和酵母凝集试验表明CM2菌体表面分布着甘露糖特异性凝集素;通过各种化学和酶的处理及细胞壁表面成分的提取试验,揭示了CM2和CI2菌株粘附素的本质为蛋白质;另外,本文还研究了这两株乳酸菌对奶牛乳房炎致病菌大肠杆菌E1和E2的粘附抑制作用以及对Caco-2细胞的活性、分泌免疫相关细胞因子的影响,显示了其具有安全、天然、治疗奶牛乳腺炎的微生物制剂的开发潜力。

关键词：乳酸菌粘附奶牛乳房炎

氟对鲤鱼肾抗氧化酶和Na^+-K^+-ATPase水平的影响

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核农学报 2016年第5期30卷 1030-1035页

作者：陈剑杰曹谨玲宋杰李潇山西农业大学动物科技学院/山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西太谷030801

为探究氟对鲤鱼的毒性机制,本试验检测了不同浓度(0、40、80、120 mg·L^(-1),分别标记为CK、T1、T2、T3)下,水相氟暴露对鲤鱼肾组织抗氧化酶SOD、CAT、LPO含量及Na^+-K^+-ATPase活性的影响,并通过免疫印迹法和免疫荧光组织化学法检测... 详细信息

为探究氟对鲤鱼的毒性机制,本试验检测了不同浓度(0、40、80、120 mg·L^(-1),分别标记为CK、T1、T2、T3)下,水相氟暴露对鲤鱼肾组织抗氧化酶SOD、CAT、LPO含量及Na^+-K^+-ATPase活性的影响,并通过免疫印迹法和免疫荧光组织化学法检测了水相氟暴露对其肾组织Na^+-K^+-ATPase蛋白表达的影响。结果表明,在不同氟浓度下暴露30 d后,T2、T3的SOD、CAT、Na^+-K^+-ATPase活性均显著低于CK,LPO含量呈升高趋势且显著高于CK;Na^+-K^+-ATPase蛋白表达分析表明,T2、T3的Na^+-K^+-ATPase蛋白的表达显著低于CK。相关性分析表明,氟暴露浓度与SOD、CAT、Na^+-K^+-ATPase活性呈负相关(Pearson系数分别为-0.586,-0.707,-0.818,P<0.01),与LPO含量呈正相关(Pearson系数为0.762,P<0.01),与Na^+-K^+-ATPase蛋白的表达呈负相关(免疫印迹法Pearson系数为-0.769,P<0.01,免疫荧光法Pearson系数为-0.848,P<0.01)。结果表明,水体中氟可在一定程度上对鲤鱼肾抗氧化酶和Na^+-K^+-ATPase水平产生抑制作用。

关键词：氟化钠鲤鱼肾抗氧化酶 Na+-K+-ATPase蛋白表达

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纳米氧化锌对鲤鱼鳃显微和超微结构的影响

电子显微学报 2011年第6期30卷 561-566页

作者：曹谨玲陈剑杰王俊东山西农业大学动物科技学院山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室山西太谷030801

采用光镜和透射电镜技术,探讨了不同浓度纳米氧化锌暴露对鲤鱼幼鱼鳃显微和超微结构的影响。暴露组纳米氧化锌浓度分别为5、10、20、50、100 mg.L-1,同时设对照组,连续暴露21 d,取鳃制备切片,进行光镜和透射电镜观察。结果表明,21 d后... 详细信息

采用光镜和透射电镜技术,探讨了不同浓度纳米氧化锌暴露对鲤鱼幼鱼鳃显微和超微结构的影响。暴露组纳米氧化锌浓度分别为5、10、20、50、100 mg.L-1,同时设对照组,连续暴露21 d,取鳃制备切片,进行光镜和透射电镜观察。结果表明,21 d后纳米氧化锌暴露组鲤鱼鱼鳃部均有不同程度的损伤,石蜡切片上可观察到暴露组鱼鳃上皮细胞增生、变性、鳃小片断裂或融合,且病变程度随纳米氧化锌浓度的升高而加重;透射电镜下可观察到暴露组鱼鳃氯细胞内线粒体出现肿胀、嵴模糊或缺失、空泡化。表明纳米氧化锌暴露可在短期内对鲤鱼鱼鳃组织造成损伤,且损伤程度存在剂量依赖效应。

关键词：纳米氧化锌鲤鱼鳃显微结构超微结构

羧基化多壁碳纳米管对雌性小鼠卵泡发育的影响

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生态毒理学报 2018年第6期13卷 369-374页

作者：郄明丽李志慧张伟伟高言冯志远张建海山西农业大学动物科技学院太谷030801 生态畜牧与环境兽医学山西省重点实验室太谷030801

碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)作为一种新形式的结晶碳,在工业及医药领域具有非常广阔的应用前景。本研究采用水溶性较好的羧基化多壁碳纳米管(MWCNTs-COOH)为研究对象,探索功能化多壁碳纳米管对小鼠卵巢发育的影响。将羧基化多壁碳... 详细信息

碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)作为一种新形式的结晶碳,在工业及医药领域具有非常广阔的应用前景。本研究采用水溶性较好的羧基化多壁碳纳米管(MWCNTs-COOH)为研究对象,探索功能化多壁碳纳米管对小鼠卵巢发育的影响。将羧基化多壁碳纳米管溶解在含0.5%Tween-20的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,对实验小鼠按照2.5,5,10 mg·kg^(-1)进行持续64 d的灌胃处理。处理结束后通过透射电子显微镜和HE染色观察卵巢组织的形态学变化。结果显示,碳纳米管确实进入了小鼠卵巢中。同时,随着MWCNTs-COOH暴露的增加,雌性小鼠卵泡数量显著减少,而雌性小鼠卵泡的形态结构并无明显变化。

关键词：羧基化多壁碳纳米管雌性小鼠生殖毒性组织形态学变化

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氟对鲤鱼脑抗氧化系统及细胞凋亡的影响

环境科学学报 2013年第3期33卷 861-866页

作者：曹谨玲陈剑杰王俊东罗永巨山西农业大学动物科技学院山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室太谷030801 广西水产研究所南宁530021

以鲤鱼为受试材料,研究了氟化钠对其脑组织的抗氧化系统、组织结构和细胞凋亡的影响.结果发现,染毒30 d时,随氟化钠浓度的升高,SOD、GSH活性表现为先诱导后抑制的趋势;暴露60 d与90 d后,SOD、GSH活性主要表现为抑制.而MDA水平在整个暴... 详细信息

以鲤鱼为受试材料,研究了氟化钠对其脑组织的抗氧化系统、组织结构和细胞凋亡的影响.结果发现,染毒30 d时,随氟化钠浓度的升高,SOD、GSH活性表现为先诱导后抑制的趋势;暴露60 d与90 d后,SOD、GSH活性主要表现为抑制.而MDA水平在整个暴露实验期间均呈增高趋势.暴露90 d后,脑组织切片的显微观察结果显示,氟化钠能导致鲤鱼脑组织血栓形成及各细胞层结构发生病理学改变,并具有剂效相关性.生物检测结果显示,随着氟化钠暴露剂量增大,鱼脑细胞凋亡率的增加与MDA水平的升高呈正相关关系(r=0.9968),而Bcl-2的表达减弱与SOD、GSH活性呈正相关关系(r=0.9198,0.9889).

关键词：氟化钠鲤鱼脑抗氧化系统细胞凋亡

高氟低碘对Wistar大鼠大脑组织病理学及DNA损伤的影响

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中国实验动物学报 2009年第1期17卷 10-14,I0002,I0003页

作者：洪建华牛瑞燕葛亚明王俊东山西农业大学医院太谷030801 山西农业大学生态畜牧与环境兽医学山西省重点实验室太谷030801

目的研究高氟与低碘对子代大鼠大脑组织病理学及脑细胞DNA损伤的影响。方法断乳Wistar大鼠(雌∶雄=3∶1)32只,随机分为四组:对照组,饲喂大鼠标准饲料,去离子水;高氟组,饲喂大鼠标准饲料,饮100mg/L氟化钠(NaF)去离子水;低碘组,饲喂低碘饲... 详细信息

目的研究高氟与低碘对子代大鼠大脑组织病理学及脑细胞DNA损伤的影响。方法断乳Wistar大鼠(雌∶雄=3∶1)32只,随机分为四组:对照组,饲喂大鼠标准饲料,去离子水;高氟组,饲喂大鼠标准饲料,饮100mg/L氟化钠(NaF)去离子水;低碘组,饲喂低碘饲料(定做),去离子水;高氟低碘组,饲喂低碘饲料,饮100mg/L氟化钠(NaF)去离子水。雌雄大鼠自然交配,待子代大鼠出生后,观察其在10、20天时脑皮质、海马组织病理学变化,及30、60和90天时脑DNA的损伤。结果与对照组相比,高氟组和低碘组大鼠大脑皮质及海马内有较多神经元核固缩、核溶解及细胞轮廓不清晰。高氟低碘组,有大量神经元出现核固缩、核溶解、锥体突明显拉长等现象,并且在大鼠发育期内尤其明显。随着日龄的增加,各实验组子代大鼠脑细胞DNA损伤程度显著增加,以高氟低碘组90日龄大鼠DNA损伤最严重。结论高氟与低碘影响了大鼠大脑皮质及海马组织形态结构与引起了脑细胞的DNA损伤。

关键词：高氟低碘子代大鼠大脑组织理学变化 DNA损伤