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枸杞多糖调节线粒体动力学改善过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞的凋亡

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2736-2743页

作者：王记委李雁冰郭敏芳孟涛于婧文刘晓琴穆秉桃贾思玮马存根尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西省晋中市030619 山西大同大学脑科学研究所山西省大同市037009 大同市第五人民医院山西省大同市037009

背景:大量研究结果证明,神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的:研究枸杞多糖对过... 详细信息

背景:大量研究结果证明,神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的:研究枸杞多糖对过氧化氢诱导人源神经母瘤细胞SH-SY5Y凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分3组培养:对照组常规培养24 h,过氧化氢组加入过氧化氢处理24 h,枸杞多糖组加入枸杞多糖处理2 h后再加入过氧化氢处理24 h。处理结束后,采用试剂盒检测细胞沉淀中丙二醛、谷胱甘肽和超氧化物歧化酶水平,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫荧光染色与Western Blot检测线粒体动力学相关蛋白(磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1、线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1)与凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)表达。结果与结论:①与对照组相比,过氧化氢组丙二醛水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组丙二醛水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平升高(P<0.05);②过氧化氢组线粒体膜电位低于对照组(P<0.05),枸杞多糖组线粒体膜电位高于过氧化氢组(P<0.05);③与对照组相比,过氧化氢组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),细胞活力与Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),细胞活力与Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);④与对照组相比,过氧化氢组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达升高(P<0.05),线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达降低(P<0.05),线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达升高(P<0.05);⑤结果表明,枸杞多糖可通过调节线粒体动力学来改善氧化应激损伤诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

关键词：枸杞多糖氧化应激线粒体动力学神经退行性疾病细胞凋亡

羟基红花黄色素A减轻双环己酮草酰二腙小鼠髓鞘脱失的机制

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5311-5319页

作者：陈莹刘健梁亚杰李彦青宋丽娟黄建军尉杰忠王青马存根山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心山西省晋中市030619 国药同煤集团总医院神经外科/山西省卫健委神经疾病防治研究重点实验室山西省大同市037003 山西大同大学脑科学研究所/大同市第五人民医院山西省大同市037009

背景:在中枢神经系统脱髓鞘疾病的发生发展过程中,小胶质细胞导致的神经炎症是主要病理特征,因此抑制炎症反应对缓解髓鞘脱失非常重要。羟基红花黄色素A有保护血脑屏障、抑制神经元的凋亡、改善神经功能的作用。目的:探究羟基红花黄色素... 详细信息

背景:在中枢神经系统脱髓鞘疾病的发生发展过程中,小胶质细胞导致的神经炎症是主要病理特征,因此抑制炎症反应对缓解髓鞘脱失非常重要。羟基红花黄色素A有保护血脑屏障、抑制神经元的凋亡、改善神经功能的作用。目的:探究羟基红花黄色素A抑制双环己酮草酰二腙诱导的小鼠髓鞘脱失的作用机制。方法:①体内实验:将30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、双环己酮草酰二腙组和羟基红花黄色素A组3组,后2组小鼠喂养含0.2%双环己酮草酰二腙的饲料6周建立脱髓鞘小鼠模型,正常组小鼠喂养正常饲料;在第4周末,给予羟基红花黄色素A组小鼠腹腔注射20 mg/(kg·d)羟基红花黄色素A,正常组和双环己酮草酰二腙组小鼠腹腔注射生理盐水,持续2周。旷场实验、高架十字迷宫实验评价小鼠的行为学变化;黑金染色和髓鞘碱性蛋白、降解髓鞘碱性蛋白免疫荧光染色检测胼胝体髓鞘脱失情况;离子钙结合接头分子1免疫荧光染色和ELISA法分别检测小胶质细胞的活化和炎症因子的表达;Western Blot法检测各组小鼠脑中Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB p65蛋白的表达水平;②体外实验:采用脂多糖诱导建立BV2小胶质细胞炎症模型。将BV2细胞分为正常组、脂多糖组(1μg/mL)和脂多糖(1μg/mL)+羟基红花黄色素A(25μmol/L)组,采用ELISA法检测细胞上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达水平。结果与结论:①对比正常组,双环己酮草酰二腙组小鼠焦虑情况严重、自主运动能力异常,胼胝体区髓鞘大量脱失,髓鞘碱性蛋白平均荧光强度显著降低,降解髓鞘碱性蛋白平均荧光强度显著升高,离子钙结合接头分子1阳性小胶质细胞数量增多,脑内白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平升高,Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB p65的蛋白表达水平明显升高。羟基红花黄色素A治疗后,小鼠上述症状和各项指标均发生相反的变化。②羟基红花黄色素A显著抑制由脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达。③上述结果说明羟基红花黄色素A能够显著改善双环己酮草酰二腙诱导的小鼠髓鞘脱失,作用机制与Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB p65信号通路抑制小胶质细胞活化介导的炎症反应有关。

关键词：羟基红花黄色素A 双环己酮草酰二腙炎症髓鞘脱失小胶质细胞小鼠

羟基红花黄色素A抑制糖氧剥夺/复糖复氧处理后神经元焦亡的作用

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4044-4051页

作者：王泽乾段彦哲吴艺舸马东黄建军闫玉清宋丽娟山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心山西省晋中市030619 国药同煤总医院神经外科/山西省神经疾病防治研究委级重点实验室山西省大同市037003 山西大同大学脑科学研究所山西省大同市037009 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西省太原市030001

背景:羟基红花黄色素A具有抗缺血、抗氧化、抗血栓及抗炎等作用,其是否影响糖氧剥夺/复糖复氧处理后神经元焦亡,目前尚不清楚。目的:探讨羟基红花黄色素A对神经元焦亡的干预作用及机制。方法:取对数生长期的HT22细胞,随机分为5组:正常... 详细信息

背景:羟基红花黄色素A具有抗缺血、抗氧化、抗血栓及抗炎等作用,其是否影响糖氧剥夺/复糖复氧处理后神经元焦亡,目前尚不清楚。目的:探讨羟基红花黄色素A对神经元焦亡的干预作用及机制。方法:取对数生长期的HT22细胞,随机分为5组:正常组、模型组、羟基红花黄色素A组、Colivelin组、Colivelin+羟基红花黄色素A组。利用糖氧剥夺/复糖复氧处理HT22细胞建立神经元焦亡模型,然后给予STAT3激动剂Colivelin、羟基红花黄色素A干预。干预后JC-1探针检测线粒体膜电位变化,活性氧试剂盒检测细胞内活性氧含量,GSDMD/TUNEL染色观察细胞焦亡情况,免疫荧光检测STAT3、GSDMD蛋白表达,RT-PCR检测STAT3、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达,Western blot检测p-STAT3、NLRP3、GSDMD、Cleaved-caspase-1、白细胞介素1β蛋白表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组焦亡细胞数量增多,p-STAT3、NLRP3、Cleaved-caspase-1、GSDMD、白细胞介素1β蛋白表达显著升高;与模型组相比,羟基红花黄色素A组焦亡细胞数量减少,焦亡相关蛋白的表达显著降低;②与模型组相比,Colivelin组细胞焦亡加剧,线粒体膜电位降低,活性氧含量增加,STAT3、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达升高,p-STAT3、NLRP3、GSDMD、Cleaved-caspase-1、白细胞介素1β蛋白表达升高;与Colivelin组相比,Colivelin+羟基红花黄色素A组上述指标均有好转。结果表明:羟基红花黄色素A通过STAT3信号通路抑制糖氧剥夺/复糖复氧后HT22细胞焦亡发挥神经保护作用。

关键词： HT22细胞细胞焦亡羟基红花黄色素A 神经元糖氧剥夺复糖复氧

miR-128-3p靶向TCF4抑制黑色素瘤A375细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化

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中国病理生理杂志 2019年第11期35卷 1999-2005页

作者：侯绍蔚张连清席海英赵爱玲侯恒山西大同大学医学院山西大同037009 大同市第五人民医院皮肤科山西大同037009 大同市第五人民医院神经内科山西大同037009

目的:探究微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对人黑色素瘤A375细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化的作用及其机制。方法:用miR-128 mimic和/或转录因子4(TCF4)表达质粒pcDNA-TCF4(pc-TCF4)转染A375细胞,RT-qPCR检测miR-128-3p的表达,Western blot法检测TCF4的表达,萤光素酶报告实验证明miR-128-3p和TCF4的靶向关系;Transwell检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测上皮标志蛋白E-cadherin和间充质标志蛋白vimentin的表达及TCF4下游靶分子cyclin D和c-Myc的蛋白表达水平。结果:过表达miR-128-3p能显著抑制TCF4的表达(P<0.01),而转染pc-TCF4能明显减弱miR-128-3p对TCF4表达的抑制作用,miR-128-3p能显著减弱TCF4野生型质粒的萤光素酶活性(P<0.01);miR-128-3p能显著抑制A375细胞增殖(P<0.01),显著减少侵袭细胞数(P<0.01);除此之外,miR-128-3p还能显著降低vimentin、cyclin D和c-Myc的表达水平(P<0.01),显著升高E-cadherin(P<0.01)的表达水平。结论:miR-128-3p能抑制黑色素瘤A375细胞的增殖、侵袭和上皮-间充质转化,作用机制与靶向TCF4及抑制其下游靶基因的表达有关。

关键词：黑色素瘤微小RNA-128-3p 细胞侵袭上皮-间充质转化转录因子4

游泳运动对大鼠实验性子宫内膜异位症的影响及机制分析

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中国病理生理杂志 2020年第10期36卷 1892-1896页

作者：景彦林杨修昭白振军贺千里山西大同大学中医药健康服务学院大同市第五人民医院山西大同037009

目的:评价游泳运动对大鼠实验性子宫内膜异位症的影响。方法:将80只雌性SD大鼠分为对照组、子宫内膜异位症模型组及大鼠在子宫内膜异位症诱导前、后进行轻度运动(每周游泳1次)、中度运动(每周游泳3次)和剧烈运动(每周游泳5次)组,共8组,... 详细信息

目的:评价游泳运动对大鼠实验性子宫内膜异位症的影响。方法:将80只雌性SD大鼠分为对照组、子宫内膜异位症模型组及大鼠在子宫内膜异位症诱导前、后进行轻度运动(每周游泳1次)、中度运动(每周游泳3次)和剧烈运动(每周游泳5次)组,共8组,每组10只大鼠。观察各组大鼠子宫内膜脂肪酸合成酶(FAS)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA及蛋白的表达。结果:诱导子宫内膜异位病变前的游泳运动对病变无明显影响,而诱导子宫内膜异位病变后再进行游泳运动(无论有氧运动频率如何),则各组大鼠子宫内膜异位病变显著减小,特别是中度和剧烈运动组病变减小更明显(P<0.05),同时观察到各运动组大鼠FAS mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.05),MMP9和PCNA mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:子宫内膜异位病变后再进行游泳运动对子宫内膜异位症的治疗是有益的,作用机制可能与FAS、MMP9和PCNA蛋白表达变化有关。

关键词：游泳运动子宫内膜异位症脂肪酸合成酶基质金属蛋白酶9 增殖细胞核抗原

枸杞多糖干预β-淀粉样蛋白1-42诱导SH-SY5Y细胞损伤：线粒体自噬的保护作用

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中国组织工程研究 2025年第31期 6688-6696页

作者：苏琴贾思玮郭敏芳孟涛李雁冰穆秉桃宋丽娟马存根尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室大同市第五人民医院

背景：神经退行性疾病与线粒体自噬调节失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用，但其能否通过调控线粒体自噬来改善β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤尚不明确。目的：探讨枸杞多糖对β-淀粉样蛋白1-42诱导的... 详细信息

背景：神经退行性疾病与线粒体自噬调节失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用，但其能否通过调控线粒体自噬来改善β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤尚不明确。目的：探讨枸杞多糖对β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及机制。方法：通过β-淀粉样蛋白1-42诱导SH-SY5Y细胞建立阿尔茨海默病细胞模型，并用枸杞多糖进行干预。将SH-SY5Y细胞分为3组：对照组，β-淀粉样蛋白1-42组(20μmol/L β-淀粉样蛋白1-42干预24 h)，枸杞多糖组(先提前1 h加入1 g/L枸杞多糖形成保护作用，然后再加入20μmol/Lβ-淀粉样蛋白1-42与枸杞多糖共同干预24 h)。CCK-8法检测细胞活力；JC-1检测线粒体膜电位；TUNEL染色检测细胞凋亡；免疫荧光和Western blot检测突触、凋亡和线粒体自噬相关指标的表达。结果与结论：(1)与对照组比较，β-淀粉样蛋白1-42组细胞活力下降(P<0.05)，细胞凋亡率上升(P<0.05)，线粒体膜电位下降(P<0.05)，促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达升高(P<0.05)，抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.05)，突触相关蛋白Syn、PSD-95表达降低(P<0.05)，线粒体自噬相关蛋白Pink1、LC3A/B、Parkin、Beclin-1表达降低(P<0.05),P62表达升高(P<0.05)；(2)与β-淀粉样蛋白1-42组比较，枸杞多糖组细胞活力升高(P<0.05)，细胞凋亡率降低(P<0.05)，线粒体膜电位上升(P<0.05),Bax和Caspase-3表达降低(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05),Syn和PSD-95表达升高(P<0.05),Pink1、LC3A/B、Parkin、Beclin-1表达升高(P<0.05),P62表达降低(P<0.05)。结果表明：枸杞多糖可能通过调控线粒体自噬来抑制β-淀粉样蛋白1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤，减少细胞凋亡，增加神经元突触可塑性。

关键词：枸杞多糖阿尔茨海默病 SH-SY5Y细胞线粒体自噬 β-淀粉样蛋白细胞凋亡工程化细胞

基于超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱的深静脉血栓模型大鼠血浆代谢组学分析

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色谱 2022年第8期40卷 736-745页

作者：谷艳臧鹏李进霞闫燕艳王佳山西大同大学医学院山西大同037009 大同市第三人民医院山西大同037000

深静脉血栓(DVT)是一种血栓栓塞性疾病,具有高发病率、高死亡率和高后遗症3大特点。采用左股静脉不完全结扎加高渗盐水刺激建立DVT大鼠模型,使用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap HRMS)检测假手术组与DVT模型组的... 详细信息

深静脉血栓(DVT)是一种血栓栓塞性疾病,具有高发病率、高死亡率和高后遗症3大特点。采用左股静脉不完全结扎加高渗盐水刺激建立DVT大鼠模型,使用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap HRMS)检测假手术组与DVT模型组的血浆代谢谱,用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)对代谢组数据进行多元统计分析,观察两组间的代谢表型差异,将多变量模型分析中的变量重要性值(VIP>1)以及代谢物在模型组中的变化倍数(FC≤0.5或FC≥2,且P一步深入理解DVT的病理机制、寻找诊断标志物及药物作用靶点提供参考。

关键词：超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱代谢组学深静脉血栓

吸入噻托溴铵干粉治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病21例

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中国新药与临床杂志 2009年第3期28卷 235-237页

作者：郭美兰林爱俊大同市第五人民医院山西大同037006

目的观察吸入噻托溴铵干粉治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期病人24wk的疗效。方法21例稳定期COPD病人,给予吸入噻托溴铵干粉剂,18μg,每日1次,治疗24wk。在治疗前及治疗2、4、8、16及24wk末检测病人的呼气峰流速(PEF)周均值、圣·乔治... 详细信息

目的观察吸入噻托溴铵干粉治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期病人24wk的疗效。方法21例稳定期COPD病人,给予吸入噻托溴铵干粉剂,18μg,每日1次,治疗24wk。在治疗前及治疗2、4、8、16及24wk末检测病人的呼气峰流速(PEF)周均值、圣·乔治呼吸问卷(SGRQ)总评分和COPD急性加重次数。结果噻托溴铵治疗期间PEF周均值显著高于治疗前,差异有非常显著意义(P人的COPD急性加重次数也明显降低(P人每日1次吸入噻托溴铵干粉18μg具有持续改善病人呼吸功能、提高运动耐力、减少急性发作次数的作用,不良反应少、耐受性好。

关键词：肺疾病慢性阻塞性投药吸入治疗结果噻托溴铵

5-氮-2'-脱氧胞苷诱导的调节性T细胞转输对自然流产孕鼠妊娠结局的影响

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中国免疫学杂志 2015年第10期31卷 1310-1314页

作者：王健赵富玺杨晶刘润花穆雅琴王喜英郭俊成刘丽华白光梅山西大同大学免疫学研究所大同037009 大同市第五人民医院大同037009

目的:研究过继转输5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5Aza D)诱导的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(inducible regulatory T cells,i Tregs)对自然流产孕鼠妊娠预后的影响。方法:以60例雌性CBA/J×雄性DBA/2J小鼠自然流产模型为研究对象,随机选取20例孕鼠经免疫磁珠分选脾脏CD4+T细胞,应用5Aza D对CD4+CD25-T细胞进行体外处理得到i Tregs,通过流式细胞术检测表观修饰前后Tregs细胞中Foxp3的表达。分别向妊娠第1天和第4天的流产孕鼠体内输注i Tregs作为治疗组,于妊娠14天比较各组孕鼠的胚胎吸收率。结果:经5Aza D修饰后,i Tregs占CD4+T细胞的比例为(41.50±8.03)%。治疗组中妊娠第1天和第4天过继转输i Tregs孕鼠的胎盘吸收率分别为10.47%和21.69%(P<0.05)。结论:对CD4+CD25-T细胞的表观修饰可能解决自然调节性T细胞来源不足的问题,在妊娠早期转输5Aza D诱导的i Treg细胞更有利于维持正常妊娠。

关键词： 5-氮-2′-脱氧胞苷 CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞过继转输反复自然流产